蛋白质水平对断奶仔猪生产性能和营养性腹泻的影响

蛋白质组学研究方法选择及比较

蛋白质组学研究方法选择及比较 目前研究蛋白组学的主要方法有蛋白质芯片及质谱法，本文将从多方面对两种研究方法进行了解与比较； 蛋白质芯片（Protein Array） 将大量不同的蛋白质有序地排列、固定于固相载体表面，形成微阵列。利用蛋白质分子间特异性结合的原理，实现对生物蛋白质分子精准、快速、高通量的检测。 主要类型： ●夹心法芯片(Sandwich-based Array) ●标记法芯片(Label-based Array) ●定量芯片(Quantitative Array) ●半定量芯片(Semi-Quantitative Array) 质谱（Mass Spectrometry） 用电场和磁场将运动的离子按它们的质荷比分离后进行检测，测出离子准确质量并确定离子的化合物组成，即通过对样品离子质荷比的分析而实现对样品进行定性和定量的一种方法。 主要类型：

●二维电泳+质谱(2D/Mass Spectrometry, MS) ●表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(Surface-enhanced laser desorption/ionization- time of flight, SELDI) ●同位素标记相对和绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ) Protein Array or Mass Spectrometry？ 如何选择合适的研究方法？以下将从六个方面进行比较与推荐： 1.筛查蛋白组学表达差异 建议选择：RayBiotech（1000个因子的芯片）+质谱 a)不同的方法学有不同的特点：对于质谱，可以筛查到未知的蛋白，但是对于分子量大、 低丰度的蛋白质，质谱的灵敏度和准确性有一定的限制。 b)不同的方法能筛查到的目标不同：根据Proteome Analysis of Human Aqueous Humor 一文中报道，质谱筛查到的差异蛋白集中在小分子与代谢物。而用RayBiotech芯片筛查到的结果，多是集中在细胞因子、趋化、血管、生长等等。 c)质谱筛查到355个蛋白，而RayBiotech抗体芯片也筛查到328个蛋白，且用定量芯片 验证25个蛋白有差异，这些蛋白是质谱找不到的。目前RayBiotech夹心法抗体芯片已经可以检测到1000个蛋白，采用双抗夹心法，尤其是对于低丰度蛋白，有很好的灵敏度和特异性，很多的低丰度蛋白是抗体芯片可以检测出来，而质谱检测不到的，且样品不经过变性和前处理，保持天然状态的样品直接检测，对于蛋白的检测准确度高。 d)质谱的重复性一直是质谱工作者纠结的问题，不同操作者的结果，不同样品处理条件， 峰值的偏移等影响因素都会产生大的影响；RayBiotech的夹心法芯片重复性高。

