瑞氏染色液配制及使用方法

瑞氏染液

产品说明：

瑞氏染料是由碱性染料美蓝（Methvlem blue）和酸性染料伊红（Eostm Y）组成的复合染料，溶于甲醇。伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。美蓝通常为氯盐，有色部分为阳离子。甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红，使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色；二是固定细胞形态，加速染色反应，增强染色效果。

使??法：

本产品可作为多种组织或细胞的染色使用，不同组织、细胞，不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献，本产品以涂片为例，举例说明，仅供参考。

1、取涂片、自然干燥。

2、滴加瑞氏染液染3 分钟,使标本被其中甲醇所固定。

3、加等量PH6.4 的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片, 与瑞氏染色液混匀，静置5 分钟。

4、水洗、吸干、镜检。

5、细菌染成蓝色，组织细胞胞浆红色，细胞核蓝色。

注意事项：

1、涂片厚薄适宜，涂片干透后固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。

2、所加染液不能过少，以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久，以防脱色。

3、染色对pH 十分敏感，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应接近中性，否则可能会导致细胞染色异常，形态难以识别，甚至错误。

4、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液，然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

产地：国产

提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。储存条件：：室温避光保存，有效期至少2年

关键词：瑞氏染液

瑞氏染液相关染色产品:

1.3消毒液配制和使用制度

消毒液配制和使用制度 1、目的 规范消毒剂的配置及消毒剂的储存、保管和使用，防止对食品造成污染，确保使用安全，特订立此制度。 2、适用范围 本标准适用于公司消毒剂及消毒剂储存、保管、发放、使用。 3、职责 3.1品控部负责文件的制定及推行和实施，并对实施的过程和结果进行检查和跟踪。 3.2生产相关的部门按照本程序的要求进行操作。 4、程序 4.1更衣室应依据各种消毒剂的特性设立专柜管理，应存放于阴凉、干燥处，严禁接触热源、火源，放置时应开口向上，以免洒漏或挥发失效。保证安全存量不少于一个月的使用量，不得出现中断现象。 4.2消毒剂配制注意事项： 4.2.1配制时应使用专用器具、量具，并加以标识区别。 4.2.2因含氯消毒剂对人体呼吸道膜和皮肤有明显刺激，配制时须戴口罩（防毒面具）和橡胶手套，或在通风区域配制。 4.2.3配制消毒剂时应产看消毒剂的生产日期和有效期，及消毒剂是否变质现象。 4.3消毒剂的配制方法： 4.3.175%酒精，将211ml蒸馏水（室温）放置于量筒中，加入95%的酒精至

1000ml，或直接购买75%酒精使用。 4.3.2ClO2消毒液，取ClO2A剂3包及B剂3包，加入盛有3.9kg（根据采购市售ClO2有效氯浓度即使调整加水量）水的塑料容器中充分溶解成为母液。配置好的母液必须在24小时内用完，若用不完须放入避光干净容器中密闭待用。 4.3.3消毒剂配制及使用控制表 4.4消毒频率及消毒液浓度 4.4.1消毒频率：看横松架每隔5分钟消毒一次；装箱、封箱人员每隔30分钟对手消毒一次；入库人员每隔1小时对手消毒一次，其他人员每隔10分钟对手消毒一次。每次浸泡不低于30秒。 4.4.2消毒液更换频率：3小时更换一次，若消毒液有效氯低于标准值应随时补充。 4.4.3消毒液控制浓度值

伊红染色液溶液的配制方法

伊红染色液配制方法 溶液的配制方法如下： 华越洋伊红染色液：100ml 伊红染料配方较多在常规配方中，有的染色效果好，但操作较繁琐，且消耗较多试剂。有的操作简单，但染色时间长，染液有效期短，常需加入冰醋酸，但加入剂量不易掌握，量少达不到促染作用，加入过多染液易沉淀，且引起色调不正，特别是容易褪色，染色结果不能长期保存。为此，对伊红Y染色液配制进行了改进。改进后的方法具有操作简便、经济、染色性质稳定、着色力强且持久颜色鲜艳等优点； 制备方法：伊红Y1G，蒸馏水90ML，苦味酸饱和水溶液10ML。将蒸馏水加入伊红，待其全部溶解后，加入苦味酸饱和水溶液。 染色结果观察：染色时间0.5-1分钟。伊红所着的颜色鲜艳，层次分明，与蓝色的细胞核对比突出。 伊红Y（四嗅荧光素二钠盐，分子式：C20-H6O5Br4NO2）是一种酸性红色胞浆性染料，室温下，在水中的溶解度度远大于在酒精中的溶解度。它在溶液反应中，由于钠离子的存在而呈碱性状态。苦味酸[分子式：（NO2）3C6HOH]是一种较强的酸性染料，它的颜色是由硝基发色团所致，染色性能是由羟基助色团产生的。苦味酸具有三种作用：1本身是一种胞浆染料，具有染色作用。2又是一种酸，加入伊红Y染色液中，使染色造成比胞浆等电点略为酸性的环境，抑制了部分氨基酸中羟基官能团，从而使氨基酸中氨基官能团和酸性染料结合，增加了染液与组织间的亲和力，起到促染作用。3苦味酸又是一种氧化剂，在染色体中经过氧化物作用后，使染色剂与组织成份结合的更牢固。组织着色鲜艳，染色后不易褪色，因而切片可长期保存。 华越洋伊红染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。 本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。 本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本伊红染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。 本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。

