生物制药工艺学试题及答案
生物制药工艺学试题1
一、名词解释（每题2分，共16分）
1、生物药物
2、效价
3、种子级数
4、反萃取
5、补料
6、盐溶
7、差异毒力
8、配料比
二、选择题（每题1分，共20分）
09.是利用生物机体、组织、细胞，生产制造或从中分离得到的具有预防、诊断、和治疗功能的物药。
A 生物技术药物
B 生物技术产品
C 生物技术制品
D 生物药物
10. 青霉素的抗菌能力主要取决于（）
A β—内酰胺环
B 羧基
C 氨基
D 噻唑环
11. 红霉素中的去氧氨基已糖和红霉糖的碳架来源于（）
A蔗糖 B乳糖 C 甘露糖 D葡萄糖
12、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株，并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。（）
A．SAMP合成酶 B．SAMP裂解酶 C．PRPP转酰胺酶 D．IMP脱氢酶
13、蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用下列哪类的方法。（）
A.分辨率高
B.负载量大
C.操作简便
D.价廉
14、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱（）
A.水
B.高盐
C.低pH
D. 高pH
15、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（）
A.凝胶排斥
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
16、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（）
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
17、亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（）
A. 阴性洗脱
B. 剧烈洗脱
C. 竞争洗脱
D. 非竞争洗脱
18、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）
A．增大 B. 减小 C. 先增大，后减小 D. 先减小，后增大
三、填空题（每空1分，共10分）
19. 在青霉素的发酵培养过程中补加的前体为。
20. 常用的灭菌方法有：化学灭菌、辐射灭菌、和。
21、多氧大环内脂的作用机理是与的特殊部位结合，选择性的抑制原核生物
蛋白质合成。
22、是机体免疫细胞产生的一类细胞因子，是机体受到病毒感染时，免疫细胞通过抗病毒应答而产生的一组结构相似，功能接近的生物调节蛋白。
23、常用的吸附剂有，和打孔吸附树脂等。
24、利福霉素SV发酵液预处理要求除去蛋白质等乳化杂质，可加入有机絮凝剂阳离
子。
25、伯胺化合物与链霉素在碱性条件下能形成，是链霉素精制的重要反应。
26、沉没培养过程中金色链霉菌的变化特征可划分为四个生长期：、次生菌丝期、、自溶期。
27、蒽莎大环内脂又可分为含有和两类。
28.维生素C的工业生产路线有和。
四、回答题：（每题6分，共24分）
29. 生物制药的发展大致分为哪几个阶段？
30、为什么说四环类抗生素具有宽广的抗菌谱？
31、简述β—内酰胺类抗生素产生作用的机制。
32、以生物原料提取纯化多肽和蛋白质在选择方法时应注意什么问题？
五、分析综合题：（共30分）
33.生物药物与化学药物相比有哪些特性？
34、试比较β—内酰胺类抗生素与大环内脂类抗生素的理化性质、药学知识、发酵菌种和条件、
分离纯化精制等知识。
生物制药工艺学试题1答案
一、名词解释（每题2分，共16分分）
01、指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，利用生物体、生物组织、体液或其代谢产物，综合应用化学、生物技术等学科的原理与方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。
02、某一药物引起生物反应的功效单位。
03、种子从摇瓶培养开始经过种子罐的逐级扩大培养的次数。
04、物质从有机溶剂萃取到水溶液中的一种萃取方法。
05、是间歇或连续补加一种或多种成分的新鲜培养基的操作过程。
06、盐离子作用大分子表面，增加了表面电荷，使之极性增加，水合作用增强，促使其形成稳定的双电层。
07、药物对病原菌和宿主组织的毒力差异。
08、参与反应的各物料之间物质量的比例称为配料比
二、选择题（每题2分，共20分）
题号09 10 11 12 13 14 15 16 17 18
答
案
D A D A B D B C C C
三、填空题（每空1分，共15分）
19、苯乙酸及其衍生物
20、干热灭菌高压蒸汽灭菌
21、核糖蛋白体50亚基
22、抗生素
23、活性炭、硅胶
24、聚丙烯酰胺
25、席夫碱沉淀
26、原生菌丝期、分泌期
27、萘醌、苯醌
28、莱氏合成法、两步发酵法
四、回答题：（每题6分，共24分）
29、生物制药的发展大致分为哪几个阶段？
答：①第一阶段，生化药品是利用生物材料加工制成的含有天然活性物质混合成分的粗制剂，效价低，售价高。②第二阶段，根据生物化学和免疫学原理，应用近代生化分离技术从生物体制取的具有针对性治疗作用特异生化成分③第三阶段，应用生物技术产生的天然活性物质以及通过蛋白质工程设计原理制造的具有比天然物质更高活性的类似物或与天然品结构不同的全新的药理活性成分。
30、为什么说四环类抗生素具有宽广的抗菌谱？
答：四环类抗生素可与微生物核糖核蛋白体30S亚基结合，通过抑制氨基酰-tRNA与起始复合物中核蛋白体的结合，阻断蛋白质合成时肽链的延长，因而使四环类抗生素具有宽广的抗菌谱。
31. 简述β—内酰胺类抗生素产生作用的机制。
答：β—内酰胺类抗生素通过抑制肽聚糖转肽酶及D-丙氨酸羧肽酶的活性抑制肽聚糖的合成，从而干扰细胞壁的合成。
32. 以生物原料提取纯化多肽和蛋白质在选择方法时应注意什么问题？
答：提取纯化时的方法应注意：①破碎组织细胞选用机械破碎法、渗透破碎法、反复冻融法、超声波法、酶法。②再抽提过程应注意适当、避免激烈搅拌以防止蛋白质变性。③分离多肽和蛋白质可
通过等电点沉淀法、盐析法、有机溶剂沉淀法④纯化过程应选用凝胶过滤层析、离子交换纤维层析、亲和层析。
五、分析综合题：（共25分）
33. 生物药物与化学药物相比有哪些特性？（10）
答：与化学药物相比生物药物有以下特性：①药理学特性，包括治疗的针对性强，疗效高；营养价值高，毒副作用小；免疫性副作用常有发生。②原料的生物学特性，原料的有效成分含量低杂质多；原料多样；原料易腐败。③生产设备的多样性，生物要对热、酸、碱、重金属离子及ph 等各种理化因素较敏感。④检验的特殊性，不仅有理化检验指标更有生物活性检验指标和安全活性指标。⑤剂型要求的特殊性，可制成注射剂、缓冲剂、控释剂。⑥保藏及运输的特殊性，须在低温下保存、运输。
34试比较β—内酰胺类抗生素与大环内脂类抗生素的理化性质、药学知识、发酵菌种和条件、分离纯化精制等知识。（15）
生物制药工艺学试题2
一、
名词解释 （每题分，共16分）
2
1、药物
2、细胞生长调节因
子
3、溶出度
4、超滤
β—内酰胺类抗生素 大环内脂类抗生素 理化性质
白色或黄色无定形或结晶
性固体，高温下分解，含3个不对称碳原子，具旋光性，易溶于有机溶剂，化学性质活泼与β—内酰胺环有关
碱性化合物，结晶水和熔点因结晶形式不同而不同，易溶于有机溶剂，遇碱内酯环易破裂，遇酸苷键易水解，内酯环中酮基活泼
药学知识
抑制肽聚糖的合成，从而干扰细胞壁的合成
改变细胞膜的通透性，导致真菌死亡，对细菌无效 发酵菌种
以青霉素为例，生产菌为产黄青霉菌
以红霉素为例，生产菌为红霉素链霉菌 发酵条件
接种量为20%、温度前期为26°C 后期为24°C 、通气量为1：（0.8~1.2）m 3/( m
3·min)、搅拌转速为150~200r/min 等
因培养基不同控制通气速率排除二氧化碳，生长ph 最适为6.6~7.0、合成ph 最适为6.7~6.9等
分离纯化精制
在低温条件下，采用醋酸丁酯或醋酸戊脂进行萃取
可采用醋酸丁酯、二氯甲烷、丙酮等萃取
5、逐级分离
6、放料
7、差向化
8.干扰素
二、选择题（每题2分，共20分）
09. 化学药物合成工艺路线设计，应从剖析药物着手。
A 化学性质
B 物理性质
C 化学结构
D 生产成本
10.β—内酰胺类抗生素是通过控制来干扰细胞壁的形成的
A 肽聚糖转肽酶
B D-丙氨酸羧肽酶
C肽聚糖水解酶 D肽聚糖转肽酶、D-丙氨酸羧肽酶
11. 当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）
A．增大 B. 减小 C. 先增大，后减小 D. 先减小，后增大
12. 用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱（）
A.水
B.高盐
C.低pH
D. 高pH
13、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（）
A.凝胶排斥
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
14、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（）
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
