紫外-可见分光光度计操作规程
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紫外-可见分光光度计操作规程
(TU1810)
1．目的：制订本标准的目的是为规检验人员在质量检验过程中的操作，保证检验结
版次： 6.0
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有效期至：年月日
果的正确性。
2．适用围：本标准适用于二厂检验员对产品质量的检验。
3．职责：QC检验员对本标准的实施负责。
4．程序：
4.1 简述
紫外-可见分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析方法。这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，它广泛用于无机和有机物质的定性和定量分析。
朗伯—比耳定律（Lambert—Beer）是光吸收的基本定律，俗称光吸收定律，是分光光度法定量分析的依据和基础。当入射光波长一定时，溶液的吸光度是吸光物质的浓度及吸收介质厚度（吸收光程）的函数。其常用表达式为，式中为系数：
A=ε·ι·C
式中A为吸光度；
ε为吸收系数；
C为溶液浓度；
ι为光路长度。
如溶液的浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应的吸光度即为吸收系数以E cm%11表示。如溶液的浓度（C）的摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，则相应有吸收系数为摩尔吸收系数，以ε表示。
4.2 仪器
紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法的原理工作的常规分析仪器。根据光路设计的不同，紫外可见分光光度计可以分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
4.2.1 仪器测量条件选择
1.测量波长的选择
通常都是选择最强吸收带的最大吸收波长λmax作为测量波长，称为最大吸收原则，以获得最高的分析灵敏度。而且在λmax附近，吸光度随波长的变化一般较小，波长的稍许偏移引起吸光度的测量偏差较小，可得到较好的测定精密度。但在测量高浓度组分时，宁可选用灵敏度低一些的吸收峰波长（ε较小）作为测量波长，以保证校正曲线有足够的线性围。如果λmax所处吸收峰太尖锐，则在满足分析灵敏度前提下，
可选用灵敏度低一些的波长进行测量，以减少比耳定律的偏差。
2.适宜吸光度围的选择
任何光度计都有一定的测量误差，这是由于测量过程中光源的不稳定、读数的不准确或实验条件的偶然变动等因素造成的。由于吸收定律中透射比T与浓度C是负对数的关系，从负对数的关系曲线可以看出，相同的透射比读数误差在不同的浓度围中，所引起的浓度相对误差不同，当浓度较大或浓度较小时，相对误差都比较大。因此，要选择适宜的吸光度围进行测量，以降低测定结果的相对误差。
在实际工作中，可通过调节待测溶液的浓度或选用适当厚度的吸收池的方法，使测得的吸光度落在所要求的围。
3.仪器狭缝宽度的选择
狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性围。狭缝宽度过大时，入射光的单色光降低，校准曲线偏离比耳定律，灵敏度降低；狭缝宽度过窄时，光强变弱，势必要提高仪器的增益，随之而来的是仪器噪声增大，于测量不利。选择狭缝宽度的方法是：测量吸光度随狭缝宽度的变化。狭缝的宽度在一个围，吸光度是不变的，当狭缝宽度大到某一程度时，吸光度开始减小。因此，在不减小吸光度时的最大狭缝宽度，即是所欲选取的合适的狭缝宽度。
4.3 紫外-可见分光光度计的检定
4.3.1 波长示值误差与重复性
仪器波长示值误差指标为±0.3nm，波长重复性指标为0.2nm，您可以用仪器氘灯的两条特征谱线检验，具体检验方法如下：
①确认仪器光谱宽带为“2.0nm”。开机初始化完成后，按数字5键进入系统应用界面，在系统应用界面中按数字键2强狭缝设定为“2.0nm”。
②在系统应用界面按RETURN键返回仪器主界面，按2键选择光谱测量功能。
③按F1键选择参数设定功能，按相应数字键设定采样间隔为0.2nm、扫描速度为中速、波长围为660nm~480nm、纵坐标围0-100、测光方式Es、光源选择氘灯
④按RETURN键返回光谱扫描界面。
⑤按START/STOP键并输入增益值为6，按ENTER键确认，开始扫描。
⑥扫描结束后，按F2键并输入阈值（1~100）后，按ENTER键进行峰值检出（如果检出峰波长为0.000nm，则需要按键返回，然后重新按F2键输入比前次输入小的数值作为阈值，重新进行峰值检出）
⑦按F4键打印输出
重复扫描三次，并做峰值检出，氘灯的两个峰标准值为656.1nm和486.0nm。
4.3.2基线平直度
样品池中不放任何遮挡物，以空气为空白进行测量，用波长扫描功能测量全波段的吸光度值，其具体测量方法如下
①首先确认仪器光谱宽带为2.0nm
②在仪器主界面俺2键选择光谱测量模式
③按F1键进入参数设置界面，按相应的数字键设置测光方式Abs、采样间隔为1nm、扫描速度为中速、波长围为1100~190nm、纵坐标围为-0.01Abs~.0.01Abs
④按RETURN键，返回光谱测量主界面，按AUTOZERO键进行基线校正。
⑤按START/STOP键进行扫描
⑥按F4键打印输出。
读取曲线的吸光度值，在1090nm~200nm波长，测量扫描图谱中起始点与最大偏移之差即为仪器的基线平直度。
分光光度法允差围
测定透光率，应符合下表中规定。
4.4.1 计算分光光度法
按《中国药典》规定，计算分光光度法一般不宜用于含量测定，对于少数采用计算分光光度法的品种，应严格按各品种项下规定的方法进行。用本法时应注意：有一些吸光度是在待测成分吸收曲线的上升或下降陡坡处测定，影响精度的因素较多，故应仔细操作，尽量使供试品和对照品的测定条件一致。若该品种不用对照品，如维生素A测定，则应在测定前对仪器作仔细的校正和检定。
4.4.2 比色法
供试品本身在紫外-可见光区没有强吸收，或在紫外光区虽有吸收但为了避免干扰或提高灵敏度，加入适当的显色剂，使反应产物的最大吸收移至可见光区。
用比色法测定时，由于显色是影响显色深浅的因素较多，应取供试品与对照品或标准品同时操作。除另有规定外，比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供试品溶液，然后依次加入等量的相应试剂，并用同样方法处理。
当吸光度和浓度关系不呈良好线性时，应取数份梯度量对照品溶液，用溶剂补充至同一体积，显色后测定各份溶液的吸光度，然后以吸光度与相应的浓度绘制标准曲线，再根据供试品的吸光度在标准曲线上查得其相应的浓度，并求出其含量。
4.5 注意事项
4.5.1 试验中所用的量瓶和移液管均应经检定校正、洗净后使用。
4.5.2 使用的石英吸收池必须洁净。当吸收池中装入同一溶剂，在规定波长测定各吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配对使用，否则必须加以校正。