瑞氏染色

1．检验目的 指导瑞氏染色的操作，进行各种涂片的分类。 2．方法原理 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。各种细胞成分化学性质 不同，对刘氏染液（改良的瑞氏染液）中酸性染料曙红和碱性染料亚甲蓝的亲和力也不 一样，标本涂片经过刘氏染液染色后，各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态、特征的目的。 3．方法性能参数（如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度和特异性） 3.1染色速度快，效果好。 3.2仅供形态学初学者初检观察染色使用。 3.3是临床最常用的染色技术之一，用于细胞分类、寄生虫检出及分类。 4．标本类型（如血浆、血清、尿液等） 4.1血细胞涂片、脱落细胞学标本（脑脊液、胸腹水等）。 4.2标本采集后要及时制片，以免时间久细胞形态发生退化改变。 5．要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统 5.1试剂组分： 5.2试剂存储和有效期： 6．校准程序（计量学溯源性）

7．质量控制，控制品使用水平和频率，允许限的纠正措施 8．程序步骤 8.1标准方法： 8.1.1加刘A（0.5-0.8ml）染色30S。 8.1.2再将刘B滴加于A液上面（滴量为A液的两倍）。以洗耳球轻吹，让两液充分 混合，染色1min。 8.1.3水洗（不能先倒染色液，以流水轻轻冲去），待干后镜检。 8.2快速染色，适用于脱落细胞学标本： 8.2.1加刘A（0.5-0.8ml）后，立即将刘B滴加于A液上面（滴量为A液的两倍）。以 洗耳球轻吹，让两液充分混合，染色10-20S。 8.2.2水洗（不能先倒染色液，以流水轻轻冲去），待干后镜检。 9．计算结果原理 10．生物参考区间 11．警告值、危急值（适用时） 12．检验结果可报告区间 12.1红细胞呈淡红色，白细胞浆中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色彩，细胞核染 紫红色，核染色质结构清楚。 12.2脱落细胞学标本如脑脊液、胸腹水沉渣涂片，因其细胞通透性较高，应行快速染色 如染色偏深，无法辨识核结构，应适当缩短染色时间，以免误判。 13．对超出可报告范围的结果的处理 14．实验室解释 15．安全防护措施 所有标本按具有潜在传染性的标本处理。 16．最常见的误差源。 17．方法的局限性（如乳糜血、溶血、高胆红素血等干扰影响、交叉反应等） 18．参考文献 18.1全国临床检验操作规程-第三版 18.2《刘氏染液厂家说明书》 19．有关引用程序与文件 20．SOP涉及的记录与表格

液体配制及实验方法

（一）液体配制 1.完全培养基 DMEM+10%FBS+1%双抗+（1%HAPS液） 若放置时间长于2周加1%谷氨酰胺 2.PBS 1000ml去离子水中溶解8.0gNaCl、0.2gKCl、2.89gNa2HPO4、0.26gNaH2PO4 3.胰酶 用之前调节PH值至7.6 4.CaCl2 将0.165gCaCl2粉末溶于10ml去离子水中配制成50X的溶液 每5ml胶原酶中加入100μl CaCl2溶液（终浓度3μmol/L）用于激活胶原酶的活性 5.双抗 终浓度：青霉素100万U/100ml 链霉素100万U/100ml 青霉素0.6μg为1个单位链霉素 1.2195μg为一个单位 称取青、链霉素粉末各0.6、1.2195g溶于10mlPBS中再定容至100ml 6.两性霉素B 100mg两性霉素B粉末溶于40mlPBS中，制成浓度为2.5mg/ml(1000X)的浓缩液 每100ml完全培养基中加入100μl 浓缩液，稀释为终浓度2.5μg/ml 7.细胞冻存液 20%DMSO+80%FBS(1mlDMSO+4mlFBS) 8STZ溶液 STZ溶于柠檬酸和柠檬酸三钠的盐溶液中 称取柠檬酸0.105g溶于5mlPBS 称取柠檬酸三钠0.145g溶于5mlPBS中混合两者制成10毫升的溶解液. 再将100mgSTZ粉末溶于该溶解液中制成浓度1%的STZ溶液，调节PH值至4.5，4°避光保存，由于STZ水溶性不稳定，溶液最好在半小时内使用完毕. 9油红O 原液：油红O 0.6g溶于异丙醇（99% ）100ml 。 稀释液：油红O 原液20ml ，蒸馏水20ml ，过滤后使用。 10茜素红 称取0.1g茜素红粉溶于100mlPBS，调节PH值到7.2，过滤后使用.