15、亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（ C）
A. 阴性洗脱
B. 剧烈洗脱
C. 竞争洗脱
D. 非竞争洗脱
16.从四环素发酵液中去除铁离子,可用（）
A. 草酸酸化
B. 加黄血盐
C. 加硫酸锌
D. 氨水碱化
17、用大肠杆菌作宿主表达重组DNA药物，缺点是（）
A.蛋白质表达量低
B.生长慢
C.产物无糖基修饰
D.难以获得工程菌
18、下列药物哪些是重组DNA药物（）
A.蛋白质工程药物
B.基因药物
C.天然生物药物
D.半合成生物药物
三、填空题（每空1分，共15分）
19. 常用的灭菌方法有：化学灭菌、辐射灭菌、 _________ 和高压蒸汽灭菌。
20. 大环内脂类抗生素是以大环内脂为母体，通过_________，以苷键和1~3个分子的糖相连结的一类抗生物质。
21. 多烯大环内脂的作用机理是与真菌细胞膜的_________结合，改变细胞膜的通透性。
22、蒽莎大环内脂又可分为含有_________和_________两类。
23、红霉素是由________、去氧氨基已糖和红霉糖组成。
24. 利福霉素SV发酵用碳源以_________为佳，氮源以_________最好。
25. 根据菌体生长与产物生成的特征，可以把发酵过程分为菌体生长期、产物合成期和菌体自溶期延滞期、_________、减速期、静止期和衰亡期。
26. 多肽的化学合成有液相合成和固相合成，常用的氨基保护基有_________ ，____ ______和
9-芴甲氧羰基。其中Fmoc 最常用。
27. 链霉素利用葡萄糖的主要代谢途径是_________和_________。
28. 生化物质在提取前，有时还用丙酮处理，其作用是使材料_________，_________，使细胞结构疏松等。
四、简答题：（每题6分，共24分）
29. 简述生化药物有何特点。
30、怎样对青霉菌的发酵液进行预处理？
31. 简述氨基酸的生产方法有哪些？
32. 如何减少四环素成品的差向四环素和ADT的含量？
五、分析综合题：（共25分）
33.国家制定GMP、GCP的意义何在？其内容包括哪些？（10）
34. 链霉素在分离纯化中如何将二氢链霉素和其他杂质分开？（15）
生物制药工艺学试题2参考答案
一、名词解释（每题2分，共16分分）
01、用于预防、治疗人类疾病，有目的的调节人体生理功能，并规定有适应症和用法、用量的物质。
02、在体外和体内对效应细胞的生长、增殖和分化起调控作用的一类物质。
03、药物从片剂或胶囊等固体口服制剂，在规定的介质中在一定条件下，溶出的速度和程度
04、在压力差的驱动下用可以阻挡不同大小分子的滤板或滤膜将液体过滤的方法。
05、一种生物制药中的温和”多阶式”分离，即将药物中的杂质一级一级分离。
06、是指发酵到一定时间，放出一部分培养物，又称带放。
07、有些抗生素如四环素，在弱酸性条件下不对称碳原子可逆的发生异构化，形成差向四环素。
08、是由诱生剂诱导有关细胞所产生的一类高活性、多功能的诱生蛋白质。
二、选择题（每题2分，共20分）
题号09 10 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 C D C D B C C B C A
三、填空题（每空1分，共15分）
09、干热灭菌
10、羟基
11、固醇类成分
12、萘醌、苯醌
13、红霉内酯
14、甘油和葡萄糖、硝酸盐、
15、对数生长期
16、苄氧羰基、叔丁氧羰基
17、糖酵解途径、单磷酸已糖支路途经
18、脱水，脱脂
四、回答题：（每题6分，共24分）
29、简述生化药物有何特点。
答：①生物原材料复杂②生化物质种类多，有效成分含量低③生物材料有种属特性④药物活性与分子空间构象有关⑤对制备技术条件要求高。
30、怎样对青霉菌的发酵液进行预处理？
答：青霉菌发酵液菌丝较大，一般在菌丝自溶前用鼓式过滤机过滤得第一次滤液，其ph值6.2~7.2之间，用硫酸调ph至4.5~5.0，再加入0.07%的溴代十五烷吡啶和硅藻土作为助滤剂，通过板框过滤机过滤得第二次滤液。第二次滤液澄清透明，可进行提取。
31. 简述氨基酸的生产方法有哪些？
答：①蛋白水解法，以毛发、血粉等为原料，通过酸、碱或酶水解成多种氨基酸的混合物，在进行分离纯化。②化学合成法，利用有机物合成和化学工程相结合的技术生产氨基酸的方法③酶法，利用微生物特定的酶系作为催化剂，使底物经过酶催化生成所需的产品④直接发酵法，直接按照生产菌株的特性发酵⑤微生物生物合成法，以氨基酸的中间产物为原料，用微生物将其转化为相应的氨基酸。
32. 如何减少四环素成品的差向四环素和ADT的含量？
答：首先四环素发酵液通过加入草酸除去钙离子和促使蛋白质凝固等手段进行预处理，为了使差向四环素和ADT的含量降低，此过程应在低温、短时下进行。此外，还可此外还可在母液中加尿素，使其与四环素形成复合物而纯化；也可加入丁醇：乙醇（3:1）混合溶剂，加入乙醇可降低母液四环素损失；但降低成品中的ADT含量的最有效方法是筛选不产生ADT的菌株。
五、分析综合题：（共25分）
33. 国家制定GMP、GCP的意义何在？其内容包括哪些？
答：①GMP即《药品生产质量管理规范》，其核心是全员全过程的管理。全体人员必须对产品
质量负责，涉及人员、厂房设备、原材料采购、入库、检验、发料、加工、制品及半成品检验、
分包装、成品检定、产品销售、运输、用户意见及反应处理等在内的全过程质量管理。②GCP
即《药品临床研究质量管理规范》，其有两个作用：一是为了在新药研究中保持支援受试者和
病人的安全和权利；二是有助于生产厂家申请临床的试验和销售许可证，能够提供符合质量的
有价值的临床资料。其涉及新药临床的所有人员都已明确规定了责任，以保证临床资料的科学性、可靠性、重现性。
34链霉素在分离纯化中如何将二氢链霉素和其他杂质分开？
答：分离二氢链霉素和其他杂质可用以下方法：①高交联度树脂精制，高交联度的氢型磺酸树
脂的结构紧密，金属离子可以自由地扩散答孔隙度很小的树脂内部与阳离子交换，而有机大离
子就难于扩散到树脂内部进行交换。用这种树脂来精制链霉素溶液，因溶液中的小离子与链霉
素有机大离子在树枝上的吸附速率不同，从而起到离子筛选的作用。②浓缩和活性炭脱色精制，为了干燥要求，精制液需要蒸发浓缩。再浓缩之前还要用活性炭脱色处理，将所得精制液用硫
酸或氢氧化钡调ph值至4.3~5.0，并按精制液透光度的不同加入不同量的活性炭，进行常温脱
色得透光度在95%以上的滤出液。
生物制药工艺学试题3
一、名词解释（每题2分，共16分）
1、微生物发酵制药
2、GMP
3、β—内酰胺类抗生素
4、蛋白质药物比活性
5、逐级分离
6、盐解
7、细胞生长调节因子
8、反义药物
二、选择题（每题2分，共20分）
9.红霉内酯的前体是( )
A 乙酸
B 丙酸
C 甲酸
D 丁酸
10、盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（）
A.分辨率高
B.变性作用小
C.杂质易除
D.沉淀易分离
11、“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（）
A.极性溶剂
B.非极性溶剂
C.水
D.溶剂
12、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（）
A. 过滤
B. 萃取
C. 离子交换
D. 蒸馏
13、下列哪种方法是由于细胞内冰晶的形成导致细胞破碎的（）
A. 真空干燥
B. 酶解法
C. 冻融法
D. 渗透压法
14、红霉素在pH 9.8时的分配系数（醋酸丁酯/水）为44.5，若用等体积的醋酸丁酯进行单级萃取，则理论收率为 ( )
A. 97.8%
B. 99.32%
C. 96.5%
D. 95.9%
15、在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用. （）
A. 紫外检测器
B.荧光检测器
C.蒸发光散射检测器
D.示差折光检测器
16、某抗生素以醋酸丁酯为流动相进行pH纸层析，酸性条件下比移值大，碱性条件下比移值小，
则该抗生素为（）
A. 弱碱性
B. 弱酸性
C.强碱性
D.强酸性
17、环孢菌素A是微生物产生的（）
A. HMG-CoA还原酶抑制剂
B.β-内酰胺酶抑制剂
C.氨基糖苷类抗生素
D. 免疫抑制剂
18、选用110树脂分离纯化链霉素，交换时pH应为（）
A．2～4 B. 4～6 C.6～8 D. 12～14
三、填空题（每空1分，共15分）
19. 工艺过程是由直接关联单元操作的次序与操作条件组成，包
括、、。
20、影响四环素发酵的因素包括：。
21、氨基糖苷类抗生素是由、氨基糖、糖组成的抗生素的总称。
22、链霉素是由链霉胍、链霉糖、构成的糖苷。
23、链霉素在温和的酸性条件下，可水解为链霉胍及。
24根据微生物的代谢产物类型，可把发酵分为、。
25、酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同，均属酶转化反应。但两者相比，酶转化法
所需设备及工艺简单，产物高，__ __ 高，生产周期_ _ 副产物少，酶的利用率也高。
26、为了促进四环素合成，阻止金霉素的合成，多通过加入竞争性的和抑氯剂-促进
剂M。
27、青霉素发酵液菌丝较大，一般用过滤。
28、多烯大环内脂的作用机理是与真菌细胞膜的结合，改变细胞膜的通透性。
四、回答题：（每题6分，共24分）
29. 怎样对青霉菌的发酵液进行预处理？
30、菌种保存的原理和方法?