断奶仔猪腹泻原因及防控措施

断奶仔猪腹泻原因及防控措施 发表时间：2019-07-23T16:06:38.093Z 来源：《基层建设》2019年第13期作者：彭超 [导读] 摘要：仔猪断奶腹泻是目前我国生猪养殖过程中经常会遇到的现象之一，一般情况下，断奶仔猪产生腹泻与早期断奶有直接关系，同时也会在一定程度上影响到仔猪的整体存活率以及今后的健康成长。 普洱市景谷县正兴镇农业服务中心 摘要：仔猪断奶腹泻是目前我国生猪养殖过程中经常会遇到的现象之一，一般情况下，断奶仔猪产生腹泻与早期断奶有直接关系，同时也会在一定程度上影响到仔猪的整体存活率以及今后的健康成长。基于此，本文对断奶仔猪腹泻原因及防控措施进行了探索分析，并且给出了笔者自己的看法。 关键词：断奶仔猪；腹泻原因；防控措施 很多生猪养殖户为了追求更高的经济效益，会推行并且落实早期仔猪断奶技术，通常情况下，会将仔猪断奶时间控制在21到28日龄，对于一些猪场或者是生猪养殖户而言，应用早期断奶技术可以有效提升自身的经济效益[1]。但是，当对仔猪实行早期断奶技术应用之后，仔猪很容易受到一些外界环境因素的影响，从而导致仔猪容易出现生理机能紊乱的情况，其主要表现为食量少以及消化不良等等症状，并且经常会导致仔猪腹泻的现象出现，严重的仔猪甚至会出现变成僵猪，然后死亡的现象，这会给生猪养殖化带来严重的经济损失。 一、断奶仔猪腹泻的原因分析 （一）仔猪消化机能受到了影响 对于早期断奶之后的仔猪而言，其多项生理机能都会受到一定的影响，尤其会对仔猪的消化机能产生严重的影响，会致使仔猪的胃分泌盐酸量减少。如果仔猪过早出现断奶的情况，则失去了母乳乳糖所产生的乳酸，胃内的ph值会出现升高的情况，并且很容易被饲料中的蛋白质物质抗原损伤，从而引起仔猪出现腹泻的现象。 （二）仔猪的消化酶活性降低 对于仔猪而言，其自身的消化酶活性是非常重要的，如果其体内消化酶的活性会出现急剧降低的情况，这也势必会导致其对饲料的消化能力下降，从而引起仔猪消化不良的现象产生，这是导致仔猪出现腹泻的重要原因之一。 （三）断奶后仔猪自身的免疫力会受到一定的影响 当仔猪早期断奶之后，其身体机能势必会受到一定的影响，母乳中含有大量的病原抗体，对仔猪的健康成长会有很大的帮助。一旦仔猪进行早期断奶之后这些抗原就不会出现抗原的供应，对于20日龄左右的仔猪来说，自身所产生的抗体数量仍然较为有限，并且仔猪的抗病能力较弱，很容易受到外界因素的影响，从而引起消化不良的现象出现，这对仔猪今后的健康成长也是有很大负面影响[2]。 （四）断奶后仔猪胃肠道的菌群会出现紊乱的情况 对于在哺乳期间的仔猪来说，仔猪胃肠道中会产生大量的乳酸菌等物质，并且其内部建立起了良好的微生物群关系。当仔猪突然断奶之后，身体内部的运转模式以及机体对于应用的摄取程度并不会很快发生改变，这也就在一定程度上导致了营养的供应不能够满足机体的需求[3]。当仔猪断奶之后，其胃内的ph值也会出现上升的情况，并且有益菌的数量会大幅度减少，大肠杆菌数量会增加，肠道内的整体细菌环境也会发生很大的改变，这种变化也会在很大程度上导致仔猪出现腹泻的现象。 （五）饲料的搭配供给不合理 对于仔猪而言，饲料的喂食搭配是非常重要的，饲料当中含有大量的抗原物质，当其进入消化道之后，势必会对消化道的黏膜免疫系统产生一定的影响，会使其发生超敏反应，从而导致肠道受损伤的情况经常出现。此外，当仔猪使用发霉的饲料之后，饲料中的毒素会在短时间之内作用到仔猪的消化机能当中，这就会致使仔猪出现腹泻的现象。当青绿饲料含量过多的时候，也会在很大程度上引起仔猪出现腹泻的情况，同时还会使仔猪的身体机能下降，出现厌食的情况。 二、断奶仔猪腹泻的防控 目前，我国生猪的养殖规模正在不断扩大，并且我国生猪市场也愈加红火，早期断奶仔猪腹泻是多种因素所共同导致的，在对其采取防控手段的时候，也应该综合考虑到不同原因的防控方式存在何种差别，这样才能够使防控的效果达到最佳。 （一）对仔猪进行提早诱食 通常情况下，当仔猪出生5到7日龄之后，仔猪就开始长牙，并且由于仔猪具有牙龈发痒的习性，这时候养殖户可以利用香甜并且容易消化的食物对仔猪进行诱导进食，这样可以有效达到促进仔猪胃肠功能发育的作用，使仔猪的消化能力得到逐渐增强[4]。同时，相关生猪养殖人员还应该在这期间不定时给仔猪断奶，从而在一定程度上降低仔猪对母乳的依赖性。 （二）逐渐对仔猪进行断奶尝试 对于仔猪来说，在对其进行断奶的时候，应该是一个循序渐进的过程，不能突然断奶，这样仔猪的成长很容易受到影响。在仔猪正式断奶的前5天开始，养殖人员应该尝试对仔猪进行断奶，减少每日对仔猪的哺乳次数，从而使仔猪逐渐适应这样的饮食。 （三）赶母留仔 当仔猪成长到一定阶段的时候——通常在15日龄左右，这时候应该将尝试将母猪与仔猪进行分离饲养，从而起到逐渐降低仔猪对于母猪的依赖性。同时逐渐将母猪与仔猪的成长环境进行隔离也可以有效起到促进仔猪对周围环境适应的作用，如果仔猪长期在母猪身边成长、进食，势必会对母猪产生较强的依赖性，同时也不利于养殖人员对其进行管理。 （四）提供适应仔猪成长的环境 对于仔猪的成长而言，环境因素是非常重要的，同时也是保证仔猪健康成长的基础。对于刚断奶不久的仔猪而言，其身体素质较差，很容易受到外界环境因素的影响。在对刚断奶的仔猪进行养殖的时候，首先应该对猪舍的温度进行精准控制，通常情况下应该将温度控制在21℃~25℃之间，这样更加有利于生猪的健康成长。此外，生猪饲养人员还应该对猪舍内部的卫生进行保证，应该定期对仔猪社展开清理工作，并且要定期对猪舍进行消毒，这样可以使猪舍内部的微生物病源得到有效减少[5]。最后，相关饲养人员还应该做好猪舍的通风工作，保证猪舍内部可以做到冬暖夏凉，使得空气更加通畅，这对生猪的成长也有很大的促进作用。 （五）注意提升断奶仔猪料的品质 对于刚刚断奶的仔猪来说，正是需要营养补充的时候，如果仔猪饲料的品质较差，势必会对仔猪成长差生负面影响。要给仔猪供应高

仔猪营养性腹泻的六大因素

仔猪营养性腹泻的六大因素 饲料中粗蛋白的含量过高?断奶仔猪消化道及其酶系统发育尚未健全，导致日粮中蛋白质的消化率低下和必需氨基酸的比例不平衡。特别是在饲粮粗蛋白水平较高的情况下，较多的饲粮蛋白质进入大肠发生腐败分解，产生多量的尸胺、腐胺等毒性胺类物质，继而对肠壁组织造成损害，使肠道的蠕动加快和分泌增加，结肠对水分的吸收能力减弱，同时还使小肠绒毛水肿，最终引起消化不良性腹泻。而且研究还表明,日粮蛋白质本身并非唯一起作用的因素,还存在着某些蛋白质的致变态的反应。一些专家学者指出,仔猪肠道对日粮抗原过敏从而导致肠道损伤是断奶后腹泻的主要原因。仔猪断奶后的过敏性腹泻与饲粮蛋白质种类有关，其中植物性蛋白是引起仔猪肠道发生过敏反应的重要抗原物。 电解质不平衡 电解质平衡在仔猪渗透压、酸碱平衡、水盐代谢方面起重要作用，其与仔猪消化不良、腹泻等有密切关系。饲粮中的电解质平衡可直接影响仔猪体内和消化道内的电解质平衡,因此饲料中的电解质不平衡极易造成仔猪体内和消化道内电解质的不平衡，最终导致仔猪腹泻。 日粮的PH值过高 断奶仔猪本身就因胃底腺不发达，胃与神经系统之间的联系尚未完全建立，胃腺功能差，导致胃内PH值较高，如果日粮中PH值过高更会导致胃内酸度下降，为病原菌提供适宜的生存环境，进而大量繁殖，引起肠壁发炎、水肿,消化吸收能力降低,大量水分和营养物质被排出肠腔，从而引起仔猪腹泻、脱水、甚至死亡。 有毒物质和抗营养物?饲料氧化酸败、发霉变质，过期失效，微量元素超标，含有毒物质(如棉酚、芥酸、单宁等)等都有可能引发仔猪腹泻。而且，饲喂过多的轻泻性原料仔猪也会发生腹泻。 维生素的缺乏 维生素是猪的重要营养成分之一，它不仅可作为猪体内许多酶的辅酶,参与生命活动,而且可以直接或间接影响猪生长、器官和组织的发育。维生素缺乏可引起一系列缺乏症,其中能引起仔猪腹泻的主要有：维生素B1、维生素B2、维生素ＰＰ和泛酸的缺乏。维生素B１作为α-酮酸氧化脱氢酶系的辅酶可参与糖代谢,其缺乏可出现糖代谢障碍，导致代谢中间产物(丙酮酸、乳酸等）的堆积,进而影响能量供应。仔猪临床表现为：呕吐、腹泻、生长停滞。维生素B2则作为生物体内的辅酶参与氧化,缺乏时，仔猪表现为:呕吐、肛门粘膜炎症并伴有腹泻等。可促进铁吸收和红细胞生成的维生素PP的缺乏,可引起蛋白质、脂肪和糖类的代谢障碍，导致慢性消化不良，甚至造成弥漫性肠炎而发生腹泻。泛

知识十六 主要蛋白质的理化性质、功能、临床意义.