瑞氏-姬姆萨复合染色液使用说明

瑞氏-姬姆萨复合染色液使用说明 货号：G3990 保存：室温避光保存，有效期至少2年。 产品内容： 2×100ml2×500ml Storage 试剂(A):Wright-Giemsa Stain100ml500ml RT避光试剂(B):磷酸盐缓冲液100ml500ml RT 产品说明： 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料，对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青Ⅱ与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 Wright-Giemsa Stain以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。染液中加中性甘油，防止甲醇挥发或氧化，同时也可使血细胞染色较清晰。该染液的特点：由瑞氏-姆姆萨复合染色液和磷酸盐缓冲液组成，等量混合使用或分别处理标本使用。 使用方法(仅供参考)： 1、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。 2、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。

3、滴加适量Wright-Giemsa Stain覆盖涂片，室温染色1～2min。 4、涂片滴加等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷 酸盐缓冲液不Wright-Giemsa Stain混匀，室温静置3～10min。 5、步骤3、4亦可以采用如下方法:取Wright-Giemsa Stain和磷酸盐缓冲 液等量混合，即为Wright-Giemsa工作液，滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上，室温静置3～10min。 6、用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注:也可用磷酸盐缓冲液等量 稀释后，冲洗玻片，时间控制在30s左右。） 7、干燥。镜检:先用低倍镜观察血涂片，再用油镜。 染色结果： 细菌、细胞核蓝色 组织细胞的细胞质、血红蛋白、嗜酸性颗粒粉红或橘红色 注意事项： 1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。 2、涂片染色中，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液，以免染料 沉着于涂片上。 3、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。 4、染色过深可用甲醇或乙醇适当脱色，最好不复染。 5、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。 6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

常用染色液配方

实验室常用染色液配方 1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液 A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升 B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。 2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升 B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升 将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。 3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升 B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升 将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。 4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。 5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升 6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。 7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。 8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升 9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.0 10、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。 11动物组织石蜡切片染色方法 苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色 10 min；入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片. 一、常用染色液的配制 ⒈碘-碘化钾（I2-KI）溶液能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。 配方：碘化钾2g ；蒸馏水300ml ；碘1g 先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。 ⒉苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ）能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。 配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ；95％酒精10ml ；过滤后再加入10ml甘油（2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 （3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。 ⒊1％醋酸洋红（aceto carmine）酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。

常用染色液配制

常用染色液配制 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020

1．草酸铵结晶紫染色液 A液：结晶紫，95%乙醇25mL。 B液：草酸铵，蒸馏水1000mL。 制备时，将结晶紫研细，加入95%乙醇溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合静止48h后，过滤后使用。 2．鲁格尔氏（路戈氏）碘液 碘，，蒸馏水300mL。先用3~5mL蒸馏水溶解KI，再加入碘片，稍加热溶解，加足水过滤后使用。 3．脱色液：95%乙醇；或丙酮乙醇溶液：95％乙醇70mL，丙酮30mL 4．沙黄（番红）染色液 ％沙黄（番红）乙醇溶液：沙黄（番红），95%乙醇100mL。 此母液存放于不透气的棕色瓶中，使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。 5．％美兰染色液 溶解于100mL蒸馏水中。 6．吕氏碱性美蓝色染色液 A液：美蓝，95%乙醇30mL。 B液：，蒸馏水100mL，分别配制A液和B液，混合即可。 7．瑞氏染色液 瑞氏染料粉未,甘油3mL，甲醇97mL。将染料放乳钵内研磨，先加甘油，后加甲醇，过夜后过滤即可。 8．5％孔雀绿水溶液（芽孢染色用） 孔雀绿,蒸馏水100mL。先将孔雀绿放乳钵内研磨，加少许95％乙醇溶解，再加蒸馏水。 9．黑色素水溶液（荚膜负染色用） 黑色素10g，蒸馏水100mL，40％甲醛（福尔马林）。将黑色素溶于蒸馏水中，煮沸5min，再加福尔马林作防腐剂，用玻璃棉过滤。 10．硝酸银鞭毛染色液 A液：单宁酸，，福尔马林(15%)，1%，蒸馏水100mL。 B液：,蒸馏水100mL。 将AgNO3溶解后，取出10mL备用，向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵，则形成很厚的沉淀，再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。再将备用的硝酸银慢慢滴入，则出现薄雾，但轻轻摇动后，薄雾状的沉淀又消失，再滴入硝酸银，直到摇动后，仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。如雾重，则银盐沉淀出，不宜使用。 11．改良利夫森（Leifson’s）鞭毛染色液 A：20％单宁（鞣酸）；B：饱和钾明矾液(20%)；C：5％石炭酸；D：碱性复红酒精（95％）饱和液。 将以上各液于染色前1~3d，按B加到A中，C加到A、B混合液中，D加到A、B、C混合液中的顺序，混合均匀，马上过滤15~20次，2~3d内使用效果较好。 12．石炭酸复红染色液 A液:碱性复红，95%乙醇10mL；B液：石炭酸（苯酚）5g，蒸馏水95mL。 先将染料溶解于乙醇，将苯酚溶于水，AB两液混合即可。