31、简述氨基酸的生产方法有哪些？
32、简述生化药物有何特点。
五、分析综合题：（共25分）
33. 国家制定GMP、GCP的意义何在？其内容包括哪些？
34、简述怎样运用基因工程制备IL-2？
生物制药工艺学试题3参考答案
一、名词解释（每题2分，共16分分）
01、通过微生物的生命活动产生和累积特定代谢产物——药物的过程称为微生物发酵制药。
02、《药品生产质量管理规范》，对生产实行全面管理，包括药品从原料到成品再从出厂到售后的全过程。
03、分子含有β—内酰胺环的一类天然和半合成抗生素的总称。
04、指每毫克蛋白质所具有的生物活性，是组成蛋白质药物的一项重要指标。
05、一种生物制药中的温和”多阶式”分离，即将药物中的杂质一级一级分离。
06、一种用高浓度盐溶液提取某些与细胞结构结合牢固的生物大分子的方法。
07、在体外和体内对效应细胞的生长、增殖和分化起调控作用的一类物质。
08、主要指反义寡核苷酸及其核苷酸序列可与靶mNRA或靶DNA互补，抑制或封闭基因的转换和表达，或诱导RnaseH识别或切割RNA，使其丧失功能。
二、选择题（每题2分，共20分）
题号09 10 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 B B B C C A D B D C
三、填空题（每空1分，共15分）
19、化学合成反应或生物合成反应、分离纯化过程、质量控制
20,、培养基、温度、ph、溶氧量
21、氨基环醇
22、甲基-L-葡萄糖胺
23、链霉二糖胺
24、初级代谢产物、次级代谢产物
25、浓度转化率短
26、抑氯剂-溴化钠
27、鼓式过滤机
28、固醇类成分
四、回答题：（每题6分，共24分）
29、怎样对青霉菌的发酵液进行预处理？
答：青霉菌发酵液菌丝较大，一般在菌丝自溶前用鼓式过滤机过滤得第一次滤液，其ph值6.2~7.2之间，用硫酸调ph至4.5~5.0，再加入0.07%的溴代十五烷吡啶和硅藻土作为助滤剂，通过板框过滤机过滤得第二次滤液。第二次滤液澄清透明，可进行提取。
30、菌种保存的原理和方法?
答：菌种经过多次传代，会发生遗传变异，导致退化，从而丧失生产能力甚至菌株死亡，因此必须进行妥善保藏，保持不退化，长期存活。因此菌种保存原理是使其代谢处于不活跃状态，即生长繁
殖受抑制的休眠状态，可保持原有特性，延长生命时限，根据不同菌种的特点和对生长的要求，对孢子作为保存材料，人工创造低温、干燥、缺氧、避光、和营养缺乏等环境，便可长期进行保藏。
31. 简述氨基酸的生产方法有哪些？
答：①蛋白水解法，以毛发、血粉等为原料，通过酸、碱或酶水解成多种氨基酸的混合物，在进行分离纯化。②化学合成法，利用有机物合成和化学工程相结合的技术生产氨基酸的方法③酶法，利用微生物特定的酶系作为催化剂，使底物经过酶催化生成所需的产品④直接发酵法，直接按照生产菌株的特性发酵⑤微生物生物合成法，以氨基酸的中间产物为原料，用微生物将其转化为相应的氨基酸。
32. 简述生化药物有何特点。
答：①生物原材料复杂②生化物质种类多，有效成分含量低③生物材料有种属特性④药物活性与分子空间构象有关⑤对制备技术条件要求高。
五、分析综合题：（共25分）
33. 国家制定GMP、GCP的意义何在？其内容包括哪些？
答：①GMP即《药品生产质量管理规范》，其核心是全员全过程的管理。全体人员必须对产品
质量负责，涉及人员、厂房设备、原材料采购、入库、检验、发料、加工、制品及半成品检验、
分包装、成品检定、产品销售、运输、用户意见及反应处理等在内的全过程质量管理。②GCP
即《药品临床研究质量管理规范》，其有两个作用：一是为了在新药研究中保持支援受试者和
病人的安全和权利；二是有助于生产厂家申请临床的试验和销售许可证，能够提供符合质量的
有价值的临床资料。其涉及新药临床的所有人员都已明确规定了责任，以保证临床资料的科学性、可靠性、重现性。
34简述怎样运用基因工程制备IL-2？
答：①IL-2基因结构，人IL-2基因只有一个拷贝，定位于第4号染色体长臂的26~28区。IL-2
基因大约有4930bp，有4个外显子和3个内含子，外显子1上游有典型的启动子和增强子结构，外显子4下游有TGA终止密码子，其后26位核苷酸处有polyA信号等。②IL-2cDNA克隆的制备，在人白血病T细胞株中提取高活性IL-2mRNA作为模板，逆转录单链cDNA，再利用末端脱氧核苷酸转移酶、引物、DNA聚合酶等合成双链cDNA，然后经蔗糖密度梯度离心法分离此cDNA。通过G-C 加尾法将cDNA片段插入某质粒上，用重组质粒转化到大肠杆菌内，得到IL-2cDNA文库，再筛选含IL-2cDNA质粒的菌株。③IL-2的表达和纯化，利用大肠杆菌发酵培养和诱导表达，收集裂解菌液，离心沉淀收集包涵体。再通过利用IL-2的疏水性或与受体亲和层析方法进一步纯化，即可得到高纯度的IL-2。
生物制药工艺学试题4
一、名词解释（每题2分，共16分）
1、药物
2、抗生素生物检定法
3、差向化
4、逐级分离
5、超滤
6、溶出度
7、接种量
8、多肽类生化药
二、选择题（每题2分，共20分）
9.青霉素生物合成的最好碳源是（）
A葡萄糖 B 乳糖 C 麦芽糖 D 蔗糖
10. 红霉素发酵的种子经几级扩大培养后移入发酵罐。（）
A 1
B 2
C 3
D 4
11、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株，并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。（）
A．SAMP合成酶 B．SAMP裂解酶 C．PRPP转酰胺酶 D．IMP脱氢酶
12、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（）
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
13、GMP管理的核心是（）
A.质量保证部门
B.全员的全过程处理
C.研究部门
D.生产部门
14、从四环素发酵液中去除铁离子,可用（）
A. 草酸酸化
B. 加黄血盐
C. 加硫酸锌
D. 氨水碱化
15、用大肠杆菌作宿主表达重组DNA药物，缺点是（）
A.蛋白质表达量低
B.生长慢
C.产物无糖基修饰
D.难以获得工程菌
16、下列药物哪些是重组DNA药物（）
A.蛋白质工程药物
B.基因药物
C.天然生物药物
D.半合成生物药物
17、从树脂上将赖氨酸洗脱下来所采用的洗脱剂不包括（）
A.氨水
B.氨水+氯化铵
C.氢氧化钠
D.硫酸铵
18、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（）
A. 过滤
B. 萃取
C. 离子交换
D. 蒸馏
三、填空题（每空1分，共15分）
19. 红霉素的保存常用或保存。
20、四环类抗生素是以为母核的一类有机化合物。
21、根据菌体生长与产物生成的特征，可以把发酵过程分为菌体生长期、产物合成期和菌体自溶期延滞期、、减速期、静止期和衰亡期。
22、生物技术制药工艺包括上游过程和下游过程，上游过程的核心技术有
、、。
23、链霉素在温和的酸性条件下，可水解为链霉胍及。
24、写出下列离子交换剂类型：
CM-C________ _______ ,DEAE-C________ 。
25、生化物质在提取前，有时还用处理，其作用是使材料脱水，脱脂，使细胞结构疏松等。
26、青霉素在贮存的过程中会形成。
27、大环内脂类抗生素是以大环内脂为母体，通过，以苷键和1~3个分子的糖相连结的一类抗生物质。
28、_________ ，_________ 和___________ 是重组DNA技术的三大基本元件。
四、回答题：（每题6分，共24分）
29. 简述胸腺素的生产工艺流程。
30、请简述生物药物质量检验的程序。
31、如何减少四环素成品的差向四环素和ADT的含量？
32、试简要比较链霉素在酸性甲醇溶液和稀碱溶液中的降解反应。
五、分析综合题：（共25分）
33. 请试述维生素C两步发酵法的工艺流程及控制要点。
34、链霉素在分离纯化中如何将二氢链霉素和其他杂质分开？
生物制药工艺学试题4参考答案
一、名词解释（每题2分，共16分分）
01、用于预防、治疗人类疾病，有目的的调节人体生理功能，并规定有适应症和用法、用量的物质。
02、利用抗生素对敏感菌的杀死或抑制程度作为客观指标来衡量抗生素的效力。
03、有些抗生素如四环素，在弱酸性条件下不对称碳原子可逆的发生异构化，形成差向四环素。
04、一种生物制药中的温和”多阶式”分离，即将药物中的杂质一级一级分离。
05、在压力差的驱动下用可以阻挡不同大小分子的滤板或滤膜将液体过滤的方法。
06、药物从片剂或胶囊等固体口服制剂，在规定的介质中在一定条件下，溶出的速度和程度。
07、是指接入的种子液体积和接种后的培养液总体积之比。
08、以多肽激素和多肽细胞生长调节因子为主的一大类内源性成分。
二、选择题（每题2分，共20分）
题号09 10 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 B B A C B B C A D C
三、填空题（每空1分，共15分）
19、砂土管冷冻管
20,、四并苯
21、对数生长期
22、微生物发酵工程、基因工程、细胞培养工程
23、链霉二糖胺
24、阳离子交换纤维素阴离子交换纤维素
25、丙酮
26、青霉素酸
27、羟基