4.5.3 取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。装样品溶液的体积以池体积的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无残留溶剂，为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面，可先用醮有空白溶剂的擦镜纸擦拭，然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放人样品室时应注意每次放入方向相同。使用后用溶剂及水冲洗干净，晾干，防尘保存，吸收池如污染不易洗净时可用硫酸发烟硝酸（3:1 v/v）混合液稍加浸泡后，洗净备用。如用铬酸钾清洁液清洗时，吸收池不宜在清洁液中长时间浸泡，否则清洁液中的铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面，并应充分用水冲洗，以防铬酸钾吸附于吸收池表面。
4.5.4 含有杂原子的有机溶剂，通常均具有很强的末瑞吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的围均不能小于截止使用波长。例如甲醇、乙醇的截止使用波长为205nm。另外，当溶剂不纯时，也可能增加干扰吸收。因此，在检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即将溶剂置1cm石英吸收池中，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定吸光度，溶剂和吸收池的吸光度应符合下表规定。
以空气为空白测定溶剂在不同波长处的吸光度的规定
4.5.5 称量应按药典规定要求。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少，转移稀释时所取容积一般应不少于5ml。含量测定时供试品应称取2份，如为对照品比较法，对
照品一般也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份，平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以。作鉴别或检查可取样品1份。
4.5.6 供试品溶液的浓度，除各品种项下已有注明者外，供试品溶液的吸光度以在0.3~0.7之间为宜，吸光度读数在此围误差较小，并应结合所用仪器吸光度线性围，配制合适的读数浓度。
4.5.7 选用仪器的狭缝谱带宽度应小于供试品吸收带半高宽的10%，否则测得的吸光度值会偏低，或以减小狭缝宽度时供试品溶液的吸光度不再增加为准，对于中国药典紫外分光光法测定的大部分品种，可以使用2nm 缝宽，但当吸收带的半高宽小于20nm 时，则应使用较窄的狭缝，例如青霉素钾及钠的吸光度检查需用1nm 缝宽或更窄，否则其264nm 的吸光度会偏低。
4.5.8 测定时除另有规定者外，应在规定的吸收峰±2nm 处，再测几点的吸光度，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸光度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm 以，否则应考虑试样的同一性、纯度以及仪器波长的准确度。
4.5.9 用于制剂含量测定时，应注意供试液与对照液的pH 值是否一致，如pH 值对吸收有影响，则应调溶液的pH 值一致后再测定吸光度。 4.6 结果计算
4.6.1 对照品比较法 可根据供试品溶液及对照品溶液的吸光度与对照品溶液的浓度以正比法算出供试品溶液的浓度，再计算含量。
C 样品=A 样品×C 对照/A 对照
式中 A 为吸光度值；C 为测试液浓度（以mg/ml 计）。
4.6.2 吸收系数法 规定的吸收系数，系指E cm %
11，即在指定波长时，光路长度为1cm ，试样浓度换算为1%（g/ml ）时的吸光度值，故应先求被测样品的E cm %
11值，再与规定的E cm %
11值比较，可计算出供试样品的含量。
E
cm
%11（样品）
=
L
C A
式中 A 为供试品溶液测得的吸光度值；
C 为供试品溶液的百分浓度，即100ml 中所含溶质的克数（g/ml ）； L 为吸收池的光路长度（cm ）。
供试品的含量%=（标准）
样品%11%11)(cm cm E E ×100 式中E cm %
11（样品）为根据前式计算出的供试品吸收系数；
E
cm
%11（标准）为药典或药品标准中规定的吸收系数。
4.7 吸收系数测定法
本法主要用于新品种的吸收系数测定。
4.7.1 测定方法 取精制样品精密称取一定量，使样品溶液配成吸光度读数在0.6~0.8之间，置1cm 吸收池中，在规定波长处按
5.5.8项的规定测出吸光度读数，然后再用同批溶剂将溶液稀释1倍，使吸光度在0.3~0.4之间，再按上述方法测定。样品应同时测定2份，同一台仪器测定的2份结果，对平均值的偏差应不超过±0.3%，否则应重新测定。测定时，先按仪器正常灵敏度测试，然后再减小狭缝测定，直到减小狭缝吸光值不增加为止，取吸光度不改变的数据。再用4台不同型号的仪器复测。
吸收系数可根据朗伯-比尔定律求算，以下例说明：
已知某化合物的分子量为287，用乙醇配成浓度为0.0030%的溶液，在波长297nm 处，用1cm 石英池，测得吸光度为0.6139，求E cm %
11值及摩尔吸收系数ε值。
E
cm %
11297nm
=A/CL=1
0030.0614
.0?=205
ε297nm =A/CL=
1287
1001000
0030.0614
.0??
=5874
4.8 开机
开机前打开仪器样品室盖，观察确认样品室无挡光物。
开机后，仪器显示初始化工作界面，仪器将进行自检并初始化整个过程需要约2min 左右，如果初始化正常结束，系统进入仪器的操作界面，如下图所示：
系统初始化…………
1. 存检查：正常
2.样品池电机复位：正常
3.波长电机复位：正常
4.狭缝电机复位：正常
5.滤光片电机复位：正常
6.光源电机复位：正常
7.钨灯检查：
8.氘灯检查：
9.波长检查：
10.参数初始化：
系统忙……
仪器初始化完成后，您便可以开始对仪器进行操作。仪器通常需要经过60min的预热时间使光源达到稳定，为保证测量数据的准确性，尽量不要在仪器预热时进行测量。
5.0 光度测量
在此功能模块下，可测定样品在确定波长下的吸光度或透过率，完成K系数运算和测量数据打印等功能。
5.1 进入光度测量模式
在仪器主界面下根据提示按1键选择光度测量方式，仪器进入光度测量模式，显示界面变为光度测量主界面，按RETURN键返回仪器主界面，如图所示：
退出光度测量时，系统在信息提示区显示“数据将丢失，继续？（是：ENTER，
否CLE）”的信息提示您对当前已测得的数据进行操作。
测试按ENTER键，系统将返回仪器主界面，所有已测得的数据将丢失。按CANCLE键，系统退回到光度测量主界面，提示信息变为“请按START键测量”，您可以继续光度测量的操作。