瑞氏染色的步骤

瑞氏染色液说明书 【产品名称】 瑞氏染色液 【包装规格】 货号：DM0005 单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml； 每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。 【预期用途】 主要用于对血细胞进行染色。 【检验原理】 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(MethyleneBlue)组成的复合染料，各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样，如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料结合后，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质；原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色；中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色；完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色，细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇 2、磷酸盐缓冲液磷酸盐

【储存条件及有效期】 5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。 3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。 4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。 【检验方法】 1、滴加瑞氏染液于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片，染色； 2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏染液上面，以嘴或洗耳球使两液充分混合，染色； 3、水洗，冲洗时不能先倒掉染色液，可缓慢从玻片一端冲洗，以防有沉渣沉淀在标本上； 4、干燥、镜检。 【检验方法的局限性】 仅供形态学初检观察染色使用。 【注意事项】

常用染色液的配制

常用染色液的配制 1.吕氏（Loefflev）美蓝染色液 A液：2%美蓝（Methylene blue）95%酒精溶液 B液：10%KOH溶液 取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。 2.石炭酸复红染色液 A液：4%碱性复红（basic fuchsin）95%酒精溶液 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解、 配成A液。 B液：5%石炭酸溶液 取A液10ml、B液90ml混合即可。一般可将此溶液稀释5-10倍使用。 但稀释液易变质失效，一次不宜多配。 3.革兰氏（gram）染色液 （1）草酸铵结晶紫染液： A液：1%结晶紫（Crystal violet）95%酒精溶液 B液：1%草酸铵（Ammonium oxalate）溶液 取A液20mlB液80ml，静置48/小时后使用。 （2）路哥氏（Lugol）碘液： 碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液另，待碘全部 溶解后，加够水即成。 （3）95%酒精溶液 （4）蕃红（沙黄）复染液： 2.5%蕃红（Safranlne O）95%酒精溶液。 取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。 4.芽孢染色液 （1）5%孔雀绿(Malachite green)溶液。 （2）0.5%蕃红溶液。 （3）苯酚品红溶液 称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。 再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合，过滤备用。 （4）黑色素(nigrosin)溶液 10%黑色素溶液，置沸水浴中30min后，滤纸过滤二次，补加水到100ml，

瑞氏-吉姆萨染色法

瑞氏-吉姆萨染色液说明书 【产品名称】 瑞氏-吉姆萨染色液 【包装规格】 货号：DM0007 单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml； 每套/盒包装规格分别为：2×20ml/盒、 2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。【预期用途】 主要用于对血细胞进行染色 【检验原理】 瑞氏染料是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用；吉姆萨染料由天青Ⅱ与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，吉姆萨染色对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，常与瑞氏染色联合使用。 瑞氏-吉姆萨染色液是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成的，细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理吸附作用，又有化学亲和作用，各种细胞及相关成分由于其化学性质不同，对瑞氏-吉姆萨染色液中的酸性染料(伊红)和碱性染料(亚甲蓝)的亲和力也不一样，标本涂片经瑞氏-吉姆萨染色后，相应各类细胞呈现不同的着色，从而达到辨别其形态特征的目的。 【主要组成成分】 试剂组成主要成分 1、瑞氏-吉姆萨染液瑞氏染料、吉姆萨染料、甲醇 2、磷酸盐缓冲液磷酸盐 【储存条件及有效期】 5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。 【样本要求】 1、血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。 2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。 3、骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血，不能用高温或火烤干燥。 4、脱落细胞涂片：取样本并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行）；若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳；若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。 【检验方法】 1、滴加瑞氏-吉姆萨染液于涂片上，并让染液覆盖整个标本涂片，染色； 2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏-吉姆萨染液上面，以嘴或洗耳球使两液充分混合，染色； 3、水洗，冲洗时不能先倒掉染色液，可缓慢从玻片一端冲洗，以防有沉渣沉淀在标本上； 4、干燥、镜检。 【检验方法的局限性】 仅供形态学初检观察染色使用。 【注意事项】

