肠道病原菌的分离与鉴定实验报告

肠道病原菌的分离与鉴定实验报告

摘要

本实验旨在分离、鉴定肠道病原菌，并深入了解肠道病原菌对人们健康的影响。本实验采用选择性培养基和生化试剂对样品进行处理和鉴定，最终成功分离出大肠杆菌、沙门菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等肠道病原菌。

引言

肠道病原菌是导致肠胃疾病的主要病因之一。一些细菌和病毒都可引起肠道感染，导致腹泻、呕吐、腹痛等不适症状。有些肠道病原菌很难通过常规的培养方法进行分离和鉴定，因此对于其鉴定至关重要。在临床和实验室中，肠道病原菌的鉴定是非常重要的。在本实验中，我们将通过选择性培养基和生化试剂来分离和鉴定肠道病原菌。

材料与方法

实验所需材料：

-食品样品（牛肉、猪肉、家禽产品等）

-选择性培养基（MacConkey agar, SS agar, XLD agar）

-氯霉素（50μg/ml）

-β-半乳糖苷酶

-生化试剂（甲基红、青田霉素、麦芽糖、尿素、甲酸氢钠、甲酸亚铁、碳酸氢铵、硫代硫酸钠、氧化亚铁、硫酸铜、氯化铵、硝酸钴、聚苯乙烯乳胶、过氧化氢）

实验步骤：

1. 食品样品的处理：将样品切成小块，加入100 ml的含氯霉素（50μg/ml)的生理盐水中，放在室温下搅动10分钟，再将悬浮液离心10分钟，取沉淀制备10倍连续稀释液备用。

2. 分离培养：取三个不同的选择性培养基MacConkey agar、SS agar和XLD agar，分别接种均匀悬浮液并用无菌环展开，然后使其在37℃恒温箱中孵化24小时。

3. 生化识别：观察菌落的形态、颜色和表面涂膜，并用生化试剂行革兰染色、甲基红反应、青田霉素试验、尿素酶试验、甲酸氢钠氧化试验、甲酸亚铁还原试验、碳酸氢铵水解试验、硫代硫酸钠还原试验、氧化亚铁试验、硫酸铜凝集试验、氯化铵水解试验、硝酸钴试验、聚苯乙烯乳胶凝聚试验和过氧化氢试验，根据结果进行分类鉴定。

结果

经过实验分离和鉴定，本实验成功分离出大肠杆菌和沙门菌等常见的肠道病原菌，并

且还分离出一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。其中大肠杆菌菌落呈淡粉色，为革兰阴性菌，甲基红反应为阳性，尿素酶试验和甲酸氢钠氧化试验均为阴性，青田霉素试验阴性。沙门

菌为革兰阴性菌，菌落呈红色，具有独特的黑点形成，生化试验呈现葡萄糖的发酵反应和

硫化反应均为阳性。确证耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法为β-半乳糖苷酶试验和聚苯

乙烯乳胶凝聚试验的联合使用。

讨论

本实验采用了选择性培养基和生化试剂进行肠道病原菌的选择分离鉴定。在处理样品时，使用了含氯霉素（50μg/ml）的生理盐水对悬浮液进行预处理，以消除干扰菌对细菌

的影响，从而提高了细菌的纯度和分离效果。采用不同的选择性培养基可以选择和提高不

同菌种的筛选效果，进一步提高了鉴定的准确性和灵敏度。通过生化试剂的使用，对分离

出的细菌进行深入鉴定，包括了革兰染色、甲基红反应、青田霉素试验、尿素酶试验、甲

酸氢钠氧化试验、甲酸亚铁还原试验等实验。本实验的结果表明，采用选择性培养基和生

化试剂联合识别，可快速准确地鉴定肠道病原菌。

结论

本实验通过采用含有氯霉素（50μg/ml）的生理盐水等处理方法，成功分离、鉴定出

常见的肠道病原菌，包括大肠杆菌、沙门菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。选择性培养基

和生化试剂的使用，使得实验具有高效、准确的特点，对于临床和实验室的研究都具有重

要意义。

细菌分离与鉴定实验报告

细菌分离与鉴定实验报告 细菌分离与鉴定实验报告 引言： 细菌是一类微小的单细胞生物，广泛存在于自然界中的各种环境中，包括土壤、水体、空气等。细菌的分离与鉴定是微生物学研究的重要环节，通过对不同细 菌菌株的鉴定，可以了解其形态特征、生理代谢特性以及致病性等信息。本实 验旨在通过对土壤样品的分离与鉴定，探索土壤中存在的细菌多样性以及其对 环境的适应能力。 材料与方法： 1. 实验材料： - 土壤样品 - 细菌培养基 - 灭菌培养皿 - 灭菌培养瓶 - 灭菌培养管 - 灭菌试管 - 鉴定试剂 2. 实验步骤： a. 取一定量的土壤样品，加入适量的生理盐水中，进行悬浮液制备。 b. 依次采用稀释涂布法、平板法和涂布法进行细菌的分离。 c. 将分离得到的单菌落转移到灭菌培养瓶中，进行单菌种的纯化培养。 d. 利用形态学观察、生理生化试验等方法对分离得到的细菌菌株进行鉴定。

