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微生物肥料生物安全通用技术准则

微生物肥料生物安全通用技术准则（NY 1109-2006）

1 范围

本标准规定了微生物肥料使用菌种安全性分级目录、不同菌种及产品选择毒理学试验的原则、程序、试验方法和结果评价方法。

本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的微生物肥料。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB 15193.3-2003 急性毒性试验

GB/T 4789.28-2003 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

半数致死量 median lethal dose,LD50

是经口给予受试物后，预期能够引起动物死亡率为50%的单一受试物剂量，该剂量为经过统计得出的估计值。其单位是每千克体重所摄入受试物质的毫克数、克数或毫升数，即mg/kg体重、g/kg体重或mL/kg 体重。

4 选择毒理学试验的原则

4.1 生产用菌种

微生物肥料生产用菌种分为四级管理，其安全分级目录见附录A。未列入附录A中的菌种，除根瘤菌和乳杆菌(Lactobacillus）外，其余均需做毒理学试验。

4.1.1第一级（A.1）为免作毒理学试验的菌种。

4.1.2 第二级（A.2）为需做急性毒性试验的菌种。

4.1.3 第三级（A.3）为需做致病性试验的菌种。

4.1.4 第四级（A.4）为禁用菌种。

4.2产品

4.2.1 除有机物料腐熟剂以外的固体微生物接种剂类产品均免做毒理学试验。

4.2.2 复合微生物肥料、生物有机肥和液体剂型微生物接种剂等需做急性毒性试验。

5 毒理学试验程序

5.1 菌种毒理学试验程序

5.1.1 应提供微生物肥料生产用菌种的鉴定资料，包括属及种的拉丁文学名和中文译名、形态、生理生化特性及鉴定依据、功能评价等资料。

5.1.2 根据产品所含菌种的鉴定资料，依据附录A之规定，确定菌种安全级别、是否做毒理学试验及毒理学检测项目。

5.1.3 对于需要做毒理学试验的菌种，生产者需提供试验用纯菌种斜面，经复核确认与该菌种鉴定资料相符且无杂菌污染后，进行毒理学试验。

5.2产品毒理学程序

需对送检产品进行菌种和载体物料的真实性确认后，进行毒理学试验。

6 试验方法

6.1受试物的准备

6.1.1菌种受试物

将试验菌种接种于适宜的培养基中，在适宜的条件下培养一定时间，用生理盐水调整菌液浓度至2.0×108～2.0×109cfu/mL，该溶液为菌种受试物。

6.1.2产品受试物

固体产品根据试验要求，配制所需浓度，溶剂首选去离子水，也可选用羧甲基纤维素、明胶、淀粉等。液体产品不可稀释，直接使用。6.2急性毒性试验

按GB 15193.3-2003执行。

6.3致病性试验

致病性试验包括以下项目。

6.3.1急性毒性试验

方法同5.2。

6.3.2 一次破损皮肤刺激试验

6.3.2.1目的

检测受试物对实验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度。

6.3.2.2实验动物

每次实验至少需要3只皮肤完好的白色健康家兔或豚鼠。

6.3.2.3操作程序

a)涂受试物前，将家兔或豚鼠背部脊柱两侧的毛去掉，去毛范围约

2.5cm×2.5cm，用75%酒精清洁、消毒暴露皮肤，待酒精挥发后，用灭菌刀片或注射针头分别在两块皮区内划一个“＃”形的破损伤口。注意皮肤破损仅达表皮，不要伤及真皮。

b)将受试物0.5mL直接滴于破损皮肤上，或滴于同样大小的2层～4层纱布上并敷贴于破损皮肤表面，然后用一层无刺激塑料膜或油纸覆盖，再用无刺激胶布固定。另一侧去毛破损皮肤作为空白对照（或溶剂对照），敷贴时间为4h。试验结束后，用温水或无刺激性溶剂除去残留受试物。

c)分别于去除受试物后1h、24h和48h观察皮肤局部反应，并按表1进行刺激反应评分。注意鉴别感染和原发性刺激反应的区别，若有感染可疑，应进行重复测试。

6.3.2.4评价规定

在各个观察时间点，按照表1对动物的皮肤红斑与水肿形成情况进行评分，并按时间点将3只动物的评分相加，除以动物数，获得不同时间点的皮肤刺激反应积分均值（刺激指数）。取其中最高皮肤刺激指数，按表2评定该受试物对动物皮肤刺激强度的级别。

表1皮肤刺激反应的评分标准

表2皮肤刺激强度分级

6.3.3溶血试验

6.3.3.1目的

检测受试物是否具有溶血特性。

6.3.3.2操作程序

用无菌棉拭子蘸取菌种受试物, 以蛇形线接种于血琼脂平板(按GB/T4789.28-2003中4.6规定),置36℃±1℃培养箱中培养, 24h后观察有无溶血环产生。同时用已知阳性菌株金黄色葡萄球菌等作为对照。

6.3.3.3试验结果

菌落周围有溶血环的，则溶血试验阳性；否则为阴性。

6.3.4抗菌药物敏感试验

质控菌株可选用大肠杆菌ATCC25922等标准菌株。

6.3.4.1目的

检测受试物对抗生素的敏感性强度。

6.3.4.2试验用抗生素

可选用头孢哌酮（CFP）、四环素（TE）、头孢唑啉（CZ）、链霉素（S）、俐特灵（FR）、环丙沙星（CIP）、复方新诺明（SXT）、氯霉素（C）、氨苄青霉素（AM）、庆大霉素（GM）、强力霉素（DO）、丁胺卡那霉素（AN）、甲氟哌酸（PEF）、氟啶酸（ENO）、多西环素(DO)、依诺沙星(ENO)、阿米卡星(AN)等中的几种。

6.3.4.3操作程序

a) 用无菌棉拭子将受试物均匀涂抹于营养琼脂平板表面，共涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动

60o，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿,置室温干燥5min。

b）用无菌棉拭子蘸取浓度为2.0×108～2.0×109cfu/mL质控菌株菌悬液，均匀涂抹于营养琼脂平板表面，具体方法同上，作为对照试验。

c)以无菌操作取出抗生素纸片分别贴在涂有受试物和质控菌株菌悬

液的平板培养基表面，每个平板放4个纸片。然后将平板置于36℃±1℃恒温培养箱中培养18h后观察抗生素纸片周围有无抑菌环，量取并记录其直径（包括纸片直径）大小，单位mm。试验应做3个平行，取其均值。