常用消毒液配制习题

1、碱能水解蛋白质和核酸，对微生物结构和酶起破坏性作用，造成微生物死亡。（√） 2、醇类消毒剂对细菌繁殖体、病毒及真菌孢子具有杀灭作用，对细胞芽孢无效。（√） 3、季铵盐类消毒液是一种阳离子表面消毒剂，为人工合成的消毒剂，能吸附于细菌表面，使细菌通透性改变，细胞内的酶溢出，细菌因代谢障碍而死亡。（√） 4、碘类消毒作用原理：是游离状态的碘原子的超强氧化作用，破坏病原体的细胞膜结构及蛋白分子而杀死病原体。（√） 5、醛类消毒液作用原理：通过烷基基化反应是菌体蛋白变性，酶和核酸等功能改变，杀菌力强。（√） 6、消毒液稀释浓度计算公式浓溶液容量=（稀溶液浓度/浓溶液浓度）*稀溶液容量（√）。 7、消毒液稀溶液容量=（浓溶液浓度/稀溶液浓度）*浓溶液容量消毒液 8、消毒液稀释倍数计算公式稀释倍数=（原药浓度/使用浓度）-1（若稀释100倍以上时公式不必减1）消毒液 9、消毒液增加药液计算公式需增加浓溶液容量=（稀溶液浓度/稀溶液容量）/(浓溶液浓度-使用浓度）（√） 10、酸类消毒液能水解蛋白质和核酸，对微生物结构和酶起破坏性作用，造成微生物死亡。（× ） 、 11、季铵盐类消毒剂对细菌繁殖体、病毒及真菌孢子具有杀灭作用，对细胞芽孢无效。（× ） 12、醇类消毒液是一种阳离子表面消毒剂，为人工合成的消毒剂，能吸附于细菌表面，使细菌通透性改变，细胞内的酶溢出，细菌因代谢障碍而死亡。（×） 13、醛类消毒作用原理：是游离状态的碘原子的超强氧化作用，破坏病原体的细胞膜结构及蛋白分子而杀死病原体。（× ） 14、碘类消毒液作用原理：通过烷基基化反应是菌体蛋白变性，酶和核酸等功能改变，杀菌力强。（× ） 15、消毒液稀释浓度计算公式浓溶液容量=（稀溶液浓度/浓溶液浓度）*浓溶液容量（× ）。 16、消毒液稀溶液容量=（浓溶液浓度/稀溶液浓度）*稀溶液容量消毒液（× ） 17、消毒液稀释倍数计算公式稀释倍数=（原药浓度/使用浓度）-2（若稀释100倍以上时公式不必减1）消毒液（×） 18、消毒液增加药液计算公式需增加浓溶液容量=（稀溶液浓度/稀溶液容量）/(浓溶液浓度-稀溶液使用浓度）（× ）

GUS染色液配制

G U S染色液配制 Prepared on 24 November 2020

一染色液配制 1）X－Gluc母液：X-Gluc，用N-N-二甲基酰胺(DMF)配成20mM的贮存液，分装成每管100μL，保存于-20℃。 2）X－Gluc基液（50mM PBS，）。配制方法： 50mM NaH2PO4·100ml； 50mM Na2HPO4 100ml共同溶解； Na2EDTA （10mM，372mg）， Triton-100（％，100μl）, K3 [Fe(CN) 6] （铁氰化钾）（，） K4 [Fe(CN) 6] （亚铁氰化钾）（，） 染色液：50μl X-Gluc母液＋450μl基液 需要试剂：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X－Gluc）； N-N-二甲基甲酰胺(DMF) ； NaH2PO4； Na2HPO4 ； Na2EDTA ；Triton-100； K3 [Fe(CN) 6] （铁氰化钾）； K4 [Fe(CN) 6] （亚铁氰化钾） 二染色方法： 1.将准备好的试材浸泡在染液，于25—37℃保温1小时至过夜。 2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2—3次，至阴性对照材料呈白色。 3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为Gus表达位点。

三实验原理 适宜的反应条件下，β- 葡萄糖苷酸酶（GUS）可将X－Gluc水解成蓝色物质，因此具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。 gus基因是目前常用的一种报告基因，是β－D－葡萄糖苷酸酶(gus)基因，其表达产物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS)能催化裂解一系列的β－葡萄糖苷酸，它可以将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X－Gluc）分解为蓝色的物质,也可以将4-甲基-伞形花酮-β-D-葡萄糖苷酯(4-MUG)分解为蓝色物质。其检测方法简单、快速、灵敏、稳定，且背景活性低。 gus基因的最大优点是它能测定外源基因表达的具体细胞和组织部位，这是其它报告基因所不能及的。 四注意事项 用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1- 3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项