知识十六主要蛋白质的理化性质、功能、临床意义 教学目的： 1、熟悉血浆蛋白质的理化性质、功能与临床意义； 2、掌握个别血浆蛋白质特别是血浆中的白蛋白、前白蛋白的临床意义； 3、了解疾病时血浆蛋白质的变化等。 重点：个别血浆蛋白质特别是血浆中的白蛋白、前白蛋白的临床意义。 难点：血浆蛋白质测定的临床意义；疾病时血浆蛋白质的变化。 教学方法和手段：课堂讲授为主，多媒体教学为辅，课堂提问突出重点。 授课时数：1学时 教学内容及组织： 一、血浆蛋白质的组成及功能 血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右，目前已经研究的血浆蛋白质有300多种，分离出的纯品约100来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞合成，主要功能。 1. 维持血浆胶体渗透压；清蛋白。 2. 作为某些物质的载体，起运输作用；如清蛋白能与多种物质结合（FA、胆红素），某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能，运铁蛋白、运皮质醇蛋白。 3. 维持体液pH恒定；血浆蛋白pI一般都小于7.4是弱酸，一部分以弱酸盐形式存在，构成缓冲对。 4. 免疫功能；血浆中许多具有免疫功能的球蛋白，主要由浆细胞合成，电泳时位于γ区带，如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE，此外，还有具有免疫作用的非特异球蛋白，如补体。 5. 凝血与纤溶作用；凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质，它们促进血液凝固，防止血液流失和溶解血栓，防止重要脏器的动脉栓塞。 6. 营养作用；血浆蛋白质可分解成AA，用于合成组织蛋白或氧化供能。 7. 催化作用；血浆中有许多酶类，其中部分在血浆中发挥作用，称血浆功能性酶，如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。 二、个别血浆蛋白质 （一）前白蛋白（prealbumin，PA）分子量5.4万，由肝细胞合成，电泳时移动速度较白蛋白快，位于其前方面得名，半寿期短12h，PA是一类运载蛋白，一种能与甲状腺素结合，称为甲状腺结合蛋白，一种能与VitA结合，称为VitA 结合蛋白，常用测定方法是免疫学方法，正常参与范围0.2～0.4g /L,急性炎症，

断奶仔猪腹泻的防治措施讲课稿

断奶仔猪腹泻的防治 措施

断奶仔猪腹泻的防治措施 在现代规模化养猪生产中，因各种应激因采的影响，断奶仔猪一般腹泻率在20%～30%左右，病死率达10%～15%，发病仔猪生长迟缓，形成僵猪，甚至死亡，给养猪生产带来了巨大的经济损失。实行仔猪早期断奶(3～5周龄)，是国内外集约化养猪生产中普遍采用的一项先进技术，它是提高养猪经济效益的有效措施。但在实际生产中，早期断奶仔猪由于受到疾病感染、饲粮、环境、饲养管理等各种因素的影响，发生腹泻又是最为常见的，它不仅影响到仔猪的生长，而且极易造成死亡，即使是耐过的仔猪，也会造成发育不良,甚至形成僵猪，严重制约养猪业的发展。因此，探讨该病发生的原因及有效的防治措施，具有十分重要的实际意义。 （一）断奶仔猪腹泻的原因： 1.环境变化环境应激，如舍内的温差超过10℃时，腹泻率就会增加25%～30%。湿度过高，也会增加腹泻的次数。 2.饲养方式不当如过度限饲或过度饲喂都会引起饥饿性和多食性腹泻。 3.消化机能不全仔猪胃内由于胃酸不足，pH值升高，胃蛋白酶形成减少，对饲料中蛋白质的消化率降低，消化不完全的饲料和胃肠道pH值上升，都为肠内致病性大肠杆菌及有害病源微生物的繁殖提供了有利条件，而乳酸菌的生长受到抑制，形成消化不良而发生腹泻。 4.免疫力下降由于母源抗体水平下降，而仔猪自身的免疫系统发育还不完全、再加上环境、饲料变化等一系列应的反应，使原来不健全的免疫系统有所降低。这样仔猪对抗病的抵抗力就非常脆弱，致病性大肠杆菌和其他有害微生物就会很容易侵入，导致仔猪腹泻的发生。 5．病毒性腹泻主要是传染性胃肠炎、流行腹泻和轮状病毒感染。以呕吐、水样腹泻和脱水为特征，粪便腥臭、混有气泡、凝乳块或未消化的饲料。10日龄以内的仔猪发病率和死亡率比较高，病死仔猪尸体明显脱水，剖检可见肠系膜充血，淋巴结肿胀，胃底黏膜轻度充血，肠内充满白色或黄绿色液体。 6.寄生虫性腹泻以球虫、蛔虫引起的腹泻较为多见，发生于20日龄以上的猪只，一般呈慢性经过，通常伴有食欲不振、咳嗽、呼吸困难、贫血等症状，有的便秘和腹泻交替出现，或有体温升高。病猪发育不良，衰竭死亡或成为“僵猪”。作初步的诊断。怀疑寄生虫引起的，可收集粪便作病原培养或作虫卵检查。 （二）仔猪腹泻的综合防治措施 1.加强饲养管理，减少断奶应激引起仔猪腹泻的应激因素主要有心理应激、环境应激和营养性应激。减少断奶应激的措施是：⑴ 控制仔猪舍内温度；保持舍内卫生及干燥。⑵ 提早补料；一般于7日龄开始补料，可使仔猪断奶前消化系统能适应植物性饲料，胃肠消化机能得到加强，从而减少营养性应激的