结果与讨论： 在本实验中，我们从土壤样品中成功分离出多个细菌菌株，并进行了初步的鉴 定工作。通过形态学观察，我们发现这些细菌菌株在形态上存在一定的差异， 包括菌落形状、颜色、大小等方面。这些差异可能反映了它们在不同环境中的 适应能力和生长特性。 进一步的生理生化试验显示，这些细菌菌株在碳源利用、氧需求、温度耐受等 方面也存在差异。有些菌株能够利用多种碳源进行代谢活动，而有些菌株则对 特定的碳源有较强的选择性。此外，我们还观察到一些细菌菌株对氧气的需求 不同，有些菌株是厌氧菌，而有些则是好氧菌。这些差异可能与它们在不同环 境中的生存策略有关。 在鉴定试验中，我们采用了一系列的鉴定试剂来确定这些细菌菌株的分类地位。通过鉴定试剂的反应，我们可以初步确定这些菌株的属于某一类细菌，如革兰 氏阳性菌或革兰氏阴性菌。然而，要进一步确定它们的物种归属，还需要进行 更加精确的分子生物学鉴定工作，如16S rRNA基因测序等。 总结： 通过本实验，我们成功地分离和鉴定了多个土壤中的细菌菌株。这些菌株在形态、生理和生化特性上存在差异，反映了它们在不同环境中的适应能力和生存 策略。进一步的分子生物学鉴定工作将有助于更加准确地确定这些菌株的分类 地位和物种归属。这些研究结果对于深入了解细菌多样性以及它们在生态系统 中的功能和作用具有重要意义。

肠道病原菌的分离与鉴定实验报告

肠道病原菌的分离与鉴定实验报告 摘要 本实验旨在分离、鉴定肠道病原菌，并深入了解肠道病原菌对人们健康的影响。本实验采用选择性培养基和生化试剂对样品进行处理和鉴定，最终成功分离出大肠杆菌、沙门菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等肠道病原菌。 引言 肠道病原菌是导致肠胃疾病的主要病因之一。一些细菌和病毒都可引起肠道感染，导致腹泻、呕吐、腹痛等不适症状。有些肠道病原菌很难通过常规的培养方法进行分离和鉴定，因此对于其鉴定至关重要。在临床和实验室中，肠道病原菌的鉴定是非常重要的。在本实验中，我们将通过选择性培养基和生化试剂来分离和鉴定肠道病原菌。 材料与方法 实验所需材料： -食品样品（牛肉、猪肉、家禽产品等） -选择性培养基（MacConkey agar, SS agar, XLD agar） -氯霉素（50μg/ml） -β-半乳糖苷酶 -生化试剂（甲基红、青田霉素、麦芽糖、尿素、甲酸氢钠、甲酸亚铁、碳酸氢铵、硫代硫酸钠、氧化亚铁、硫酸铜、氯化铵、硝酸钴、聚苯乙烯乳胶、过氧化氢） 实验步骤： 1. 食品样品的处理：将样品切成小块，加入100 ml的含氯霉素（50μg/ml)的生理盐水中，放在室温下搅动10分钟，再将悬浮液离心10分钟，取沉淀制备10倍连续稀释液备用。 2. 分离培养：取三个不同的选择性培养基MacConkey agar、SS agar和XLD agar，分别接种均匀悬浮液并用无菌环展开，然后使其在37℃恒温箱中孵化24小时。 3. 生化识别：观察菌落的形态、颜色和表面涂膜，并用生化试剂行革兰染色、甲基红反应、青田霉素试验、尿素酶试验、甲酸氢钠氧化试验、甲酸亚铁还原试验、碳酸氢铵水解试验、硫代硫酸钠还原试验、氧化亚铁试验、硫酸铜凝集试验、氯化铵水解试验、硝酸钴试验、聚苯乙烯乳胶凝聚试验和过氧化氢试验，根据结果进行分类鉴定。

大肠杆菌及其检验

大肠杆菌及其检验 大肠杆菌的生物学特性 ●简介： 大肠埃希氏菌习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属，并且大肠杆菌株ATCC 11775是该属的模式菌种。 附：肠杆菌科各属 大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%，而与同科的志贺氏菌属（除鲍氏志贺氏菌外）的DNA相关性可达80-87%。 大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道外感染。 ●形态与染色 大小0.4～0.7×1～3um,无芽胞,大多数菌株有动力。 有普通菌毛与性菌毛，有些菌株有多糖类包膜，革兰氏阴性杆菌。 附：有动力是什么意思？请看动力试验。 革兰氏阴性杆菌是什么意思？请看革兰氏染色介绍。 大肠杆菌扫描电镜照片 大肠杆菌透射电镜照片 大肠杆菌分裂照片

最新：大肠杆菌革兰氏染色照片 培养特性 由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。 最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能生长，生长温度范围为15-46℃。 在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态： （1）光滑型：菌落边缘整齐，表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色，在生理盐水中容易分散。 （2）粗糙型：菌落扁平、干涩、边缘不整齐，易在生理盐水中自凝。 （3）粘液型：常为含有荚膜的菌株。 此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生长pH为6.8-8.0，所用培养基pH为7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于8.0则生长缓慢。 附：菌落形态有什么用处？菌落形态学 生化反应 大部分菌株发酵乳糖产酸产气，并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。

IMViC试验为“+、+、-、-”。即为典型大肠杆菌。 ●抗原构造 比较复杂，主要由菌体O抗原、鞭毛H抗原、夹膜K抗原组成。 ●抵抗力 该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。 在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感，但易耐药，是由带有R因子的质粒转移而获得的。 致泻性大肠杆菌简介 大肠杆菌为人和动物肠道中的常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道外感染。 某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，与人类疾病有关的大肠杆菌，统称为致泻性大肠杆菌（enterovirulent E. coli ）。 一般包括四种： 肠毒素性大肠杆菌（ETEC） 致病性大肠杆菌（EPEC） 出血性大肠杆菌（EHEC） 侵袭性大肠杆菌（EIEC）。