瑞氏染液配制、使用方法及注意事项 南宁市二医院检验科马升俊 1.瑞氏染色的原理： 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理吸附作用。瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物（天青）组成,其深于甲醇后,解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。各种细胞由于其所含化学成分不同，对染料的亲和力也不一样，因此，染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。 2.试剂的配制： 2.1 瑞氏染液的配制： 2.1.1 自配染液:瑞氏染粉0.1g，甲醇（AR）60ml。 将瑞氏染粉放入清洁干燥研钵中，先加少量甲醇，充分研磨使染料溶解，将巳溶解的染料倒入棕色试剂瓶中，未溶解的再加少量甲醇研磨，直至染料完全溶解，甲醇全部用完为止。染液配好后放于室温下，一周后即可使用。新配制染液效果较差，放置时间延长，染色效果越好。久置应密封，以免甲醇挥发或氧化成甲酸。染液中也可加中性甘油2～3ml，除可防止甲醇过早挥发外，也可使细胞着色清晰。 2.1.2 成品瑞氏染液: 现巳有成品瑞氏染液，如四川迈克科技公司出的快速瑞氏染色试剂（500ml/瓶）其只需室温密闭储存，可长期稳定，染色效果好。2.2 缓冲液的配制: 称取磷酸二氢钾（无水）0.3 g，磷酸氢二钠（无水）0.2 g；加蒸馏水至1000 ml使其溶解。配好后磷酸盐缓冲溶液应校正PH值，其范围在PH6.4～6.8即可，后塞紧瓶口备用。 3. 瑞氏染色的使用方法： （以血涂片为例）： 3.1把制好的血涂片编好号，然后将血片平放在染色架上； 3.2加瑞氏染液数滴，使其覆盖整个血膜，固定细胞约1分钟； 3.3滴加等量或稍多的缓冲液（可按1：2滴加），使染液充分混匀，染色5～10分钟；

常用染色液的配制

附录二：常用固定液和染色液的配制 常用染色液的配制 1. 番红水液 番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。 2. 番红酒液 番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml。 3. 固绿染液 固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。 4. 碘-碘化钾染液 碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。 5. 苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液 将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。6.改良苯酚品红染液 原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。原液B：将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。 原液C：将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。染色液：取C液20ml，加45%冰醋酸80ml，充分混匀，再加入1g 山梨醇，放置14天后使用，可保存3年。 7. 间苯三酚染液 将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。 8. 中性红染液

将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水，用时稀释10倍。 9. 钌红染液 将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水，现用现配。 10.龙胆紫染液 将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。 11.铁醋酸洋红染液 先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末（切记不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸1~2min，并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min 后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。 12.苏木精染液 苏木精的配方很多，常用的有如下3种： 配方Ⅰ：苏木精水溶液 0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。 配方Ⅱ：代氏苏木精（Delarfield’s haematoxylin） 甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml 乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml 丙液：甘油25ml + 甲醇25ml 分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加

消毒液配制使用和记录

消毒液配制使用说明 （有效成分为二氧化氯） 一、消毒液母液的配制要求： 1、先将专用瓶装满1000毫升水； 2、将两一包连体袋两种组分同时倒入专用瓶中； 3、立刻盖上专用瓶摇匀溶解； 4、静止15分钟后使用，此时消毒液的浓度约为10000PPM，此浓缩液即为母液。 二、消毒液的使用要求： 1、各车间员工洗手消毒使用的消毒水浓度要求约为100PPM，浸泡时间为1分钟，浸泡后自然 晾干； 2、各车间脚踏池消毒水的消毒水浓度要求约为200PPM，浸泡时间为15秒； 3、各车间地面消毒使用的消毒水浓度要求约为150PPM，采用清洗干净的拖帕拖地，拖地后自 然晾干； 4、各车间工作服、工作帽、毛巾消毒使用的消毒水浓度要求约为150PPM，清洗干净后自然晾 干； 5、各车间生产环境空气的消毒防霉除臭使用的消毒水浓度要求约为150PPM左右，消毒时间为 30分钟，采用喷雾器喷洒，用量为每10立方米空间喷洒1公斤浓度要求为150PPM的消毒水（可在交接班之间进行）。 6、各车间空气的自然熏蒸消毒使用的消毒水浓度要求约为1000PPM，使用方法为：将消毒水 用塑料盆装好后放置于车间内的四周，让其自然挥发，消毒时间为8小时，用量为每100立方米空间放置0.1公斤浓度要求为1000PPM的消毒水（可在转班之间进行，需空间密闭）。 三、其它注意事项： 1、消毒液配制浓度举例：母液浓度为10000PPM，现要配5kg洗手消毒液。洗手消毒液浓度要 求为100PPM，所需母液体积为：100×5000÷10000＝50毫升。 2、每天各车间消毒负责人员到品控部按需领取配制好的消毒母液，领取后签字确认。 3、消毒液的配制量由各车间消毒负责人员根据车间用量按需配制。 4、各车间消毒负责人员必须根据各自车间情况，为本班次或下班次准备好洗手消毒液。 5、各车间班组长和现场品控负责监督消毒液的配制和使用。