下面根据图3-2给出了光度测量主界面的具体介绍：
①此处“光度测量”表示目前为光度测量模式；“990nm”为当前的工作波长；“0.000Abs”表示目前实时测得的吸光度值。
②此部分为工作区，以表格的形式显示具体测量的数据，每屏可显示最多9个测量数据值，超过则会自动分屏显示。
③此部分为信息提示区，当前的信息提示您按START/STOP键开始测量。
④此处显示当前时间，图中显示的时间为4月15日8时34分。
⑤此部分为功能键提示区，显示F1~F4键的功能。具体按键功能如下：
★F1—进入参数设定界面；
★F2—删除测量数据，刷新屏幕；
★F3—设置样品池状态；
★F4—打印测量结果。
另外在此画面下，按键盘的操作键GOTOWL可进行工作波长的设置；按AUTOZERO键可完成当前波长下自动校零的功能。
5.2 参数设置
在光度测量主界面下，按F1键进入光度测量参数设置界面，按RETURN键返回到光度测量主界面，如图所示：
在该界面下可设置测量的光度方式，测量波长和K系数运算的系数，根据界面下方的提示按相应的数字进行各项参数的设置。所有参数设置完成后，按RETURN 键返回到光度测量主界面。
5.3 设置光度方式
在光度测量模式下，仪器提供Abs（吸光度）、T%透光率和R%（反射率）两种光度方式供您选择。
在光度测量参数设置界面按1键设置光度方式，每按一次1键，Abs、T%和R%交替变换，如图所示。
5.4 设置测量波长
在光度测量参数设置界面按2键可进行测量波长设置，如图所示：
设置波长界面的底部，系统提示您输入您想要设置的测量波长，用数字键0~9和“.”输入您想要设置的测量波长，如果输入错误按CANCEL键可清楚当前的输入，输入完成按ENTER键确认后，系统提示“系统忙…”，此时系统正在设定您所设置的波长，完成设定后系统退出测量波长设定，返回到光度测量参数设置界面。
您也可以在下图所示的光度测量主界面下，按GOTOWL键设置光度测量的工作波长。
在光度测量界面的底部，系统提示您输入您想要设置的测量波长，用数字键0~9和“.”输入您想要设置的测量波长，如果输入错误按CANCEL键可清楚当前的输入，输入完成按ENTER键确认后，系统提示“系统忙…”，此时系统正在设定您设置的波长，完成设定后系统退出测量波长设置界面，返回到光度测量主界面；不输入数据按RETURN键可直接退出测量波长设定界面，返回到光度测量主界面。
5.5 输入K系数值
在光度测量参数设置界面按3键可进行光度测量K系数的设置，如图所示：
设置K系数界面的底部，系统提示您输入你您想要设置的K系数，用数字键0~9、“.”和“—”输入K系数，如果输入错误按CANCEL键可清除当前的输入，输入完后按ENTER键确认，系统设定完成输入的K系数后退出K系数设置界面，返回到光度测量参数设置界面。
5.6暗电流校正
进行暗电流校正可以消除仪器部分噪声，保证样品的测量结果更为准确。一般在仪器环境发生变化时，您必须进行仪器的暗电流校正，所谓的环境变化主要是指：环境温度变化较大时、安装位置改变、做高吸收度样品时等。（建议您在启动仪器预热后，在进行测量前进行暗电流校正，保证数据结果的准确性）。暗电流校正的具体操作如下：
在光度测量参数设置界面按4键进行暗电流校正，此时在提示区显示“系统忙…”
，大约10s后提示信息变为“请按数字键选择”，此时表示暗电流校正完成，如上图所示
5.7 试样池设置
在试样池设置界面下，您可以选择您所配置的试样池（包括：固定池、五联池
和八联池）。如果所配置的试样池为八联池或者五联池，，您还可以设置使用的试样池数，并进行移动试样池，试样池复位等操作。
在下图所示的光度测量主界面下，按F3键进入试样池设置界面，如果所示
在试样池设置界面下，根据提示按相应的数字键进行您所需要的设置，完成设置后，按RETURN键返回到光度测量主界面。
5.8选择试样池类型
在试样池设置界面下按1键进行试样池类型的设置。系统提供的试样池类型有固定池架、五联池架和八联池架三个选项，每按一次1键，系统在固定池、五联池和八联池之间交替转换，如图所示。请根据自己实际所配置的试样池类型，选择适合您的试样池类型。
5.9 设定使用试样池数
此项参数仅对五联池或八联池有效。在试样控制界面下，按2键进行使用样品池数设置，如图所示：
在试样池设置界面的底部，系统提示您输入您想要设置的使用试样池数，用数字键0~9输入使用试样池数，如果输入错误按CANCEL键可以清楚当前的输入，输入完后按ENTER键确认，系统设定完成输入的使用池数后返回到试样池参数设置界面；
不输入数据按RETURN键可直接返回到试样池参数设置界面。
在测量过程中，系统根据该项设置对指定书目的试样池逐一进行测量，序号以n-1,n-2,…标识，n标识第n次测量，后面的数字表示样品池序号。如果使用池数为1个，或者将多样池修改样池数为1，则重新回到主界面进行测量后，已测得数据按照1-1,2-1,3-1,4-1….顺序编号。
6.0 一号池空白校正
此项参数用来设定是否要进行一号池空白校正（仅对五联池和八联池有效），此项设置有“否”和“是”两个选项，每按一次3键，选项在“否”和“是”之间交替切换，如图所示。
空白校正的意义是把位于1号试样池的试样作为空白，对其他试样池（除一号样品池外的其他设定的样品池）进行测定。在测量开始时，系统将以1号样品池的试样作为空白进行校零。
6.1 移动试样池
此项参数仅对五联池和八联池有效。在试样池设置界面下，按数字键4将移动试样池架到下一试样池。
此选项后面的数值标示当前在光路上的试样池编号，每按一次4键，试样池架将向下移动一个单位，此选项后面的数值也相应的加1，直到样品池编号的最大值后，样品池复位到1号样品池，以此循环。样品池的最大编号五联池为5，八联池为8.
6.2 试样池复位
此项参数仅对五联池和八联池有效。不管当前光路上是几号样品池，在试样池设置界面下按数字键5将试样池架复位，使得1号样品池回到光路上。
6.3 单池测样
在试样池类型选择为八联池或者五联池时，当使用试样池数设置为1,1号池空白校正选项为“否”时，可用<移动试样池>功能选择八个试样池（或五个试样池）中的任一个作为测量样池，随后的测量仅对选中的样池操作。
6.4 自动校零（校100%）
在光度测量设置界面下，ZERO键可对当前工作波长进行零吸光度（透过率100%）校正。在校正前，应先放入空白样品（如：溶解待测样品的溶剂等），然后进行校正操作。
当使用单样品池进行测量时，单样品池测量包括使用单样品池架和多样品池的单池测样，（关于多样品池的单池测样请参考<单池测样>）。
测量时首先参考<参数设置>和<试样池设置>设置好各种测量参数和试样池参数（主要是选择样品池类型和多样品的单池设置），然后参考<自动校零>进行校零操作；校零后将装好样品的比色皿放入样品池，按START/STOP键，重复测量一次样品，测量的结果将显示在界面上，如图所示。
测量结果的表格中“No.”表示测量数据的编号，图中表示第2次测量的第1号样品池的结果（如果是多样品的单池测量，编号“1”表示的是当前使用的样品池）；“Abs”表示测得样品的吸光度值；“K*Abs”表示吸光度值经过K系数运算后的值，
图中测量时的K系数的值为10.
