第五章 脱毒苗的培育
第五章脱毒苗的培育
目前病毒病已成为世界作物生产中仅次于真菌病害的主要病害，是造成大田作物和园艺作物的生活力、产量和品质下降，甚至造成植株大面积死亡的重要原因之一，给农业生产造成巨大的危害和损失。由于病毒复制与植物代谢密切相关，而且有些病毒的抗逆性很强，至今仍没有一种特效药物能够实现既能有效防治病毒病害，又不伤害植物。因此，通过组织培养来培育脱毒苗，无疑满足了农作物和园艺植物生产发展的迫切需要。
所谓“脱毒苗”，又称“无病毒苗”，是指不含有该种植物的主要危害病毒，即经过检测主要病毒在植物体内的存在表现为阴性反应的苗木。因此，准确地说，“脱毒苗”是“特定无病毒”，应称为“检定苗”。通过组织培养技术培育的脱毒苗具有以下特点：①提高产量。如草莓脱毒可提高产量20%～30%，单株结果多，单果重增加；马铃薯脱毒可提高产量40%以上；观赏花卉平均增产50%～80%。②提高品质。如苹果着色好，糖度高；菊花切花生长健壮，植株增高，优质切花数增多，花朵增大，花色艳丽，商品价值高。③抗病性增强。植物脱毒后自身抗逆性提高，对病虫的抗性增强，如甘薯脱毒后可增强抗茎线虫病。
目前，通过组织培养手段培育脱毒苗已成为农作物、园艺植物、经济作物优良品种繁育、生产中的重要环节。世界不少国家十分重视这项工作，把脱除病毒纳入常规良种繁殖的一个重要程序，建立了大规模的无病毒生产基地，为生产提供无病毒优良种苗，已在生产上发挥了重要作用，取得了显著的经济效益。
第一节脱毒方法
目前，组织培养应用的脱毒方法有热处理、微茎尖培养、茎尖培养结合热处理、茎尖微体嫁接、愈伤组织培养、花药培养等脱毒方法。其中，前三种脱毒方法最常用，也最容易掌握。实践证明，根据植物种类和待检病毒的种类、特性不同，采取不同脱毒方法的组合处理，其脱毒效果会更好。本节重点介绍热处理脱毒法和茎尖培养脱毒法。
一、热处理脱毒
(一)热处理方法
1.温汤浸渍处理
将材料放在50℃～55℃的温水中浸渍10min至数小时，可使一些热敏感的病毒失活。此法简便易行，适用于休眠器官、剪下的接穗或种植材料的脱毒处理，但易使材料受伤。为避免长时间浸泡对植物材料的伤害，一般采用热空气处理脱毒。
2.热空气处理
热空气处理脱毒适用于鲜活植物材料的脱毒。将生长的盆栽植株、种球、愈伤组织、离体瓶苗等移入温热治疗室或生长箱内，以35~40℃的温度处理几十分钟至数月。至于具体的处理温度与处理时间可按照植物种类、器官类别和生理状况，以及待脱除病毒的种类等来综合确定。如香石竹在38℃下处理2个月，其茎尖所含病毒即可被清除；马铃薯在35℃下处理几个月能够脱除卷叶病毒。如果采用热处理再结合茎尖培养，其脱毒效果会更好。如草莓茎尖培养结合36℃处理6周，比单纯的茎尖培养更能有效地清除轻型黄边病毒。此外，每种植物都有热处理临界温度，过高温度处理会造成植物的伤害(图5-1)，所以采用变温处理既可消除病毒但又不伤及植物。如马铃薯每天40℃下处理4h与16℃～20℃20h 交替变温处理马铃薯块茎，既清除了芽眼中的叶片病毒，又保持了芽的活力。
(二)热处理脱毒法的缺陷
1.热处理不能脱除所有病毒。如在马铃薯中应用此技术，只能消除卷叶病毒。一般而言，热处理主要对球状病毒、类似纹状病毒及植原体（也叫类菌原体或类菌质体，为原核生物）等起作用。
2.延长热处理时间，病毒钝化效果好，但也可能会钝化寄主植物的阻抗因子，致使寄主植物抗病毒因子难于活化，从而降低无毒植株的发生率。
3.热处理对植物组织有一定伤害，只有部分植株能够存活。
鉴于热处理脱毒存在上述缺陷，热处理最好与其他脱毒方法配合使用，脱毒效果好。
二、微茎尖培养脱毒
(一)微茎尖培养脱毒方法
微茎尖培养脱毒操作程序见图5-2。其技术关键包括以下几方面：
1.病毒种类及分布的诊断
在实施脱毒操作之前，应根据欲植物所携带的病毒种类及其在体内的分布状况，确定切取茎尖的大小。病毒分布少，切取的茎尖可稍大，否则宜小。
2.母体植株的选择及预处理
选择母体植株，首先要考虑是否具有原品种的典型特征特性，这关系到培养的脱毒苗是否失真；其次要考虑感染病毒的轻重和携带病毒的多少。在感染病毒程度较轻、携带病毒较少的植株上采集外植体，利于培养出脱毒苗。
母体植株的预处理是为了获取表面不带病原菌的茎尖外植体。可在切取茎尖前，将母体植株栽种在温室内无菌的盆钵中培养。浇水时不要直接浇在叶片上，最好定期喷施内吸杀菌剂，如喷施0.1%多菌灵和农用链霉素等。对于田间种植的母体植株，可以切取插条插入营养液中，在其腋芽抽生的枝条上选取外植体，这比从田间直接取材的污染率要小得多。在剥取茎尖外植体前，需对茎芽进行表面灭菌。叶片包被严紧的芽，如菊花、兰花的芽，只须在75%酒精中浸蘸一下即可；叶片包被松散的芽，如香石竹、大蒜、马铃薯等的芽，则要用0.1%次氯酸钠表面消毒10min。实际消毒时应灵活运用这些消毒方法。
3.微茎尖的剥离
在解剖镜下剥离微茎尖(图5-3)。微茎尖剥离方法见技能5-1。
4.培养基
①微茎尖培养时，一般以White、Morel和MS培养基作为基本培养基。
②由于双子叶植物的生长素和细胞分裂素是由第2对最年幼的叶原基合成，所以培养不带叶原基的微茎尖时，需要在培养基中适当提高激素的浓度。
③为了使培养的脱毒苗能保持原品种的特征特性，应避免使用容易促进外植体愈伤组织化的植物激素。如生长素类应使用NAA或IBA，而避免使用2,4-D，细胞分裂素类可用KT或BA；GA对某些植物微茎尖培养有利，应注意选择使用。
④为了有利于茎尖的生长，常需要提高培养基中钾盐和铵盐的含量；以MS 作为微茎尖培养的培养基时，应适当降低部分离子的浓度。
⑤为了操作方便和加快扩繁速度，一般都使用琼脂培养基，但当其能诱导外植体愈伤组织化时，最好改用液体培养基。使用液体培养基时，需制作滤纸桥，将微茎尖接种于桥面上。
5.接种和培养
微茎尖剥离后，应尽快接种在培养基上。接种时只用解剖针接种即可，确保微茎尖不能与芽的较老部分或解剖镜台或持芽的镊子接触，避免材料染菌。接种后置于23℃～27℃左右、光照10～16h/d、光强1000~5000 lx的条件下培养。微茎尖培养必须保证较高的温度和充足的光照时间，否则在低温和短光照条件下，茎尖容易进入休眠状态。微茎尖初代培养需数月才能完成，其后续培养与茎段培养相同，在此不再赘述。植株再生途径为无菌短枝发生型(图5-4)。
(四)影响微茎尖培养的因素
1.外植体大小
通常微茎尖培养的脱毒效果与微茎尖大小呈负相关，而培养茎尖的成活率则与茎尖大小呈正相关，即茎尖越小，对培养基的要求越高，培养成活率越低，脱毒效果越好；茎尖越大，则与之相反。实践证明，茎尖剥离时不带叶原基，其脱毒效果最好，但成活率最低；而带1~2个叶原基的茎尖培养，一般可获得40%以上的脱毒苗。通常切取带1~2个叶原基的茎尖进行培养，以达到既脱毒又保证成活率的目的。
2.母体植株受病毒侵染的程度
一般单一病毒侵染的植株脱毒较容易，多种病毒复合侵染的植株脱毒则较难。
3.培养基和培养条件
见前述内容。
4.其他
参考第四章第二节的内容。
三、其他脱毒方法
表5-1 其他脱毒方法简介
第二节脱毒苗的鉴定
经过脱毒处理得到的种苗，必须经过严格的鉴定，确证其无病毒且农艺性状优良之后，才可以作为脱毒良种种苗用于实际生产。脱毒苗的鉴定包括两个方面：一是脱毒效果的鉴定；二是农艺性状的鉴定。
一、脱毒效果鉴定
对于非潜隐性病毒，可以通过直观检测法就能观察有无病毒病症状；对于潜隐性病毒病则必须通过病毒检测。病毒检测方法有指示植物法、抗血清鉴定法、酶联免疫吸附测定法、电子显微镜法和分子生物学检测法等。其中，指示植物法和抗血清检测法是目前国内外常用的病毒鉴定方法。
(一)指示植物法
1.指示植物和指示植物法的含义
指示植物法是指利用病毒在其他植物上产生的枯斑作为鉴别病毒种类的标准，又称为枯斑法。这些对病毒敏感并能产生专一性枯斑症状的植物称为指示植
物，又称为鉴别寄主。指示植物一般分为二类：一类是接种病毒后产生系统性症状，病毒可扩展到植株非接种部位，通常没有局部病斑的指示植物；另一类是只产生局部病斑，常为坏死、褪绿或环状病斑的指示植物。部分常用指示植物见表5-2。
表5-2 一些常用指示植物及其检测的病毒 (引自王清连，2004)
2.对指示植物的要求
①根据病毒种类的不同，选择适合的指示植物(因病毒的寄主范围是不同的)；②一年四季都能栽培和容易接种；③能够较长时期内保持对病毒的敏感性；
④在较广的范围内具有同样的反应。
3.鉴定方法