HE染色程序及相关溶液配制

HE染色程序 1.取材与固定：一般取0.5立方米，基木不用再次修形。置于4%甲醛溶液中，至少固定24小时。室温保存即可。 2.水洗：视组织块大小而定。一般与固定时间相等或至少水洗 24小时。 3、脱水：70%酒精(过夜或2h) ->80%酒精(过夜或lh) -90% 酒精 (lh) ->95%酒精I (lh) -95%酒精(lh) 11-100%酒精I (5)-100%酒精II (lh), 梯度酒精脱水 注：当酒精浓度逐渐升高时，特别是100%的酒精，注意观察组织 块情况，不能脱水脱过了，如果拖过了，切片时，组织易碎。如果水 脱的不彻底，则浸蜡时，蜡不能完全浸入，也会影响后期切片。 4、透明：二甲苯I (lOmin)—二甲苯II(lOmin)。 5、浸蜡：58°C 1.5-2h (一般用新蜡) 6、包埋：叠好的蜡槽，一般深lcm,宽lcm,长7cm,放4个组织块为 宜。注：包埋一般采用旧蜡，避免产生气泡。包埋时用来夹取组织块 的银子，要同时放在蜡箱里预热。先向蜡槽内倒蜡，然后用预热的蹑 子夹取浸蜡缸中的组织，放到蜡槽底部，尽量避免漂浮。包埋后，就 不要挪动蜡槽了，否则组织漂浮在蜡槽的表面。 7、常规切片，一般组织3-5微米，神经组织切7微米。展片温度 为52摄氏度。捞片时刻直接从95%的酒精中取载玻片直接捞片，不必 擦干载玻片上的洒精。捞好片后，置于37度温箱恒温干燥过夜。

8、切片脱蜡：二甲苯I (5min)—二甲苯JI(8min), 9、水化：100%酒精(lmin)-90%酒精(lmin)-80%酒精(lmin) -70% 酒精(lmin) 10、水洗2-5min 11、苏木素染色15-20min 12、水洗至灰黄色 13、分化：1%盐酸酒精分化30s至桃粉色， 14^水洗返蓝：2-3h 15、伊红染色：15min 16、脱水：70%酒精(10s) ->80%酒精(20s) -90%酒精(30s) -95%洒精(lmin) -100%酒精(2min)-100%酒精(2min) 17＞二甲苯透明：二甲苯I (5min)—二甲苯II(5min) 18、中型树胶封片，镜检。 相关液体的配制: 1、4%甲醛固定液：40%的甲醛溶液10ml + 90ml蒸憾水,摇匀即可。 2、处理载玻片用的盐酸酒精：95%酒精100ml+ 36-38%盐酸1 ml摇匀即可。 3、分化用1%盐酸酒精：注：1%盐酸酒精配制：75%酒精99ml+36-38%HCL lml 即可。 4、二甲苯：无需配制，用商品化得即可。

丽春红(Ponceau S)染色液的配制及使用

丽春红（Ponceau S）染色液的配制及使用 丽春红（Ponceau S）也称猩红，可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜（nitrocellulose membrane）和醋酸纤维素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。 丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS或其它适当溶液洗去。因此，蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜，用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。 注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。 使用说明 将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中，摇动5-10分钟或更长时间；取出印迹膜，用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，可出现清晰条带，记录结果；用蒸馏水，PBS或其它适当溶液漂洗2-3次，每次3-5分钟，去除丽春红，进行后续的WB 检测。 补充：丽春红染色液也可以直接用来染PAGE胶，不过，在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE胶，起到固定蛋白的作用。 丽春红染色液的配制 常用的丽春红染色液有两种：一种用乙酸配制，另外一种用三氯乙酸（TVA）和5-磺基水杨酸（5-Sulfosalicylic acid）配制。配制方法如下： 一、用乙酸配制成分：0.1%（w/v）丽春红，5%（v/v）乙酸，ddH2O。 4 ℃保存，不要冻上。也可以配成“0.2%（w/v）丽春红，3%（v/v）乙酸，ddH2O”。