6.5 当使用多样品池进行测量时
只有配置多样品池架（如：八联池、五联池等）后才能进行多样品池测量，您可以根据实际需要选择您需要使用的样品池个数。使用多样品池测量可以大大的提高您的工作效率。
使用多样品池测量时的测量结果如图所示，表格中“No.”表示测量数据的编号，图中“2-3”表示第2次测量的第3号样品池的结果；“Abs”表示测得样品的吸光度值；“K*Abs”表示吸光度值经过K系数运算后的值，图中测量时的K系数的值为10.图中表示的是使用3个样品池进行2次测量的结果。
测量结果查阅，如果测量结果超过了显示器显示的围（一屏最多显示9个），您可以用方向键↑↓逐行查阅测量结果。
测量结果的删除
测量结果结束后，您可以按F2键清楚测量数据，此时系统提示“数据将丢失，继续？（是：ＥＮＴＥＲ，否ＣＬＳ）”根据提示按ＥＮＴＥＲ键确认，系统将清除所有测量数据；按CANCEL取消删除操作，系统提示变回“请按START键测量”，您可以继续其他操作，如果所示
请您在删除测量结果前进行数据的打印输出，以避免数据丢失造成损失。
7.0 光谱测量
在此功能模块下，可对样品在一段确定波长的吸光度Abs、透过率T%和样品光束（或者灯）能量Es和参比光束能量Er进行测量及打印。
7.1 进入光谱扫描测量模式
在仪器主界面下根据提示按2键选择光谱测量方式，仪器进入光谱测量模式，显示界面变为光谱测量主界面，按RETURN键返回仪器主界面，如图所示：
退出光谱测量时，系统在信息提示区显示“数据将丢失，继续？（是：ENTER，否：CLE）”的信息，提示您对当前已测得的数据进行操作。
此时按ENTER键，系统将返回仪器主界面，所有已测得的数据将丢失。按CANCEL键，系统退回到光谱测量主界面，提示信息变为“请按START键测量”，您可以继续光谱测量的操作
下图给出了光谱测量主界面的具体介绍：
①此处“光谱测量”表示目前为光谱测量模式；“990nm”为当前的工作波长；“0.000Abs”表示目前实时测得的吸光度值。
②此部分为工作区，以平面坐标图的形式显示测得的谱线。图中的横坐标为波长值，纵坐标为吸光度值Abs（根据光度方式的不同，纵坐标还可以为透过率T%和能量值Es、Er）。
③此部分为信息提示区，当前的信息提示区您按START/STOP键开始测量
④此处显示当前时间，图中显示的时间为4月15日8时34分
⑤此部分为功能键提示区，显示F1~F4键的功能。具体按键如上图所示。
7.2 参数设置
在光谱测量主界面下，按F1键进入光谱测量参数设置界面，按RETURN键返回到光谱测量主界面，如图
在该界面下可设置光度方式、扫描速度、采样间隔、波长围、纵坐标围、光源选择、等。
根据界面下方的提示按相应的数字进行各项参数的设置。
7.3 设置光度方式
在光谱测量模式下，仪器提供Abs（吸光度）、T%（透过率）、R%（反射率）、Es（样品光路能量）和Er（参比光路能量）五中光度方式供您选择。
在光度测量参数设置界面下按1键设置光度方式，每按一次1键，五种光度方式之间交替转换，如图所示。
7.4 设定扫描速度
仪器提供快速，中速，慢速三种扫描速度。如果是在宽的波长围简单的了解样品大概什么地方有吸收峰，峰值为多少时，可以选择快速扫描；如果需要在较小的波长围准确读取峰的位置和峰值，选择慢速扫描，可以保证结果的准确可靠；中速扫描则是介于二者之间。
在光谱测量参数设置界面下按2键可进行扫描速度的设置。每按一次2键，中速、快速和慢速之间交替切换，如图所示
UV-2600型紫外分光光度计操作指导书
UV-2600型紫外分光光度计操作指导书 1概况 仪器概况： UV-2600型紫外分光光度计是由日本岛津（Shimadzu）生产制造，与功能强大的操作软件UVProbe结合，操作简单方便，且符合SH/T0181方法的测量精度要求。 主要技术参数 波长范围185nm～900nm （使用积分球附件ISR- 2600Plus时220nm～1400nm） 分辨率 波长准确性± 谱带范围、、、1、2、5nm测光方式双光束方式 杂散光%以下检测器光电倍增管R-928 测光范围-5～5Abs比色池1cm 光源50W卤素灯、氘灯单色器切尼尔-特纳单色器 主电压AC100V～240V主频率50/60Hz 使用条件 操作温度：15～35℃ 操作湿度：30%～805% 2仪器结构 仪器由UV-2600型紫外分光光度计和计算机组成。 3操作步骤 开机 在使用前先确认仪器和计算机的工作电源，检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。确认后先开启计算机，然后开启仪器电源。待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时，启动电脑桌面上的UVPROBE程序。 首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器，操作完毕如下图①所示，然后点击上图
的连接键②，这样仪器与计算机连接（当然，中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等都是必须的，此处不再赘述）并开始下示的初始化面。 初始化大约需要5分钟左右，进行一系列的检查和初置，如一切顺利通过就可以开始测定。 测定 首先选择测定的方式，在主菜单上能发现右图所示的各键，自左至右 分别为： ①报告生成器：用于制作各种格式的报告。 ① ② ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨ ⑩ ⑾ ⑿ ⒀ ⒁
紫外可见分光光度计常见故障的排除
紫外可见分光光度计常见故障的排除 光源部分： （1）故障：钨灯不亮； 原因：钨灯灯丝烧断（此种原因几率最高）； 检查：钨灯两端有工作电压，但灯不亮；取下钨灯用万用表电阻档检测。 处置：更换新钨灯； （2）故障：钨灯不亮； 原因：没有点灯电压； 检查：保险丝被熔断； 处置：更换保险丝，（如更换后再次烧断则要检查供电电路）； （3）故障：氘灯不亮； 原因：氘灯寿命到期（此种原因几率最高）； 检查：灯丝电压、阳极电压均有，灯丝也可能未断（可看到灯丝发红）； 处置：更换氘灯； （4）故障：氘灯不亮； 原因：氘灯起辉电路故障； 检查：氘灯在起辉的过程中，一般是灯丝先要预热数秒钟，然后灯的阳极与阴极间才可起辉放电，如果灯在起辉的开始瞬间灯内闪动一下或连续闪动，并且更换新的氘灯后依然如此，有可能是起辉电路有故障，灯电流调整用的大功率晶体管损坏的几率最大。 处置：需要专业人士修理； 二．信号部分： （1）故障：没有任何检测信号输出； 原因：没有任何光束照射到样品室内；
检查：将波长设定为530nm，狭缝尽量开到最宽档位，在黑暗的环境下用一张白纸放在样品室光窗出口处，观察白纸上有无绿光斑影像； 处置：检查光源镜是否转到位？双光束仪器的切光电机是否转动了（耳朵可以听见电机转动的声音）？ （2）故障：样品室内无任何物品的情况下，全波长范围内基线噪声大； 原因：光源镜位置不正确、石英窗表面被溅射上样品； 检查：观察光源是否照射到入射狭缝的中央？石英窗上有无污染物？ 处置：重新调整光源镜的位置，用乙醇清洗石英窗； （3）故障：样品室内无任何物品的情况下，仅仅是紫外区的基线噪声大； 原因：氘灯老化、光学系统的反光镜表面劣化、滤光片出现结晶物； 检查：可见区的基线较为平坦，断电后打开仪器的单色器及上盖，肉眼可以观察到光栅、反光镜表面有一层白色雾状物覆盖在上面；如果光学系统正常，最大的可能是氘灯老化，可以通过能量检查或更换新灯方法加以判断； 处置：更换氘灯、用火棉胶粘取镜面上的污物或用研磨膏研磨滤光片（注意：此种技巧需要有一定维修经验者来实施）； （4）故障：样品室放入空白后做基线记忆，噪声较大，紫外区尤甚； 原因：比色皿表面或内壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白样品对紫外光谱的吸收太强烈，使放大器超出了校正范围； 检查：将波长设定为250nm，先在不放任何物品的状态下调零，然后将空比色皿插入样品道一侧，此时吸光值应小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干净或使用了玻璃比色皿；同样方法也可判断空白溶液的吸光值大小； 处置：清洗比色皿，更换空白溶液； （5）故障：吸光值结果出现负值（最常见）； 原因：没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液； 检查：将参比液与样品液调换位置便知； 处置：做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液； （6）故障：样品信号重现性不良；
原子吸收分光光度计使用说明书