d)质控菌抑菌环应均在质控范围内，说明试验方法准确可靠，否则试验无效。

6.3.5急性腹腔注射致病性试验

6.3.5.1目的

检测受试物的急性致病性。

6.3.5.2试验动物

清洁级健康成年小鼠，体重18～20g。

6.3.5.3操作程序

a）选健康成年小鼠40只,体重18～20g，雌、雄各半，剂量为

500mg/kgBW，按0.1mL/10gBW经腹腔注射受试物。

b）于腹腔注射后第3d、7d分别取存活的实验动物雌、雄各5只解剖，并做大体病理学观察。

c)腹腔注射后第14d将剩余实验动物处死、解剖并做大体病理学观察。

6.3.5.4结果观察、评价

根据试验周期内动物有无死亡及出现的中毒体症、大体病理学观察及病理组织学检查发现病变的程度进行分级判定（见表3）。

表3急性致病性判定标准

6.3.6 急性眼刺激试验

6.3.6 .1 目的

检测受试物对实验动物眼睛的急性刺激和腐蚀作用。

6.3.6.2 实验动物

3只家兔，试验前检查家兔双眼，有异常者不能用于试验。

6.3.6.3 操作程序

a）吸取受试物0.1mL,滴入家兔一侧眼结膜囊内，另一侧眼以生理盐水作为正常对照。

b）滴受试物后，将眼被动闭合4s,30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d，肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。如果72h内未出现刺激反应，或第7d或第14d，眼睛刺激反应完全恢复，即可提前终止试验。必要时，用2%荧光素钠溶液或裂隙灯、放大镜检查角膜及虹膜变化。

6.3.6.4 评价规定

按表4对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分，并分别计算每只动物在三个不同观察时间（24h、48h和72h）角膜损害、虹膜损害、结膜充血和结膜水肿四方面的“平均评分”（即每只动物的24h、48h和72h评分之和除以观察数3）。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间进行评分，按表5或表6眼刺激反应分级标准判定受试物对眼睛的刺激强度。

表4急性眼刺激反应的评分标准

表5眼刺激反应分级标准

表6眼刺激性反应分级标准

7 结果评价

凡毒理学试验结果评价为有毒的产品，不得生产和销售；有毒或致病性试验结果不符合的菌种,均不得作为微生物肥料生产用菌种。

7.1急性毒性试验

根据半数致死量（LD50）数值,判定受试物的毒性分级, 半数致死量(LD50)剂量分级按GB 15193.3-2003附录D执行，凡LD50>5000mg/kgBW 的，可通过，即该菌种可作为生产用菌种或该产品可进行生产、销售。

7.2致病性试验

7.2.1急性毒性试验

结果判定同6.1。

7.2.2一次破损皮肤刺激试验

如结果为无刺激或仅具轻度刺激作用，可通过；否则，应放弃使用。

7.2.3溶血试验

溶血试验结果为阴性的，可通过；否则，应放弃使用。

7.2.4抗菌药物敏感试验

受试菌株必须对两种以上的抗生素敏感；否则，应放弃使用。

7.2.5急性腹腔注射致病性试验

结果为无急性致病性可通过；否则，应放弃使用。

7.2.6急性眼刺激试验

结果对眼无刺激性或具有轻刺激性的，可通过；否则，应放弃使用。

附录A

（规范性附录）

菌种安全分级目录

A.1第一级：免作毒理学试验的菌种

A.1.1根瘤菌

类

Azorhizobium caulinodans茎瘤固氮根瘤菌（田菁（茎瘤）根瘤菌）Bradyrhizobium elkanii埃氏慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobium japonicum日本慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobium liaoningense 辽宁慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）

Mesorhizobium huakuii华癸中生根瘤菌（紫云英）

Mesorhizobium loti 百脉根中生根瘤菌

Rhizobium etli埃特里根瘤菌（菜豆）

Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli豌豆根瘤菌（菜豆生物型）

Rhizobium leguminosarum biovar trifolii豌豆根瘤菌（三叶草生物型）

Rhizobium leguminosarum biovar viceae 豌豆根瘤菌（蚕豆生物型）

Sinorhizobium fredii 费氏中华根瘤菌（快生大豆根瘤菌）Sinorhizobium meliloti苜蓿中华根瘤菌

还包括尚未确定种名的，从一些豆科植物根瘤内分离、纯化、鉴定、回接、筛选后在原宿主植物结瘤、固氮良好的根瘤菌，如花生、绿豆、沙打旺根瘤菌等。

A.1.2自生及联合固氮微生物类

Azospirillum lipoferum生脂固氮螺菌

Azospirillum brasilense 巴西固氮螺菌

Azotobacter beijgerinckii拜氏固氮菌

Azotobacter chroococcum 褐球（圆褐）固氮菌Azotobacter vinelandii棕色固氮菌

Azotobacter paspali雀稗固氮菌

Beijerinckia indica 印度贝氏固氮菌

A.1.3光合细菌类

Rhodobacter capsulatus荚膜红细菌

Rhodobacter sphaeroides 类球红细菌(球形红杆菌) Rhodopseudomonas acidophila 嗜酸红假单胞菌Rhodopseudomonas gelatinosa 胶质红假单胞菌Rhodopseudomonas globiformis球形红假单胞菌Rhodopseudomonas palustris 沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas rutila血色红假单胞菌Rhodopseudomonas sulfidophila 嗜硫红假单胞菌Rhodopseudomonas viridis 绿色红假单胞菌Rhodospirillum fulvum 黄褐红螺菌Rhodospirillum rubrum 深红红螺菌Rhodospirillum salinarium盐场红螺菌

Rubrivivax gelatinosus胶状红环菌（胶状红长命菌）

A.1.4分解磷钾化合物细菌类

Bacillus amyloliquefaciens液化淀粉芽孢杆菌

Bacillus laterosporus侧孢芽孢杆菌

Bacillus licheniformis 地衣芽孢杆菌

Bacillus megaterium巨大芽孢杆菌

Bacillus mucilaginosus胶胨样芽孢杆菌

Bacillus subtilis枯草芽孢杆菌

Bacillus thuringiensis 苏云金芽孢杆菌Thiobacillus thiooxidans氧化硫硫杆菌

A.1.5促生细菌类

Paenibacillus azotofixans固氮类芽孢杆菌

Paenibacillus polymyxa多粘类芽孢杆菌

A.1.6 酵母菌

类

Candida guillermondii 季也蒙假丝酵母

Candida membranaefaciens 膜醭假丝酵母

Candida tropicalis热带假丝酵母

Candida utilis产朊假丝酵母

Endomycopsis fibuliger 扣囊拟内孢霉

Pichia farinosa粉状毕赤酵母

Pichia membranaefaciens 膜醭毕赤酵母Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母