粪便标本中致病菌的检验实验设计

临床模拟标本细菌学检验的实验设计书 1.标本分析 标本中可能的正常菌群：正常情况下肠道中有多种细菌寄生，包括大量的厌氧菌、肠球菌、大肠埃希菌、肠杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌等。 标本中可能存在的病原菌：①细菌性：吸收不良性腹泻，包括致病性大肠埃希菌等；产毒素性腹泻，包括霍乱弧菌、肠毒素型大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌、变形杆菌、气单胞菌属、蜡样芽胞杆菌等；侵袭性腹泻，包括志贺菌、肠致病型大肠埃希菌、肠侵袭型大肠埃希菌、肠出血型大肠埃希菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌等；食物中毒，包括沙门菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、乙型溶血链球菌和肉毒梭菌等；伪膜性肠炎，包括艰难梭菌或金黄色葡萄球菌；慢性腹泻，可能由结核杆菌引起；继发性肠道感染：铜绿假单胞菌、非结核分枝杆菌等。②真菌性：念珠菌、毛霉菌等。③病毒性：轮状病毒等。 2.检验思路

图1-1 粪便标本细菌学检验程序 3.拟采用的实验方法及预期结果 （1）显微镜检查（仅在怀疑为霍乱弧菌、艰难梭菌、结核分枝杆菌感染等情况下进行） ①不染色标本检查：用生理盐水或卢戈氏碘液或0.1%亚甲蓝染液与等量的粪便标本混合均匀涂于载玻片上，盖上盖玻片用相差显微镜或暗视野显微镜高倍镜镜检。 A.若标本呈米泔样或洗肉水样，镜检发现逗点状或弯曲状的弧菌，呈流星样

穿梭，运动活泼，提示霍乱弧菌感染。此时加入O群或O139群霍乱弧菌多价诊断血清，显微镜下观察与不加诊断血清比较，若大于80%的细菌停止运动或运动明显减弱，判断为制动试验阳性，可初步报告为“疑似O群或O139群霍乱弧菌”。 B.若发现呈S形、螺旋形并快速、拧塞样或投镖样运动的细菌，提示为弯曲菌。 C.若高倍镜观察发现有无光亮的卵圆形孢子或假菌丝可初步报告酵母样真菌感染。 ②染色检查：如细菌染色呈现下列典型形态时，对诊断具有提示作用。 A.取新鲜米泔样类便标本涂片2张，用乙醇或甲醇固定，分别进行革兰染色和1：10稀释苯酚复红染色，油镜观察呈鱼群状排列的杆状或弧形红色革兰阴性杆菌。提示为霍乱弧菌。 B.粪便做革兰染色，镜检发现细小、长而弯曲，呈S形或螺旋形、海鸥状的革兰阴性弧菌，可初步报告“疑似空肠弯曲菌”。 C.取水样便涂片，革兰染色，若发现大量散在或成堆（葡萄状）排列的革兰阳性球菌同时伴随革兰阴性杆菌明显减少，疑为引起伪膜性肠炎的葡萄球菌。 D.抗生素相关性腹泻的主要病原菌，大便呈黄绿色糊状便或暗绿色海水样便，黏液多，有时可见片状伪膜，涂片革兰染色可见大量革兰阳性粗大杆菌、无荚膜、卵圆形芽胞位于菌体一端同时伴有炎症细胞疑为艰难梭菌。 E.涂片革兰染色见瓜子状革兰阳性孢子或假菌丝，可初步报告检出酵母样真菌。 F.取蚕豆大小小的粪便与饱和生理盐水10ml混合，静置1小时，取表面液体涂片进行抗酸染色，发现红色抗酸杆可报告“找到抗酸杆菌”，提示为结核分

脓汁和粪便标本中病原菌检测实验报告二

脓汁和粪便标本中病原菌的检测 年级专业：14临床输血学号： 3140704004 姓名：宁立军组别：第七组 合作者：牛恺文黄可秀朱晋辉 实验室：第六实验室指导老师：罗军 实验的得分： 一、实验目的 通过革兰氏染色并在油镜下观察细菌形态结构、细菌的生化反应和细菌的血清学反应等手段区别和鉴定脓汁标本中和粪便标本中细菌，检测病原微生物，并进行细菌药物敏感性试验。 二、实验器材 1器材 接种环接种针打火机马克笔酒精灯电热恒温培养箱物显微镜电炉试管（带棉塞）称量纸药勺牛皮纸橡皮筋尺子锥形瓶高压蒸汽灭菌器镊子玻片吸水纸 2 试剂药品 普通营养琼脂培养基蒸馏水脓汁标本粪便标本石蜡油生理盐水结晶紫卢戈碘液 95%乙醇稀释复红葡萄糖微量发酵管（2支）乳糖微量发酵管（2支）青霉素抗菌素纸片链霉素抗菌素纸片庆大霉素抗菌素纸片兔血浆福

氏志贺菌诊断血清 三、方法与步骤 1培养基制备 称取一定量的肉汤培养基，至于 三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮 沸一次，趁热分装；称取一定量的营 养琼脂培养基，至于三角烧瓶中，加 入适量的蒸馏水，煮沸三次（煮至刚 刚冒泡，立刻置于台面，半分钟后再 煮），使完全溶解，趁热分装。（平板 培养基：以无菌操作，倾注平皿10ml，琼脂完全凝固后，平板倒放，4℃冰箱保存备用。斜面培养基：培养基趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。）贴上标签后灭菌使用。 2空气与人体体表细菌学检查 根据空气中细菌气溶胶粒子，在 地心引力的作用下，以垂直的自然 方式沉降到培养基表面，培养以 后，计数菌落形成单位（CFU），了 解空气的污染情况。平板盖打开， 盖朝下放在平板旁，琼脂平板暴露15分钟即可。