(1)汁液涂抹法取被鉴定植物的1~3g幼叶置于研钵中，加入10ml水和等量的0.1 mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0），研碎后加入少量500~600目金钢砂作为摩擦剂，制成匀浆，用手指(戴上手套)或纱布或棉球蘸取匀浆在指示植物叶片上轻轻涂抹2～3次，以汁液进入叶表皮细胞又不损伤叶片为度，或用喷枪喷射进行接种。5min后用清水清洗叶面多余匀浆及金刚砂。接种后将指示植株置于
室内或防虫网室内，在半遮荫、温度15~25℃的条件下培养，2~6d后可视其病症的有无，来判断被鉴定植物是否脱毒。若汁液带病毒即出现可见病症(表5-3)。
表5-3 几种马铃薯病毒的指示植物及其症状(引自潘瑞炽等，2000)
液涂
抹法
主要
用于
草本
植物
的脱毒鉴定，适用于鉴定通过汁液传播的病毒。利用指示植物法鉴定时，一般以早春为宜，因为早春刚萌发嫩叶或花瓣，接种成功率较高，5月份以后接种较难成功，从而影响检测结果的正确性。
(2)嫁接法将被鉴定植物的芽或幼叶嫁接在指示植物上，4~6周后根据指
示植物的症状来判断是否脱毒。此法适用于非汁液传播病毒的鉴定。如草莓的黄化病毒、丛枝病毒等。一般木本植物和一些无性繁殖的草本植物的脱毒鉴定常用此法。一般有以下三种嫁接方法：
①直接在指示植物上嫁接待检植物的芽片或小叶(见技能5-3)。
②双芽嫁接法。在休眠期剪取指示植物和待检植物的接穗，萌芽前分别把带有两个芽的指示植物接穗与待检植物接穗同时切接在实生砧木上，指示植物接穗接在待检接穗上方(图5-5)。
③双重芽嫁接法。先将指示植物的芽嫁接到实生砧木基部距地面10～20cm处，再在接芽下方嫁接待
检植物的芽，两芽相距2～3cm。成活后剪去指示植物芽上部的砧干(图5-6)。一般夏秋芽接，次年观察结果。
(二)抗血清鉴定法
植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白，是一种较好的抗原，给动物注射后会引起抗体产生。抗体是动物受外来抗原的刺激产生的一种免疫球蛋白，主要存在于血清中。有抗体存在的血清叫抗血清。不同病毒引起的抗血清有各自的特异性。病毒作为抗原与其相对应抗体的抗血清之间会发生沉淀反应，即免疫反应，因而抗血清可作为病毒检测的高度专化的试剂。用被鉴定的组培苗的汁液作为抗原，加入已知病毒的抗血清中，观察其反应，可判知被鉴定植物有无病毒和病毒种类，此法称为抗血清鉴定法。此法因具有高度的特异性而鉴定速度快，一般几小时甚至几分钟就可完成，所以是植物病毒鉴定的最有用的方法之一。抗血清鉴定法包括抗原制备、抗血清收集、免疫反应试验等，具体操作程序见图5-7。利用
抗血清鉴定时要注意避免叶绿体的自发凝聚，可用磷酸缓冲液提取汁液，再用氯
仿处理除去叶绿体，保持pH在6.5~8.5之间。另外，抗原和抗体的比例要适当，抗原过量时会抑制沉淀的生成。
(三)酶联免疫吸附测定法
酶联免疫吸附测定法（ELISA法）是将酶与抗体(或抗原)结合，制成酶标
抗体(抗原)，将抗原固定在支持物上，加入待检血清，然后加入酶(过氧化物酶
或碱性磷酸酶)标记的抗体，使待检血清中与对应抗原的特异性抗体结合，最后
用特殊分光光度计测定。此法灵敏度高，特异性强，是抗血清鉴定法中发展最迅速、应用最广泛的方法。但也存在缺点：①抗体制备所需时间长，费时费力；②
一次只能检测一种病毒，检测多种病毒时灵敏度低；③经常存在假阳性反应，给
脱毒苗检测带来困难。
(四)其他鉴定方法
表
其他
脱毒
鉴定
方法
列举
二
、农
艺
性
状
鉴
定
有些脱毒方法可使脱毒苗产生变异（失真）。如经热处理后，高温可引起分
生组织细胞突变；经愈伤组织诱导的再生植株脱毒苗，有时会产生染色体变异，导致良种性状的丧失等等。因此，经过脱毒和脱毒效果鉴定后，还需进行田间农
艺性状鉴定，确证脱毒苗仍保持原品种的特征特性之后，才能作为原原种进行推广。农艺性状鉴定时，必须采取隔离措施，以免重新感染病毒；鉴定中注意淘汰
劣变植株，保留优良植株；注意发现和选留超越母体植株优良性状的突变体。
第三节脱毒苗的保存与繁育
一、脱毒苗的保存
脱毒苗并非具有额外的抗病性，它们有可能被病毒再次感染。所以，一旦培育得到脱毒苗，就应很好地隔离与保存。这些脱毒苗构成的原原种或原种材料，保管得好可以保存利用5~10年。通常脱毒苗应种植在300目的防虫网内，才能防止蚜虫的进入。栽培用的土壤应进行消毒，周围环境也要求整洁，并及时喷施农药防治虫害，以保证脱毒苗和脱毒植株是在与病毒严密隔离的条件下栽培繁殖的。有条件的地方可以到海岛或高岭山地种植保存，那里气候凉爽，虫害少，有利于脱毒材料的生长和繁殖。另一种更经济实用的方法，是通过组织培养进行繁殖和离体保存，具体见第九章内容。
二、脱毒苗的繁育
脱毒苗的扩繁主要采用无性繁殖方法，如嫁接、扦插、压条、匍匐茎繁殖和微型块茎(根)繁殖等。从良种繁育的角度考虑，建立一套完整、科学的体系是非常必要的。我国农作物脱毒苗繁育生产体系见图5-8。在脱毒苗的繁育体系中，各级分工负责，各司其职，相对独立，又上下衔接，确保脱毒苗的繁育质量和顺利、及时地供应生产。市售良种经2～3年使用后再度感染，便会影响作物产量和品质，应重新更换和采用脱毒苗，以保证生产的质量。
技能5-1 微茎尖的剥离
技能要求
●掌握微茎尖剥离操作程序
●切取茎尖准确，操作规范、熟练、快捷
●训练前准备
1.材料与试剂
香石竹等各种植物材料的嫩茎、75%酒精、脱脂棉、95%酒精、0.1%次氯酸钠、无菌水、模拟培养基(只加琼脂，已灭菌)等。
2.仪器与用具
超净工作台、医用小剪刀、解剖镜（8~40倍）、解剖刀、解剖针、平底试管、酒精灯、培养皿、滤纸、镊子、磁力搅拌器、烧杯(500 ml、100 ml)、量筒（100 ml）、容量瓶（500ml 、1000ml）、各类移液管、冰箱、标签纸、记号笔等。所有仪器与用具使用前消毒或灭菌。
●方法步骤
1.切取茎芽
任选几种植物嫩茎，用医用小剪刀剪取3～5cm长、带顶芽或腋芽的短茎10个，去掉叶片，仅保留护芽的嫩叶柄，置于灭菌过的培养皿中。
2.茎芽消毒
用洗涤液或洗衣粉水洗涤，尤其是腋芽的叶柄处用软毛刷涮擦，用清水反复冲洗干净，然后移入超净台，用0.2%次氯酸钠浸渍10min，无菌水冲洗3~5次后备用。
3.剥离茎尖
将芽置于衬有无菌湿滤纸的培养皿内，在解剖镜下，一只手用镊子按住嫩叶柄或芽，另一只手用解剖刀或解剖针将叶片和叶原基层层剥除，到茎尖初露为止，再用解剖刀切下0.3~0.5mm的微茎尖(带2个叶原基)。选用不同的材料反复练习，达到熟练操作。
●注意事项
1.接种时最好使茎尖向上，不能埋入培养基内。
2.为了防止茎尖变干，应在一个衬有无菌湿滤纸的培养皿内剥离茎尖，而且从剥离到接种的间隔时间越短越好。整个剥离过程中，要注意常将解剖针和解剖刀蘸入90%酒精中，并用火焰灼烧灭菌，冷却后使用。
3.剥离微茎尖时双眼要同时睁开，调整好解剖镜的焦距，并且手、眼与工具间配合默契。
4.切割微茎尖要用锋利的解剖刀，并做到随切随接。
技能5-2 热处理与茎尖培养脱毒
技能要求
●脱毒方案科学、合理，操作规范、熟练、快捷
●母体植株选择正确，外植体切取恰当，微茎尖剥离准确，大小适宜
●训练前准备
1.材料与试剂
盆栽香石竹或组培苗；75%酒精、脱脂棉、95%酒精、0.1%升汞、2.5％次氯酸钙或次氯酸钠溶液、吐温-40、无菌水、MS母液、激素母液（KT、6-BA、NAA 等）、蔗糖、琼脂、蒸馏水或去离子水、0.1M NaOH、0.1M HCl。
2.仪器与用具
人工气候箱或恒温箱、水浴锅、超净台、解剖镜（8~40倍）、镊子、解剖刀、解剖针、平底试管、酒精灯、培养皿、滤纸、磁力搅拌器、烧杯(500 ml、100 ml)、量筒（100 ml）、容量瓶（500ml 、1000ml）、移液管、标签纸、记号笔等。所有仪器与用具均消毒或灭菌。
●方法步骤
1.香石竹脱毒方法
按照香石竹脱毒工艺流程操作（图5-9）。
（l）热处理将盆栽植株（定植后 l～2个月）或试管苗（15d苗龄），置于人工气候箱或恒温箱内，在36～38℃下处理2周，或每天在36℃16h和30℃8h处理共30d，光照16h/d，光强为30001x。
（2）消毒选取无病虫害、叶色浓绿的香石竹叶腋间生出的侧芽为外植体，自来水冲洗0.5 h，75％的酒精消毒30s，再用2.5％次氯酸钙或次氯酸钠溶液消毒15 min，取出后用无菌水漂洗4～5次，无菌滤纸吸去多余水分备用。试管苗不需经过表面消毒。
（3）茎尖剥离在解剖镜下层层剥离叶片使芽体暴露，用解剖针剥掉幼叶，直至只剩下2个最幼小的叶原基。