Rhodotorula rubra深红酵母

A.1.7放线菌

类

Frankia sp.弗兰氏克菌（固氮放线菌）

Streptomyces chingyangensis泾阳链霉菌

Streptomyces microflavus 细黄链霉菌

A.1.8 AM真菌类

Glomus mosseae 摩西球囊霉

A.1.9其

它

Lactobacillus parabuchner类布氏乳杆菌

Lactobacillus acidophilus嗜酸乳杆菌

Lactobacillus bulgaricus 保加利亚乳杆菌

Lactobacillus casei干酪乳杆菌

Lactobacillus

delbruecki德氏乳杆菌

Lactobacillus lactis乳酸乳杆菌

Lactobacillus plantarum植物乳杆菌

Pediococcus pentosaceus戊糖片球菌

Streptococcus lactis 乳酸链球菌

Streptococcus thermophilus 嗜热链球菌

A.2第二级：需做急性毒性（LD50）试验的菌种

Arthrobacter aurescens金黄节杆菌

Aspergillus candidus Link 亮白曲霉

Aspergillus niger 黑曲霉

Aspergillus oryzae米曲霉

Aspergillus penicillioides Speg 帚状曲霉

Aspergillus wentii Wehmer 温特曲霉

Eurotium chevalieri Mangin 谢瓦散囊菌

Bacillus brevis(Brevibacillus brevis) 短芽孢杆菌

Bacillus circulans 环状芽孢杆菌

Bacillus coagulans凝结芽孢杆菌

Bacillus pumilu 短小芽孢杆菌

Bacillus sphaericus球形芽孢杆菌

Brevibacterium sp. 短杆菌

Burkholderia fungorum真菌伯克霍尔德氏菌

Chaetomium cochliodes 螺卷毛壳

Chaetomium trilaterale 三侧毛壳

Clostridium pasteurianum 巴斯德梭菌

G eobacillus stearothermophilus嗜热脂肪地芽孢杆菌

(Bacillus stearothermophilus)

Geotrichum candidum 白地霉

Nocardia sp. 诺卡氏菌

Nocardiopsis sp. 拟诺卡氏菌

Paenibacillus macerans 浸麻类芽孢杆菌

Penicillium citreonigrum 黄暗青霉

Penicillium citrinum 桔青霉Penicillium frenguentans常现青霉Penicillium glabcum 光孢青霉Pseudomonas fluorescens 荧光假单胞菌Promicromonospora citrea柠檬原小单胞菌Pseudomonas putida 恶臭假单胞菌Pseudomonas stutzeri施氏假单胞菌Pseudomonas vesicularis泡囊假单胞菌Rhizopus oryzae米根霉Sphingobacterium multivorum多食鞘氨醇杆菌Sporotrichum thermophile 嗜热侧孢霉Streptomyces albidoflavus微白黄链霉菌Streptomyces fradiae 弗氏链霉菌streptomyces griseospiralis灰旋链霉菌Trichoderma harzianum哈茨木霉Trichoderma koningii康宁木霉Trichoderma viride绿色木霉

A.3第三级：需做致病性试验的菌种

Acinetobacter calcoaceticus乙酸钙不动杆菌Acinetobacter baumannii鲍氏不动杆菌Alcaligenes denitrifican s 反硝化产碱菌Alcaligenes faecalis粪产碱菌Alcaligenes xylosoxidans木糖氧化产碱菌Bacillus cereus 蜡样芽孢杆菌Enterobacter agglomerans成团肠杆菌Enterobacter cloacae阴沟肠杆菌Enterobacter gergoviae日勾维肠杆菌Pseudomonas alcaligenes产碱假单胞菌Pseudomonas diminuta 缺陷假单胞菌Proteus sp. 变形菌

A.4第四级：禁用菌种

Erwinia sp. 欧文氏菌Klebsiella pneumoniae肺炎克雷伯氏菌Klebsiella oxytoca 产酸克雷伯氏菌Pseudomonas aeruginosa 铜绿假单胞菌

检验科微生物实验室生物安全事件应急预案

检验科微生物实验室生物安全事件应急预案 This manuscript was revised by JIEK MA on December 15th, 2012.

检验科微生物实验室生物安全事件应急预案为了有效的预防微生物实验室生物污染，有效应对实验室突发污染事件，保证实验结果的科学准确，保障实验工作人员的健康、生命财产安全，防止实验室污染对周围环境造成严重污染，加强检验工作的质量控制和实验室的管理，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》和《实验室生物安全通用要求》等相关法律法规的规定，特制定本预案，确保一旦发生实验室污染事件及安全事故时，能及时、规范、科学、迅速有效地控制。一、适用范围本预案适用于微生物实验室发生的、与实验室安全相关的、危害科室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：1．病原微生物的实验室污染事件； 2．工作人员受到实验室内有毒病原微生物的感染或侵害； 3．病原微生物被泄漏出实验室事件。 4．由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。当出现以上适用范围中的任意情况，启动本预案。二、应急管理小组有微生物实验室生物安全事件应急管理小组，科主任任组长，制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。发生突发事件后应急处理小组全体成员，应立即按实验室污染突发事件处理

的技术规范，采取有效措施控制事件、调查原因，减少人员伤亡和财产损失。三、预防措施 1．加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。 2．建立实验室病原微生物专库，对于传染病病原样本建立严格的监督管理制度。 3．增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。 4．提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。 5．建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告。 6．建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。 7．定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。四、应急控制措施

国内外微生物肥料的发展概况汇总

国内外微生物肥料的发展概况一、微生物肥料的定义微生物肥料是指一类含有活微生物的特定制，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应。可将微生物肥料分为两类，一类是通过其中所含微生物的生命活动，增加了植物营养元素的供应量，导致村物营养状况的改善，进而产量增加，代表品种是要菌肥：另一类是广义的微生物肥料，其制品虽然也是通过其中所含的微生物生命活动作用使作物增产，但它不仅仅限于提高植物营养元素的供应水平，还包括了它们所产生的次生代射物质，如激素类物质对植物的刺激作用，促进植物对营养元素的吸收利用，或者能够拮抗某些病原微生物的致病作用，减轻病虫害而使作物产量增加。二、微生物肥料的种类和作用机理微生物肥料的种类很多，如果按其制品中特定的微生物种类可分为细菌肥料(如根病菌肥、固氮菌肥)、放线菌肥(如抗生菌类、5406)、真菌类肥料(如菌根真菌)等：按其作用机理又可分为根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌类肥料、解钾菌类肥料等：按其制品中微生物的种类又可分为单纯的微生物肥料和复合微生物肥料。微生物肥料的功效主要是与营养元素的来源和有效性有关，或与作物吸收营养、水分和抗病有关，概况起来有以下几个方面： 1、增加土壤肥力，这是微生物肥料的主要功效之一。如各种自生、联合、共生的国氮微生物肥料，可以增加土壤中的氮素来源，多种解磷、解钾微生物的应用，可以将土壤中难溶的磷、钾分解出来，从而能为作物吸收利用。 2、产生植物激素类物质刺激作物生长，许多用作微生物肥料的微生物还可产生植物激素类物质，能刺激和调节作物生长，使植物生长健壮，营养状况和得到改善。 3、对有害微生物的生物防治作用，由于在作物根部接种微生物肥力，微生物在作物根部大量生长繁殖，在为作物根际的优势菌，限制了其它病原微生物的繁殖机会。同时有的微生物对病原微生物还具有拮抗作用，起到了减轻作物病害的功效。三、我国微生物肥料的概况我国微生物肥料的研究应用和国际上一样，是从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的，起初只有大豆和花生根瘤菌剂：50年代，从原苏联引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌剂，称为细菌肥料：60年代又推广使用放线菌制成的“5406”抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥：70-80年代中期，又开始研究VA菌根，以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率：80年代中期至90年代，农业生产中又相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂：近几年来又推广应用由固氮菌、磷细菌、钾细菌和有机肥复合制成的生物肥料做基肥施用。