二、用三氯乙酸和5-磺基水杨酸成分：2% （w/v）丽春红，30%的三氯乙酸，30%的5-磺基水杨酸。

染色液的配制

染色液得配制 吕氏(Loeffler)i^性美篮染液 A 液：美蓝(methylene blue) 0. 6g 95% 酒精 30ml B 液；KOH 0,01g 蒸镭水100ml 分别配制A液与B液,配好后 泯合即可。 二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A 液:碱性复夕工(basic fuchsin) 0. 3g 95% 酒精 10ml 8 液：石炭酸5.0g 蒸他水95ml 将碱性复红在研钵中研磨后， 逐渐加入95%酒粘，继续研磨使其溶解，配成A液。 将石炭酸溶解于水中，配成B液。 泯合A ;夜及B液即成。通常可將此混合液様释5—10倍使 用，稀释液易变质失效, -次不宜多配。 三、革兰氏(Gram)染色液仁草酸铁绪晶紫染液 A 液.：结晶紫(crystal violet) 2g 95% 酒精 20ml B 液：草酸钱(ammonium oxalate) 0. 8g 蒸他水80ml 混合 A、B二液,静置48小时后使用. 2?卢戈氏(Lugol)碘液碘片1-Og

碘化钾2. Og 蒸他水300ml 先將碘化钾溶解在少量水中，再將碘片溶解在矶化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。 3.95%得酒精溶液. 4.番红复染液 备红(safranine 0) 2. 5g 95% 酒精 100ml 取上述配好得番红酒精溶液10ml与80ml蒸他水混匀即成。 四、芽砲染色液 仁孔雀绿染液 孔雀绿(malachite green) 5g 蒸他水100ml 2.番红水溶液 番红0. 5g 蒸他水100ml 3.嵐酚品红溶液 碱性品红11g 无水酒精100ml 制法取上述溶浪Wml与100ml5%得苯酚溶液混合，过滤备用。 4?黑色素(n i gros i n)溶液 水溶性黑邑素10g 蒸餾水100ml 称取10gX色素溶于WOml蒸锚水中，置沸水浴中30分钟后，滤纸过滤

瑞氏-姬姆萨复合染色液

瑞氏-姬姆萨复合染色液 简介： 瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青Ⅱ与伊红混合而成，染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示胞浆的嗜碱性程度，特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深，核结构显色不佳，常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Wright-Giemsa Stain 以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料，通过研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色，细胞核及细菌呈蓝色，嗜酸性颗粒呈橘红色。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片，待涂片自然干燥。 2、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。 3、 滴加适量Wright-Giemsa Stain 覆盖涂片室温染色。 4、 涂片滴加等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动玻片或采用其他方式混合，使磷酸盐缓冲液与 Wright-Giemsa Stain 混匀室温静置。 5、 步骤3、4亦可以采用如下方法: 取Wright-Giemsa Stain 和磷酸盐缓冲液等量混合， 即为Wright-Giemsa 工作液，滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上室温静置。 6、 用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注: 也可用磷酸盐缓冲液等量稀释后，冲洗玻 片，时间控制在30s 左右。） 7、 干燥。 8、 镜检: 先用低倍镜观察血涂片，再用油镜。 编号 名称 DM0007 2×100ml DM0007 2×500ml Storage 试剂(A): Wright-Giemsa Stain 100ml 500ml RT 避光 试剂(B): 磷酸盐缓冲液 100ml 500ml RT 使用说明书 1份

常用染色液的配制.

1. 番红水液 番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。 2. 番红酒液 番红0.5g或1g溶入50%酒精，定溶至100ml 3. 固绿染液 固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。 4. 碘腆化钾染液 碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。 5. 苏丹川（或W）染液 将0.1g苏丹川或W溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。 6?改良苯酚品红染液 原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。 原液B：将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。 原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。 染色液：取C液20ml，加45%冰醋酸80ml，充分混匀，再加入1g山梨醇，放置14天后使用，可保存3年。 7?间苯三酚染液 将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。 8. 中性红染液 将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水，用时稀释10倍。 9. 钉红染液 将5~10mg钉红溶入25~50ml蒸馏水，现用现配。 10龙胆紫染液 将0.2g龙胆紫溶入100mI蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。 11铁醋酸洋红染液 先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末（切记不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。 12苏木精染液 苏木精的配方很多，常用的有如下3种： 配方I:苏木精水溶液 0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。 配方H：代氏苏木精（Delarfield ' s haematoxylin 甲液：苏木精1g +无水酒精6ml 乙液：硫酸铝铵（铵矶）10g +蒸馏水100ml