肠道实验报告

肠道实验报告 肠道实验报告 导语： 肠道是人体消化系统中一个重要的器官，它承担着将食物消化、吸收和排泄的 功能。为了更好地了解肠道的工作原理以及其对人体健康的重要性，我们进行 了一系列的肠道实验。本报告将详细介绍这些实验的设计、结果和结论，并探 讨肠道在人体健康中的关键作用。 实验一：肠道菌群分析 我们首先对志愿者的粪便样本进行了肠道菌群分析。通过高通量测序技术，我 们成功地获得了每个志愿者肠道中存在的微生物群落的DNA序列。分析结果显示，志愿者之间的菌群组成存在差异，这与个体的饮食、生活方式和遗传因素 有关。此外，我们还发现一些常见的肠道菌群，如双歧杆菌和乳酸菌，对维持 肠道健康起着重要作用。 实验二：肠道通透性测试 为了评估肠道的通透性，我们使用了一种叫做“肠道通透性试验”的方法。志愿 者在空腹状态下饮用一种特定的溶液，其中含有一种被称为“肠道通透性指标” 的物质。通过尿液中指标物质的浓度变化，我们可以间接地了解肠道通透性的 程度。结果显示，志愿者之间的肠道通透性存在差异，这可能与个体的饮食结构、肠道菌群和肠道炎症状态有关。 实验三：肠道免疫功能评估 肠道免疫系统是人体抵御病原体侵袭的重要防线。为了评估肠道免疫功能，我 们测量了志愿者肠道中的免疫指标，如免疫球蛋白A（IgA）的水平。结果显示，

志愿者之间的肠道免疫功能存在差异，这可能与个体的年龄、饮食结构和肠道 菌群有关。此外，我们还观察到肠道炎症状态对免疫功能的影响，炎症程度越高，免疫功能越受损。 实验四：肠道健康与心理健康的关联 越来越多的研究表明，肠道健康与心理健康之间存在着密切的关联。为了探索 这种关系，我们对志愿者进行了心理问卷调查，并与肠道菌群分析结果进行了 对比。结果显示，志愿者中存在一定程度的焦虑和抑郁症状与肠道菌群的差异 相关。具体而言，一些有焦虑和抑郁症状的志愿者肠道中的某些菌群相对较少，而其他菌群相对较多。这一发现为进一步研究肠道菌群与心理健康之间的关系 提供了线索。 结论： 通过这一系列的肠道实验，我们揭示了肠道在人体健康中的重要作用。肠道菌 群的组成、肠道通透性、肠道免疫功能以及与心理健康的关联都对我们了解肠 道的功能和调控机制提供了重要线索。未来的研究可以进一步探索肠道与其他 系统（如神经系统和免疫系统）之间的相互作用，以及肠道对人体健康的潜在 影响。这将有助于我们更好地理解肠道的重要性，并为相关疾病的预防和治疗 提供新的思路和方法。

大肠杆菌检验方法的探究与分析

大肠杆菌检验方法的探究与分析 大肠杆菌是一种广泛存在于自然界的细菌，它属于革兰氏阴性杆菌的 一种。大肠杆菌是人体内肠道的重要成分之一，但在一些状况下，它也可 能是人体内病原菌的源头。因此，对大肠杆菌进行检验与分析对于食品安全、环境卫生等领域具有重要意义。 一、大肠杆菌的检验方法 大肠杆菌的检验方法主要包括传统的培养、镜检、酶反应试验等方法，以及现代的分子生物学方法。 1.传统培养方法 传统培养方法是检验大肠杆菌的常规方法，主要包括快速检验方法和 定量检验方法。 - 快速检验方法：将所需检验的物体样本加入选择性富培养基（如MacConkey琼脂）中，培养在37℃环境下，观察24小时后，如果出现鲜 红色粘稠菌落，则判断为大肠杆菌阳性。 -定量检验方法：将样本按一定比例稀释后接种在含有葡萄糖和发酵 试剂（如拉氏琼脂、EC琼脂）的培养基上，经过24-48小时培养，根据 产生酸和气泡的数量判断大肠杆菌的数量。 2.镜检 镜检是将样本放在显微镜下进行观察，主要观察大肠杆菌的形态和结构。大肠杆菌具有革兰氏阴性细菌的特征，其形状为杆状，长度大约为 2-3微米，直径为0.5-1微米。 3.酶反应试验

大肠杆菌在酶反应方面具有一些特殊的代谢能力，通过检测特定酶的 活性，可以初步确定是否为大肠杆菌。常用的酶反应试验包括氧化-发酵 试验、Urease试验、甘露醛试验等。 4.分子生物学方法 分子生物学方法包括PCR（聚合酶链式反应）、基因测序等，这些方 法可以检测大肠杆菌的特定基因序列，并通过序列比对和分析进行鉴定。 在大肠杆菌的检验与分析过程中，可以从以下几个方面进行探究和分析。 1.方法选择 不同的检验方法适用于不同的实验对象。传统培养方法适用于大量样 本的检验，其操作简单，成本较低；而分子生物学方法适用于对个别样本 进行准确鉴定，能够检测到数量很少的细菌。在实际应用中，可以根据实 验需要和条件，选择恰当的检验方法。 2.灵敏度和特异性 大肠杆菌的检验方法需要具有高灵敏度和特异性，能够快速、准确地 检测出目标细菌。特异性指检验方法能够判断目标菌株与其他细菌的区别；灵敏度则是通过测定方法在样本中检测到细菌的数量来衡量。 3.准确性和可靠性 大肠杆菌的检验结果需要具有高的准确性和可靠性。在进行检验之前，需要严格控制实验条件和操作步骤，以避免假阳性或假阴性结果的出现。 此外，需要进行质量控制，使用已知含有大肠杆菌的阳性对照样本，评估 检验方法的准确性和可靠性。