断奶仔猪腹泻的原因与防治

动物医学熊杰内容摘要： 仔猪从出生到断奶经历了大量的应激，包括各种微生物、饲养环境、温度、断奶、日粮转变等。随着日粮等改变，其肠道微环境发生相应改变，主要是微生物种类和数目发生转变，肠道生理结构和功能也发生一系列改化。在上述条件不稳定的情况下，伴随着方方面面的刺激，都可能造成小猪在哺乳期间和断奶前后发生各种腹泻，本文从病原性因素、生理性因素、饲料、应激、以及环境等因素出发，分析了断奶仔猪腹泻发生的原因，从免疫、饲料营养、饲养管理等角度提出了一些综合性预防措施，并讨论了治疗断奶仔猪腹泻的方法。 关键词：断奶仔猪腹泻病因预防治疗 目前，断奶仔猪腹泻是最常见、最严重的仔猪疾病之一，也是引起断奶仔猪死亡的重要原因。断奶仔猪腹泻在养猪业中危害居首，导致仔猪成活率降低，饲料报酬降低，生长缓慢，生长发育停滞甚至形成僵猪；同时由于腹泻导致体质下降，免疫力降低，对疾病的抵抗力减弱，容易继发感染其他疾病，严重威胁养猪业的健康发展。本文对断奶仔猪腹泻的原因及其防治方法做一综述。 一、发病原因 病原性因素 病原微生物的感染是造成断奶仔猪腹泻的主要原因之一，由细菌感染引起的腹泻常见有致病性大肠杆菌及沙门氏菌感染引起的腹泻；由病毒感染引起的腹泻主要有轮状病毒感染、冠状病毒感染引起的猪

传染性胃肠炎和猪流行性腹泻。 1 细菌性腹泻 病原性大肠杆菌是最主要的病原之一，大肠杆菌为消化道内的常在菌，早期寄生于仔猪的结肠内。在哺乳期，由于母乳抗体及乳中其他抑制物抑制了大肠杆菌的繁殖，仔猪一般不发生本病。当仔猪断奶后，肠道消化酶下降，对饲料营养物质消化吸收能力下降，蛋白质在肠道后段腐败发酵增多, 加上母源抗体供应中断，免疫力下降，这就容易引起感染造成腹泻。同时，断奶应激还会使循环抗体水平降低，抑制细胞免疫力和免疫水平，引起仔猪抗病力弱，这也为致病性大肠杆菌、沙门氏菌的大量入侵和繁殖提供了条件。 2病毒性腹泻 当仔猪感染冠状病毒、轮状病毒时，病毒侵袭细胞，使受感染的细胞变性、坏死，随着肠绒毛细胞损害程度的增加，腹泻的严重性增加。当病毒侵袭整个小肠时，引起小肠破损程度增加，发生破损后，小肠的吸收能力大幅度下降，液体排出量增加，肠内大量未被吸收的固体物质自身吸附水分，以保持肠内渗透压的平衡，从而进一步加重腹泻的危害。仔猪断奶后失去母源抗体的保护，一旦饲养管理不善，易发生传染性胃肠炎性腹泻，尤以冬春季节多发，气温突降是诱因生理性因素 1 胃酸分泌不足 胃肠酸性低出生仔猪胃酸分泌量低，且缺乏游离盐酸，一般从20天开始才有少量游离盐酸出现，以后随年龄增加。仔猪至少在2

仔猪断奶引发的营养性腹泻

仔猪断奶引发的营养性腹泻 早期断奶仔猪由于受心理、环境、营养应激等因素的影响，导致仔猪断奶后易发生消化机能紊乱，出现腹泻。而腹泻会导致仔猪生长受阻，饲料利用率降低，免疫力下降，抗病力差等，严重时甚至死亡，给养猪生产造成巨大的经济损失。近20多年的研究表明，日粮营养因素是引起仔猪腹泻的主要原因。本文主要从断奶任猪的营养生理特点出发，阐述断奶仔猪营养性腹泻产生的原因及其防治措施。 断奶仔猪营养生理特点 1．代谢机能旺盛，相对生长迅速仔猪物质代谢旺盛，生长快，20日龄仔猪体重为初生时的4．5倍，每千克体增重的蛋白质沉积量为9g一14g，而成年猪每千克体增重沉积的蛋白质仅为0．3g―O．4g，前者是后者的30倍一35倍。仔猪60日龄体重为初生重的15．7倍，钙、磷代谢也旺盛，每千克增重含7g一9g钙，4g一5g磷。因此，仔猪单位体重所需养分高，且对日粮营养物质的要求也高。 2．消化系统发育不成熟断奶仔猪消化道的重量和容积较小，且发育不完全。消化器官随日龄的增长而增长，如：初生时胃的重量约4g 一8g，仅为成年猪的1％左右；直到约50kg体重时才接近成年猪的重量。其它消化器官变化规律类似。 3．消化酶系发育不健全，消化酶分泌不足新生仔猪主要分泌胰脂肪酶、乳糖酶和几种蛋白酶用于母乳的消化，0―25日龄乳糖酶的活性很高，但麦芽糖酶和蔗糖酶分泌量较少，21日龄前淀粉酶分泌量也不足，且3周龄仔猪的其它酶(如胰蛋白酶、淀粉酶等)含量通常少于成熟