微生物实验室安全操作规范

微生物实验室安全操作规范微生物实验室的布局和设计应考虑良好的微生物操作和安全。本质是最大程度的减少微生物菌种的交叉污染，微生物样本的处理环境也是重要，因为环境也能引起也污染的可能。规范微生物实验室内仪器、设备的安全操作及染菌的微生物培养物处理程序，保证微生物实验室安全操作意义重大。一、员工安全操作规范 1、实验室主任（对实验室直接负责的人员）负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。 2、实验室安全主管（向实验室主任汇报）提供常规的实验室安全培训。 3、接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 4、禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 5、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。实验室的门应保持关闭。 6、实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 7、每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。

二、高压灭菌锅的安全使用操作规范： 1、堆放：将需灭菌的物品予以妥善包扎，依次堆放在灭菌锅。需灭菌物品外需黏上高压指示胶带以检验灭菌温度是否达到要求。 2、加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管2厘米以上（不宜过多）；连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以免烧坏电热管和意外发生。 3、密封：在每次使用高压锅前，都必须认真检查高压锅的出气伐和安全阀，确保其状态完好，如有故障，在故障排除之前不得使用高压灭菌锅。把堆放好物品的灭菌桶放在锅体内，盖上锅盖并锁紧。 4、加热灭菌：将灭菌器接通电源，指示灯亮，表示电源已正常输入，按下开始按纽电热管开始加热工作；灭菌期间工作人员需监视高压锅指示面板上的压力、温度和时间等。 5、开盖：灭菌结束后，切勿立即将灭菌锅内的蒸汽排出，应待压力表指针归零位后，方可开启锅盖。三、电炉使用操作程序及注意事项： 1、将盛有液体的玻璃容器（应垫石棉网）或不锈钢器皿置于电炉上，方可打开电炉加热。

病原微生物实验室生物安全管理

七、病原微生物实验室生物安全管理（共15分） 1、一、二级实验室备案证明☆ （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第二十五条。（2）检查内容：查一、二级病原微生物实验室是否向设区的市级卫生计生行政部门备案。（3）检查方法：查备案材料或资格证书。（4）结果评价：此项不合格则该项目整体不得分。（5）监督关键点：①一、二级实验室的备案与实际情况是否相符；②有无存在未备案的一、二级实验室。 *2、三级、四级实验室开展高致病性病原微生物实验活动资格证书（重点项☆，或合理缺项）（1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第二十条、第二十一条。（2）检查内容：查三级、四级实验室是否经国家认可并取得从事高致病性病原微生物实验活动资格证书。（3）检查方法：查备案材料或资格证书。（4）结果评价：此项不合格则该项目整体不得分。（5）监督关键点：三、四级实验室是否存在未取得资格证书从事高致病性病原微生物实验活动。 3、实验室建立生物安全委员会，建立健全实验室生物安全管理体系和感染应急预案（1分）（1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第三十一条、第三十二条、第四十条，《实验室生物安全通用要求（GB19489-2008）》7.1。（2）检查内容：实验室生物安全委员会的建立文件，成员应体现其组织及学科的专业范围，具体职责包括①制定生物安全规章制度、操作规程和标准操作程序等；②建立实验活动风险评估的工作制度和程序，组织开展风险评估工作； ③负责本单位生物安全的日常监督、检查；④对本单位实验室开展的第一、第二类病原微生物的实验活动进行审查。实验室生物安全管理体系：生物安全管理手册、程序文件、作业指导书和记录。感染应急预案：结合本单位实际制定。从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室制定的预案应向所在地省级卫生计生行政部门备案。（3）检查方法：查阅生物安全管理体系、预案等文件。

微生物肥料发展史

微生物肥料发展史微生物学microbiology源自希腊字，由micro（微小）、bios（生命）及logos（科学）這三个字所组成，意为研究微小生命之科学。而微生物（microorganism）則是指形态微小（一般只直经小于1mm），结构简单，大多是单细胞，少数是多细胞以及某些沒有细胞结构的低等生物，这些微小生物必须借助光学显微镜或电子显微镜才能看清楚他们的型态结构。微生物的应用多，范围广，与人们的生活息息相关。随着科学技术的发展，人们越来越多的应用微生物。下面介绍一下微生物肥料的发展史。如果说从1890年维诺格拉得斯基分离硝化细菌的纯培养，到1896年诺布尔销售专利商品根瘤菌菌剂算起，微生物肥料迄今己有100多年的史历。19世纪中叶，一些学者对土壤和农业生产中的一些重要问题很感兴趣，如有机质的分解过程、植物氮素养料原源、硝酸盐在土壤中形成过程等。直到19世纪下半叶，以巴斯德(巴氏灭菌方法的发明人)为代表一批学者在微生物学研究方面取得重要成果，促进了农业微生物研究、应用和发展，固氮、解钾、解磷等微生物肥料随之应运而生。固氮生物肥料就目前所知，除固氮根瘤菌如花生根瘤菌、大豆根瘤菌及牧草根瘤菌以外，其它固氮菌的固氮量很低，为此不作重点介绍。下面仅就当前农业生产中应用效果较好的解钾、解磷微生物发展史，做一简单介绍供参考。 1、解钾细菌：解钾细菌是在1911年，由丹麦学者巴撒立克从蚯蚓肠道中分离获得的，是一种带芽孢的杆菌。1930年前苏联学者亚历山大罗夫在土壤中也同样分离到了这种细菌，定名为硅酸盐细菌，1939将该菌应用于生产实际。经研究发现硅酸盐细菌能分解钾长石、玻璃粉、磷灰石等矿物质，释放出钾素和磷素，进一步发现硅酸盐细菌生命活动，改善了土壤中有效钾素和磷素。自1950年以来，我国学者在土壤中和作物根际都分离得到多株硅酸盐细菌，并做了大量工作。经研究发现硅酸盐细菌主要有两种菌，一种是胶质芽孢杆菌，另一种是环状芽孢杆菌。这两种菌都能分解硅酸盐矿物和磷灰石，并将钾、磷、硅等无机离子释放出来。目前解钾微生物应用较多是胶质芽孢杆菌，如生物钾肥。 2、解磷细菌：解磷细菌是在1935年，由前苏联学者蒙基娜从黑钙土壤中发现的，该菌株分解有机磷化合物，其形态与巨大芽孢杆菌相似，定名为巨大芽孢杆菌变种。1954年我国东北农科院从东北黑鈣土和灰化土中也分离到了分解有机磷很强的解磷巨大芽孢杆菌。1955年中国农科院土肥所分离一种产酸能力较强的无芽孢细菌，对磷酸三鈣有明显的分解作用，试验表明该菌株对无机磷分解能力较强。1956年，我国科技工作者又在水稻田中分离到分解磷的蜡状芽孢杆菌。其后对巨大芽孢杆菌、无芽孢解磷细菌和蜡状芽孢杆菌分解无机磷的能力进行了比较。结果显示：无芽孢解磷细菌解磷能力>巨大芽孢杆菌>蜡状芽孢杆菌。无芽孢解磷细菌分解无机磷的能力虽然比较强，但该菌不形成芽孢，其产品储存稳定性较差，一般仅三个月，商业价值不高。生产企业对于生产菌株不仅要考虑使用价值，更重要的是考虑其商品价值。为此，生物磷肥生产中多采用产生芽孢的解磷细菌，如巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等。 3我国微生物肥料的研究与发展：我国微生物肥料的的研究始于20世纪40年代，最早研究应用的是根瘤菌制剂，代表和奠基人有张宪武先生、陈华癸院士和樊庆笙先生等。50年代是早期发展的时期，开始研究应用了包括根瘤菌在内的固氮菌、溶磷细菌、硅酸盐细菌等细菌肥料；60年代则主要推广应用了“5406”放线菌抗生菌肥料；70-80年代中期开始研究由土壤真菌制成的泡囊——丛枝菌根(AM菌根)。这3次不稳定的起伏发展，其主要原