（4）茎尖培养用刀片切下茎尖（0.3～0.6mm长）放入培养基。培养基为MS＋6-BAlmg／L＋KTlmg／L＋NAA0.5mg／L或MS + 6-BA0.5~1.0 mg/L + NAA0.2 mg/L。培养条件为23～25℃，光照16h，光强2000lx。2～3周进行1次转接，5～7周后可获得小植株，约2个月后长成2~3 cm高、基部带小芽的丛生芽。
(5)分类编号适当扩繁用茎尖产生的试管苗，并严格对每个茎尖形成的无性系进行分类编号，明确种源，以备病毒检测后，及时淘汰带毒无性系。
●注意事项
1.严格按照热处理方案操作，保证热处理温度和处理时间。
2.其他注意事项与技能5-1相同。
技能5-3 脱毒效果的指示植物鉴定法
技能要求
●按病毒鉴定的操作流程操作
●指示植物选择准确，操作规范、准确、熟练、快捷
●汁液涂抹损伤率和嫁接死亡率不超过3%
●训练前准备
1.材料与试剂
苋色藜、EMC系草莓、UC系草莓、King或Ruden等指示植物种子、香石竹和草莓的待检脱毒苗、栽培基质与肥料、各种杀虫剂和杀菌剂等。
2.仪器与用具
300目防虫网室、花盆、研钵、500～600目金钢砂、医用小剪刀、嫁接刀、嫁接夹、塑料条或封口膜、纱布、棉球等。
●方法步骤
1.香石竹试管苗的脱毒鉴定方法
采用汁液涂抹法进行香石竹组培苗脱毒鉴定。其操作流程见图5-10。
(1)脱毒苗培育与指示植物栽植在防虫网室内，提前播种石竹、苋色藜等指示植物种子，培育实生苗(按常规管理)；按热处理结合茎尖培养脱毒法培育香石竹试管苗(见技能5-2)，作为待检苗。
(2)叶片研磨当指示植物石竹、苋色藜的实生苗苗龄达8~10周时，取香石竹脱毒苗幼叶1~3g置于研钵中，加入10ml水和等量的0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.0），研碎后加入少量600目金钢砂作为摩擦剂，制成匀浆。
(3)汁液涂抹用手指或纱布或棉球蘸取匀浆液轻轻涂抹石竹、苋色藜的叶片表皮接
种。两种指示植物各涂抹2组，每组5盆。
(4)观察记录汁液涂抹1周后检查新生叶是否产生病斑。如有枯斑或花叶等症状，说明脱毒效果不佳，需进一步脱毒。
2.草莓试管苗的脱毒鉴定方法
(1)嫩枝(芽)嫁接法嫩枝(芽)嫁接操作工艺流程见图5-11。提前培育草莓脱毒苗和EMC系草莓、UC系草莓、King或Ruden等指示植物。当指示植物的实生苗足够大时，取草莓脱毒苗嫩枝(芽)，削成接穗，用劈接法或插接法嫁接在指示植物匍匐茎上。每种指示植物各嫁接2组，每组5盆，每盆3枝。1~2月后，观察指示植物新展开的叶片、匍匐茎、老叶上是否出现皱叶、脉结、黄边等病斑。如发现有病斑，则说明脱毒效果不佳，需再次脱毒。
(2)小叶嫁接法草莓小叶嫁接操作流程见图5-12。
①草莓脱毒苗培育与指示植物栽植同香石竹脱毒鉴定。
②削接穗取待检草莓叶，去两侧小叶，留中央小叶，保留叶柄长约1.5cm，削皮层成楔形。
③“砧木”选择与处理从盆栽生长良好的指示植物(EMC系草莓、UC系草莓、King或Ruden实生苗足够大)挑选健全叶片，剪去中央小叶，用单面刀片自剪口处向下纵切1.5～2crn切口。
④嫁接将待检小叶的叶柄插入切口，用封口膜缠绕包扎嫁接部位，然后用喷雾器向植株喷少许清水，用开有小孔的塑料袋将指示植物罩上。
⑤接后管理将嫁接后的指示植物移至防虫网室，置于散射光下按常规养护。
⑥观察记录在防虫网室内养护10d后去掉塑料袋，观察指示植物新老叶上病斑的有无，并以此作为判定草莓组培苗是否脱毒的重要依据。
●注意事项
1.指示植物和脱毒苗要提前培育。
2.采用汁液涂抹法进行香石竹组培苗脱毒鉴定时，涂抹叶片力度要适当，既要使汁液浸入叶片，又不要使指示植物的叶片受损严重，这样有利于受损部位尽快愈合。
3.削嫩枝(芽)或叶时，要用利刀且动作迅速，尽量使切面保持固有的形状，这样利于接芽与叶片与“砧木”尽快愈合成一体。为防止干燥，可在接合片涂些凡士林。
技能5-4 脱毒效果的酶联免疫吸附测定法
技能要求
●按酶联免疫吸附测定流程操作，操作规范、准确、熟练
●根据测定结果，能够准确计算，并根据测定和计算的数据分析，得出待检样品是否有病毒的结论。
●训练前准备
1.材料与试剂
待测苹果脱毒苗、山定子实生幼苗无病叶；苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的抗血清、A蛋白和酶标S蛋白、抗体及酶标A蛋白稀释液
(8ml/mlNaCl+0.2mg/mlKH
2PO
4
+2.9 mg/ml Na
2
HPO
4
·12H
2
O+0.2
mg/mlKCl+2%PVP+0.1%牛血清蛋白+0.05%吐温20，pH7.4的缓冲液)、包被液
(0.05ml/L的Na
2CO
3
+NaHCO
3
的缓冲液，pH9.6)、酶作用底物(0.4mg/ml邻苯二胺)、
反应终止液(2mol/L的H
2SO
4
)、95%酒精、蒸馏水等。
2.仪器与用具
酶联免疫检测仪、离心机、冰箱、微孔板(40孔微量聚苯乙烯板，用95％酒精浸泡
2h，蒸馏水冲洗后晾干备用)、研钵、解剖刀、手术剪、移液管等。
●方法步骤
按酶联免疫吸附测定工艺流程操作（图5-13）。
1.样品处理
取待测苹果嫩叶，按1：2～5加抗原提取液(可用抗体及酶标A蛋白稀释液)研磨，低速离心(4000r／min，离心5min)，取上清液，即为待检样品。用山定子实生幼苗的无病叶为阴性对照。
2.包被A蛋白
取A蛋白加5倍包被液，在28℃条件下孵育2h。A蛋白的工作浓度为lug ／ml，。
3.加抗血清ACLSV
加入抗血清ACLSV，在28℃条件下孵育2h。抗血清ACLSV的工作浓度为1：1000～ 2000，
4.加待检样品
即抗原样品及山定子阴性对照样品，4℃条件下过夜。
5.加酶标A蛋白
加入酶标A蛋白，28℃条件下孵育2h。酶标A蛋白适宜的工作浓度是1：4～100。
6.加底物溶液
加入即0.4mg/ml邻苯二胺，在室温下遮光显色15～30min。
7.加反应终止液
显色达到要求后，加入2mol/L的H
2SO
4
溶液，使反应终止。
8.用酶联免疫检测仪测定
反应终止后，于20min内用在A
490
纳米波长处测定吸光值，以待检样品的平均吸光值／阴性对照的平均吸光值≥2，视为阳性，即苹果脱毒苗带病毒，有待进一步脱毒。
●注意事项
1.严格按照酶联免疫吸附测定流程操作。
2.测定时要多做几个重复，以提高结果的准确性。
细胞培养室管理方法
细胞培养室管理的研究与探索 文章来源：中国实用医药作者：徐家英秦立强等 【摘要】本文从培养室的服务职能，培养室的技术交流，细胞培养室的建设，实验室管理制度建立的重要性等几个方面进行了研究与探索，充分发挥细胞培养室的潜能，从而达到有效提高研究质量的目的。 【关键词】细胞培养室；技术服务与交流；培养室建设与管理 实验室是高等学校从事科研的重要基地，营造一个好的实验研究环境对实验室管理和建设起着至关重要的作用。实验室管理质量的好坏，直接关系到实验研究是否进展顺利。良好的实验室建设，能给研究者带来愉快的心情，同时也能有效的提高研究质量。 细胞培养室是综合实验室的一个重要组成部分, 细胞培养技术是生命科学各研究领域的一种最基本、最重要、也是应用最广泛的研究技术之一。对于高等医学院校来说,各生物医学相关学科均建有细胞培养实验室，其规模、档次、技术水平、使用效率、管理模式、服务保障等方面都缺乏统一的标准，普遍存在着小而全、投资分散、资金浪费、缺乏有效管理、无法提供服务保障、不利于技术交流和创新等诸多问题。本文总结了笔者在细胞实验室管理与建设方面的一些经验，并与广大同行进行探讨。 1 细胞培养室的服务职能 细胞培养除了需要娴熟的操作技术外，更多的体现在培养技术的过程复杂，无菌要求严格。研究人员掌握该门技术的时间周期较长。如果成天陷入清洗，包装和消毒等简单繁琐的劳动中，就会影响研究人员专心致志地从事研究活动中更重要的环节。建立大型细胞培养室，由专人进行工作流程服务，实验室按研究人员的要求提供标准化、规范化的实验用品和材料，可以极大地提高细胞培养实验室的成功率，确保实验器材符合细胞培养的要求，减少研究人员的无谓劳动。因此可以将研究人员从烦琐的劳动中解放出来，安心从事更重要的研究活动。 2 细胞培养实验室的技术交流 细胞培养是一项通用的技术平台。但针对各个研究课题而言，每个研究人员进行细胞培养的目的和要求又各不相同，即既有共性，又有特殊性。一个学科自建的细胞培养室，一般仅局限于本学科领域内有限的研究方向所必需的细胞培养方法和技术，对其它的特殊方法了解不多，因此不利于技术创新。即便是某个研究生掌握的新方法，常常由于毕业分配等原因离开科室，而使新的特殊技术不复存在，不利于特殊技术的建立和完善。 如果大型细胞培养室面向全校开放，自学科的研究人员中具有丰富科研经验的研究人员、博士、硕士等不同层次、不同研究目的和不同要求，他们相互之间不存在利害关系，容易交流，毫无技术保留。每个人的经验和教训很快为大家所用，可极大缩短技术学习的周期和提高新技术的交流。同时，实验室建立了技术档案制度，不同学科的研究人员探索的新技术不会因走人而流失，可以极大地丰富和积累特殊技术，提高技术水平，为后来者提供更多的方便。 3 细胞培养室的建设 3．1 细胞培养室面积和房间安排实验室的面积应由实验台的长度、净化工作台的大小等仪器设备情况决定，同时还应考虑科研及实验人员有足够的空间，