酶体系消化酶含量的50％，从而导致早期断奶仔猪对植物性蛋白和淀粉的消化率较低。因此，选择仔猪补料的原料时，必须充分考虑原料的可消化性，使之与仔猪所分泌的酶相一致。 4．胃酸分泌不足，胃肠道微生物区系易变初生仔猪胃酸分泌量低，断奶前主要通过母乳中的乳糖发酵产生的乳酸来维持胃内酸度。断奶后由于饲料中乳糖含量的大大降低，导致乳酸产量下降，使胃内总酸度较低。同时，由于饲料中的一些蛋白质及无机阳离子也会与胃酸结合，**终导致仔猪对蛋白质的消化障碍及仔猪胃肠道病原微生物的大量繁殖，进而破坏仔猪消化道内微生物区系的平衡，导致仔猪腹泻。仔猪胃肠道内微生物区系随年龄增长有一定变化，但只要仔猪处于健康状态，各部分菌群达到平衡；而断奶仔猪阶段，正是肠道微生物区系中菌群种类和数量易变化的阶段，此时，微生物区系很脆弱，易发生微生物区系的平衡火惆。 5．体温调节能力差由王仔猪被毛稀疏，皮下脂肪很少，且没有对哺乳动物的体温调节起重要作用的褐色脂肪，隔热能力差，再加上大脑皮层发育不健全，对各系统机能的协调能力差，导致仔猪体温调节机制不健全，易受冷、热应激的影响，尤其是冷应激对新生仔猪影响更严重。因此，生产中要加强早期断奶仔猪的防寒保暖工作，以降低仔猪腹泻发生率。 仔猪营养性腹泻产生的原因 1．采食量由于上述营养生理特点的限制，仔猪断奶后通常不能适应饲料由易消化且营养价值高的液体的母乳向以植物性饲料为主、难消化的固体仔猪料的转变，且由于断奶等应激因素的影响，造成仔猪在断奶后1d一2d拒食、少食，而2d一3d后由于饥饿便大量进食，短时间内食入的大量营养物质在仔猪消化道内难以消化，造成消化迟滞。

断奶仔猪腹泻原因与防治

断奶仔猪腹泻原因与防治--天津正大朱显金 很多养殖户反映，小猪断奶后，一般拉稀7-10天，不但不长，而且奶膘掉得厉害，让人头疼。对于这个问题，我们首先从拉稀原因分析，然后早提出防治方案。 一、断奶原因分析 1、断奶后母仔分离应激 断奶后仔猪从分娩栏到保育栏，母仔分离，使仔猪失去了母猪的爱抚和保护，由依附母猪生活变成了仔猪独自生活，并且断奶后仔猪重新组群并窝，仔猪间相互争斗撕咬，再加上温度变化、环境的变化，引起仔猪的较强的应激而发生倡导功能的紊乱，进而引起腹泻。 2、日粮的改变 断奶前仔猪主要以母乳为主，采食饲料为辅，而断奶后完全要从饲料中吸取营养。由于母乳中含有丰富的脂肪和易于消化的酪蛋白。碳水化合物是以乳糖为主，不含淀粉和纤维。而断奶后仔猪离开母乳，不能从母乳中获得蛋白质，而是来源于饲料中的植物蛋白质，碳水化合物以淀粉和多糖为主，不含乳糖，脂肪含量低，并在饲料中含有仔猪几乎不能消化的粗纤维，因而使得仔猪发生腹泻。 3、消化机能不全 断奶仔猪胃肠功能不健全，消化酶不足的应激。仔猪断奶进入保育期，从吃母乳变成了以饲料为主，加上断奶应激，降低了消化酶的水平。据资料表明，断

奶后1周各种消化酶活性降低到断奶前水平的1/3。使本来就不足的酶含量更少，影响营养成份的消化和吸收，因而导致腹泻 4、胃肠道酸性环境的变化 断奶前，仔猪主要是吃母乳，母乳进入胃肠道后，会分解成乳酸，使胃肠道PH值较低，呈酸性环境。断奶后，仔猪胃内由于胃酸不足，PH值升高，胃蛋白酶形成减少，对饲料中蛋白质的消化率降低，消化不完全的饲料为小肠内致病性大肠杆菌及有害病源微生物的繁殖提供了有利条件，而乳酸杆菌的生长受到抑制，形成了消化不良而发生腹泻。 5、缺铁性贫血性下痢 哺乳阶段，仔猪可以从母乳中获得一部分铁元素，断奶后，部分仔猪吃料少或干脆不吃料，引起铁元素缺乏，进而引起红细胞合成受阻，引起下痢。 6、疾病问题 可以起断奶下痢的致病微生物主要是大肠杆菌、沙门氏菌、梭菌、猪瘟、传染性胃肠炎等。 7、免疫功能低 由于精神、环境、饲料等一系列应激反应，在断奶后，使原本不健全的免疫系统此时又有所降低，降低了仔猪对疾病的抵抗力，致病性大肠杆菌和其它有害微生物容易侵入导致仔猪腹泻的发生。 二、预防措施。 1、加强母猪饲养管理 仔猪在哺乳期间，应加强母仔猪的饲养管理，保持良好的环境卫生、温度条