食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测实验报告

实验九食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测 [实验目的] 1、了解国家规定的食品质量与细菌菌落总数和大肠菌群数量的重要关系。 2、掌握食品细中细菌菌落总数及大肠菌群的检测方法。 [实验原理] 菌落总数根据稀释平板技术法检测每mL/g检样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上,经37℃、24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。它所反映的是检样中的活菌数，细菌数越多，说明污染程度越大，这项指标可作为判定待测样品被污染的程度。 大肠菌群数是在100mL(g)食品中（或1000 mL水中）大肠菌群最近似值。它是指肠杆菌科中的４个属，即埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。这一菌群致病力不强，具有共同特点：好氧和兼性厌氧、革兰氏染色阴性反应、无芽孢杆菌、37℃培养24-48h能发酵乳糖产酸产气。大肠菌群在人畜肠道内含量最多，可随排泄物进入水源或污染食品。国际公认以大肠菌群的存在作为粪便污染指标。这项指标可判定待测样品有无被粪便污染及污染的程度。 [实验材料] 1、检样牛乳（饮料、酱油） 2、培养基普通营养琼脂平板、单料乳糖胆盐发酵培养基、乳糖发酵培养基、EMB平板 3、仪器和其他物品恒温箱、水浴锅、无菌培养皿、无菌吸管、无菌盐水瓶（内装225 mL无菌生理盐水）、无菌试管（内装9 mL无菌生理盐水）、灭菌剪刀、镊子等 [实验内容] 1、细菌菌落总数的测定 (1)制备样品及样品稀释 取待测样品（牛乳、酱油）一瓶，用点燃的酒精棉球烧灼瓶口，若是塑料瓶则用75%的酒精棉球擦拭灭菌。在无菌条件下取样25 mL放入内装225 mL生理盐水的瓶中，充分混匀，制成10-1的稀释液。用1 mL无菌吸管吸取10-1稀释液1mL，沿管壁徐徐注入装有9mL无菌生理盐水的试管中（注意，吸管尖端不要触及管内稀释液），振荡试管，混合均匀，制成10-2的稀释液。另取1mL无菌吸管，按上述操作方法做成10-3稀释液。每次稀释，换用一支无菌吸管，共做10-1、10-2、10-3三个稀释度，分别含样品0.1mL，0.01mL，0.001mL。 (2)培养 将上面已做好的样品稀释液充分振荡，然后分别吸取该稀释度的稀释液1 mL至标有相应稀释度的无菌培养皿中，每个稀释度做2个培养皿。将融化并冷却至55℃左右的营养琼脂注入培养皿中，立即轻轻旋转培养皿，使检样与培养基混匀。待凝固后，置37℃温箱培养48±2h。 (3)菌落计数 记录各平板上的菌落数后，按下表所述方法进行计数并报告。 a.先计算同一稀释度的平均菌落数.若其中一个平板有大片状菌苔生长则不应采用,用另

微生物肠杆菌科综合实验报告

肠 道 杆 菌 实 验 论 文 班级：检验一班实验日期：2013-09-24~30 实验组：第二组指导老师：

综合实验报告 专业班级：医学检验时间：2013年 9月 24日～9月30日实验名称肠道杆菌指导教师熊亚南 一、预习报告 1. 实验目的 1.1掌握肠道条件致病菌与肠道致病菌的菌落特点。 1.2掌握肠道杆菌的主要生化反应。 1.3掌握肠道杆菌的分离鉴定方法。 1.4掌握粪便标本细菌学检测流程 2. 实验基本原理 肠道杆菌的细菌为革兰氏阴性菌，大多数有鞭毛，能运动。少数无鞭毛不能运动，不产生芽孢，需氧或兼性厌氧，在普通培养基上，一般都生长良好，均能发酵葡萄糖产酸或产气，触酶试验阳性，氧化酶试验阴性，还原硝酸盐。 这类细菌是人类和动物肠道中的细菌，有的引起腹泻、肠炎、肠热症和痢疾等。有的为条件致病菌，有时也可引起身体各个部位的感染。 3. 实验流程图 高压灭菌锅试管 锥形瓶接种环酒精灯无菌玻片显微镜、载玻片 镊子 二、实验报告 1.材料与方法 1.1材料 2号菌液双糖铁培养基CB培养基SS 培养基基础培养基青霉素庆大霉素氯霉素复方 新诺明志贺氏诊断血清沙门氏诊断血清无菌生理盐水、结晶紫染液、卢戈碘液、95%乙醇溶液、稀释石碳酸复红染液、无水乙醇、松柏油 1.2方法 1.2.1标本分离 将菌种用平板划线法，分别接种于CB和SB培养基中，37℃温室培养24小时，进行菌落分离。 操做人： 1.2.2 鉴别实验 1.2.2.1 双糖铁实验 用接种针以无菌操作技术挑取可疑菌落，立即垂直插入培养基中心至接近管底处，再循

原路退出到斜面上；接种针自斜面最低处向上划一直线（要求通过试管培养基的中心点），然后再从斜面低处向上轻轻来回作蜿蜒划线；接种完毕，盖好试管塞。贴上标签纸。37℃培养18~24小时，取出观察结果并分析，观察结果。 1.2.2.2 Gram stain实验 1.2.2.2.1 涂片 于洁净无油的载玻片上,加无菌生理盐水一滴,按无菌操作法用接种环取待检标本少许，研入无菌盐水中，使成一个均匀、极薄菌膜，直径在1cm 左右。 1.2.2.2.2干燥 使涂片自然干燥 1.2.2.2.3固定 将玻片涂有菌膜的面向上迅速地往返通过火焰２－３次，以玻片触及皮肤，热而不烫为度。 1.2.2.2.4初染 在制作的涂片上滴加结晶紫染液，1min后水洗，并将片上积水轻轻洒净 1.2.2.2.5媒染 加卢戈碘液，1min后水洗，并将片上积水洒净 1.2.2.2.6脱色 加95%乙醇溶液数滴于涂片上，频频摇3-5s后，斜持玻片，使乙醇溶液流去，再加乙醇溶液。如此反复２－３次，直至流下的乙醇溶液无色或稍呈淡紫色时为止（约30s）。水洗，轻轻洒去片上积水。 1.2.2.2.7复染 以稀释石碳酸复红染液1min后，水洗，待干或用吸水纸印干，油镜检视。 1.2.2.3血清学实验 取一块无菌玻片，平均分成两区，分别滴上志贺和沙门氏诊断血清，用接种环取在双糖铁培养基斜面上培养的可疑菌种分别与玻片上的两种血清混匀，注意每换一种血清时应用火焰灭菌再取菌落，以防交叉感染。混匀后等待实验结果并观察 操做人： 1.2.4 药敏实验 1.2.4.1 用灼烧过的接种环取可疑菌种，做来回划线，使之密密涂满于基础培养基表面。1.2.4.2 将镊子经酒精灯灼烧后夹取含青霉素、庆大霉素、复方新诺明、氯霉素的纸片贴于含菌培养基表面并轻压，纸片应贴得均匀，纸片贴牢后避免移动。 1.2.4.3 37℃孵育24h，观察各消毒剂周围有无抑菌圈，比较各抑菌圈大小。 1.2.4.4 从平板背面用直尺测包括纸片直径在内的抑菌圈直径，记录结果。 操做人： 2.结果 2.1标本分离 CB培养基平板未变色，SS培养基在同一个平板上部分由原来红色变为黄色，则SS平板仍为红色培养基上的单个菌落为可疑菌落。 2.2 鉴别实验 2.2.1双糖铁试验结果 所有培养基均是斜面为红色，底层培养基生成黑色沉淀，斜面培养基与底层培养基有部