第五章 植物的繁殖器官
第五章植物的繁殖器官 5. 1 名词解释 繁殖营养繁殖孢子繁殖有性生殖花单子房多室复子房完全花不完全花花芽分化减数分裂心皮双受精珠孔受精合点受精雄配子体雌配子体自花传粉异花传粉胚珠真果假果雄性不育单性结实无融合生殖多胚现象世代交替被子植物生活史 5.2 填空题 ( 1) 每一个雄蕊一般由( ) 和( ) 两部分组成。 ( 2) 果实中果皮由( ) 发育而来; 种子则由( ) 发育而来。 ( 3) 按发育方式胚乳分为( ) 、( ) 和( ) 。 ( 4) 花粉囊壁的( ) 与花粉囊开裂有关; ( ) 为花粉粒的发育提供 营养。 ( 5) () 和( ) 合称为花被。 ( 6) 传粉的方式有两种, 一种是( ) ; 另一种是( ) 。 ( 7) 心皮边缘相互连合缝线称为( ) ; 心皮背部相当于主脉的部分称 为( ) 。 ( 8) 单核花粉粒又称为( ) ; 单核胚囊又称为( ) 。 ( 9) 植物的繁殖可以分为( ) 、( ) 、( ) 三种类型。 ( 10 ) 典型被子植物的花包括四轮变态叶即( ) 、( ) 、( ) 、( ) 。 ( 11 ) 花托的形状随植物种类不同而异, 常见的有( ) 、( ) 、( ) 、 ( ) 、( ) 。 ( 12 ) 萼片之间完全分离称为() ; 萼片之间部分或全部联合在一起 称为( ) 。 ( 13 ) 萼片通常在开花后即脱落, 称为( ) ; 有些植物的萼片比花瓣 先脱落, 称为( ) ; 有的直到果实成熟后, 花萼依然存在称为( ) 。 ( 14 ) 一朵花中所有的花瓣总称为( ) ; 所有萼片的总称为( ) 。 ( 15 ) 花瓣的大小和形状相同的花为( ) , 反之则为( ) 。 ( 16 ) 各花瓣之间彼此完全分离的花称为() ; 部分或全部联合在一 起的花称为( ) 。 ( 17 ) 花萼和花冠合称为() ; 同时具有花萼和花冠的花称为( ); 缺少其中之一的称为( ) ; 同时缺少两者的称为( ) 。 ( 18 ) 子房是( ) 基部膨大成中空囊状部分, 其外为( ) , 内部为 ( ) 。 ( 19 ) 胚珠一般着生在子房的( ) , 着生的部位称为( ) 。 ( 20 ) 由一个心皮形成的子房称为( ) , 由多个心皮形成的子房称为 ( ) 。 ( 21) 一个小孢子母细胞或大孢子母细胞经过减数分裂形成( ) 个子 细胞。 ( 22 ) 花粉粒外壁上的孔沟称为( ) 或( ) 。 ( 23 ) 花粉粒外壁的主要成分是() 、( ) 、( ) 、( ) 、( ) 、 ( ) 等。 ( 24 ) 花粉粒内壁的主要成分是( ) 、( ) 、( ) 、( ) 等。 ( 25 ) 一个发育成熟的胚珠由( ) 、( ) 、( ) 、( ) 和( ) 等几 部分构成。
2016-2017学年高中生物第5章第2节植物种苗脱毒技术检测
第二节植物种苗脱毒技术 一、种苗脱毒的含义 1．外植体的来源：从感染病毒的植株上所剥离的茎尖分生组织。 2．培养方法：在离体条件下将外植体进行组织培养。 3．幼苗特点：不含病毒。 二、利用分生组织作为外植体的原因 1．农作物在种植过程中，经常会受到病毒、细菌和真菌等病原体的感染。 2．侵入植物体内的病毒可以通过维管束和细胞壁间的胞间连丝扩散到所有的组织器官。 3．植物的茎尖等分生组织处于分化的初级阶段，其组织内的维管束还未形成，此时植物体内的病毒只能通过胞间连丝移动到分生区，而这一移动过程远不及细胞分裂的速度，所以分生区一般不会受到病毒侵染。 三、马铃薯脱毒苗的培养程序 取材和消毒：剪芽并剥去外叶，自来水下冲洗 10 min，再用质量分数为5%的漂白粉溶液消毒后，用无菌水冲洗2～3次。 ↓ 剥离和接种：在解剖镜下，用解剖刀小心地除去茎尖周围的叶片组织，露出分生区，用解剖针细心剥取所需的茎尖，并将其接种于MS培养基上，切面接触培养基。 ↓ 培养：将接种的茎尖置于25 ℃、1 500 lx～3 000 lx光照条件下培养。 预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中
植物种苗脱毒的保障与方法 1．保障脱毒苗无毒的方法 (1)选取的外植体为分生组织。 (2)对材料消毒。 (3)所用培养基经过严格灭菌。 (4)操作过程为无菌操作。 (5)培养室为无菌室。 2．几种脱毒方法 材料一微繁殖技术又称快速繁殖技术，就是将植物体的一部分组织小块进行培养，并诱导分化成大量的小植株，从而达到快速无性繁殖的目的。在20 m2的培养室内最多可容纳100万株试管苗。这一技术已有几十年的历史，现已基本成熟，并形成诸如工厂化生产兰花这样产值巨大的工业生产体系。 材料二植物的脱病毒技术是微繁殖的一个分支，植物病毒严重地影响着农业生产，对于无性繁殖的植株来说，一旦感染上病毒就会代代相传，日趋严重。但在茎尖分生组织中，细胞繁殖十分迅速，病毒还未侵入，因此就成了植物体相对无病毒的特殊区域。 阅读上述材料请回答：
新版动物遗传育种学总复习试题【精】
遗传育种总复习 一、选择题。 1、染色体减数发生在下列哪个时期？【 A 】A．减数分裂第一次分裂 B．减数分裂第二次分裂C．有丝分裂前期 D．有丝分裂中期 2、A、B为两个完全连锁的基因，AABB×aabb的F1进行测交，所能产生的后代的基因型有（）种类型。【 A 】 A、2 B、3 C 、4 D、5 3、导致母畜怀孕期间胚胎中途夭折或出生时死亡的基因称为（）。【 A 】 A．致死基因 B．半致死基因 C.有害基因 D．显性基因 4、猪的染色体数目是条。【 C 】 A．60 B．46 C．38 D．66 5、一DNA分子中，已知A的含量为19%，那么G的含量为（ C ）。【 C 】 A、19% B、25% C、31% D、不能确定 6、关于突变下列叙述正确的是（ C）。【 C 】 A、突变一定有害 B、突变一定有利 C、突变一般有害 D、突变一般有利 7、A、B为两个不完全连锁的基因，AABB×aabb的F1进行测交，所能产生的后代的基因型有（）种类型。【 C 】 A、2 B、3 C 、4 D、5 8、数量性状选择效果要好，需要（）。【 C 】 A、遗传变异程度低 B、遗传力低 C、选择强度高 D、环境造成变异程度高 相关：要想数量性状选择效果好的条件：1、遗传差异大 2、选择差异大 3、育种值估计准确性高4、世代间隔小5、被选性状的数目N为3-5为宜6、遗传相关（回避同一个群体同时选两个相关的性状） 9、水牛的染色体数目是（ 48 ）条。【 B 】 A、60 B、48 C、30 D、24 10、一DNA分子中，已知A的含量为19%，G+A的含量为（）。【 C】 A、38% B、50% C、31% D、不能确定 11、染色体片段断裂后倒转180度重新连接，是（）。【 A 】 A、倒位 B、易位 C、占位 D、重复 12、位于X染色体与Y不同源部分的基因表现出（）。【 C 】 A、常染色体遗传 B、限性遗传 C、伴性遗传 D、限雄遗传 13、遗传参数中，衡量育种值方差占表型方差比例的是（）。【 C 】 A、遗传力 B、重复力 C、遗传相关 D、育种值14、黄牛的染色体数目是（）条。【 A 】 A、60 B、46 C、30 D、24 15、从细胞核内传递遗传信息到细胞核外的物质是（）。【 C 】 A、DNA B、tRNA C、mRNA D、蛋白质16、要判断一个体在一显性完全的基因座位是否是杂合体，可以（）。【 B 】 A、根据本身表现型 B根据测交结果 C、根据父亲表现型 D、根据母亲表现型 17、一男子为红绿色盲，其女儿为正常，该女儿与一正常男性所生儿子率为多少？【 A 】 A、1/2 B、1/3 C 、1/4 D、1/5 18、遗传力的取值范围( )。【 C 】 A．2～3 B．0.5～1 C．0～1 D．1～2 19、真核生物的终止密码子是（）。