蛋白质的性质和分类

蛋白质凭借游离的氨基和羧基而具有两性特征，在等电点易生成沉淀。不同的蛋白质等电点不同，该特性常用作蛋白质的分离提纯。生成的沉淀按其有机结构和化学性质，通过pH的细微变化可复溶。蛋白质的两性特征使其成为很好的缓冲剂，并且由于其分子量大和离解度低，在维持蛋白质溶液形成的渗透压中也起着重要作用。这种缓冲和渗透作用对于维持内环境的稳定和平衡具有非常重要的意义。 在紫外线照射、加热煮沸以及用强酸、强碱、重金属盐或有机溶剂处理蛋白质时，可使其若干理化和生物学性质发生改变，这种现象称为蛋白质的变性。酶的灭活，食物蛋白经烹调加工有助于消化等，就是利用了这一特性。 (二)蛋白质的分类 简单的化学方法难于区分数量庞杂、特性各异的这类大分子化合物。通常按照其结构、形态和物理特性进行分类。不同分类间往往也有交错重迭的情况。一般可分为纤维蛋白、球状蛋白和结合蛋白三大类。 1.纤维蛋白包括胶原蛋白、弹性蛋白和角蛋白。 (1) 胶原蛋白胶原蛋白是软骨和结缔组织的主要蛋白质，一般占哺乳动物体蛋白总量的30%左右。胶原蛋白不溶于水，对动物消化酶有抗性，但在水或稀酸、稀碱中煮沸，易变成可溶的、易消化的白明胶。胶原蛋白含有大量的羟脯氨酸和少量羟赖氨酸，缺乏半胱氨酸、胱氨酸和色氨酸。 (2) 弹性蛋白弹性蛋白是弹性组织，如腱和动脉的蛋白质。弹性蛋白不能转变成白明胶。 (3) 角蛋白角蛋白是羽毛、毛发、爪、喙、蹄、角以及脑灰质、脊髓和视网膜神经的蛋白质。它们不易溶解和消化，含较多的胱氨酸(14-15%)。粉碎的羽毛和猪毛，在15-20磅蒸气压力下加热处理一小时，其消化率可提高到70-80%，胱氨酸含量则减少5-6%。 2.球状蛋白 (1) 清蛋白主要有卵清蛋白、血清清蛋白、豆清蛋白、乳清蛋白等，溶于水，加热凝固。 (2) 球蛋白球蛋白可用5-10%的NaCl溶液从动、植物组织中提取；其不溶或微溶于水，可溶于中性盐的稀溶液中，加热凝固。血清球蛋白、血浆纤维蛋白原、肌浆蛋白、豌豆的豆球蛋白等都属于此类蛋白。 (3) 谷蛋白麦谷蛋白、玉米谷蛋白、大米的米精蛋白属此类蛋白。不溶于水或中性溶液，而溶于稀酸或稀碱。 (4) 醇溶蛋白玉米醇溶蛋白、小麦和黑麦的麦醇溶蛋白、大麦的大麦醇溶蛋白属此类蛋白。不溶于水、无水乙醇或中性溶液，而溶于70-80%的乙醇。 (5) 组蛋白属碱性蛋白，溶于水。组蛋白含碱性氨基酸特别多。大多数组蛋白在活细胞中与核酸结合，如血红蛋白的珠蛋白和鲭鱼精子中的鲭组蛋白。 (6) 鱼精蛋白鱼精蛋白是低分子蛋白，含碱性氨基酸多，溶于水。例如鲑鱼精子中的鲑精蛋白、鲟鱼的鲟精蛋白、鲱鱼的鲱精蛋白等。鱼精蛋白在鱼的精子细胞中与核酸结合。 球蛋白比纤维蛋白易于消化，从营养学的角度看，氨基酸含量和比例也较纤维蛋白更理想。 3. 结合蛋白 结合蛋白是蛋白部分再结合一个非氨基酸的基团(辅基)。如核蛋白(脱氧核糖核蛋白、核糖体)，磷蛋白(酪蛋白、胃蛋白酶)，金属蛋白(细胞色素氧化酶、铜蓝蛋白、黄嘌呤氧化酶)，脂蛋白(卵黄球蛋白、血中β1-脂蛋白)，色蛋白(血红蛋白、细胞色素C、黄素蛋白、视网膜中与视紫质结合的水溶性蛋白)及糖蛋白(γ球蛋白、半乳糖蛋白、甘露糖蛋白、氨基糖蛋白)。

质谱技术在蛋白质组学研究中的应用_甄艳

第35卷　第1期2011年1月 南京林业大学学报(自然科学版) J o u r n a l o f N a n j i n g F o r e s t r y U n i v e r s i t y (N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n ) V o l .35,N o .1 J a n .,2011 h t t p ://w w w .n l d x b .c o m [d o i :10.3969/j .i s s n .1000-2006.2011.01.024] 　收稿日期:2009-12-31 修回日期:2010-10-26 　基金项目:国家自然科学基金项目(31000287);江苏省高校自然科学基础研究项目(10K J B 220002)　作者简介:甄艳(1976—),副教授,博士。＊施季森(通信作者),教授。E -m a i l :j s h i @n j f u .e d u .c n 。 　引文格式:甄艳,施季森.质谱技术在蛋白质组学研究中的应用[J ].南京林业大学学报:自然科学版,2011,35(1):103-108. 质谱技术在蛋白质组学研究中的应用 甄　艳,施季森 ＊ (南京林业大学,林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室,江苏　南京　210037) 摘要:随着蛋白质组学研究的迅速发展,质谱技术已成为应用于蛋白质组学研究中的强有力工具和核心技术。质谱技术的先进性在于为蛋白质组学研究提供的通量和分子信息。笔者重点概述了基于质谱路线的蛋白质组学研究,介绍了基于质谱的定量蛋白质组学﹑翻译后修饰蛋白质组学、定向蛋白质组学、功能蛋白质组学以及基于串联质谱技术的蛋白质组学数据解析的研究 进展。 关键词:质谱;蛋白质组学;定量蛋白质组学;翻译后修饰;定向蛋白质组学;功能蛋白质组学中图分类号:Q 81 文献标志码:A 文章编号:1000-2006(2011)01-0103-06 A p p l i c a t i o n o f m a s s s p e c t r o m e t r y i n p r o t e o m i c s s t u d i e s Z H E NY a n ,S H I J i s e n ＊ (K e y L a b o r a t o r y o f F o r e s t G e n e t i c s a n d B i o t e c h n o l o g y M i n i s t r y o f E d u c a t i o n , N a n j i n g F o r e s t r y U n i v e r s i t y ,N a n j i n g 210037,C h i n a ) A b s t r a c t :W i t ht h e r a p i d d e v e l o p m e n t o f p r o t e o m i c s ,m a s s s p e c t r o m e t r y i s m a t u r i n g t o b e a p o w e r f u l t o o l a n dc o r e t e c h -n o l o g y f o r p r o t e o m i c s s t u d i e s d u r i n g t h e r e c e n t y e a r s .T h e s u p e r i o r i t y o f m a s s s p e c t r o m e t r y l i e s i n p r o v i d i n g t h e t h r o u g h -p u t a n d t h e m o l e c u l a r i n f o r m a t i o n ,w h i c hn o o t h e r t e c h n o l o g y c a n b e m a t c h e di np r o t e o m i c s .I nt h i s r e v i e w ,w e m a d e a g l a n c e o n t h e o u t l i n e o f m a s s s p e c t r o m e t r y -b a s e d p r o t e o m i c s .A n dt h e nw e a d d r e s s e d o n t h e a d v a n c e s o f d a t a a n a l y s i s o f m a s s s p e c t r o m e t r y -b a s e dp r o t e o m i c s ,q u a n t i t a t i v em a s ss p e c t r o m e t r y -b a s e dp r o t e o m i c s ,p o s t -t r a n s l a t i o n a l m o d i f i c a t i o n s b a s e d m a s s s p e c t r o m e t r y ,t a r g e t e d p r o t e o m i c s a n df u n c t i o n a l p r o t e o m i c s b a s e d -m a s s s p e c t r o m e t r y . K e yw o r d s :m a s ss p e c t r o m e t r y ;p r o t e o m i c s ;q u a n t i t a t i v ep r o t e o m i c s ;p o s t -t r a n s l a t i o n m o d i f i c a t i o n ;t a r g e t e d p r o -t e o m i c s ;f u n c t i o n a l p r o t e o m i c s 蛋白质组学(P r o t e o m i c s )是从整体水平上研究细胞内蛋白质的组成、活动规律及蛋白质与蛋白质的相互作用,是功能基因组学时代一门新的学科。目前蛋白质组学的研究主要有两条路线:一是基于双向电泳的蛋白质组学;二是基于质谱的蛋白质组学,其中基于双向电泳的蛋白质组学研究路线最终也离不开质谱技术的应用。自20世纪80年代末,两种质谱软电离方式即电喷雾电离(e l e c t r o s p r a y i o n i z a t i o n ,E S I )和基质辅助激光解析离子化(m a -t r i x a s s i s t e d l a s e r d e s o r p t i o n i o n i z a t i o n ,M A L D I )的发明和发展解决了极性大、热不稳定蛋白质和多肽分 析的离子化和分子质量大的测定问题[1] ,蛋白质组学研究中常用的质谱分析仪包括离子阱(i o n t r a p ,I T ),飞行时间(t i m e o f f l i g h t ,T O F ),串联飞行时间(T O F -T O F ),四级杆/飞行时间(q u a d r u p o l e /T O F h y b r i d s ),离子阱/轨道阱(I T /o r b i t r a ph y b r i d ) 和离子阱/傅里叶变换串联质谱分析仪(I T /F o u r i e r t r a n s f o r m i o n c y c l o t r o nr e s o n a n c em a s s s p e c t r o m e t e r s h y b r i d s ,I T /F T M S ),这些质谱仪具有不同的灵敏度、分辨率、质量精确度和产生不同质量的M S /M S 谱[2] 。质谱作为蛋白质组学研究的一项强有力的工具日趋成熟,并作为样品制备及数据分析的信息学工具被广泛地应用。因此,有学者指出质谱技术 已在蛋白质组学研究中处于核心地位[3] 。目前在通量及所包含的分子信息内容上,基于质谱的蛋白质组学技术在细胞生物学研究中可以鉴定和量化