微生物实验室安全管理制度

微生物实验室安全管理制度一、生物安全管理 1、实验室主任（对实验室直接负责的人员）负责制订和采用生物安全管理计划以及安全或操作手册。 2、实验室安全主管（向实验室主任汇报）提供常规的实验室安全培训。 3、将生物安全实验室的特殊危害告知实验室人员，要求他们阅读生物安全或操作手册，并遵循标准的操作和规程。实验室主管应当确保所有实验室人员都了解这些要求。实验室内应备有可供取阅的安全或操作手册。二、实验室生物安全规程（一）进入规定 1、在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物的实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。 2、只有经批准的人员方可进入实验室工作区域。 3、实验室的门应保持关闭。 4、儿童不应被批准或允许进入实验室工作区域。（二）操作规范 1、严禁用口吸移液管。 2、严禁将实验材料置于口内。严禁舔标签。 3、所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。 4、出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，必须向实验室安全主管报告。 5、必须制订关于如何处理溢出物的书面操作程序，并予以遵守执行。（三）人员防护 1、在实验室工作时，任何时候都必须穿着工作服。 2、在进行可能直接或意外接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上合适的手套。手套用完摘除后必须洗手。 3、在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须洗手。 4、有喷溅的可能时，为了防止眼睛或面部受到泼溅物的伤害，应戴安全眼镜、面罩（面具）或其他防护设备。 5、不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。 6、禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。

微生物实验室生物安全操作规程

微生物实验室生物安全操作规程 tiger 一、目的制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。二、适用范围适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。三、职责实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。四、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。 1.9 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。 1.10禁止将无关动物带入实验室。 2.无菌室安全操作规程 2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，并且同时打开超净台进

国内外微生物肥料的发展概况

国内外微生物肥料--发展概况一、微生物肥料的定义微生物肥料是指一类含有活微生物的特定制，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应。可将微生物肥料分为两类，一类是通过其中所含微生物的生命活动，增加了植物营养元素的供应量，导致村物营养状况的改善，进而产量增加，代表品种是要菌肥：另一类是广义的微生物肥料，其制品虽然也是通过其中所含的微生物生命活动作用使作物增产，但它不仅仅限于提高植物营养元素的供应水平，还包括了它们所产生的次生代射物质，如激素类物质对植物的刺激作用，促进植物对营养元素的吸收利用，或者能够拮抗某些病原微生物的致病作用，减轻病虫害而使作物产量增加。二、微生物肥料的种类和作用机理微生物肥料的种类很多，如果按其制品中特定的微生物种类可分为细菌肥料（如根病菌肥、固氮菌肥）、放线菌肥（如抗生菌类、5406）、真菌类肥料（如菌根真菌）等：按其作用机理又可分为根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌类肥料、解钾菌类肥料等：按其制品中微生物的种类又可分为单纯的微生物肥料和复合微生物肥料。微生物肥料的功效主要是与营养元素的来源和有效性有关，或与作物吸收营养、水分和抗病有关，概况起来有以下几个方面： 1、增加土壤肥力，这是微生物肥料的主要功效之一。如各种自生、联合、共生的国氮微生物肥料，可以增加土壤中的氮素来源，多种解磷、解钾微生物的应用，可以将土壤中难溶的磷、钾分解出来，从而能为作物吸收利用。 2、产生植物激素类物质刺激作物生长，许多用作微生物肥料的微生物还可产生植物激素类物质，能刺激和调节作物生长，使植物生长健壮，营养状况和得到改善。 3、对有害微生物的生物防治作用，由于在作物根部接种微生物肥力，微生物在作物根部大量生长繁殖，在为作物根际的优势菌，限制了其它病原微生物的繁殖机会。同时有的微生物对病原微生物还具有拮抗作用，起到了减轻作物病害的功效。

微生物肥料市场报告

微生物肥料概况一、微生物肥料的分类 1、微生物菌剂，包括农用微生物菌剂和有机物料腐熟剂两大类产品。对应的标准是《农用微生物菌剂GB20287-2006》。

2、生物有机肥。生物有机肥指特定功能微生物与主要以动植物残体（如畜禽粪便、农作物秸秆等）为来源并经无害化处理、腐熟的有机物料复合而成的一类兼具微生物肥料和有机肥效应的肥料。对应的标准是《生物有机肥NY 884-2012》。 3、复合微生物肥料，复合微生物肥料是指特定微生物与营养物质复合而成，能提供、保持或改善植物营养，提高农产品产量或

改善农产品品质的活体微生物制品。对应的标准是《复合微生物肥料NY/T 798—2015》。二、微生物肥料发展必要性（一）微生物肥料具有六大功能，是解决农业可持续发展问题的突破口 1、提供或活化养分功能（1）生物固氮 ①根瘤菌及其制剂产品：如花生根瘤菌、大豆根瘤菌、紫云英根瘤菌 ②自生固氮菌/联合固氮菌及其制剂：圆褐固氮菌、拜氏固氮菌、雀稗固氮菌、巴西固氮螺菌、粪产碱菌； ③巴西、阿根廷、美国等大豆主要生产国，在大豆种植中均不施化学氮肥，使用根瘤菌菌剂即可满足大豆对氮肥的需要。（2）溶磷