【 D 】 A、AUA B、AUG C、AGG D、UAG 20、翻译过程中运输氨基酸并识别密码子的物质是（）。【B 】 A、rRNA B、tRNA C、mRNA D、蛋白质 21、若100%的性细胞在减数分裂过程中发生了交换，则互换率为：（）【 A 】 A、100% B、50% C、200% D、25% 22、Aa 个体可以产生几种配子？【 B 】 A、1 B、2 C、3 D、4 23、有一只能育的变性公鸡，用它与正常母鸡交配，它们产生的后代中性别雄：雌比例为（）。【 B 】 A、1：2 B、1：3 C 、1：4 D、1：5 24、同型交配时能改变（）。【 B 】 A．基因频率 B．基因型频率 C.基因频率和基因型频率 D．基因 25、一男子为红绿色盲，其女儿为正常，该女儿与一正常男性所生女儿为携带者的几率为多少？【 A 】 A、1/2 B、1/3 C 、1/4 D、1/5 26、数量性状的特点是( )。【 A 】 A．需要测量 B．从外观可看出区别 C.由单个基因决定 D．变异间断分布 27、真核生物的起始密码子是（）。【 B 】 A、AUA B、AUG C、AGG D、UAG 28、反密码子位于（）。【 B 】 A、rRNA B、tRNA C、mRNA D、蛋白质 29、转录的产物是（）。【 C 】 A、DNA B、染色体 C、RNA D、蛋白质 30、AaBb的个体能产生（）种类型的配子。【 C 】 A、2 B、3 C 、4 D、5
细胞培养实验室的设置设备
一、细胞培养实验室的设置及设备 （一）细胞培养实验室的设置 组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。目前，超净工作台的广泛使用，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。 细胞培养实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。 1．无菌操作区 （1）无菌操作室：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，最好能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。 理想的无菌操作室应划为三部分： a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。 c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效灭菌效果；墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
无菌操作间的空气消毒： 紫外线灯—－产生臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。 空气过滤的恒温恒湿装置—－最好。 表1 洁净室（区）空气洁净度级别表 洁净度级别尘粒最大允许数／立方米微生物最大允许数浮游菌／立方米沉降菌／皿 100级3,500 0 5 1 10000级350,000 2,000 100 3 100000级3,500,000 20,000 500 10 300000级10,350,000 60,000 - 15 无臭氧紫外线消毒器 电子消毒灭菌器—－在高压电场作用下，电子管的内外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂，能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应，从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的，消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，空气不留异味，消毒物体表面不留残毒。
第五章 园林植物害虫防治原理
一、园林植物害虫防治原则 园林植物害虫的防治应在“预防为主, 综合治理”的治虫方针指导下，贯彻以“园林技术措施为基础，充分利用园林生物群落间相互依存、相互制约的客观规律，因地制宜地协调好生物、物理、化学等各种防治方法，以达到经济、安全、有效地控制害虫不成灾的目的”。 二、有害生物综合治理 1.在害虫防治上，不着重害虫的彻底消灭，而是着重将害虫的数量调节到不造成经济损失的地步。 2.在防治技术上，不仅强调各种防治方法的配合，而且强调以自然调控为主，各种防治措施都有它的优点，也有其局限性。 3.在防治效益上，应从生态学观点出发，不能单看防治效果，同时，还应注重生态平衡，生态效益、社会效益。 植物检疫：又称法规防治，即一个国家或地区用法律或法令形式，禁止某些危险的病虫、杂草人为地传入或传出，或对已发生及传入的危险病虫、杂草，采取有效措施消灭或控制蔓延。 植物检疫的种类（对外检疫、对内检疫） 3、园林植物害虫检疫对象的确定原则 ?我国尚未发生或局部发生的危险性害虫。 ?必须是严重影响园林植物的生长和观赏价值 ,而防除又极为困难的。 ?必须是人为传播的 二、园林技术防治措施 园林技术防治：利用一系列的栽培管理技术，有目的地改变园林生态系统中的某些因子，以达到控制害虫发生，保护园林植物生长的目的。 常见措施 选择适宜圃地，育苗或栽植前应先进行地下害虫调查。 合理轮作。 选用良种壮苗。 施用充分腐熟的肥料。 培育抗虫品种。 适地适树，合理配置各种树木、花卉。 加强对园林植物的抚育管理，及时修剪。 修除枯枝，清扫落叶，及时除草。 物理机械防治 概念：利用各种物理因子、人工和器械控制害虫种群数量的一种防治方法。 常用的防治方法 捕杀：利用人力或简单器械,捕杀有群集性、假死性习性的害虫。 诱杀：利用害虫的趋性，设置灯光、潜所、毒饵、饵木等诱杀害虫 阻杀：人为设置障碍，防止幼虫或不善飞行的成虫迁移扩散。 高温杀虫： 生物防治 概念：利用生物及其代谢物质来控制害虫。 生物防治的优点和局限性 优点：①生物防治法不仅可以改变生物种群组成成分，而且能直接消灭大量害虫；②对人、畜、植物安全，不会杀伤天敌，不会污 染环境；③不会引起害虫的再次猖獗和形成抗性；④对一些害虫有长期的抑制作用。 局限性：①生物防治效果比较缓慢；②人工繁殖技术较复杂；③受自然条件限制较大。 化学防治 概念：利用化学农药直接杀灭农业害虫的措施称为化学防治法。 化学防治的优缺点 优点：a.高效；b.使用方便；c.速效；d.杀虫谱广。 缺点：a. 易产生抗性；b.引起环境污染和人蓄中毒；c. 造成主要害虫的再猖獗和次要害虫上升为主要害虫。 合理使用农药，防止药害产生 正确选用农药： 适时用药： 农药交替使用和混用： 防止药害产生： 产生药害的类型：急性、慢性。 产生药害的部位： 产生药害的因素： 植物本身生理生化及形态因素： 药剂因素： 气候因素： 农药的分类 按其作用和效益分类： 触杀剂： 胃毒剂： 内吸剂： 熏蒸剂： 绝育剂： 拒食剂与忌避剂： 引诱剂： 接农药来源与化学组成分类 无机农药： 有机农药： 植物性农药： 微生物农药： 5、农药的加工剂型及其应用方法 粉剂：用原药加入一定量的惰性粉经机械磨碎成为粉状的混合物。 可湿性粉剂：在原药中加入一定量的湿润剂和填充剂，通过机械研磨或气流粉碎而制成。 可溶性粉剂：把具有水溶性的固体农药制成可溶性粉剂。 乳油：用原药加入一定量乳化剂、溶剂制成透明油状剂型。 颗粒剂：原药加载体制成大小约30-60目的颗粒。 烟剂：用原药加燃料、氧化剂、消燃剂制成。 超低容量制剂：是专门供超低容量喷雾使用的剂型。
细胞培养操作步骤