断奶仔猪腹泻的原因与防治之令狐文艳创作

仔猪腹泻的原因与防治 令狐文艳 动物医学熊杰内容摘要： 仔猪从出生到断奶经历了大量的应激，包括各种微生物、饲养环境、温度、断奶、日粮转变等。随着日粮等改变，其肠道微环境发生相应改变，主要是微生物种类和数目发生转变，肠道生理结构和功能也发生一系列改化。在上述条件不稳定的情况下，伴随着方方面面的刺激，都可能造成小猪在哺乳期间和断奶前后发生各种腹泻，本文从病原性因素、生理性因素、饲料、应激、以及环境等因素出发，分析了断奶仔猪腹泻发生的原因，从免疫、饲料营养、饲养管理等角度提出了一些综合性预防措施，并讨论了治疗断奶仔猪腹泻的方法。 关键词：断奶仔猪腹泻病因预防治疗 目前，断奶仔猪腹泻是最常见、最严重的仔猪疾病之一，也是引起断奶仔猪死亡的重要原因。断奶仔猪腹泻在养猪业中危害居首，导致仔猪成活率降低，饲料报酬降低，生长缓慢，生长发育停滞甚至形成僵猪；同时由于腹泻导致体质下降，免疫力降低，对疾病的抵抗力减弱，容易继发感染其他疾病，严重威胁养猪业的健康发展。本文对断奶仔猪腹泻的原因及其防治方法做一综述。

一、发病原因 病原性因素 病原微生物的感染是造成断奶仔猪腹泻的主要原因之一，由细菌感染引起的腹泻常见有致病性大肠杆菌及沙门氏菌感染引起的腹泻；由病毒感染引起的腹泻主要有轮状病毒感染、冠状病毒感染引起的猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻。 1 细菌性腹泻 病原性大肠杆菌是最主要的病原之一，大肠杆菌为消化道内的常在菌，早期寄生于仔猪的结肠内。在哺乳期，由于母乳抗体及乳中其他抑制物抑制了大肠杆菌的繁殖，仔猪一般不发生本病。当仔猪断奶后，肠道消化酶下降，对饲料营养物质消化吸收能力下降，蛋白质在肠道后段腐败发酵增多, 加上母源抗体供应中断，免疫力下降，这就容易引起感染造成腹泻。同时，断奶应激还会使循环抗体水平降低，抑制细胞免疫力和免疫水平，引起仔猪抗病力弱，这也为致病性大肠杆菌、沙门氏菌的大量入侵和繁殖提供了条件。 2病毒性腹泻 当仔猪感染冠状病毒、轮状病毒时，病毒侵袭细胞，使受感染的细胞变性、坏死，随着肠绒毛细胞损害程度的增加，腹泻的严重性增加。当病毒侵袭整个小肠时，引起小肠破损程度增加，发生破损后，小肠的吸收能力大幅度下降，液体排出量增加，肠内大量未被吸收的固体物质自身吸附水分，以保持肠内渗透压的平衡，从而进一步加重腹泻的危害。仔猪断奶后失

小猪拉稀怎么治疗

小猪拉稀怎么治疗？ 小猪拉稀在养猪场很常见，那么小猪拉稀应该如何治疗呢？这是很多养猪人的疑问。本文，我们就为广大养殖户详细介绍一下。 首先，要想知道小猪拉稀怎么治疗，先要分清楚小猪拉稀的类型。最常见的小猪拉稀类型有：仔猪黄白痢、仔猪红痢、小猪病毒性腹泻、小猪营养性腹泻等几种。仔猪黄白痢是最常见的小猪腹泻类型，没有之一。不管是吃奶小猪黄白痢还是断奶仔猪黄白痢，不管是黄痢还是白痢，起罪魁祸首都是大肠杆菌。3-10日龄最常见的是黄痢，10-25日龄最常见的是白痢。治疗仔猪黄白痢，效果最好的方案是：利克太保+阿莫西林+硫酸粘菌素，饮水治疗。严重腹泻注射止泻的针剂。