一例蛋鸡空肠弯曲杆菌的分离与鉴定

一例蛋鸡空肠弯曲杆菌的分离与鉴定 引言 空肠弯曲杆菌是一种常见的病原菌，主要存在于动物的肠道内，特别是鸡、鸭等禽类 的肠道内。它可以引起禽类的肠道感染，导致禽类的生长发育受到阻碍，甚至造成禽类的 死亡。对蛋鸡空肠弯曲杆菌进行及时的分离与鉴定是非常必要的。本文将围绕一例蛋鸡空 肠弯曲杆菌的分离与鉴定过程进行详细介绍。 一、分离样品的获取 分离样品的获取是进行蛋鸡空肠弯曲杆菌分离与鉴定的第一步。我们选择了一批有临 床症状的蛋鸡作为我们的分离样品。这些蛋鸡出现了腹泻、食欲不振、体重下降等症状， 经过初步观察怀疑是空肠弯曲杆菌感染。我们选择这些蛋鸡的粪便作为我们的分离样品， 因为空肠弯曲杆菌主要存在于禽类的肠道内。 二、分离培养 我们将采集的蛋鸡粪便样品放入无菌离心管中，加入适量的生理盐水并进行均匀搅拌。然后，将混合液进行10倍稀释，并分别吸取不同稀释倍数的混合液加入无菌琼脂培养皿中，再均匀晃动，使琼脂与混合液充分混合。将琼脂培养皿进行培养，选择最适宜的温度和时 间进行培养。培养时间一般为24小时至48小时左右。 三、形态学鉴定 在培养好的琼脂培养皿上，我们可以观察到一些菌落的形成。我们选择了具有典型形 态特征的菌落进行进一步的分离和鉴定。空肠弯曲杆菌的菌落一般呈灰白色、灰黄色，而 且形状呈不规则圆形，表面比较光滑。使用显微镜观察菌落的形态特征，我们可以看到空 肠弯曲杆菌呈细长的弯曲杆状，有时也呈螺旋状，具有明显的弯曲和扭曲特征。 四、生理生化鉴定 我们对分离出的空肠弯曲杆菌进行了一系列的生理生化鉴定实验。首先是对菌体的形态、结构和组织进行观察，包括利用显微镜观察菌体的形态特征、孢子、芽孢和胞外结构等。其次是进行细菌的生理生化反应实验，包括对细菌的生长特性、代谢特性、酶活性、 运动能力等进行测试。最后是对细菌的生物化学特性进行检测，包括对细菌的氧气需求、 耐热性、耐酸碱性、氧化还原反应等进行测定。 五、分子生物学鉴定 在确定了分离出的细菌为空肠弯曲杆菌后，我们使用分子生物学技术对其进行了进一 步的鉴定。我们提取了空肠弯曲杆菌的基因组DNA，并进行了PCR扩增。选择了空肠弯曲

脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告

脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告 本实验旨在通过对脓汁和粪便标本的检测，确认其中的病原菌种类及数量，并提供合理的治疗建议。 一、实验原理 病原菌是引起感染的主要原因之一，其种类和数量的检测是诊断和治疗感染的关键步骤之一。本实验将通过培养、鉴定和计数脓汁和粪便标本中的病原菌，以确定感染的类型和程度，从而为治疗提供依据。 二、实验材料和试剂 1. 脓汁标本和粪便标本； 2. 消毒用具（酒精棉球、焊接器等）； 3. 细菌培养基（营养琼脂、MacConkey琼脂、血琼脂）； 4. 鉴定试剂（青霉素酶、氧化/还原试验等）； 5. 光学显微镜； 6. 均质器； 7. 精密天平。 三、实验步骤 1. 标本制备 将脓汁标本和粪便标本均匀搅拌，取出适量标本（大约1克）并转移到无菌离心管中。 2. 标本清洗 使用去离子水将标本管中的标本沉淀洗涤三次，去除杂质。 3. 均质标本 使用均质器将标本转移到无菌均质袋中，并进行均质处理。 4. 鉴定菌落计数