28、供体，受体载体
四、回答题：（每题6分，共24分）
29、简述胸腺素的生产工艺流程。
答：胸腺（绞碎）→胸腺碎块（生理盐水）→提取液组分1（加热去蛋白）→上清液组分2（丙酮、-10°C）→丙酮粉组分3（磷酸盐缓冲液、硫酸铵饱和度0.25）→上清液组分4（硫酸铵饱和度0.50）→盐析物（tris-HCl缓冲液）→超滤液（脱盐、干燥）→胸腺素
30、请简述生物药物质量检验的程序。
答：①药物的取样，取样应具有科学性、真实性、代表性。②药物的鉴别试验检验其是否为此品③杂质检查④药物的安全性保证药物无毒无菌等⑤药物的含量测定⑥检验报告的书写必须真实和有原始记录。
31、如何减少四环素成品的差向四环素和ADT的含量？
答：首先四环素发酵液通过加入草酸除去钙离子和促使蛋白质凝固等手段进行预处理，为了使差向四环素和ADT的含量降低，此过程应在低温、短时下进行。此外，还可此外还可在母液中加尿素，使其与四环素形成复合物而纯化；也可加入丁醇：乙醇（3:1）混合溶剂，加入乙醇可降低母液四环素损失；但降低成品中的ADT含量的最有效方法是筛选不产生ADT的菌株。
32. 试简要比较链霉素在酸性甲醇溶液和稀碱溶液中的降解反应。
答：在酸性甲醇溶液中：链霉素水解为链霉胍和甲基链霉二糖胺苷二甲醇缩醛，后者继续与稀硫酸作用则又转化为醛和甲基链霉二糖胺苷，但如与浓盐酸共热则会产生链霉糖和N-甲基-L-葡萄糖胺。在稀碱溶液中：链霉素降解为链霉胍和链霉二糖胺，后者进一步水解为链霉糖和N-甲基-L-葡萄糖胺，而链霉糖则经分子重排而形成麦芽酚。
五、分析综合题：（共25分）
33. 请试述维生素C两步发酵法的工艺流程及控制要点。
答：维生素C的工艺流程：D-山梨醇（醋酸杆菌氧化）→L-山梨糖（假单胞菌生物转化）→2-酮-L-古洛糖酸（内酯化、烯醇化）→维生素C
控制要点:整个过程中山梨糖的制备是关键的一步，用醋酸菌能使山梨醇氧化成山梨糖。
①山梨醇发酵菌种应选用醋酸菌属生产菌。②发酵条件：温度为26~30°C、最适ph为4.4~6.8、山梨醇的浓度为19.8%、通气量为1800ml/min、氮源为有机氮源、排除能干扰产生菌发酵的铁和铜等金属离子。③第二步发酵是氧化葡萄杆菌或假单胞杆菌经过二级种子扩大培养转移至少含有第一步发酵液的培养基中，在28~34°C下培养60~70h放罐发酵液转化精制获得维生素C。
34链霉素在分离纯化中如何将二氢链霉素和其他杂质分开？
答：分离二氢链霉素和其他杂质可用以下方法：①高交联度树脂精制，高交联度的氢型磺酸树
脂的结构紧密，金属离子可以自由地扩散答孔隙度很小的树脂内部与阳离子交换，而有机大离
子就难于扩散到树脂内部进行交换。用这种树脂来精制链霉素溶液，因溶液中的小离子与链霉
素有机大离子在树枝上的吸附速率不同，从而起到离子筛选的作用。②浓缩和活性炭脱色精制，为了干燥要求，精制液需要蒸发浓缩。再浓缩之前还要用活性炭脱色处理，将所得精制液用硫
酸或氢氧化钡调ph值至4.3~5.0，并按精制液透光度的不同加入不同量的活性炭，进行常温脱
色得透光度在95%以上的滤出液。
生物制药工艺学试题5
一、名词解释（每题2分，共16分）
1、化学全合成工艺
2、微生物发酵制药
3、干扰素
4、GMP
5、差异毒力
6、热源
7、细胞生长调节因子
8、效价
二、选择题（每题2分，共20分）
9.是利用生物机体、组织、细胞，生产制造或从中分离得到的具有预防、诊断、和治疗功能的药物。
A 生物技术药物
B 生物技术产品
C 生物技术制品
D 生物药物
10. 红霉素发酵培养基使用的各种碳源效果大小顺序为（）
A 蔗糖＞葡萄糖＞淀粉＞糊精
B 糊精＞蔗糖＞葡萄糖＞淀粉
C 淀粉＞葡萄糖＞淀粉＞糊精
D 葡萄糖＞糊精＞蔗糖＞淀粉
11、青霉素前体氨基酸的生物合成中不包括（）
Aα-氨基己二酸B缬氨酸 C 赖氨酸 D半胱氨酸
12、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（）
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
13、β—内酰胺类抗生素是通过控制D来干扰细胞壁的形成的
A 肽聚糖转肽酶
B D-丙氨酸羧肽酶
C肽聚糖水解酶 D肽聚糖转肽酶、D-丙氨酸羧肽酶
14、从四环素发酵液中去除铁离子,可用（）
A. 草酸酸化
B. 加黄血盐
C. 加硫酸锌
D. 氨水碱化
15、某抗生素以醋酸丁酯为流动相进行pH纸层析，酸性条件下比移值大，碱性条件下比移值小，则该抗生素为（）
A. 弱碱性
B. 弱酸性
C.强碱性
D.强酸性
16、下列药物哪些是重组DNA药物（）
A.蛋白质工程药物
B.基因药物
C.天然生物药物
D.半合成生物药物
17、化学药物合成工艺路线设计，应从剖析药物着手。
A 化学性质
B 物理性质
C 化学结构
D 生产成本
18、红霉素中的去氧氨基已糖和红霉糖的碳架来源于（）
A蔗糖B乳糖 C 甘露糖 D葡萄糖
三、填空题（每空1分，共15分）
19. 链霉素是由链霉胍、链霉糖、构成的糖苷。
20、生化药品的最大特点是、。
21、青霉素属于β—内酰胺类抗生素，它的性质很不稳定，用溶剂萃取法分离时，整个提炼过程应在低温、快速、__________下进行。
22、四环类抗生素是一类以四并苯为母核的一族抗生素；链霉素是_ 类抗生素；红霉素是分子内含有元环大环内酯类抗生素。
23、沉没培养过程中金色链霉菌的变化特征可划分为四个生长期：原生菌丝期、次生菌丝期、分泌期、。
24、多氧大环内脂的作用机理是与的特殊部位结合，选择性的抑制原核生物蛋白质合成。
25、青霉素的萃取方式一般采用萃取。
26、维生素C的工业生产路线有和。
27、在青霉素的发酵培养过程中补加的前体为。
28、制药工艺学是研究药的工业生产过程的共性规律及其应用的一门学科，包括、和。
四、回答题：（每题6分，共24分）
29. 怎样对青霉菌的发酵液进行预处理？
30、在沉淀法提取四环素过程中如何控制结晶？
31、产生杂合抗生素的方法有哪些？
32、为什么说四环类抗生素具有宽广的抗菌谱？
五、分析综合题：（共25分）
33. 生物药物与化学药物相比有哪些特性？
34、如何根据青霉素生产菌特征进行发酵过程控制？
制药工艺学课后答案
第二章化学制药工艺路线的设计和选择 2-1工艺路线设计有几种方法，各有什么特点？如何选择？ 答：（1）类型反应法，类型反应法是指利用常见的典型有机化学反应与合成方法进行合成工艺路线设计的方法。类型反应法既包括各类化学结构的有机合成通法，又包括官能团的形成，转换或保护等合成反应。对于有明显结构特征和官能团的化合物，通常采用类型反应法进行合成工艺路线。 （2）分子对称法，药物分子中存在对称性时，往往可由两个相同的分子片段经化学合成反应制得，或在同一步反应中将分子的相同部分同时构建起来。该法简单，路线清晰，主要用于非甾体类激素的合成。 （3）追溯求源法，从药物分子的化学结构出发，将其化学合成过程一步步逆向推导，进行寻源的思考方法，研究药物分子化学结构，寻找出最后一个结合点，逆向切断链接消除重排和官能团形成与转化，如此反复追溯求源直到最简单的化合物，即期始原料为止，即期始原料应该是方便易的，价格合理的化学原料或天然化合物，最后是各步的合理排列与完整合成路线的确定。 2—2工艺路线评价的标准是什么？为什么？ 答：原因：一个药物可以有多条合成路线，且各有特点，哪条路线可以发展成为适合于工业生产的工艺路线则必需通过深入细致的综合比较和论证，从中选择出最为合理的合成路线，并制定出具体的实验室工艺研究方案。 工艺路线的评价标准：1）化学合成途径简捷，即原辅材料转化为药物的路线简短;2）所需的原辅材料品种少并且易得，并有足够数量的供应； 3）中间体容易提纯，质量符合要求，最好是多不反应连续操作； 4）反应在易于控制的条件下进行，如无毒，安全； 5）设备要求不苛刻； 6）“三废”少且易于治理； 7）操作简便，经分离，纯化易达到药用标准； 8）收率最佳，成本最低，经济效益好。 第五章氯霉素生产工艺 5-2、工业上氯霉素采用哪几种合成路线？各单元步骤的原理是什么？关键操作控制是什么？ 答:工业上氯霉素采用具有苯乙基结构的化合物原料的合成路线；
《生物制药工艺学》复习思考题
《生物制药工艺学》复习思考题 第一章生物药物概论 1、生物药物有哪几类？DNA重组药物与基因药物有什么区别？ 2、生物药物有哪些作用特点？ 3、DNA重组药物主要有哪几类？举例说明之。 4、术语：药物与药品，生物药物，DNA重组药物，基因药物，反义药物，核酸疫苗，RNAi 第二章生物制药工艺技术基础 1、生物活性物质的浓缩与干燥有哪些主要方法？ 2、简述生物活性物质分离纯化的特点和分离纯化的主要原理。 3、怎样保存微生物菌种？何谓菌种退化？如何检查菌种退化？ 4、诱变育种的总体流程是怎样的？选择出发菌需注意哪些事项？ 5、生物制药工艺中试放大的目的是什么？ 6、酶固定化的方法有哪些类别？ 7、术语：冷冻干燥，喷雾干燥，薄膜浓缩，自然选育，诱变育种，蛋白质工程，转基因动物，蛋白质组学，酶工程，immobilized enzyme，抗体酶，模拟酶，组合生物合成，药物基因组学，DNA Shuffling，定向进化，甘油冷冻保藏法，液氮保藏法，斜面保藏法，沙土管保藏法 第三章生物材料的预处理 1、去除发酵液中杂蛋白有哪几种方法？ 2、去除发酵液中钙、镁、铁离子的方法有哪些？ 3、影响絮凝效果的主要因素有哪些？ 4、细胞破碎有哪些方法？各有什么特点？ 5、超声波破碎细胞的原理？ 6、术语：凝聚作用，絮凝作用，渗透压冲击法，错流过滤，超声波破壁，酶法破壁，高压匀浆法，高速珠磨法，反复冻融法，渗透压冲击法，液氮研磨法，丙酮粉 第四章萃取法 1、溶剂萃取法的基本原理，其特点是什么？ 2、溶剂萃取法按操作方式不同，可分为哪几类？各有什么特点？ 3、影响有机溶剂萃取的因素有哪些？萃取剂的选择需遵循哪些原则？ 4、使用有机溶剂萃取时，改变pH值将如何影响酸性或碱性抗生素的分配系数？ 5、乳化剂为何能使乳状液稳定？ 6、破坏乳状液的方法有哪些？