目前主要研究和应用的菌种有： ①细菌：巨大芽胞杆菌；氧化硫硫杆菌；假单胞菌属的一些种；芽胞杆菌属或类芽；胞杆菌属的一些种。 ②真菌：青霉菌、黑曲霉，菌根等。（3）解钾菌种主要有：胶质芽胞杆菌、环状芽胞杆菌（4）溶解中量元素产生铁载体的氧化硫硫杆菌、根霉 2、产生促进作物生长活性物质能力种类多：菌种主要有醋杆菌、气单胞菌、柠檬节杆菌、巴西固氮螺菌、自生固氮菌、巨大芽胞杆菌、多粘类芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、阴沟肠杆菌、荧光假单胞菌等。这类微生物可以单独使用，更可以与其它微生物种类复合使用，使促生作用、肥效作用更好地结合起来，以提高和加强应用效果。这种复合剂型的研制是一个发展方向。 3、促进有机物料腐熟功能腐熟菌剂产品使用的菌种：约60个种。（1）细菌（18个）：枯草芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、黄褐假单胞菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌、多食鞘氨醇杆菌、戊糖片球菌、解淀粉芽孢杆菌、德氏乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳杆菌、施氏假单胞菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、阿氏团队节杆菌、黄褐假单胞菌、施氏假单胞菌、产黄纤维单胞菌；

微生物肥料生产新技术

微生物肥料生产新技术 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998

微生物肥料生产新技术一、微生物肥料生产新工艺及流程一般传统的微生物肥料生产工艺是：保藏菌种→斜面菌种培养活化→摇瓶扩大培养→发酵罐液体发酵→按一定的比例用草炭吸附后包装或按一定的比例稀释后直接包装。建立这样的生产企业需要建立大面积的无菌培养室、购置发酵罐、空压机、过滤器等设备，而且培养、发酵条件不易控制，菌种质量难以保证，投资大、成本高。河北省生物工程技术公司针对众多微生物肥料生产企业中存在的上述难题，联合河北农业大学、河北大学、河北省科学院微生物研究所等单位微生物专家，经多年研究攻关、多次实验，开发出微生物肥料生产新工艺，成功解决了上述难题，非常适合中小微生物肥料生产企业采用，尤其是特别适合现有的复混肥料、有机肥料生产企业生产生物有机无机肥料、生物有机肥料，作为其产品功能更新、升级或提高应用效果而添加。河北省生物工程技术公司微生物肥料新的生产工艺是：使用公司新开发出的高活性、高含量微生物菌粉按一定比例直接加入或包衣到有机肥或复混肥料中，即可生产出符合国家农业部登记标准要求的微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料、微生物冲施肥、拌冲剂等产品。具体工艺流程为：（1）微生物菌剂工艺：草炭或其他吸附剂 + 菌粉微生物固体菌剂或颗粒肥包装（2）生物有机肥工艺：有机肥粉状或颗粒 + 菌粉生物有机肥包装（3）复合微生物肥料（生物复混肥）：

化肥（N、P、K）配料→混合→造粒→烘干冷却→筛分→ 包装菌粉（4）微生物冲施肥微生物拌种剂和其他辅料配比制成微生物冲施肥及拌种挤上述新工艺，实际上相当于将微生物肥料生产中投资大、工艺复杂、技术难度大、质量要求高、用量少的菌剂生产环节交给我们来完成，由我们统一规模化生产提供给每个企业。这样将使微生物肥料的生产变得简便、高效、低成本。就象手机市场研发出强大的手机芯片，从而使手机生产变得简化进而出现山寨手机一样，高活性的菌粉就是这种“芯片”，只需嫁接到你的产品中，即可生产出各种成分、含量的微生物肥料。所不同的是：高活性菌粉中的有效菌是国家已认可、明确用于农业生产的菌种，用于生产出来的各种微生物肥料均可获得农业部的微生物肥料登记证。河北省生物工程技术公司提供的菌粉产品，采用现代化的生产设备，在工业化发酵生产生物肥料的基础上，将菌剂进一步浓缩低温脱水精制而成，实现了菌剂生产的规模化、现代化，保证了菌剂的质量，降低了成本。二、高活性菌粉技术指标：含（胶质芽孢杆菌）活性芽孢100亿/克个以上，有效期24个月三、在微生物肥料生产中使用高活性菌粉的特点及优势 1、生产投资成本低

微生物实验室的生物安全分类(1)

兽医微生物实验室的生物安全分类（2005年版）凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求。实验室的设计、设施也有所不同。目前国际公认的微生物实验室分为生物安全（biosafety level，BSL）1至4级。其中BSL-1最低，BSL-4最高。BSL-1~4俗称P1~4。 BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物实验工作。实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在试验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。 BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。其不同点在于：工作人员要经过操作病原因子的专门培训，并由能够胜任的专业人员进行指导和管理；工作时限制外人进入实验室；某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行；对污染的锐器采取高度防护措施。凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2实验室进行。 BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸入途径引起严重的或致死性疾病病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服。BSL-3实验室要经过专业的设计和建造。 BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到BSL-4的安全水平。BSL-4实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室均应是毒力的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实验室安全工作细则。在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在II级生物安全柜或者是安全柜与一套由生命维持系统工期的正压个人工作服联合使用。

微生物实验室安全与防护

微生物实验室安全与防护在工作区内禁止饮食，吸烟和存放食物及使用化妆品。实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗；进入无菌室必须穿工作服，戴口罩、帽子。在各种操作进程中均应尽量避免或减少气溶胶产生。实验工作区禁止无关人员出入，尤其要严禁儿童进入。工作人员在处理传染性物质或动物之后，以及在离开实验室时要洗手。凡发生溢漏事故或接触传染性物质后，均应立即报告实验室监督员或实验室主任，并做好书面记录及采取相应措施。结核杆菌的培养及标本涂片务必在生物安全柜里操作。 9. 有涉及感染性材料的操作应在生物安全柜中进行，如结核杆菌培养、感染性组织等。 10.

工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其它防护服。工作完毕后必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。 11. 工作时必须戴手套（两副为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。 12. 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。

水质检测中心规章制度一、检测中心系化验重地，非工作人员未经许可，谢绝参观。二、化验人员应热爱本职工作，熟练业务知识，态度认真。三、检测中心的工作应程序化、规范化，严格按检验程序操作，并详细做好原始记录，及时上报化验结果，化验结果要真实、准确。检验结果记录及报告每月汇总并装订成册。四、检测中心的工作间禁止饮食和吸烟，不许嘻笑和大声喧哗。五、检测中心物品陈列要整齐有序，室内外要清洁卫生，不许乱放杂物及私人物品。六、检测中心所有药品应分类存放，所配试剂必须注明名称，浓度，配制日期，配制人等。使用过程中严禁浪费。七、检验工作中，一些废弃物必须经过无害处理方可丢弃。八、对化验仪器要备加爱护，细心操作，使用过的仪器、设备及玻璃器皿要及时整理，清洗复位。九、检测中心必须确保安全，下班前必须检查水、电、气及门窗是否关闭。要防火、防盗、防毒、危险物品及仪器严禁外人乱动乱用。