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMS018ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5小20 d、200 pl> 1ml）,酒精灯1盏，液器1台，斜架1台， 酒精喷壶 1 个，酒精棉球缸 1 个，污缸 1 个， 常规耗材：培养瓶（50 cm 2）,定量移液管（5ml、10ml）,枪头（1ml、200小 10 d）,培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO,胰酶，苯扎溴氨，75% 酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min 后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏，首先用一大烧杯盛满37C的温水放于液氮罐旁边，待 细胞株取出后留上端1/3于37C水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若 种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。 实验步骤 一、原代细胞的培养 1. 紫外消毒30min 后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作者的 双手。 2. 将所需的培养基确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基瓶口用酒 精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3 次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上，瓶口对准酒精灯，且放在距离酒精灯最近的位置，瓶盖置于酒精灯的另一侧。 3. 取1 个高压后的新培养瓶，瓶口在酒精灯上消毒2-3 次，旋开后分别再次消毒瓶 口和瓶盖2-3 次分别放于酒精灯两侧，把保种管在超净台外用酒精棉球擦拭下2/3 后拿进超净台内在酒精灯上消毒保种管口2-3次放于台面左手边，取1ml 移液器快速移动在酒精灯上消毒1-2 次，然后再装上枪头吸取保种管内的细胞液，悬空移入培养瓶内。 4. 拿出1 支高压后的5ml 定量移液管，在酒精灯上灼烧尾部后装于电动移液器上， 再次放于酒精灯上灼烧整个定量移液管管身2-3 次，悬空进入培养基瓶内吸取4ml 培养基再悬空移入培养瓶内，将培养瓶瓶口和瓶盖在酒精灯上消毒2-3 次后拧紧平放，在瓶身做好实验标记。 5. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3 次后拧紧，熄灭酒精灯，整理实验台面，取出实验试 剂及污缸等，关闭超净工作台。 6?将培养瓶放于28C,5%CO2的培养箱内培养，旋开瓶口少许。注意整个培养箱底托盘内一定要放高压后的水，且定期更换确保无菌。 在CO2培养箱内培养10-12h，瓶盖拧紧后拿出培养箱，置于荧光倒置显微镜下观察细胞贴壁情况，及细胞形态。最后更换培养液。 、培养液的更换
动物育种学复习题汇总.(黄金版)
动物育种学（四川农大版） 一、名词解释 1、家畜：广义指家养的驯化动物，狭义指属于哺乳纲的驯化动物 2、品种：具有一定经济价值，主要性状遗传性能比较一致，能适应一定的自然环境以及饲养条件，能生产出符合人类需求的产品的家养动物群体 3、驯化：经过人类数千年甚至上万年的饲养、选择和育种，使动物的体型发生巨大变化，完全失去其野性，生活习性发生根本变化，成为对人类有很大依赖的家养动物 4、重复力：指的是家畜个体某一性状多次度量值之间相关程度的度量 5、系水力：指肌肉受外力作用时保持原有水分和添加水分的能力 6、遗传缺陷：是指由于遗传物质的变异导致的畜禽遗传性疾病 7、生产性能测定：对畜群表型进行的系统测定工作称生产性能测定 8、配妊时间：母牛产后第一次输精直至妊娠的最后一次输精所间隔的天数 9、选择差：被选留个体均数与群体均数之差 10、近交系数：一个个体同一基因座上的两个等位基因为同缘相同基因的概率 11、杂种优势：不同种群杂交所产生的杂种往往在生活力、生长势和生产性能方面在一定程度上优于两个亲本种群平均 12、配套系杂交：建立一些配套的品系作为杂交中的父本或母本 13、顶交：用近交系的公畜与无亲缘关系的非近交系母畜交配 14、遗传相关：两个性状基因型值（育种值）之间的相关叫遗传相关 15、品系：源于共同祖先经过近交获得在某些性状上具有遗传性能比较一致的后代 16、遗传漂变：由某一代基因库中抽样形成下一代个体的配子时所发生的机误，这种机误引起基因频率的变化 17、选择反应：通过人工选择在一定时间内，使得性状向着育种目标方向改进的程度 18、世代间隔：子代出生时其父母的平均年龄 19、迁移：不同群体间由于个体转移引起的基因流动过程 20、选配：人为确定个体间交配的策略 21、近交衰退：隐性有害纯合子出现的概率增加 22、一般配合力：群体的平均加性基因效应 23、不返情率：指一头公牛的所有与配母牛在第一次输精后的一段时间间隔内不返情的比例 24、近交系：通过连续近交形成的品系 25、杂交改良：利用优良的外来品种与本地品种进行杂交以改进地方品种的缺点或提高本地品种的生产性能 26、保种：保护人们需要的畜禽品种资源，使之免遭混杂或灭绝 27、群体有效含量：与实际群体有相同基因频率、方差或相同的杂合度衰减率的理想群体含量 28、理想群体：指规模恒定、公母各半、没有选择、迁移、突变也没有世代交替的随机交配群体 29、随机配种：将群体内所有公畜的后代放在一起，根据个体的表型值高低来选留后备种畜 30、各家系等量留种：在每世代中，各家系选留的数量相等，而公母保持原比例的一种留种方式 31、转基因动物：将体外重组DNA移植到胚胎细胞中，发育成动物个体，并以可遗传的方式
动物育种学复习重点
家畜：经过驯养且具有一定经济价值的家养动物。 家养：人类的培育使动物在新的生态环境条件下逐渐适应的一个过程。 家畜育种：通过改进、保护和利用家养动物遗传资源求得当前和未来更高的生产效率的全部活动。 家畜育种学：人类应用遗传学理论，指导家畜育种实践的有关科学知识体系。物种：具有不同的生态特点，彼此之间存在着生殖隔离，二倍体染色体数目和基本形态互不相同的生物集团, 是生物分类系统的基本单位。 品种：畜牧学的单位，指具有特定生物学特性、经济特性和种用价值、能适应一定的自然和经济条件、能满足人类一定需求、具有一定数量的某种家畜类群。品系：狭义：来源于同一头卓越的系祖，且有与系祖类似的体质和生产力的种用高产畜群；广义：一群具有突出优点，并能将这些突出优点相对稳定地遗传下去的具有较高种用价值的种畜群。 单系：来源于同一头系祖，并且具有与系祖相似的外貌特征和生产性能的畜群。近交系：运用连续近交形成，群体近交系数达0.375以上。 群系：由群体继代选育法建立的多系祖品系。 地方品系：由于各地生态条件和社会经济条件的差异，在同一品种内经长期选育而形成的具有不同特点的地方类群。 专门化品系：具有某方面突出优点，专门用于某一配套系杂交的品系 合成品系：以两个或两个以上品种或品系杂交建立的品系 生长：同类细胞数目增加或体积增大，使个体由小到大，体重逐渐增加的这种现象称为生长。 发育：由受精卵分化出不同的组织器官,从而产生不同的体态结构与机能的过程。它是个体生育机能逐步实现和完善的一个过程。 累积生长：家畜在任一时期所测得的体重或体尺，是前期生长发育的累积结果。家畜体重的累积生长理论上为“S”形曲线。 绝对生长: 单位时间内的平均增长量. 反映生长速度，呈“钟”形，其最高点相当于累积生长曲线的拐点。 相对生长：单位时间内增长量（增量）与原有体量（始重）的比值。反映了生长发育的强度。
动物育种学复习题汇总资料整理
动物育种学 （四川农大版） 一、名词解释 1、家畜：广义指家养的驯化动物，狭义指属于哺乳纲的驯化动物 2、品种：具有一定经济价值，主要性状遗传性能比较一致，能适应一定的自然环境以及饲养条件，能生产出符合人类需求的产品的家养动物群体 3、驯化：经过人类数千年甚至上万年的饲养、选择和育种，使动物的体型发生巨大变化，完全失去其野性，生活习性发生根本变化，成为对人类有很大依赖的家养动物 4、重复力：指的是家畜个体某一性状多次度量值之间相关程度的度量 5、系水力：指肌肉受外力作用时保持原有水分和添加水分的能力 6、遗传缺陷：是指由于遗传物质的变异导致的畜禽遗传性疾病 7、生产性能测定：对畜群表型进行的系统测定工作称生产性能测定 8、配妊时间：母牛产后第一次输精直至妊娠的最后一次输精所间隔的天数 9、选择差：被选留个体均数与群体均数之差 10、近交系数：一个个体同一基因座上的两个等位基因为同缘相同基因的概率