GGX-5型火焰原子吸收分光光度计使用说明书 1 GGX-5火焰原子吸收分光光度计的使用 1.1 仪器特点 原子吸收是指基态自由原子对光辐射能的共振吸收。通过测量自由原子对光辐射能的吸收程度而推断出样品中的某一元素的量大小,根据这一原理研制的分析测试仪器称原子吸收分光光度计。仪器主要由原子化系统、光学系统、信号检测放大输出系统及附属设备组成。下面先将仪器部分结构的性能和特点概述一下: (1) 元素灯, 光源稳定, 寿命较长,我站较常使用的铜、铅、镉、锰、铁、镍等元素灯, 使用五至六年后才更换(具体点灯时间没有统计) 。在使用期内光源是十分稳定的,当一旦出现光能量下降得利害且光源不稳时,需反接处理或更换元素灯。 (2) 原子化系统, 现在很多生产厂家采用石英玻璃喷雾器, 玻璃喷雾器具有耐腐蚀、干扰小的优点, 出厂前已将玻璃喷雾器出口的碰撞球的位置调节固定好, 无须使用者再调节球的位置。同时配有各种口径的毛细吸液管, 使用者可根据需要选择提升量大小, 以调节最灵敏、最稳定的雾化率达到理想的检测效果。(3) GGX-5型, 由于生产厂吸取了国外同行的先进电子线路和技术, 仪器的数据输出相当稳定, 工作曲线线性、数据重复性和准确性等技术指标都能达到比较理想的水平, 部分使用同型号仪器的用户亦有同感。 1.2 原子吸收分光光度计的开关机原则“先开后关, 后开先关”原则。如开机程序“电源→A 键→B 键→C 键”, 关机时必须是“C 键→B 键→A 键→电源”。气路必须先开空气压缩机, 待一定空气压力和流量后, 才能开乙炔气点火, 关机时必须关闭(切断) 乙炔气源后, 才关空气压缩机。如果开关机程序操作混乱, 极容易损伤或烧毁电气设备, 甚至发生严重安全事故。GGX-5型采用了燃气安全阀系统, 该系统只有当仪器主机电源开通后, 空气压力和流量达到一定的条件下, 燃气阀门才能撞开, 这种装备为安全使用仪器加了一道非常实用有效的防线。开关机除了要严格按程序外, 还必须严格地、准确地将各功能键调到应处的位置。要
Lambda 750 紫外-可见-近红外分光光度计使用说明
Lambda 750 紫外/可見/近紅外分光光度計使用說明 Lambda 750資料獲取（Data Collection）頁是一個圖形化的設置介面，但需要設置的參數是類似的，下面就以掃描方法設置為例來看看每一個專案的情況。 以掃描方法為例，資料獲取頁面讓您設置掃描的開始和結束範圍，縱座標類型和狹縫寬度。其他可以設置的參數包括掃描速度（Scan speed）、資料間隔（Data interval）、迴圈次數（Number of cycles）等。 設置掃描範圍時，開始（Start）值必須大於結束（End）值。不然的話數值將被互換。 縱座標類型從下拉清單中選擇。可選擇的縱座標類型（Ordinate mode）有： A ——Absorbance，吸光度 %T ——Transmittance，透過率
E1 ——樣品光路能量值 E2 ——參考光路能量值 %R ——Reflectance，反射率 狹縫寬度（Slit width）的選擇： 狹縫寬度在紫外／可見範圍內以nm表示， 通常選擇狹縫寬度為所測量的譜帶寬度的五分之一到十分之一之間，設置寬的狹縫可以 增加能量，提高信噪比，但同時會降低解析度和準確度，並且可能引起譜帶增寬；設置一個較小的狹縫可以增加解析度和光度計的準確度，但會降低信噪比。 掃描速度（Scan speed）——掃描速度（nm / min）。從下拉清單中選擇需要的掃描速度，慢掃描速度適用於窄峰，並且可以改善信噪比，使用較快地掃描速度適用於寬峰。如果選擇快速掃描，資料間隔會被自動設定。 資料間隔（Data interval）——採樣的數據間隔（nm） 迴圈次數（Number of cycles）——迴圈（重複）掃描的次數。 最快迴圈（Cycle as fast as possible）——儘快地迴圈，一個迴圈結束就立即開始下一個。 迴圈時間（Cycle time）——自行輸入一個迴圈時間，並選擇時間單位。迴圈 時間必須比最小迴圈時間長。 燈切換（Lamp change）——切換使用氘燈或鎢燈進行測量的波長位置（nm）。 如果您關心的光譜峰正好位於默認的切換波長（326 nm）附近，編輯改變該波長缺
752紫外可见分光光度计使用方法解析
752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。 使用：仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽／0％ 3?／100％ 4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度（Absorbance） T——透射比（Trans） C——浓度（conc） F——斜率（Factor） (2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置） 5SD键：该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。 b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C 值（C=F*A）。 6 ▽／0％键：该键具有2个功能 a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。 b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?／100％键；该键具有2个功能 a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。 b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。 例如：设置斜率为1500。 方法一 T）按A／τ／C／F键切换到F状态。 b）如果当前F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500。 C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。
紫外可见分光光度计的校正
实训二紫外可见分光光度计的校正 一、实训目的 1、了解紫外-可见分光光度的基本构造。 2、熟悉紫外可见分光光度计的操作技术。 3、熟悉校正波长和测量吸收值精度的原理和方法。 二、仪器与试剂 1、仪器：紫外-可见分光光度计，石英吸收池（1cm），容量瓶（1000m1），烧杯。 2、试剂：0.0600g→1000ml的K2Cr2O7的硫酸标准溶液（0.005mol/L），NaI溶液（10g/L），NaNO2溶液（50g/L）。 三、实训原理 紫外-可见分光光度计是单光束手工操作仪器，备有钨灯及氢灯两种光源，可用于可见及紫外光区。它是具有色散能力较高的单色器，狭缝可调，可得到较纯的单色光，适用于定性鉴别和定量分析。 新仪器启用前或仪器修理后或长期使用后均需对仪器的性能进行检定。仪器的性能主要是波长准确度与重现性、单色器的分辨能力、吸光度的准确性和重现性及杂散光等。 四、实训操作 1、吸收池配对性试验 每次测定前，应先用蒸馏水做吸收池配对性试验。两个吸收池透光率T相差应＜0.5％。 2、波长准确性与重现性 校验波长是否准确，可用谱线校正法。在吸收池中置一白纸挡住光路，转动波长至486nm附近，遮光观察白纸上蓝色斑。轻微移动波长，至使此蓝色光斑最亮时止。根据调整的波长范围观察所得到的相应颜色，并进行对比核对，判断波长的准确性。 3、吸收度的准确性与透光率重现性 在紫外-分光光度计中用作读取透光率的电位器的精度可达到0.2％，但是，由于其他原因，例如电压变化等，实际测得的透光率误差大于0.2％。一般要求透光率的精度、稳定性和重现性不超过0.5％。透光率的准确性可用已知吸光系数的物质核对，常用的是重铬酸钾。取在120℃干燥至恒重的基准K2Cr2O7约60mg，精密称定，用H2S04溶液(0.005mol／L)溶解并稀释至1000ml，摇匀。按下表规定的吸收峰与谷波长处测定。 将测得的吸光度，计算出其吸光系数，取平均值与表中规定值核对，如相对偏差在土1％以内，则透光率准确性好。K Cr O的H S0溶液（0.005mol／L)的E cm1% 透光率重现性可结合透光率准确性实验同时进行，即在固定波长、溶液浓度以及狭
紫外可见分光光度计 文档
紫外可见分光光度计 一．基本简介 紫外可见分光光度计简介1852年，比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著名的比尔朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年，美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器，使光度法的灵敏度和准确度也不断提高，其应用范围也不断扩大。 [1]从仪器理论上讲，各种紫外可见分光光度计，都是根据比耳定律设计的；而比耳定律研究的是在平行光、单色光的条件下，物质对光的吸收。但是，紫外可见分光光度计的单色器不可能得到真正的单色光。并且，单色器系统不同，它产生的单色光的纯度（光谱带宽）也不同，并且光通过物质时，也不可能是真正的平行光。因此，严格地说，实际工作中，任何紫外可见分光光度计，都不可能真正满足比耳定律。所以，紫外可见分光光度计都是针对近似平行光、近似单色光的条件设计的。所以，就看谁设计、制造仪器最能满足或接近比耳定律（或产生的比耳定律的偏离最小），谁的仪器到了使用者手里，由于非平行光或非单色光产生的分析误差最小，谁的仪器就最好（当然还有杂散光、噪声、稳定性等要求）。这就是从仪器学理论，去看紫外可见分光光度计的设计、制造误差的最根本、最本质的问题；也是使用者从仪器学理论去看紫外可见分光光度计的分析误差的最根本、最本质的问题。 二．工作原理 吸收光谱 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