生物制药工艺学
三、名词解释 1. 生物制品（Biological Products）生物制品是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断。人用生物制品包括：细菌类疫苗(含类毒素) 、病毒类疫苗、抗毒素及抗血清、血液制品、细胞因子、生长因子、酶体内以及体外诊断制品，以及其他生物活性制剂，如毒素、抗原、变态反应原、单克隆抗体、抗原抗体复合物、免疫调节剂及微生态制剂等。 2. 分叉中间体在微生物代谢过程中，一些中间代谢产物既可以被微生物用来合成初级代谢产物，也可以被用来合成次级代谢产物，这样的中间体被称为分叉中间体。 3. 热阻和相对热阻热阻是指微生物在某一种特定条件下（温度和加热方式）的致死时间。 相对热阻是指某一种微生物在某一条件下的致死时间与另一种微生物在相同条件下的致死时间之比。 4. 种子（广义和狭义）广义种子: 从菌种开始，到发酵罐接种之前的所有生产过程。 狭义种子：种子罐中的种子。 5. 摄氧率单位体积发酵液每小时消耗氧的量。 6. 呼吸强度单位重量的菌体（折干）每小时消耗氧的量。 7. 呼吸临界氧浓在溶氧浓度低时，呼吸强度随溶氧浓度增加而增加，当溶氧浓度达到某一值后，呼吸强度不再随溶氧浓度的增加而变化，此时的溶氧度称为呼吸临界氧浓度。影响因素：微生物的种类、培养温度以及生长阶段。 8. 凝聚价或凝聚值电解质的凝聚能力可用凝聚价或凝聚值表示，定义为使胶粒产生凝聚作用的最小电解质浓度。化合价越高，凝聚能力越强。凝聚能力：Al3+>Fe 3+>H+>Ca2+>Mg2+>K+ >Na+>Li+ 常用的凝聚剂：Al 2(SO 4 ) 3 ·18H 2 O、AlCl 3 ·6H 2 O、FeCl 3 、ZnSO 4 、MgCO 3 等 9. 凝聚作用在某些电解质作用下，使扩散双电层的排列电位降低，破坏胶体系统的分散状态，而使之凝聚的过程。影响凝聚作用的主要因素是无机盐的种类、化合价以及无机盐的用量。 10. 絮凝作用某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间产生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。 11. 多级错流萃取料液经萃取后的萃余液再用新鲜萃取剂进行萃取的方法。 12. 多级逆流萃取在第一级中加入料液，萃余液顺序作为后一级的料液，而在最后一级加入萃取剂，萃取液顺序作为前一级的萃取剂。 13. 超临界流体抗溶剂法（Supercritical Fluid Anti-solvent，SAS）先用有机溶剂溶解溶质，再加入超临界流体作抗溶剂，使溶质的溶解度大大下降，溶质从溶液中结晶析出。 14. 超临界溶液快速膨胀法（Rapid Expansion of Supercritical Solution, RESS）是利用高密度的超临界流体溶解固体溶质，通过喷嘴快速泄压至1个大气压的低密度气体，溶质的溶解度急剧减小至万分之一以下，造成固体溶质结晶析出。 15. 道南电位由于带电荷粒子在不同相间的分布不同而产生的相间电位差即为道南电位。 16. 吸附等温线当固体吸附剂从溶液中吸附溶质达到平衡时，其吸附量与溶液浓度和温度有关。当温度一定时，吸附量与浓度之间的函数关系称为吸附等温线。 17. 批一次性投入料液，不补料，直到放罐。(或许） 18. 浓差极化当溶剂透过膜而溶质留在膜上时，它使得膜面上溶质浓度增大而高于主体中溶质浓度，这种现象称为浓差极化。为避免浓差极化现象，通常采用错流过滤。 19. 亲和色谱（Affinity Chromatography）具有很高的选择和分离性能以及较大的载量，纯化倍数高，并能保持较高的活性。 20. 疏水相互作用色谱（Hydrophobic Interaction Chromatography）利用蛋白质表面存有的疏水性部位，与带有疏水性配基的载体在高盐浓度时结合，洗脱时将盐浓度逐渐降低，蛋白质因疏水性不同而逐个地先后被洗脱而分离。该法中蛋白质与固定相结合力较弱，利于保持活性。 21. 膨胀床色谱传统色谱的最大缺点是不能处理含固体颗粒的料液。色谱吸附剂直接与原料液在搅拌罐中混合来吸附目标产物或流化床吸附。膨胀床色谱操作过程：被处理的料液从膨胀床底部泵入，床内的吸附剂将不同程度地向上膨胀，料液中的固体颗粒可以顺利地通过床层，目标产物在膨胀床内可被吸附剂吸附，从而可达到从料液中吸附和初步纯化目标化合物的目的。原理：吸附介质颗粒在向上流动液体的作用下膨胀起来，液体中的目
生物制药工艺学题库
第一章生物药物概述 1、生物药物(biopharmaceuticals) 指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液或其代谢产物，综合利用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理和方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。 2、抗生素（antibiotics）： 抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的化学物质”。 3、生化药品 从生物体分离纯化得到的一类结构上十分接近人体内的正常生理活性物质，具有调节人体生理功能，达到预防和治疗疾病的物质 4、生物制品（biological products） 是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等直接加工制成，或用现代生物技术方法制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。 5、基因工程药物 采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多肽和蛋白质类药物 6、生物药物分类 按生理功能和用途分类 （1）治疗药物：对疑难杂症如肿瘤、爱滋病、免疫性疾病、内分泌障碍等具有特殊的作用；（2）预防药物：对传染病的预防； （3）诊断药物：免疫诊断试剂、单克隆抗体诊断试剂、酶诊断试剂、放射性诊断药物和基因诊断药物等；某些生物活性物质亦是检测疾病的指标，如谷草转氨酶等； （4）其它生物医药用品：生物药物在其他方面应用也很广泛：如生化试剂、保健品、化妆品、食品、医用材料等。 按原料的来源分类 （1）人体组织来源的生物药物：主要有人血液制品类、人胎盘制品类、人尿制品类；（2）动物组织来源的生物药物：动物的脏器、其他小动物制得的药物如蛇毒、蜂毒等。（3）植物组织来源的生物药物：中草药、有效成分； （4）微生物来源的药物：抗生素、酶、氨基酸、维生素等； （5）海洋生物来源的药物； 7、生物药物的特性 （1）药理学特性 （2）在生产、制备中的特殊性 （3）检验上的特殊性 （4）剂型要求的特殊性 （5）保藏及运输的特殊性 第二章生物药物的质量管理与控制 1、生物药物质量检验的程序与方法 基本程序：取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告 2、药物的ADME A: absorption，药物在生物体内的吸收； D: distribution, 药物在生物体内的分布； M: metabolism，药物在体内的代谢转化； E: excretion，药物及其代谢产物自体内的排除。 3、药物的三级质量标准 1. 国家药典：凡例、正文、附录三大部分； 2. 部颁药品标准：性质与药典相同，具有法律的约束力。收载《中国药典》未收载的，但常用的药品及制剂。 3. 地方药品标准：对药典以外的某地区常用的药品、制剂的规格和标准，常制定地区性的
生物制药工艺学思考题和答案解析