11、杂种优势：不同种群杂交所产生的杂种往往在生活力、生长势和生产性能方面在一定程度上优于两个亲本种群平均 12、配套系杂交：建立一些配套的品系作为杂交中的父本或母本 13、顶交：用近交系的公畜与无亲缘关系的非近交系母畜交配 14、遗传相关：两个性状基因型值（育种值）之间的相关叫遗传相关 15、品系：源于共同祖先经过近交获得在某些性状上具有遗传性能比较一致的后代 16、遗传漂变：由某一代基因库中抽样形成下一代个体的配子时所发生的机误，这种机误引起基因频率的变化 17、选择反应：通过人工选择在一定时间内，使得性状向着育种目标方向改进的程度 18、世代间隔：子代出生时其父母的平均年龄 19、迁移：不同群体间由于个体转移引起的基因流动过程 20、选配：人为确定个体间交配的策略 21、近交衰退：隐性有害纯合子出现的概率增加 22、一般配合力：群体的平均加性基因效应 23、不返情率：指一头公牛的所有与配母牛在第一次输精后的一段时间间隔内不返情的比例 24、近交系：通过连续近交形成的品系 25、杂交改良：利用优良的外来品种与本地品种进行杂交以改进地方品种的缺点或提高本地品种的生产性能 26、保种：保护人们需要的畜禽品种资源，使之免遭混杂或灭绝
2017-2018学年高中生物 第五章 植物的组织培养技术 5.1 植物快速繁殖技术(1)素材 中图
植物快速繁殖技术 植物快速繁殖就是应用组织培养技术，快速繁殖名优特新品种，使其在较短时间内繁衍较多的植株；快速繁衍珍稀濒危植物，使物种得以保存。快速繁殖是当前植物细胞工程中应用最广泛，又最有效的方法之一。 除了一部分豆类作物外，种子是不会传递病毒的。植物病毒是通过无性繁殖传递的，而快速繁殖是建立在无性繁殖的基础上，病毒在母体内逐代积累，危害越来越严重。目前在生产上尚无特效药物可彻底除去病毒，而快速繁殖却可以，因此，快速繁殖脱毒显得非常重要。 一、植物快速繁殖的途径和方法 以植物的根、茎、叶柄和花等片段以及孢子作为外植体，或者切取茎尖、腋芽进行离体培养，可以直接诱导器官分化，产生芽、根，也可以诱导改变原有的分化状态，脱分化形成愈伤组织，再经过不同的细胞分化途径重建形成不同的器官，直到完整植株。(P86 L.1~L.16) 植物快速繁殖的类型与方式可归纳如下表： 器官型 芽，扩大繁殖系数稳定，是快速繁殖的主 要方式 丝石竹等可获得与母株相同的
快速繁殖中茎尖培养脱毒 无病毒苗的获得： （一）材料的培养和灭菌 为了获得无菌的茎尖，应把供试植株种在无菌的盆土中，放在温室栽培。浇水要浇在土中，不要浇在叶片上。如材料取自田间，可切取插条，在实验室内进行溶液培养。由这些插条的腋芽长成的枝条，其污染程度比直接从田间植株取来的枝条少得多。自外，定期喷施内吸杀菌剂（如0.1%多菌灵和0.1%链霉素）也十分有效。 （二）茎类剥离 取幼苗茎尖2~3cm小段，剥去可见的大叶，放在烧杯内用自来水冲洗1h左右，移入无菌室进行严格消毒。先用95%酒精快速浸泡一下，再放入5%的漂白粉溶液内消毒7~10min （也可用市场上出售的次氯酸钠溶液稀释为5%），然后用无菌水冲洗3~4次，在双筒解剖镜下一手用细镊子将茎芽按住，另一手用解剖针仔细地将幼叶剥去，最后露出圆滑的生长点，用注的针头侧刃或自制的解剖针，仔细地切取带有1~2个叶原基的生长点，随即接种到试管培养基上进行培养。这样外植体（生长锥带1~2个原叶基）的培养，严格来说，应称为分生组织培养。 以上操作必须严格在无菌条件下的超净工作台中进行，所用器具都应浸泡于70%的酒精中，使用前要在究竟灯上烧灼灭菌，注意不使解剖针、刀太烫，以免损伤组织。解剖镜台应垫载玻片，每剥离一个茎尖应以酒精棉团擦拭，手也应经常用70%酒精擦试。茎尖很幼嫩，暴露时间越短约好。因为超净台的气流和酒精灯发出的热都会使茎尖迅速变干。 （三）茎尖培养 目前常使用的的基本培养基是MS培养基或White培养基，它有较高浓度的无机盐，对促进组织分化和愈伤组织生长是有利的。在培养基中可酌情添加5%~10%椰乳，0.1~1.0mg/L 的吲哚乙酸、萘乙酸、苄基腺嘌呤等，有的还需添加活性炭。根据培养种类不同，添加的生长调节剂可适当调整。（P92~P93 L.11） 茎尖培养的生长可能有4种类型：①组织不增大，不久变褐死亡，这可能是生长点受伤所致。②组织渐变绿，但体积增大缓慢，可把组织转到NAA浓度高于0.05mg/L的培养基上，并提高温度以加速其生长。③组织基部不产生或少量产生愈伤组织，而生长点发育正常，一个月内可形成无根的小植株，这是最理想的情况。当长有2~3片西欧啊叶时，应把
动物育种学答案
动物育种学网上作业题参考答案 绪论 一、名词解释 1. 农业 答：农业是人类赖以生存和发展的基础产业，亦即农业是解决人类吃饭穿衣等最基本的生活需求的第一产业。 2. 植物农业 答：即种植业，是利用水、土壤和日光等自然资源，为人类生产粮、棉、麻、油等植物产品。 3. 动物农业 答：即畜牧业或养殖业，是通过饲养畜禽以及水生动物，将植物产品转化为肉、蛋、奶、毛等动物产品。 4. 育种 答：利用现有畜禽资源，采用一切可能的手段，改进家畜的遗传素质，以期生产出符合市场需求的数量多、质量高的畜产品。 5. 家畜育种学 答：是人为地控制畜禽个体的繁殖机会，利用适当的育种方法，尽可能“优化”地开发利用畜禽品种的遗传变异的一系列理论和方法，是人类应用遗传学理论指导家畜育种实践的有关科学知识体系。 二、填空 1. 农业生产体系一般是指（植物农业）和（动物农业）。 2. 动物农业（养殖业）可为人类生产（肉）、（蛋）、（奶）、毛、皮等动物性产品，解决“小康”问题。 3. 畜牧生产中的“六畜”一般是指（马）、（牛）、（羊）、（鸡）、（犬）、（豕）。 三、判断 1.经济比较发达的国家或者地区其畜牧业发展水平往往比较低下。（ ） 2.影响动物生产效益的诸多因素中，家畜的遗传育种对最终效益的贡献率是最高的。（√） 3.传统的家畜育种工作注重的是育种者经验与灵感的结合。（√） 4.英国的短角牛协会是世界上第一个正式的育种组织。（√） 四、简答 1.育种（手段）对发展畜牧业的作用？ 答：1 充分利用畜禽品种资源：发挥优良品种的珍贵基因库作用，保护品种资源的保护的目的；2 培育新品种和品系：提高畜禽群体具有很高生产性能，为市场提供高质量畜产品；3 现有优良品种中选育优秀的种畜：提高畜禽群体内的良种覆盖率，使群体不断地得到遗传改良；4 培育或筛选杂交配套系：利用杂种优势，为工厂化畜牧业生产提供高产、低耗的商品畜禽。 第一章 一、名词解释 1. 家畜 答：是野生动物经人类的逐渐驯化和长期饲养而形成的，与人类社会经济活动有密切关系，是人类重要的生活资料和生产资料，为人类生产肉、蛋、奶、毛、绒、皮、裘等畜产品，以及用于运输和农耕。 2. 家畜概念（广义） 答：在人类的控制干预下，能够进行正常繁殖，有相当大的群体规模，具有有利于人类的经济性状，性状
植物脱毒苗组织培养技术的研究
植物脱毒苗组织培养技术的研究 本论文对菊花、郁金香和康乃馨进行了脱除病毒培育无毒苗的适用技术研究。现将主要结果摘要如下：菊花脱毒苗培育试验中，以患花叶病“国庆”菊花幼嫩茎尖长0.5-0.8mm为外植体。 外植体愈伤组织的诱导和生长及分化出芽均受到BA和NAA配比的影响。在MS+BA2.0mg／1+NAA0.1mg／1培养基上培养，愈伤组织诱导效果最好，诱导率达96.0％；愈伤组织分化出芽以MS+BA3.0mg／1+NAA0.1mg／1效果最佳，分化率达60.0％，每块愈伤组织平均分化出4个芽。 幼苗2cm长时切割转接到1／2MS培养基上培养，10天后长出白色小根，生根率达78.0％；在含有NAA0.1-0.5mg／1培养基上生根率可达92.0％以上，在 1／2MS+NAA0.1mg／1中培养的每株生根数最多。郁金香脱毒组织培养，以 0.3-0.5mm茎尖为外植体。 茎尖愈伤组织的诱导在MS+NAA2.0mg／1+BA1.5mg／1培养基上诱导率达 94.0％；愈伤组织分化出芽在MS+NAA0.5mg／1+BA1.5mg／1培养基分化率达 86.0％；用茎尖直接分化芽的试验中，在MS+NAA0.1mg／1+2，4-D0.1mg／1上茎尖成活率达90.0％，分化率达60.0％；郁金香组培苗生根培养，在1／ 2MS+NAA0.5mg／1培养基中生根率达80.0％，平均每苗生根5.2条。康乃馨脱毒组培试验表明，用0.3mm茎尖接种，以MS+BA0.7mg／1+NAA0.1-0.2mg／1为培养基诱导愈伤组织效果好，诱导率为90.0％；愈伤组织分化出芽以MS+BA0.8mg／ 1+NAA0.2mg／1培养分化最好，分化率为74.0％，平均每块愈伤组织有芽5.9个。 在1／2MS+NAA0.01mg／1+IBA0.05-1.0mg／1上诱导生根时间短，根条数适
细胞培养室操作规范
细胞培养室操作规范文件编码（GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968）