将均质标本分别接种在营养琼脂、MacConkey琼脂和血琼脂培养基上，并在37°C下培养24-48个小时。随后使用光学显微镜进行菌落计数和观察颜色和形态。根据颜色和形态等特征，初步确定病原菌的种类。 5. 鉴定试剂检测 针对感染可能的病原菌种类，使用相应的鉴定试剂进行检测，以确定病原菌的确切种类。 6. 病原菌计数 根据菌落计数结果，对病原菌进行定量计数，以进一步确定感染的程度。 四、结果分析 经过实验分析，使用光学显微镜和鉴定试剂检测，可以初步确定脓汁标本中的病原菌可能为金黄色葡萄球菌。通过菌落计数和定量计数，可以确定金黄色葡萄球菌的数量为10^6CFU/mL。而粪便标本中则检测出大肠杆菌，其数量为10^5CFU/g。 五、诊断和治疗建议 1. 脓汁标本中检测出的金黄色葡萄球菌，提示患者可能患有金黄色葡萄球菌感染，建议对患者进行进一步检查，以确认诊断。 2. 粪便标本中检测出的大肠杆菌，建议患者增加膳食纤维的摄入，加强个人卫生，避免感染传播。 3. 如确认患者感染疾病，应根据病原菌的种类和数量，合理选择抗生素进行治疗。 4. 感染后应注意休息和饮食调理，避免疲劳和劳累，促进身体的康复。

硫化氢阳性的大肠杆菌的鉴定报告

硫化氢阳性的大肠杆菌的鉴定报告【关键词】大肠杆菌 大肠杆菌是人和动物肠道的正常菌群，并普遍散布于自然界中，除部份具有致病性外，大多数属于正常菌群，近2年咱们在腹泻患者粪便中分离出引发致泻的H2S阳性的大肠杆菌，就此咱们进行了系统鉴定，现将鉴定结果介绍如下。以供参考。 1 材料与方式 材料来源所采检样来源于新疆乌鲁木齐市第一人民医院儿童分院腹泻病门诊，按常规法采样送检。 实验用培育基和诊断血清琼脂、伊红美兰琼脂均由上海医学化验所提供。水解酪蛋白琼脂、生化实验培育基均由浙江省军区后勤部卫生防疫查验所提供。 双糖铁培育基由卫生部上海生物制品研究所提供。实验前按2%的尿素、1%的蔗糖量别离加入双糖铁半固体培育基内，制成三糖铁尿素半固体培育基斜面备用。 药物灵敏实验纸片由北京天坛药物生物技术开发公司提供。

沙门菌属诊断血清、致病性大肠艾希菌诊断血清均由卫生部成都生物制品研究所提供。 实验用对照菌株选用地址株200020(O111：K58)大肠杆菌；药物灵敏实验菌株选用ATCC 25922。 方式待检样品的分离查验程序均按常规法进行，将患者粪便标本直接划种于伊红美兰琼脂和琼脂平板上，置37℃温箱培育24h后观看。 2 结果与分析 形态学分析按上述方式进行分离划种，置37℃温箱培育24h 后在伊红美兰琼脂平板上生长出边缘整齐、湿润、红色的菌落。琼脂平板上生长出红色且中心产H2S的菌落，该菌在两皿上均呈现为优势菌落。将上述特点的菌落挑取假设干个穿刺接种于三糖铁尿素半固体培育基斜面上，置37℃温箱培育18～24h后，反映为典型的大肠艾希菌的初步生化反映：发酵葡萄糖产酸产气、分解乳糖、尿素酶阴性、动力阳性。所不同的是产生硫化氢，对该典型菌落进行了涂片染色后，镜下观看为革兰阴性无芽孢小杆菌。血清学实验采纳沙门菌属诊断血清和致病性大肠艾希菌诊断血清对待检菌株进行了玻片凝聚实验，

微生物实验报告细菌

微生物实验报告 题目脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业2013级临床医学八年制 实验者 学号 小组 成员 指导老师 一、实验目的

1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。 2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。 3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。 4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。 5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。 6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。 7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。 二、实验器材 1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网 2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒 3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机 4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基 5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基 6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水 7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯 三、实验方法与步骤

1.培养基的制备 称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌 2.空气与人体体表细菌学检查 2.1空气的细菌学检查 每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。2.2人体体表细菌学检查 甲丙常规洗手，乙丁标准洗手。甲和乙、丙和丁分别共用1个平板按下图在普通平板上接种手指上的细菌。第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。 3.细菌的分离培养 3.1 实验方法 平板划线法：借助于划线，将混杂的多种细菌，在平板表面分散成单个细菌，并固定在某一点上。培养以后细菌各自分裂繁殖，形成肉眼可见的细菌集团（单菌落）。 3.2实验步骤

脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告

2016年秋季学期微生物学实验报告 1、了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理。 2、熟悉常见病原性球菌及常见肠道致病菌的检查程序，掌握各检查实验操作。 3、了解脓汁和粪便标本中病原菌的检测的临床应用及临床意义。 4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。 5、熟悉抗生素对于不同细菌的作用机理。 6、树立牢固的无菌观念。 二、实验器材： 1、培养基：营养琼脂平板、伊红美兰平板、斜面、营养肉汤、半固体琼脂 2、标本：脓汁标本、粪便标本、空气细菌培养物、手指皮肤细菌培养物、细菌分离培养物、斜面培养物、营养肉汤培养物、药敏试验培养物 3、器材： 1）培养基的制备：天平、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、试管、试管架、刻度吸管、洗耳球、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、干粉培养基、酒精灯、火机。 2）细菌的分离培养：碘酒棉球，酒精棉球、眼科镊子、接种环。 3）细菌的纯培养: 接种环。 4）细菌的形态学检查：生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、结晶紫染液、芦戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红、染色架、接种环。 5）细菌的生化试验:糖发酵管、抗菌素（青霉素、链霉素、庆大霉素）纸片、眼科镊子、接种针、接种环、小砂轮、葡萄糖发酵微量管、乳糖发酵微量管、兔血浆、生理盐水、载玻片。 6）结果分析：尺子。 三、方法与步骤 1、营养肉汤培养基的制备 取1.1g营养肉汤粉末于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇晃锥形瓶使其几乎完全溶解。将锥形瓶置于电陶炉上加热至沸腾，观察固体是否完全溶解，冷却后分装至试管内。 2、细菌的分离培养（平板划线分离法） 甲→脓汁标本→营养琼脂平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板 丙→粪便标本→伊红美蓝平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板 1）接种环烧灼灭菌，以免污染标本。 2）取标本3～5ul。 3）转动平板，当看到平板表面象镜面有反光的时候，保持这个角度，划线时就能看清划线痕迹，以便控制划线。 4）接种环与平板呈30～40度角，在平板表面上方，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条 5）甲、乙烧掉接种环上多余的标本。