抗生素发酵生产工艺 1. 青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义？ 青霉素是发现最早，最卓越的一种B-内酰胺类抗生素，它是抗生素工业的首要产品，青霉素是各种半合成抗生素的原料。青霉素的缺点是对酸不稳定，不能口服，排泄快，对革兰氏阴性菌无效。青霉素经过扩环后，形成头孢菌素母核，成为半合成头孢菌素的原料。2. 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制？ 青霉素在深层培养条件下，经历7个不同的时期，每个时期有其菌体形态特性，在规定时间取样，通过显镜检查这些形态变化，用于工程控制。 第一期：分生孢子萌发，形成芽管，原生质未分化，具有小泡。 第二期：菌丝繁殖，原生质体具有嗜碱性，类脂肪小颗粒。 第三期：形成脂肪包含体，积累储蓄物，没有空洞，嗜碱性很强。 第四期：脂肪包含体形成小滴并减少，中小空泡，原生质体嗜碱性减弱，开始产生抗生素。 第五期：形成大空泡，有中性染色大颗粒，菌丝呈桶状。脂肪包含体消失，青霉素产量提高。 第六期：出现个别自溶细胞，细胞内无颗粒，仍然桶状，释放游离氨，pH上升。 第七期：菌丝完全自溶，仅有空细胞壁。一到四期为菌丝生长期，三期的菌体适宜为种子。 四到五期为生产期，生产能力最强，通过工艺措施，延长此期，获得高产。在第六期到来之前发束发酵。 3. 青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？ 控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标，不同时期分段控制。在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，菌体浓度。最后要注意消沫，影响呼吸代谢。 4. 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？ 青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。提炼工艺包括如下单元操作： ①预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。 ②萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。 ③脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。 ④结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐可直接结晶析出。 氨基酸发酵工艺 1. 如何对谷氨酸发酵工艺过程进行调控？ 发酵过程流加铵盐、尿素、氨水等氮源，补充NH4+；生物素适量控制在2-5μg/L；pH 控制在中性或微碱性；供氧充足；磷酸盐适量。 2. 氨基酸生产菌有什么特性，为什么？ L-谷氨酸发酵微生物的优良菌株多在棒状杆菌属、小短杆菌属、节杆菌属和短杆菌属中。具有下述共同特性：①细胞形态为短杆至棒状；②无鞭毛，不运动；③不形成芽孢；④革兰氏阳性；⑤生物素缺陷型；⑥三羧酸循环、戊糖磷酸途径突变；⑦在通气培养条件下产生大量L-谷氨酸。 3. 生物素在谷氨酸发酵过程中的作用是什么？
中医药大学生物制药工艺试卷
山东***大学 专业 年级（ 科） 《生物制药工艺学》期末考试试卷（A 卷） 姓 名： 学 号： 班 级: 考试时间： 补（重）考：（否） 题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总分 核分人 得分 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 说明：本试卷总计100分，全试卷共5页，完成答卷时间2小时。 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 一、填空题（本大题共10题，每题1分，共10分） 1．微生物的诱变育种常用的诱变剂有物理诱变剂、化学诱变剂和 。 2．工业生产中对大量培养基和发酵设备的灭菌，最有效最常用的方法是 。 3．微生物菌种的 是指利用微生物在一定条件下产生自发突变的原理，通过 分离、筛选排除衰退型菌株，选择维持原有生产水平的菌株的过程。 4．在超临界流体萃取过程中，为提高溶解度小的物质的溶解能力，常加入 。 5．采用液氮超低温保藏法保藏菌种时，应将盛装菌种的安瓿管保藏在 ℃液 氮管中进行保存。 6．高分子聚合物沉淀法中应用最多的沉淀剂是 。 7．疏水相互作用色谱常用的分离载体为多聚糖和 。 8．较纯的固体一般有 和无定形沉淀两种状态。 9．抗生素包括天然抗生素、半合成抗生素和 。 10．需要通过工业发酵生产的维生素为 和 。 得分 阅卷人 （签全名）
二、单项选择题（本大题共10 题，每题1分，共10分） 1．采用冷冻干燥法保存菌种时常用的保护剂是（ ）。 A ．乙醇 B ．甘油 C.脱脂牛奶 D ．液体石蜡 E ．蛋白胨 2．蛋白质盐析常用的中性盐是（ ）。 A ．碳酸钙 B ．磷酸钠 C.氯化钠 D ．硫酸镁 E ．硫酸铵 3．采用有机溶剂沉淀法时，最重要的因素是（ ）。 A ．温度 B ．湿度 C.压力 D ．pH E ．金属离子 4．次级代谢产物的产生菌一般是（ ）。 A ．细菌 B ．放线菌 C.霉菌 D ．噬菌体 E ．真菌 5．利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法，称为（ ）。 A ．离子交换法 B ．等电点沉淀法 C.亲和色谱法 D ．双水相萃取法 E ．吸附法 6．聚电解质沉淀法中应用较多的沉淀剂为（ ）。 A ．聚乙二醇 B ．酸性多糖 C.EDTA D ．EDTA-Na E ．硫酸铅 7．下面属于β-内酰胺类抗生素的是（ ）。 A ．青霉素 B ．链霉素 C.红霉素 D ．土霉素 E ．金霉素 8．目前分辨率和选择性最好的凝胶过滤介质为（ ）。 A ．聚丙烯酰胺凝胶 B ．葡聚糖凝胶 C.琼脂糖凝胶 D ．聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶 E ．葡聚糖琼脂糖凝胶 9．结晶过程的推动力是（ ）。 A ．温度 B ．pH C.溶质溶度 D ．过饱和度 E ．时间 10．链霉素发酵生产的菌种为（ ）。 A ．产黄青霉菌 B ．灰色链霉菌 C.红色链霉菌 D ．金色链霉菌 E ．土壤细菌 三、多项选择题（本大题共10题，每题1分，共10分） 得分 阅卷人 （签全名） 得分 阅卷人 （签全名）
生物制药工艺处理学考试2013-12(A卷)
中国药科大学 生物制药工艺学 期末试卷A卷 2013-2014学年第一学期 专业班级学号姓名 题号一二三四总分 得分 核分人： 得分评卷人一、填空题（每空0.5分，共30分） 1、细胞破碎包括哪三大类方法、和。 2、萃取因素也称萃取比，其定义为被萃取溶质进入的总量与该溶质在 中总量之比。 3、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度，其中影响晶体大小的主要因素有 ， ， ， 。 4、大孔网状聚合物吸附剂是在树脂聚合时加入 致孔剂，待网格骨架固化和链结构单元形成后，用溶剂萃取或蒸馏水洗将致孔剂去掉，形成不受外界环境条件影响的 ，其孔径远大于2～4nm，可达 ，故称“大孔”。 5、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大倍的柱体积， 的柱比，较吸液量、较粒的凝胶固定相。 6、写出下列离子交换剂类型：732 ，724 ，717 ，CM-C , DEAE-C ，PBE94 。 7、请写出下列药物英文的中文全称：IFN（Interferon）、 第1页（共8页）
IL(Interleukin) 、 CSF（Colony Stimulating Factor）、rhGH（Recombinant Human Growth Hormone）、Ins（Insulin）。 8、生物药物的分类：、、、 。 9、在生化制药工艺中干燥的方法主要包括：、 、。 10、疫苗制备时，可用 、 和 方法扩增病毒。 11、各向异性膜分为两层，一层是，厚度为0.1~1μm，决定了膜的 性质，另一层是，厚度约0.1mm，作用是。 12、制备型高效液相色谱的重要参数有、、 、。 13、密度梯度离心常用的介质有、 、。 14、用100μmol/L NADH使乳酸脱氢酶吸附在固定化丙酮酸类似物上，若NADH从洗脱液中去除，则脱氢酶被洗脱，这种洗脱方法称为。 15、生化药物的主要资源有 、 、 和 。 16、粘多糖是一类含有 和 的多糖。 17、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)脂质是 ，临床应用效果 ，原因是 。从发现年代上看,该物质 于青霉素被发现。 第2页（共8页）
生物制药工艺学习题(含复习资料
生物制药工艺学习题集（含答案） 第一章生物药物概述 一、填空： 1、我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中药 2、现代生物药物已形成四大类型，包括基因重组多肽和蛋白质、基因药物、天然生化药物、合成与部分合成的生物药物 3、请写出下列药物英文的中文全称：（）干扰素、()白介素、（）集落刺激因子、（）促红细胞生成素、（）表皮生长因子、（）神经生长因子、（）重组人生长激素、（）胰岛素、（）人绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素、超氧化物歧化酶、组织纤溶酶原激活物 4、常用的β-内酰胺类抗生素有青霉素、头孢菌素；氨基糖苷类抗生素有链霉素；大环内酯类抗生素有红霉素；四环类抗生素有土霉素；多肽类抗生素有杆菌肽；多烯类抗生素有两性霉B；蒽环类抗生素有阿霉素 5、嵌合抗体是指用人源抗体恒定区替换鼠源抗体恒定区，保留抗体可变区；人源化抗体是指抗体可变区中仅（决定簇互补区）为鼠源，其（骨架区）及恒定区均来自人源。 6、基因工程技术中常用的基因载体有质粒、噬菌体（）、黏粒（）、病毒载体等。 二、选择题：