微生物肥料及其应用优势

微生物肥料及其应用优势中国化肥网2008-9-20 10:46:31 来源：本网论坛【大中小】【关闭】【讨论】关键词: 肥料所谓微生物肥料是指将土壤中的有益微生物分离出来，经选育扩大培养而制成的一类生物活性制剂。微生物肥料具有调节植物生长，增加作物产量和改善作物品质，改良土壤，保护生态环境，减少污染等优点，为广大农民所欢迎。特别是近年来，微生物肥料的应用发展很快，对促进微生物肥料的研究和开发应用，提供了良好的前景。 1微生物肥料的分类及其应用微生物肥料大致可分为以下几类：固氮微生物肥料，微生物钾肥，微生物磷肥；另外还有“5406”和EM菌等微生物肥料。 1 1固氮微生物肥料固氮微生物肥料是微生物肥料最早出现的一种。自从生物学家1888年第一次分离出固氮菌不久就出现了固氮的根瘤菌肥料。根瘤菌可使空气中的氮元素转变为氮素化合物，使土壤中增加氮素营养，农作物需要的氮气大部分都由土壤中各类氮细菌通过生物固氮作用而提供的，而人工合成的氮肥仅占农作物需要量的12％，因此，固氮微生物对于作物的生长具有极其重要的作用，在自然界中有三种生物固氮体系，一是自生固氮，即固氮微生物独自生活固氮；二是共生固氮，即固氮微生物同其他生物共同生活，并形成共生组织进行固氮；三是联合固氮，即固氮微生物同其他生物共栖，不形成特殊组织而进行固氮。我国固氮微生物的研究始于本世纪30年代，首先由张宪诚教授等对大豆根瘤菌进行了研究。1953年在我国东北150万ha的大豆栽培中推广应用，普遍获得了增产效果，大豆平均增产12％。后来，中国科学院林业土壤研究所的科技人员对大豆根瘤菌的接种效果、大豆根瘤的发育及其生理活性作用进行了大量长期研究。由于微生物固氮过程中需要厌氧、贫氮和能源等苛刻条件，另外各种类型的固氮菌对植物的专一性也影响了固氮效果，因此扩大固氮微生物肥料应用的领域还有待于深入研究。 1 2磷细菌肥料磷是植物三大营养元素之一，土壤里含磷虽多，但能为植物直接利用的极少，作为养分能为植物吸收的有效磷在土壤溶液中仅为10－5～10－6摩尔。绝大部分是以不溶性的无机和有机磷化物存在。使用磷肥虽可满足植物对磷的需要，但在土壤里易被固定为难溶态磷，利用率很低。这些无效磷化物在解磷微生物的作用下，可转变为植物可利用的养料。在土壤中具有解磷作用的微生物很多，其中巨大牙孢杆菌、珊瑞红赛氏杆菌、假单孢菌、放射小球菌、橙色黄杆菌等都具有较强的解磷作用。其中有的还对核酸和卵磷脂有较强的分解能力。由于解磷细菌的作用大幅度提高了磷肥的有效供给，磷细菌肥料用于油菜，可增产14％～19％，小麦、水稻、玉米可增产10％左右。因此磷细菌肥料值得进一步研究、开发和应用。 1 3细菌钾肥目前研究和应用的钾细菌大致有两类，一类是硅酸盐形态的解钾细菌，目前研究和应用的解钾细菌大多是属于这一类，另一类解钾细菌是非硅酸盐形态的。 30年代苏联学者就从土壤中分离出了硅酸盐细菌(即钾细菌)，后来的研究证明，这种细菌分解铝硅酸盐类的原生态矿物，可使难溶于水的钾转化为植物能吸收利用的有效钾，同时还能分解土壤和矿物中难以被作物吸收利用的无效磷成为有效磷。据报道，钾细菌尚有微弱的固氮能力，且在代谢过程中还产生一定量的赤霉素、细胞分裂素、吲哚乙酸等生理活性物质。这些物质能促进作物根系的生长发育，提高了作物的抗病能力。钾细菌肥料用于小麦、

发展我国微生物肥料的对策研究

第!"卷第#期!$$$年%!月辽宁师范大学学报&自然科学版’ ()*+,-.)/01-),1,23)+4-.5,167+819:&3-9*+-.;<17,<7=>191),’ ?).@!"3)@# A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A B7<@!$$$文章编号C%$$$D%E"F&!$$$’$#D$#%$D$" 发展我国微生物肥料的对策研究谢明杰G宫文红G曹文伟 &辽宁师范大学生物系G辽宁大连%%H$!I’ 摘要C我国是一个农业大国G农业是国民经济的基础G发展农业生产历来具有战略意义@但人们往往在获取最大的短期经济效益的同时忽视了以保护资源和环境为目标的社会效益和生态效益@面对世界范围内进行的K第二次绿色革命L和K可持续性农业发展L日益强烈的趋势G中国农业如何避免重蹈发达国家K先污染M破坏G后治理L的覆辙G是摆在我们面前的严峻课题@着重阐述微生物肥料在发展生态农业中的作用及使微生物肥料应用规模进一步扩大应采取的措施@ 关键词C微生物N肥料N发展对策中图分类号C;%##文献标识码C O !$世纪P$年代中期以前G世界各国往往力争获取最大的短期经济效益而忽视了以保护资源和环境为目标的社会效益和生态效益@据联合国粮农组织报告G造成发展中国家的环境问题的原因之一是农药和化肥使用量的增长@由于农药和化肥的过量使用G污染了河流和地下水G给人类带来了严重的危害Q%R@我国是一个农业大国G农业是国民经济的基础G发展农业生产历来具有战略意义@但长期以来G由于片面追求高产量的耕作理念G盲目地对农业环境进行不适当地M过度地开发以及滥用化肥和农药等G 已使我国的生态环境每况愈下@面对世界范围内K第二次绿色革命L和K持续性农业L日益强烈的趋势G中国农业如何避免重蹈发达国家K先污染M破坏G后治理L的复辙G是摆在我们面前的严峻课题G而微生物肥料由于具有肥效高M本身无毒无害M不污染环境且成本低M可节约能源等特点G它的大面积推广和应用G 将是解决上述问题的有效措施之一@ %微生物肥料的含义微生物肥料是指一类含有活微生物的特定制品@它是通过微生物的生命活动导致作物获得特定的肥料效应G在这一效应中G微生物起关键作用@ !我国微生物肥料的应用现状我国微生物肥料的研究M生产和应用已有数十年的历史@其种类居世界首位G按照微生物的作用机理可分为根瘤菌类肥料M固氮菌类肥料M解磷细菌肥料M抗生菌肥料M硅酸盐细菌肥料和复合微生物肥料等Q!R@同世界其他各国一样G根瘤菌肥料是我国应用时间最长M生产最多M效果最稳定的微生物肥料@近年来G从花生M大豆M豆科绿肥以及牧草根瘤菌中已选育出若干优良菌株G并生产出根瘤菌肥十余种@目前生产的专用根瘤菌肥有花生M大豆M紫云英M苜蓿M三叶草M菜豆等Q"R@实践证明根瘤菌肥的作用效果是显著的G它在我国农牧业生产中起了重要的作用@ 磷细菌肥料是利用磷细菌的作用把土壤中作物不能吸收的无效态的无机磷或有机磷转化成作物能够吸收的有效态磷G从而提高单位面积产量@钾细菌肥料也叫硅酸盐细菌肥料@它在小麦M棉花等作物上 J收稿日期C%I I I D$#D!# 作者简介C谢明杰&%I H"D’G女G辽宁大连人G辽宁师范大学副教授G硕士@ 万方数据