健康家兔肠道中乳酸菌的分离鉴定

健康家兔肠道中乳酸菌的分离鉴定 刘雪美;栾淑莉;温建新 【摘要】In this experiment MRS and MRS + 10％ the hard muck leaching agent of domestic rabbit and MRS + 10％. pickles juice are three kinds of selective medium, carry on respectively to the lactobacilluses of healthy domestic rabbit bowel way aerobic and anaerobic culture, according to cultured bacteria colony characteristics, dyeing property and microscope morphology observation, coseparate 7 Lactic Acid Bacteria strains, among them, the aerobic bacteria is 2 strains, anaerobic bacteria is 5 strains. Combine a bio - chemical to experiment preliminary identification, aerobic germ strains are the Laetococcus lactis and Lactobacillus brevis, be disgusted with oxygen germ are Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus coprophilus, Intestinal Lactobacillus, Lactobacillus lactis and Lactobacillus curvatus. This experiment is to make clear the beneficial intestinal flora of healthy domestic rabbit, in order to play the preparation for making composite animal Microbial ecological agent which is easier to colony and survive in animal intestinal.%本试验选用MRS、MRS+10%家兔硬粪浸出液和MRS+10%泡菜汁3种选择培养基,对健康家兔肠道的乳酸菌群分别进行需氧和厌氧培养,根据可培养细菌菌落特征、染色特性、显微镜形态观测,共分离出7株乳酸菌株,其中需氧菌2株,厌氧菌5株.结合生化试验初步鉴定,需氧菌株分别为乳酸乳球菌和短乳杆菌,厌氧菌株分别为嗜酸乳杆菌,嗜粪乳杆菌,肠乳杆菌,乳酸乳杆菌和弯曲乳杆菌.本实验为弄清健康家兔肠道的有益菌群,以便下一步制作更易于在畜禽的肠道中定植存活的复合动物微生态制剂做准备.

【报告】大肠杆菌培养实验报告

【关键字】报告 大肠杆菌培养实验报告 篇一：大肠杆菌检测实验报告 国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数 实验目的 实验原理：国标法操作的原理 实验器材： 培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台 实验药品： 磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl 实验步骤： 一： 10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml 量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。 用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min 二： 1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。 3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。 4：灭完菌后放入超净台中备用。 三： 1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS 2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。 3：取4只试管，编号1—4 4：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS 5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀 7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。 9：取4只平皿，编号1—4 10：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；

大肠杆菌核酸鉴定实验报告

大肠杆菌核酸鉴定实验报告 大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，它在人和动物的肠道中起着重要的生理功能。然而，某些菌株可能会引起食物中毒和感染等健康问题。对大肠杆菌进行核酸鉴定是非常重要的。本报告将详细介绍大肠杆菌核酸鉴定实验的过程、结果和分析。 一、实验目的 本实验旨在通过核酸鉴定技术确认样品中是否存在大肠杆菌，并进一步了解其亚型和相关特性。 二、实验原理 核酸鉴定是通过特定引物与目标DNA序列发生互补配对，借助聚合酶链反应（PCR）扩增目标序列，并通过凝胶电泳分析扩增产物。在本实验中，我们将使用16S rRNA基因作为靶标序列进行核酸检测。 三、实验步骤 1. 样品处理：将待检测样品（如食物、水或环境样品）进行预处理，包括培养基预处理、细胞破碎等步骤，以提取出目标DNA。 2. PCR扩增：设计合适的引物，将目标序列进行PCR扩增。反应体系包括DNA模板、引物、聚合酶和缓冲液等。 3. 凝胶电泳：将PCR扩增产物与DNA分子量标准品一同加载到琼脂糖凝胶上，通过电泳分离，根据迁移距离判断是否存在大肠杆菌。 4. 提取目标DNA：从凝胶上切下目标带，使用商业化的基因提取试剂盒进行目标DNA的提取。

5. DNA测序：将提取得到的目标DNA进行测序，并获取测序结果。 四、实验结果 经过PCR扩增和凝胶电泳分析，我们观察到了预期大小的PCR产物带。进一步通过基因提取和测序，我们成功获取了大肠杆菌16S rRNA 基因的序列。 五、实验分析 1. 序列比对：将测得的16S rRNA基因序列与已知大肠杆菌参考序列 进行比对，可以确定样品中存在的大肠杆菌亚型。 2. 亲缘关系分析：利用已知大肠杆菌亚型构建系统发生树，并将样品 中的亚型与之进行比较，以了解它们之间的亲缘关系。 3. 特性分析：通过比对已知大肠杆菌的特性数据库，分析样品中的大 肠杆菌可能具有的毒力因子、耐药性等特性。 六、实验结论 通过核酸鉴定技术，我们确认了待测样品中存在大肠杆菌，并获取了 其16S rRNA基因序列。进一步的分析表明，该大肠杆菌属于某一特 定亚型，并具有一定的亲缘关系和特性。这些结果对于食品安全和公 共卫生具有重要意义。 七、实验优化与展望 1. 实验流程优化：可以尝试使用更高效、更精确的DNA提取方法， 以提高核酸鉴定的准确性和灵敏度。 2. 多重PCR检测：针对不同亚型设计多组引物，进行多重PCR检测，以便同时检测多种大肠杆菌亚型。 3. 应用于实际样品：将该方法应用于真实食品或环境样品中，验证其

2018-粪便检查实验报告-范文word版 (12页)

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