1、以下能用重组技术生产的药物为 （B） A、维生素 B、生长素 C、肝素 D、链霉素 2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物 （C） A、洛伐他汀 B、干扰素 C、肝素 D、细胞色素C 3、能用于防治血栓的酶类药物有 （D） A、 B、胰岛素 C、天冬酰胺酶 D、尿激酶 4、环孢菌素是微生物产生的 （A） A、免疫抑制剂 B、酶类药物 C、酶抑制剂 D、大环内酯类抗生素 5、下列属于多肽激素类生物药物的是 （D） A、 B、四氢叶酸 C、透明质酸 D、降钙素 6、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是 （D） A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸，使之和人胰岛素序列一致
生物制药学复习题.doc
中国药科大学生物制药工艺学期末试卷（A 卷） 一、填空题（每空0.5分，共30 分） 1．酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同，均属酶转化反应。但两者相 比，酶转化法所需设备及工艺简单，产物浓度高，转化率高，生产周期短，副产物少，酶的利用率也高。 2．多肽的化学合成有液相合成和固相合成，常用的氨基保护基有苄氧羰基、叔丁氧羰基（BOC）和9-芴甲氧羰基(Fmoc) 。其中Fmoc 最常用。3．到目前为止，多糖的构效关系方面的研究还是很不完善的，但可以确定多糖的活 性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量、及多糖中的取代基等密切 相关。 4、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传 质阻力、固定相中传质阻力。 5、写出下列离子交换剂类型：732 强酸型阳离子交换树脂，724 弱酸型阳离子 交换树脂，717 强碱型阴离子交换树脂，CM-C 阳离子交换纤维 素,DEAE-C 阴离子交换纤维素，PBE94 阴离子交换剂。 6、常用的吸附剂有活性炭，硅胶和大孔吸附树脂等。 7、过饱和溶液的形成方法有蒸发法、温度诱导法、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、 等电点法、微量扩散法、化学反应结晶、共沸蒸馏结晶（八选七）。 8、根据色谱机理，色谱柱分为：反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色 谱（或亲和色谱）。 10、透析的方法有：旋转透析器，平面透析器，连续透析器，浅流透析器。 11、常用的制备型离心机转子有角度转子，水平转子，区带转子，垂直转子。 12、克服浓差极化现象的措施有搅拌，震动，错流，切流。 13、供体，受体和载体是重组DNA技术的三大基本元件 14、写出下列英文缩写的中文名称：IFN 干扰素；IL-2 白介素－2 ；TNF 肿瘤坏死因子。 15、青霉素属于β-内酰胺类抗生素，它的性质很不稳定，用溶剂萃取法分离时整个提炼过程应在低温，快速，准确调节pH 值下进行。 16、四环类抗生素是一类以四并苯（萘并萘）为母核的一族抗生素；链霉素是氨基糖苷类抗生素；红霉素是分子内含有14 元环大环内酯类抗生素。 二、名词解释（每小题3 分，共24分） 1、基因药物：核酸类药物，以遗传物质DNA、RNA 为治疗物质基础的药物（1 分），如核酸疫苗、反义药物。（1 分）与基因工程类药物不同，基因工程药物化学组成上主要是蛋白质或多肽，但基因药物组成上主要为核酸（1 分）。
生物制药工艺学习题汇总
第三章 填空题 1. 反应溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等。 2.水、乙醇、乙酸、乙二胺等属于质子溶剂，乙醚、二氯甲烷、丙酮、吡啶等属于非质子溶剂，甲苯、正己烷、环己烷等属于惰性溶剂。 选择题 1.可逆反应属于（ A ） A. 复杂反应 B. 平行反应 C. 基元反应 D. 简单反应 3.在溶剂的作用描述中，不正确的是（ B ） A.使反应分子能够分布均匀、增加分子间碰撞和接触的机会、有利于传热和散热。 B.溶剂必须是易挥发的 C.溶剂必须是惰性的，不能与反应物或生成物反应 D.溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等 简答题 单分子反应，双分子反应，一级反应，二级反应之间的关系？ 答：在某基元反应过程中若只有一分子参与反应则称为单分子反应。多数的一级反应为单分子反应。当相同或不同的两分子碰撞时相互作用而产生的反应称为双子反应，即为二级反应。 化学合成药物工艺研究的主要内容是什么？ 答：化学合成药物工艺研究的主要内容有7个：配料比、溶剂、温度和压力、催化剂、反应时间及其监控、后处理、产品的纯化和检验。 第四章 1.简述天然提取法制备手性药物的一般步骤？ 答：①酶法分析②酶催化的还原反应③酶催化的氧化反映④酶催化的不对称合成反应 ⑤酶催化的转氨基化作用 2.什么是手性药物，其构型与活性的特点是什么？ 答：具有药理活性的手性化合物就是手性药物。①两个对映体具有相同的药理作用。②两个对映体中的一个有药理活性，另一个则无明显作用。③两个对映体的药理作用不同，上市后用于不同的适应症。④在消旋体中增加一种对映体的比例可调整临床疗效。⑤两个对映体中的一个有治疗价值，另一个则有不良作用。 第五章 选择题 1、氯霉素抗菌谱广，而最主要的不良反应是（D） A、二重感染 B、胃肠道反应 C、对肝脏严重损害 D、对造血系统的毒性 E、影响骨、牙生长 2、与氯霉素特点不符的是(A) A、口服难吸收 B、易透过血脑屏障 C、适用于伤寒的治疗 D、骨髓毒性明显 E、对早产儿、新生儿可引起灰婴综合症 3、氯霉素的下述不良反应中，哪项是与剂量和疗程无关的严重反应？（A） A、不可逆的再生障碍性贫血 B、灰婴综合征 C、可逆的各类血细胞减少 D、溶血性贫血 E、出血现象 4、可能拮抗氯霉素抗菌作用的药物是（C） A、磺胺类 B、庆大霉素 C、红霉素 D、四环素 E、多黏菌素
生物制药工艺学试题4参考答案
湖南城市学院生物工程专业 《现代生物制药工艺学》考试试卷标准答案及评分细则考核方式: 闭卷考试时量：120 分钟试卷类型：A 一、名词解释（每题2分，共16分分） 01、用于预防、治疗人类疾病，有目的的调节人体生理功能，并规定有适应症和用法、用量的物质。 02、利用抗生素对敏感菌的杀死或抑制程度作为客观指标来衡量抗生素的效力。 03、有些抗生素如四环素，在弱酸性条件下不对称碳原子可逆的发生异构化，形成差向四环素。 04、一种生物制药中的温和”多阶式”分离，即将药物中的杂质一级一级分离。 05、在压力差的驱动下用可以阻挡不同大小分子的滤板或滤膜将液体过滤的方法。 06、药物从片剂或胶囊等固体口服制剂，在规定的介质中在一定条件下，溶出的速度和程度。 07、是指接入的种子液体积和接种后的培养液总体积之比。 08、以多肽激素和多肽细胞生长调节因子为主的一大类内源性成分。 二、选择题（每题2分，共20分） 题09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 答 案 B B A C B B C A D C 三、填空题（每空1分，共15分） 答案 19、砂土管冷冻管 20,、四并苯 21、对数生长期 22、微生物发酵工程、基因工程、细胞培养工程 23、链霉二糖胺 24、阳离子交换纤维素阴离子交换纤维素 25、丙酮 26、青霉素酸 27、羟基 28、供体，受体载体 四、回答题：（每题6分，共24分） 29、简述胸腺素的生产工艺流程。 答：胸腺（绞碎）→胸腺碎块（生理盐水）→提取液组分1（加热去蛋白）→上清液组分2（丙酮、-10°C）→丙酮粉组分3（磷酸盐缓冲液、硫酸铵饱和度0.25）→上清液组分4（硫酸铵饱和度0.50）→盐析物（tris-HCl缓冲液）→超滤液（脱盐、干燥）→胸腺素 30、请简述生物药物质量检验的程序。 答：①药物的取样，取样应具有科学性、真实性、代表性。②药物的鉴别试验检验其是否为此品③杂质检查④药物的安全性保证药物无毒无菌等⑤药物的含量测定⑥检验报告的书写必须真实和有原始记录。 31、如何减少四环素成品的差向四环素和ADT的含量？ 答：首先四环素发酵液通过加入草酸除去钙离子和促使蛋白质凝固等手段进行预处理，为了使差向四环素和ADT的含量降低，此过程应在低温、短时下进行。此外，还可此外还可在母液中加尿素，使其与四环素形成复合物而纯化；也可加入丁醇：乙醇（3:1）混合溶剂，加入乙醇可降低母液四环素损失；但降低成品中的ADT含量的最有效方法是筛选不产生ADT的菌株。
(完整版)生物制药工艺学_吴晓英_例卷