微生物肥料产业需求与技术创新

微生物肥料产业需求与技术创新发表时间：2019-07-22T16:52:09.163Z 来源：《基层建设》2019年第13期作者：莫意雯[导读] 摘要：在国家绿色农业发展和乡村振兴计划等战略中，微生物肥料均被列为绿色新型投入品和优先支持发展的生物制品，必将在新时代迎来更好的发展机遇。身份证号：33010819920721XXXX 浙江杭州 310000 摘要：在国家绿色农业发展和乡村振兴计划等战略中，微生物肥料均被列为绿色新型投入品和优先支持发展的生物制品，必将在新时代迎来更好的发展机遇。本文在分析我国微生物肥料行业现状与标准体系特点基础上，阐述了微生物肥料具备的多功能、主动响应、信号调控、绿色环保等方面特征，提出了下一步发展的技术创新与新产品名录。关键词：微生物肥料；产业需求；技术创新引言：在国家绿色农业发展和乡村振兴计划等战略中，对微生物肥料产业提出了新的要求，研发新产品、新菌种、新工艺、新功效等已成为新时期产业发展目标。本文在重点对近几年我国微生物肥料行业现状分析的基础上，提出下一步发展的新产品与技术方向等产业发展需求，尤其是围绕实现产业发展目标，需要重视和加速推进创新力度，为产业发展提供强大的原动力，进而推动产业健康稳定和可持续发展。 1我国的微生物肥料特点一是产品种类多，使用菌种达170多种，登记产品超过6?000个。研发应用的菌剂产品种类多，尤其是在研制开发微生物与有机营养物质、微生物与无机营养物质的复合而成的新产品方面，处于领先的地位。其次是我国微生物肥料应用面积广，每年应用面积累计2.7×107?hm2以上，几乎在所有作物上都有应用，在提高化肥利用率、降低化肥使用量和减少化肥过量使用导致环境污染，净化和维护土壤健康，提升作物品质等方面已取得了较好的效果。三是我国微生物肥料行业生产规模大，产能3?000万t以上，但需通过技术创新，突破新的功能菌种选育、生产工艺优化、货架期延长等关键技术难题，进一步提高产品质量，降低生产成本，稳定应用效果，为我国微生物肥料产业下一个黄金发展时期提供坚实的技术基础。 2微生物肥料产业需求 2.1微生物肥料产业发展总体情况微生物肥料因其培肥地力、节本增效、绿色环保等特点受到广泛关注，已成为绿色生态农业发展的不可替代的制胜法宝之一。近年来，国家通过各种措施推动了微生物肥料的应用与发展，在颁布实施的《生物产业发展规划》中，将微生物肥料纳入到“农用生物制品发展行动计划”；2015年原农业部制定了《到2020年化肥使用量零增长行动方案》，明确“有机肥替代化肥”的技术路径；近年又提出“一控两减三基本”的目标，力争实现农药化肥的零增长。微生物肥料的作用将越来越凸显，对实现“藏粮于地、藏粮于技”战略指导思想，保障国家粮食安全、农产品质量安全和农业生态安全具有十分重要的意义。 2.2微生物肥料标准体系助力产业健康持续发展相关标准体系涉及了产品质量要求、检测方法、安全评估、生产规程、应用效果评价等各个方面，在产品生产、登记、销售、流通等各个环节被政府部门采用，为行业健康持续发展提供了技术支撑及法规依据，实现了政府监管有法可依，企业生产有章可循，行业发展有规可矩[1]。以当前产业发展和市场需求为切入点，大力开展复合型微生物肥料菌株的相互作用、复合发酵工艺优化、货架期延长技术、微生物包衣技术，以及土壤生物修复等关键技术研究，制定“复合型微生物肥料生产质量控制技术规程”、“土壤修复菌剂”、“微生物包衣技术规程”等相关标准，并针对微生物肥料产品中广泛使用的芽孢杆菌等，研制含量和功能定量的微生物制剂标准样品，以进一步丰富和完善微生物肥料标准体系，促进产业的健康、快速发展。 2.3微生物产业的跨越发展急需技术产品的创新尽管我国微生物肥料的研发应用历经数10年，并在近10年来取得了快速发展，但是仍存在整体水平参差不齐、功能机理不明、菌株与产品同质化严重、生产工艺欠合理、技术创新不足、效果稳定性差、菌种产品产权保护不力等制约我国微生物肥料行业发展的问题[2]。这些与研究基础薄弱、研发投入少、行业起步晚等密切相关。在我国微生物肥料迎来快速发展新时代的今天，行业技术产品创新不足成为主要的制约因素。 3微生物肥料产业技术创新 3.1选育新功能菌种是研发新一代微生物肥料的核心目前，微生物肥料距离“智能化”产品目标尚有差距，其主要原因是功能菌株及其组合达不到要求，仅能满足“智能化”的部分要求，尤其是主动响应的互作性和系统调控的稳定性方面存在不足。菌种创新是微生物肥料产业发展的核心内容，包括新功能菌种的筛选技术和评价技术。针对优良菌种“六性”要求，即功能性、生产性、互作性、协同性、生态适应性、安全性，急需建立对应的技术方法，实现优良菌株的科学评价，并且加强与土壤环境的耦合评价技术，明确功能菌种应用后对土壤理化性质和生物肥力的影响[3]。同时，应重视菌种活性保持技术，采用回归应用环境、添加植物或土壤浸提物等措施进行复壮，防止菌种退化。此外，也急需肥料管理部门在下一步的肥料管理法规中，确立新研发功能菌株的知识产权保护政策，采用现代技术建立菌株编码的唯一性系统，维护新菌株选育者的权益，达到产权保护和菌种溯源的目标。 3.2未来数年内的新技术产品及其特征微生物肥料优良生产菌株筛选及发酵工艺技术、微生物农田土壤净化修复技术、共生固氮微生物应用新技术、微生物种子包衣技术、有机资源综合利用微生物转化新技术、作物秸秆快速腐解还田微生物及其配套技术、新型复合配套技术。其对应的重点研发应用产品分别为：根瘤菌剂、有机物料腐熟菌剂、土壤修复菌剂、溶磷菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料等。这些新产品应具备的特征如下： 3.2.1土壤修复菌剂对蔬菜、果树、草药、烟草等重茬土壤、酸性土壤、盐碱土壤和次生盐渍化土壤的有效修复，以及对土壤中的农药残留、土壤中的除草剂残留等高效降解。该产品对修复土壤和维护土壤健康，及在保证农产品安全中不可缺少。 3.2.2固氮及根瘤菌剂