721可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮，并观察波长显示窗，调整至需要的测试波长。 注意事项：转动测试波长调100%T/0A后，以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”，便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下：*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源，所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm，即200nm-339nm适应氘灯，340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项：如果光源选择不正确，或光源切换杆不到位，将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的，未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只，供紫外光谱区使用，置入样品架时，两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只，供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用，更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面，不应该接触比色皿的头光面，即透光面上不能有手印或溶液痕迹，待测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时，将遮光体置入样品架(如图七所示)，合上样品室盖，并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键，显示器上显示“00.0”或“-00.0”，便完成调T零，完成调T零后，取出遮光体。 注意事项：1.测试模式应在透射比(T)模式； 2.如果未置入遮光体合上样品室盖，并使其进入光路便无法完成调T零；
分光光度计说明
722可见分光光度计使用说明书 1．仪器的主要用途 722可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的的分析。仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器之一 2．仪器的工作环境 2．1仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35℃，相对湿度不超过85%。 2．2使用时放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动。 2．3 室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。 2．4 电扇不宜直接向仪器吹向，以免影响仪器的正常使用。 2．5 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 2．6供给仪器的电源电压为AC220V±22V，频率为50Hz±1Hz，并必须装有良好的接地线。推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2．7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使7 避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐 蚀气体的场所使用。 3 仪器的主要技术指标及规格 3．1 光学系统：单束光、衍射光栅。 3．2 波长范围：330nm~800nm。 3．3 光源：钨卤素灯12V30W。 3．4 接收元件：光电池。 3．5 波长准确度：≤±2nm。
3．6 波长重复性：1nm。 3．7 光谱带宽：＜6nm。 3．8 杂散光：0.7%τ（在360nm处）。 3．9 透射比测量范围：0.0%τ~100.0%τ。 3．10 吸光度测量范围：0.000A~1.999A。 3．11 浓度直读范围：0000~1999。 3．12 透射比准确度：±1.0%τ。 3．13 透射比重复性：0.5%τ。 3．14 噪声：≤0.3%τ。 3．15 稳定性：亮电流≤0.5%τ/3min， 暗电流≤0.2%τ/3min。 3．16 电源：AC220V±22V，50Hz±1Hz。 3．17 外型尺寸：570mm×400mm×260mm。 3．18 净杂散光测量范围：18 净重：22kg。 4．仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物 质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理--比耳定律。 τ=I/I0 logI0/I=KCL A=KCL
(完整版)紫外分光光度计的使用方法
UV2600型紫外分光光度计操作规程 一、开机 1.打开仪器电源。 2.打开电脑，点击UV Analyst 进入光谱分析软件。 3.软件将自动搜索仪器端口，点击“联机”，软件与仪器联机成功。 二、选择测试模式 根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量” 【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况，以便对样品进行定性测量。 1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 注意：在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致！ 【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度（或透过率）随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度（或透过率）。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“自动校零”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“测量”，以完成样品的吸光度（或透过率）的测量。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。 【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。
可见分光光度计使用说明
722可见分光光度计 使 用 说 明 书 上海精密科学仪器有限公司
目录 第一章设计原理与主要用途 2 第二章仪器的工作环境 2 第三章仪器的安装 3 第四章主要技术指标及规格 3 第五章仪器视图与构件名称 3 第六章仪器使用操作说明 4 第七章仪器的应用问题解决方案11 附录A 仪器验收13
第一章 设计原理与主要用途 一、原理 分光光度计的基本原理是：物质在光的照射下会产生对光吸收的效 应，而且物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同物质都具有其 各自的吸收光谱。因此不同波长的单色光通过溶液时其光的能量就 会被不同程度的吸收，光能量被吸收的程度和物质的浓度有一定的 比例关系，即符合比耳定律。 0I I T = abc T I I A ===1lg lg 0 其中：T —透射比 A —吸光度 I 0—入射光强度 a —吸收系数 I —透射光强度 b —溶液的光程长度 c —溶液的浓度 由上式可以看出当吸收系数a 与光程长度b 不变时，吸光度与溶液 浓度成正比。本仪器正是依据这一原理而设计的。 二、用途 本仪器可供物理、化学、医学、生物学等学科进行科研或供化学工 业、食品工业、制药工业、冶金工业、临床生化、环境保护部门进 行各种物质的定性定量分析。 第二章 仪器的工作环境 一、仪器的运输和存储 本仪器在运输过程中必须防雨淋、曝晒及剧烈冲击。 本仪器存储时应包装完好的存储于有遮蔽的仓库内，周围无酸性气 体、碱及其它有害物质。仓库的环境温度在-25℃～40℃之间，相对 湿度不大于85%。 二、仪器的使用环境 避开阳光直射的场所和有较大气流流动的场所。 请不要安放在有腐蚀性气体及灰尘多的场所。 应避开有强烈振动和持续振动的场所。 应远离发出磁场、电场和高频电磁波的电气装置。 仪器应放在可载重的稳定水平台面上，仪器背部距墙壁至少15cm 以 上，以保持有效的通风散热。 避开高温高湿环境 使用温度： 室温 5℃～40℃
TU1901紫外可见分光光度计操作规程