细胞培养室操作规范1、本室是进行各种细胞培养的（准）净化级实验室，所有进入细胞培养实验室的人员都必须遵守本室的规章制度，接受本室管理人员的管理。 2、按预约制度使用细胞室。非实验人员未经允许不得进入细胞室。 3、按培养室的要求洗手、更衣、换拖鞋，将衣服存放在指定地点。实验用品尽量一次带入，进出细胞室请随手关门。严禁将与实验无关的易燃、易爆及其他有毒有害物品带入细胞室；在本细胞室内不得进行病原性微生物等其它易污染物的操作。 4、培养实验所用试剂专人专用，以防止交叉污染。 5、使用仪器前认真阅读“操作规程”，并严格按“操作规程”进行操作，未经管理者同意不得擅自更改仪器程序。使用后仪器恢复原位，并填写“使用情况记录”。如仪器出现故障，请及时通知实验室老师。因操作不当导至仪器、设备、实验器材的损坏，追究实验者责任，并按学校有关规定赔偿。 6、未经实验者允许，不得翻看其他实验者的细胞。不按规则进行操作造成他人细胞损失，需酌情赔偿。 7、每次实验结束后，应及时清理桌面、台面、地面，整理好用过的实验器材。观察培养箱中CO2的浓度、温度、供气压力等参数，待正常后方可离开。实验区用紫外线照射30分钟，并做好记录。将废弃物品带出操作间。 8、爱护实验室公共财物。节约使用常规实验耗材、节约用电。注意防火防盗，杜绝一切可能导致火灾的行为。
9、进入细胞室的实验人员必须遵守清洁卫生值日安排。严禁随意反复进出培养室。每周做全面清洁消毒一次，超净台上滤网需每月清洗一次。 10、禁止在培养室吸烟、进餐，实验过程中严禁喧哗、闲聊。 11、本制度自公布之日起生效，解释权归实验室。
动物育种学A 及答案
注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 东北农业大学成人教育学院考试题签 动物育种学（A） 一、名词解释（每小题2分，共20分） 1. 物种： 2. 混合模型： 3. 亲缘选配： 4. 近交系： 5. 杂种优势： 6. 杂交育种： 7.家系内选择： 8. 本品种选育：
注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 9. 轮回杂交： 10. MOET： 二、计算题（每小题各8分，共32分） 1．有一头公牛，某一性状表型为显性类型，为了鉴别其是否带有隐性基因，选择了若干头隐性纯合子母牛与之交配，请问该公牛最少要连续产生多少头显性类型的后代而不产生隐性个体，才有99%的把握说该公牛为显性纯合子公牛？（log2=0.301） 2. 个体X的系谱如图所示，请计算X个体的近交系数。 A X C B 已知：个体X的系谱图如上，求X的近交系数 F X = ?
注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 3. 某种猪场拟制订的综合选择指数中包含3个育种目标性状：瘦肉率(X1)、达到100kg体重的日龄(X2)和背膘厚(X3)，有关数据资料列表如下，试制订综合选择指数。现在有一个个体X的估测瘦肉率为58%，达到100kg体重的日龄为166天，背膘厚为13mm，计算该个体的综合选择指数。 猪群3个性状的表型
注：装订线内禁止答题，装订线外禁止有姓名和其他标记。 三、简答题（每小题6分，共18分） 1. 简述品种应具备的条件。 2.影响育种值估计的主要因素和提高育种值估计准确度的育种措施有哪些？ 3. 品系的维持措施有哪些？
《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁
《植物组织培养技术》植物脱毒与快繁 模块介绍 本模块针对组培研发岗位的工作职责与任职要求，编排了试验方案设计和数据调查与分析二个实训项目，主要内容包括组培的基本理论、提高组培苗遗传稳定性的措施、组培试验方案的制订等，重点阐述了组培快繁的程序与类型、组培研究的技术路线与试验设计方法、组培快繁的常见问题、组培数据调查与分析方法等。在理论学习的同时，开展项目实践活动，培养学生会设计组培试验、撰写试验方案、编制组培试验观察表和技术指标统计分析，具备组培研发工所要求的理论知识、技能水平和相应的职业素质。模块结构设计见表1。 表1 模块结构设计 项目1 蔬菜组培与快繁/马铃薯脱毒与快繁 一、学习目标
（一）终极目标 掌握植物脱毒与鉴定技术，培育马铃薯等蔬菜脱毒、快繁与脱毒苗的鉴定技术。（二）促成目标 1.熟悉植物脱毒的意义、原理与方法，能够运用脱毒技术培育马铃薯等蔬菜脱毒苗； 2.掌握脱毒苗鉴定技术，清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗鉴定方法； 3.清楚马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与无病毒苗繁育体系、方法； 4.提高操作水平和分析解决问题能力，培养团队精神、敬业精神、责任意识。 二、学习内容 1．蔬菜组织培养概况； 2.马铃薯组培概况； 3.马铃薯脱毒种薯繁育流程； 4.脱毒苗的优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)； 5.植物脱毒技术； 6.脱毒苗鉴定技术； 7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定； 8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导； 9.马铃薯等蔬菜脱毒苗的保存与繁殖； 10.甘薯脱毒与快繁技术要点（拓展）； 11.大蒜脱毒与快繁技术要点（拓展）； 12.紫背天葵组培与快繁技术（拓展）； 13.结球甘蓝组培与快繁技术（拓展）。 三、知识点 1.蔬菜组织培养概况； 2.马铃薯组培概况； 3.马铃薯脱毒种薯繁育流程； 4.脱毒苗的含义、实质与培育优势(含病毒的种类、传染途径、表现症状与危害)； 5.植物脱毒技术（热处理、微茎尖培养、其它脱毒方法）； 6.脱毒苗鉴定技术（指示植物法、嫁接法等）； 7.马铃薯脱毒苗培育与鉴定； 8.马铃薯脱毒苗快繁与微型薯诱导（实验室诱导、温室生产）。 四、技能点
水产动物育种学试卷及参考答案
一、名词解释 基因迁移：也称为基因移居，是指具有某一基因频率群体的一部分，因某种原因移至基因频率不同的另一群体，并杂交定居，从而改变了群体的基因 频率，这种影响也称迁移压力。迁移压力的增强可使某些基因从一个 群体有效地散布到另一群体中。大规模的迁移会形成强烈的迁移压力 引起群体遗传结构的改变。 家系选择：从混有不同类型的原始群里选出优良个体留种，建立若干家系并繁殖后代，家系内逐代淘汰劣质个体，家系间逐步淘汰劣质家系，选留超 越原始群体及对照品种、符合原定选择指标的优良家系，进而参加品 系产量测定，称为家系选择。 特殊配合力:指某特定组合的实际产量，与根据其双亲的一般配合力算得的理论值的偏差。它受基因的显性效应和非等位基因互作效应控制。Hertwig效应：采用物理射线处理精子时,通常伴随着照射剂量的增高, 受精后胚胎的成活率降低;当照射超过某一剂量时,成活率反而回升,这种现象 称作Hertwig效应 选择反应：是一种衡量选择效果的指标,指受选择性状经一世代的选择后,性状平均值的变化情况,在数值上等于选择亲本所繁殖的子代表型平均值 (Yf)减去选择前群体的表型平均值(Y),即R=Yf-Y。 二、判断题 1.狭义的遗传多样性指种内或种间表现在分子、细胞、个体三个水平的遗传变 异度。（×）（√）2.所谓表型相关就是两个数量性状表型变量间的相关。 （√） 3.在育种和生产实践上，严格地说，只要有一对基因不同的两个个体进行交配， 便是杂交。（×） 4.原始生殖细胞在未进入生殖嵴之前，既可分化为精原细胞，又可分化为卵原 细胞，（√） 5.水产动物的性别包括两个方面,其一是由其生理构成所表现出的性别,称为 遗传性别。（×） 6.水产动物性染色体的主要决定类型分为XX-XY型、XX-XO型、ZW-ZZ型和ZO-ZZ 型。（√） 7.群体品种的生长性能是靠其遗传上的同质性来达到的。 （×） 三、选择题 1.与影响驯化速度无关的因素是 C 。 A、A、遗传基础 B、环境变异 C、自然选择 D、选择作用 2.两性繁殖鱼类排出的卵子处于 B 。 A、A、第一次成熟分裂中期 B、第二次成熟分裂中期 B、C、第一极体排出时D、第二极体排出时 中，G代表 B 。 3.表型方差分析的数学模型P=G+E+I GE A、A、表现型值 B、基因型值 C、环境作用 D、互作偏差效应值 4.下列哪项不属于高技术品种 C 。 A、A、多倍体品种 B、雌核发育品种 C、育成品种 D、转基因品 种