当然，母猪做好产后消炎，小猪做好三针保健，做好保温工作等，可以很好的预防仔猪黄白痢。断奶之后的仔猪进入保育期，全程使用：保育太保，可以预防断奶仔猪腹泻，提高免疫力和抗应激能力，加快保育期生长速度。 仔猪红痢是由梭菌引起的腹泻，刚出生1-3日龄的仔猪最容易发生，1周龄以上的仔猪很少发病。仔猪红痢的典型症状是：粪便呈带血的红褐色，其中含有灰色组织碎片，液装稀粪。治疗仔猪红痢，可以使用：利克太保+阿莫西林+硫酸粘菌素，饮水治疗。严重的仔猪红痢，可以注射止泻的针剂+止血敏。

猪会发生病毒性的腹泻，小猪自然也不例外，常见的病毒性的腹泻有：流行性腹泻、传染性胃肠炎和轮状病毒感染。这种腹泻的典型症状是：拉水一样的粪便，颜色以灰色、黄绿色、黑色居多。因为是病毒性的腹泻，治疗理念从抗病毒+止泻两方面抓，饮水：利克太保+阿莫西林+硫酸粘菌素，拌料：蓝圆非太保。严重腹泻的注射头孢+黄芪多糖。

小猪营养性腹泻以小猪粪便中含有未消化的乳凝块或没有消化的饲料，这种腹泻常在母猪奶水“过硬”和保育仔猪换料时发生，猪吃了以后，营养成分没有完全吸收而被排出。预防和治疗小猪营养性腹泻，可以通过改善母猪和仔猪的饲料，或者在仔猪饲料中添加有益菌、维生素、微量元素等。比如给保育猪拌料：保育太保，为断奶的小猪，给母猪使用：母畜太保。 以上就是我们对于小猪常见腹泻的介绍，其中也介绍了各自的治疗方案。相信看了本文的养猪人，就不会再问小猪拉稀怎么治疗了吧！

断奶仔猪腹泻的原因

断奶仔猪腹泻的病因及防治 摘要：目前，断奶仔猪腹泻是最常见、最严重的仔猪疾病之一，也是引起断奶仔猪死亡的重要原因。断奶仔猪腹泻在养猪业中危害居首，导致仔猪成活率降低，饲料报酬降低，生长缓慢，生长发育停滞甚至形成僵猪；同时由于腹泻导致体质下降，免疫力降低，对疾病的抵抗力减弱，容易继发感染其他疾病，严重威胁养猪业的健康发展。本文从病原性因素、生理性因素、饲料、应激、以及环境等因素出发，分析了早期断奶仔猪腹泻发生的原因，从免疫、饲料营养、饲养管理等角度提出了一些综合性预防措施，并讨论了治疗断奶仔猪腹泻的方法。关键词：断奶仔猪，腹泻，病因，预防，治疗 1、断奶仔猪腹泻的病因 1.1 病原性因素 病原微生物的感染是造成断奶仔猪腹泻的主要原因之一，由细菌感染引起的腹泻常见有致病性大肠杆菌及沙门氏菌感染引起的腹泻；由病毒感染引起的腹泻主要有轮状病毒感染、冠状病毒感染引起的猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻。一些科学家们指出：轮状病毒和特定的大肠杆菌菌群的联合感染才是腹泻最主要的病因[1]。 1.1.1 细菌性腹泻 病原性大肠杆菌是最主要的病原之一，大肠杆菌为消化道内的常在菌，早期寄生于仔猪的结肠内。在哺乳期，由于母乳抗体及乳中其他抑制物抑制了大肠杆菌的繁殖，仔猪一般不发生本病。当仔猪断奶后，肠道消化酶下降，对饲料营养物质消化吸收能力下降，蛋白质在肠道后段腐败发酵增多, 加上母源抗体供应中断，免疫力下降，这就容易引起感染造成腹泻。同时，断奶应激还会使循环抗体水平降低，抑制细胞免疫力和免疫水平，引起仔猪抗病力弱，这也为致病性大肠杆菌、沙门氏菌的大量入侵和繁殖提供了条件。 1.1.2 病毒性腹泻 当仔猪感染冠状病毒、轮状病毒时，病毒侵袭细胞，使受感染的细胞变性、坏死，随着肠绒毛细胞损害程度的增加，腹泻的严重性增加。当病毒侵袭整个小肠时，引起小肠破损程度增加，发生破损后，小肠的吸收能力大幅度下降，液体排出量增加，肠内大量未被吸收的固体物质自身吸附水分，以保持肠内渗透压的平衡，从而进一步加重腹泻的危害。仔猪断奶后失去母源抗体的保护，一旦饲养管理不善，易发生传染性胃肠炎性腹泻，尤以冬春季节多发，气温突降是诱因[2]。 1.1.3 痢疾密螺旋体腹泻 痢疾密螺旋体主要侵害大肠。其侵入大肠上皮细胞，尤其是杯状细胞，可造成糜烂，加快细胞更新，使大肠粘膜发生出血性炎症。在生理功能上，该螺旋体干扰液体和电解质的吸收，并造成黏液分泌亢进，吸收机能丧失而引发腹泻。 1.2 生理性因素 1.2.1 胃酸分泌不足 仔猪分泌胃酸的能力很弱，只有胃内pH值低于4时才有利于蛋白质的消化，能使大量病菌灭活。母乳中含有丰富的乳糖，可被胃中乳酸杆菌分解成乳酸，成为哺乳仔猪胃酸的主要来源。所以尽管哺乳仔猪分泌胃酸能力很弱，仍消化良好。而仔猪断奶后，乳酸来源终止，胃酸分泌仍然很少，仔猪胃内酸度不足，使胃蛋白酶原的激活受到限制，胃蛋白酶形成减少，影响饲料特别是蛋白质消化，消化不良的饲料为小肠内致病性大肠杆菌及其它病原菌繁殖提供了条件，而乳酸杆菌的生长则受到抑制，导致仔猪消化不良，肠内渗透性紊乱而发生腹泻[3]。 1.2.2 胃肠消化酶少 仔猪刚出生时，除乳糖酶、凝乳酶含量较高外，其它各种酶含量都较低。随着仔猪日