TU-1901/1900操作规程 一、开机 1．1 依次打开打印机、计算机，Windows完全启动后，打开主机电源。 二、仪器初始化 2．1在计算机窗口上双击图标，仪器进行自检，大约需要四分钟。如果自检各项都“”，软件自动进入工作界面，预热半小时后，可以进行测量工作。 三、测量 A：光度测量 参数设置： 单击按钮（上方或左侧），进入光度测量。单击设置光度测量的参数：具体输入： 1.清除以有的波长点，输入要测量的波长值（从长波到短波）添加到测量波长点内； 2.重复测量次数，是否计算平均值，SD，RSD，等要求； 3.选择光度模式（一般为T%或Abs）； 4.单击退出参数设置，进行测量。 校零和测量： 单击,将两个样品池中都放入参比溶液，单击。仪器自动完成校零，校零完成后，取出外池的参比溶液。倒掉取出的参比溶液，放入样品溶液，单击；即可测出样品的Abs 或T%值。 测量完成后，可以随时进行打印或保存。 B：光谱扫描 参数设置： 单击，（上方或左侧）进入光谱扫描。单击，设置光谱扫描参数，具体输入： 1．波长范围（先输长波再输短波）； 2．测光方式（一般为T%或Abs）； 3．扫描速度（一般为中速）； 4．采样间隔（一般为1nm或0.5nm）； 5．显示范围（一般为0--1）。 6．单击退出参数设置。 基线校正： 单击，将两个样品池中都放入参比溶液单击，校零完成后单击存入基线，取出外池的参比溶液。 样品的光谱扫描： 倒掉取出的参比溶液，放入样品单击进行扫描， 当扫描完毕后，单击查看检出图谱的峰、谷相对应的波长值及Abs值。可以根据需要，调整阈值增加或减少检出的峰和谷数量 测量完成后，可以随时进行打印或保存。 C：定量测量 参数设置 单击（上方或左侧），进入定量测量；单击，设置具体参数：
紫外可见分光光度计及其应用
紫外可见分光光度计及其应用 科技论文写作期末作业 西北民族大学生命科学与工程学院 11级生物技术(1)班 符朝方 学号:P112114841 紫外可见分光光度计及其应用 李诗哲 西北民族大学生命科学与工程学院兰州 730100 摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一，几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点，并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器，无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域，还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业，紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。 2原理:紫外可见分光光度法 【1】紫外可见分光光度法是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小，波长短的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分
子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的 某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 【2】2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱 有机化合物的电子跃迁 与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4]，即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。 跃迁类型有:σ?σ*、n?σ*，π?π*、n?π四种。 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ?σ*，n?σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。不饱合机化合物的电子跃迁类型为n?π*，π?π*跃迁，吸收峰一般大于200nm. 2.2有机化合物的吸收带 吸收带(absorption band):在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。 (1)R吸收带 (2)K吸收带 (3)B吸收带 (4)E吸收带 2.3无机化合物的紫外可见吸收光谱 无机化合物的UV-Vis光谱吸收光谱主要有:电荷 迁移跃迁及配位场跃迁。 (1)电荷迁移光谱
(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用
应用 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。 基本原理 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息，可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A= kcl 式中比例常数k与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。 组成 各种型号的紫外－可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。 1.光源 在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。 2．单色器 单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多，其光径可在0.1~10cm之间，其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器 检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5、信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。
分光光度计使用说明
722型分光光度计的使用方法 一、测量原理 分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A 与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc （a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L·mol-1·cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。 T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或A=K·C·L(比色皿的厚度) 测定时，入射光I, 吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。 《分光光度计的表头上，一行是透光率，一行是吸光度。》 二、722型分光光度计的使用 1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）。 2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。 3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示
为000.0。（调节100%T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿 架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵敏度 的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。 4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作。 三、吸光度“A”的测量 将选择开关置于A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。 四、浓度c的测量 将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。 注意事项： 1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至最低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。 2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。
U-3900紫外分光光度计操作说明
U-3900分光光度计简易操作说明书 1. 开机 插上电脑、主机电源，打开电脑、主机开关。 2. 打开测试软件，进行自检（自检时不放任何东西，自动进行），自检后主机预热15-20min 再开始测量。 3. 基线校正 将两个比色皿装上空白样放入样品槽中，合上盖子。单击baseline，工作界面出现use1，单击ok，开始扫描，扫描结束出现绿色标示“ready”后即可进行下步操作。 4. 样品最大吸收波长扫描 4.1点击屏幕右侧
4.2 在instrument标签栏data mode选ABS（吸光度）； 在Start/end wavelength根据需要设置起始扫描波长（可在199-1099nm间任意设定）； 在scan speed一栏中设置合适得扫描速度（一般选取中间值，如300nm/min）。 其它默认。 4.3 在monitor标签栏，Y-axis Max和Min可根据实际样品的abs峰值调整，其它默认。
4.4 在processing和Report标签栏，一般取默认设置。 4.5
5. 样品标准曲线的绘制 5.1 配制标准试样（一般5个）。 5.2 点击屏幕右侧
紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程 1、目的 规范设备管理，正确使用、维护设备，防止设备事故发生，确保检测工作顺利开展。 2、适用范围 适用于TU-1810S紫外可见分光光度计的操作。 3、基本要求 3.1准备工作 3.1.1确认环境温度、相对湿度是否满足要求（要求温度为15℃～35℃、相对湿度不大于80%）； 3.1.2开机前打开仪器样品室盖，观察确认样品室无挡光物后再打开电源。 3.2启动 3.2.1打开电源，仪器显示初始化工作界面，仪器将进行自检并初始化，若初始化正常结束，系统将进入仪器操作主界面； 3.2.2仪器需进行预热使光源达到稳定后开始测量，预热时间一般为15～30分钟。 3.3运行 3.3.1选择数字键“3”→按“F1”→按“1”键选择工作模式为“标样法”→按“2”键用数字键将波长值输入，输入完成按“ENTER”键→按“3”键选择需要的浓度单位。 3.3.2继续按“F1”键进入标样法工作曲线参数设置界面→按“1”键输入标样数，输入完成按“ENTER”键→按“2”键，按照系统提示用数字键输入标样浓度，输入完成按“ENTER”键→再按“2”键，在一号池位置放置空白溶液，按“A/Z”键进行自动校零，校零结束将要测量的标样放入对应的比色池位置，按“START/STOP”键对当前测试的标样进行测量→测量结束系统提示输入下一号标样的浓度值，重复以上操作，直至标准曲线测试完成。
3.3.3按“3”键可看到标准曲线、曲线方程及相关系数，将线性方程及相关系数记录在原始记录本上，按“RETURN”键返回定量测量参数设置界面。 3.3.4按“F3”键进入试样池设置→再按“1”键选择试样池为5联池→按“2”键可利用数字键对样品池数进行设置，输入完成后按“ENTER”键→继续按“3”键选择一号池空白校正为“否”→按“4”键对移动试样池数进行设置，按“RETURN”键返回到定量测量画面→在一号池位置放入空白溶液，按“A/Z”键对当前工作波长进行零吸光度校正，将测量的样品依次放入设定的使用样品池中，按“START/STOP”键测量样品的浓度值。 3.4结束 测量结束将比色皿用去离子水冲洗干净倒置晾干，清理台面，关闭电源开关，并及时填写相关记录。 4、维护方法 4.1每次使用后应检查样品室是否积存有溢出溶液，经常擦拭样品室，以防废液对部件或光路系统腐蚀。 4.2仪器使用完毕应盖好防尘罩，可在样品室及光源室内放置硅胶袋防潮，但开机时必须取出。 4.3仪器液晶显示器及键盘日常使用时应注意防止划伤，并注意防水、防尘、防腐蚀等。 4.4定期进行性能指标检测，发现问题及时上报。 4.5长期不使用仪器时，应定期更换硅胶，每隔两星期开机运行一小时，确保仪器的正常使用。 5、安全操作注意事项 5.1操作设备时应确保环境的温度及相对湿度满足要求（温度为15℃～35℃、相对湿度不大于80%）。 5.2操作时不允许碰伤光学镜面，且不可以擦拭其镜面。 5.3仪器周围无有害气体及强腐蚀性气体，且不应该有强震动源。 5.4设备使用电源为220±10%，开机前应确认电源是否符合设备要求。 6、紧急应对措施
i3紫外可见分光光度计说明书
i3型紫外/可见分光光度计仪器使用说明书 济南海能仪器有限公司
目录 第一章仪器的应用领域．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4 第二章仪器的工作环境．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4 第三章仪器的技术参数．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4 第四章仪器的工作原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5 1、琅伯-比尔定律．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5 2、琅伯-比尔定律在实用过程中的可靠性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5 第五章仪器的外部结构．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7 1、主机外表面图．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7 2、操作面板图．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7 第六章内容介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9 一、仪器功能简介（结构图）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10 二、仪器开机和使用之前的注意事项．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10 三、仪器开启和自检．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10 四、光度测量功能．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12 五、定量测量（含标准曲线功能）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14 六、系数法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18 七、系统设定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 20 第七章仪器的日常维护与保养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 23 第八章常见问题判断与检修．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 24 第九章常见问题解答．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 27
UV-2600系列紫外可见分光光度计操作规程
UV-2600系列紫外可见分光光度计操作规程 1目的 规范UV-2600紫外可见分光光度计的操作、使用、保养和维护，以延长仪器设备寿命，保证设备和操作人员的安全，使检验结果准确可靠。 2适用范围 适用于本公司UV-2600紫外可见分光光度计（尤尼可（上海）仪器有限公司）的使用操作。 3职责 3.1操作人员：按本操作规程操作仪器，对仪器进行日 常维护，作使用登记。 3.2保管人员：负责监督仪器操作是否符合规程，对仪 器进行定期维护、保养。 3.3计量检定员：负责该仪器的周期检定计划及实施。 3.4科室负责人：负责仪器综合管理。 4仪器设备性能技术指标 4.1波长范围：190nm～1100nm
4.2波长精度：±0.8nm 4.3波长重复性：0.2nm 4.4光谱带宽：4nm， 4.5杂散光：0.05%T（220nm，340nm） 4.6数据显示：320x240图行液晶显示器 4.7光度方式：透过率、吸光度、反射率、能量 4.8光度范围：0-200％-0.3-3.0A 0-9999C（0-9999F） 4.9光度精度：0.3％T 4.10基线直线性：±0.002A 4.11稳定性：±0.002A/小时＠500nm(预热1小时后) 5安全操作注意事项 5.1本仪器必须设专人管理，实行专管共用，使用人员 必须经专门培训后方可上机操作。 5.2仪器正常使用环境：室内空气流通、清洁、干燥（使用温度为5℃—35℃）、无腐蚀性气体、避免直射日光的照射。 5.3严格遵守操作规程，如仪器出现故障应马上切断电源，立即向管理人员或科室负责人报告，查明原因及时修理，
不得擅自“修理”，如需修理，须及时向领导报告，并作好 使用和故障情况登记及实验记录。 5.4不得在仪器室内制作和储存样品。 5.5注意仪器的清洁卫生，应定期更换干燥剂。 5.6严禁频繁开关机，以免损坏电源。供给仪器的电源 为220伏±10%，49.5—50HZ，并必须装有良好的接地线。 5.7在样品检测过程中须打开门、窗，保证室内通风，检 测完毕，须关闭仪器及电、门、窗 等，并将样品移出仪器室。 6操作程序 6.1基本操作步骤： 开电源仪器开始自检。待初始化完成后，仪器将预热15分钟，15分钟到或按[ESC/STOP]。屏幕最低行会显示： 重性校刻系统？否，（选“是”做系统校刻，选“否”跳过，三声鸣叫，进入主显示界面。 各测定方法操作步骤：
- 紫外-可见分光光度计操作规程
- 紫外可见分光光度计基本知识
- 紫外可见分光光度计 文档
- 紫外可见分光光度计基本知识PPT
- 紫外可见分光光度计原理及操作完整ppt
- 752紫外可见分光光度计使用方法
- 紫外-可见分光光度计基本原理
- 紫外可见分光光度计及其应用
- 紫外可见分光光度计的使用方法
- 紫外可见分光光度计的使用方法
- 紫外可见分光光度计参数分析方法
- 紫外可见分光光度计的校正
- 紫外、可见分光光度计技术报告
- 紫外可见分光光度计使用
- 紫外可见分光光度计的一般使用.
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- 紫外可见分光光度计概述
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