诚信应考, 考试作弊将带来严重后果！ 华南理工大学期末考试 《生物制药工艺学》试卷A( 2007/01/11 ) 注意事项：1. 考前请将密封线内各项信息填写清楚； 2. 所有答案请直接答在试卷上( 或答题纸上) ； 3．考试形式：闭卷； 4. 本试卷共大题，满分100 分，考试时间120 分钟。 一、名词解释：（共20分，每个2分） 发酵、热原质、人工免疫、细胞因子、手性药物、生物合成技术、核酸疫苗、生物制品、交联度、分级分离 二、多选题（答案为不定项选择，共20分，每小题2分） 1.按分子所带电荷进行分离的方法主要有（） A、离子交换层析法 B、电泳法 C、等电聚焦 D、亲和层析 2.HPLC具有哪“三高”（） A、高压 B、高效 C、高灵敏度 D、高速 3.工业上生产5’核苷酸的主要原料是（） A、RNA B、DNA C、啤酒酵母 D、解脂假丝酵母 4.细胞生长调节因子具有以下特点？（） A、同源性 B、多源性 C、多效性 D、协同性 5.生物制品免疫效力试验包括（） A、定量免疫定量攻击法 B、变量免疫定量攻击法 C、定量免疫变量攻击法 D、被动保护力测定 6.抗生素工业生产的主要方法包括( ) A.生物合成法 B.化学合成法 C.酶转化法 D.基因工程法 7.鱼油多不饱和脂肪酸的主要组成成分包括（） A.二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）等ω -3系多不饱和脂肪酸（PUFA） B.花生四烯酸 C.胆汁酸 D.棕榈酸 8.多糖类药物的主要生理功能主要有（） A.调节免疫功能和抗感染、抗肿瘤、抗衰老； B.抗凝血； C.促进细胞DNA、蛋白质的合成； D.解热镇痛 9.下列药物属于酶类药物的有（） A.透明质酸 B.胸腺激素 C.木瓜蛋白酶 D.细胞色素C 10.生物活性物质的提取方法包括（） A.用酸、碱、盐水溶液提取 B.用表面活性剂提取
生物制药工艺学习题集及答案
发酵工艺学（2）习题集 第一章生物药物概述 1、生物药物、抗生素、生化药品、生物制品、基因工程药物的概念 (1)、生物药物：指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，利用生物体、生物组织、体液或其代谢产物，综合应用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理与方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。 (2)、抗生素：抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的有机物质。 (3)、生化药品：利用生理学和生物化学的理论、方法及研究成果直接从生物体分离或利用微生物合成，或用现代生物技术制备的一类用于预防、治疗、诊断疾病，有目的的调节人体生理机能的生化物质。 (4)、生物制品：是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。各种疫苗、抗血清、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、诊断试剂。(5)、基因工程药物：采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多糖和蛋白质类药物。 2、生物药物的分类。 （1）、按照药物的化学本质和化学特性可分为：氨基酸类药物及其衍生物、多肽和蛋白质类药物、酶类药物、核酸及其降解物和衍生物、多糖类药物、脂类药物、维生素。 （2）、按原料来源可分为：人体组织来源的生物药物、动物组织来源的生物药物、微生物来源的生物药物、植物来源的生物药物、海洋生物来源的生物药物。 （3）、按功能和用途可分为：治疗药物、预防药物、诊断药物。 3、生物药物的特性。 药理学特性： （1）治疗的针对性强治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。如细胞色素c为呼吸链的一个重要成员，用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病，效果显著。 （2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质，因此具有高效的药理活性 （3）毒副作用小，营养价值高 （4）生物副作用常有发生
《生物制药工艺学》教学方法和手段改革方案及案例
3-1-7 《生物制药工艺学》教学方法和手段改革方案及案例 学习情景：酶类药物生产工艺 实施说明： 任务目标描述；通过任务驱动，研究性学习等教学活动，要求学生掌握酶类药物生产工艺中的技术要点。 教学方法：任务驱动（启发、引导），研究性学习（决策、实施检查和评价），注意学生主体性。 教学资源：多媒体、视屏、PPT、教材。 教学必备的技能：能根据教学方法合理的设计教学情景；使学生掌握酶类药物生产过程中的关键技术，并能逐步推演酶类药物生产步骤。 实施过程： （一）任务驱动——教师提出任务要求 酶类药物生产过程和原理。注重经典工艺设计思想，教师提出任务要求，教师下达任务书，提出问题，比如：生产过程中应该注意哪些关键流程，这些流程对生产有何影响等。 （二）自发讨论式教学——师生互动 学生通过资讯、计划获得决策（学生查阅资料、写出计划、最后决策）， 同时通过教师层层递进的提问，学生获得指导，师生之间互相讨论，电脑设计等 内容中的一些概念有层次的提出，学生能自觉地投入到思考和讨论中，增强了学习的主动性。 （三）动手实施——学生实际操作 任务实施：在抉择基础上，学生实施工作任务，并进行验证。 准备：由学生自主设计酶类药物生产流程，并对其中工艺进行描述和解释。（教师指导） 操作：根据设计，生产酶类药物，并对其活性，纯度进行验证。（教师指导）在此教学活动中，倡导发挥学生学习的主动性，使之全面参与学习过程， 即学生自行设计方案并完成相关准备、教师随时指导，学生自助式发现、分析和解决实践过程中的问题，自检实践结果，为保证任务的实施、教师随时指导
（四）教学总结——师生互动 任务评价、总结：小组互评、总结。 教师：根据学生实习任务的完成情况，师生互动总结理论知识点，进行 工作任务评价，进一步巩固任务课题目标。 学生：完成生产工艺原理分析与实践报告。 附：教学方案、任务评价标准 教学方案 自助式发现、分析和解决实践过程中的问题，自检实践结果，为保证任务的实施、教师随时指导。 （四）教学总结——师生互动 任务评价、总结：小组互评、总结。 教师：根据学生实习任务的完成情况，师生互动总结理论知识点（超氧化物岐化酶生产流程）、生产过程的可能出现的问题，并解释原因，进行工作任务评价，进一步巩固任务课题目标。 学生：完成各超氧化物岐化酶的生产实践报告。 被动的学习既无法调动学习积极性又限制了学生的个性发展和创新能力的培养，
1生物制药工艺学习题集生物药物概述
生物制药工艺学习题集 第一章生物药物概述 一、填空： 1、我国药物的三大药源指的是____________ 、___________ 2、现代生物药物已形成四大类型，包括__________________ 3、请写出下列药物英文的中文全称：IFN ( In terfero n ) _________________________________ 、IL(lnterleukin) 、CSF( Colony Stimulating Factor) 、EPO (Erythropoietin ) _________________________________ 、EGF ( Epidermal Growth Factor ) _______________ 、NGF ( Nerve Growth Factor ) ________________________ 、rhGH (Recomb inant Huma n Growth Hormone ) ______________________________________ 、Ins (Insulin ) __________ 、HCG ( Human Choriogonadotrophin ) ______________________ 、LH _______________ 、SOD _____________ 、tPA _____________________ 4、常用的3-内酰胺类抗生素有____________________ 、 _____________ ;氨基糖苷类抗生素 有___________ ;大环内酯类抗生素有________________ ;四环类抗生素有 _______________ ;多肽类抗生素有_____________ ;多烯类抗生素有_______________ ; 蒽环类抗生素有______________ 5、嵌合抗体是指用__________________ 替换___________________ ,保留___________________ ; 人源化抗体是指抗体可变区中仅______________________ 为鼠源，其___________________ 及恒定区均来自人源。
中国药科大学生物制药工艺学期末B卷
中国药科大学生物制药工艺学期末试卷（B 卷） 一、填空题（每空0.5 分，共30 分） 1多糖构效关系研究还不够完善，但目前的研究已表明，多糖的活性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量以及多糖中的取代基有关。 2、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏S AMP 合成酶的腺嘌呤缺陷型菌株，在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤；另外，改变细胞膜对5 ′-IMP 的透性，选育Mn2+ 不敏感的变异株。 3、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传质阻力、固定相中传质阻力。 4、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中，当柱中某位点之pH 值下降到蛋白质组分PI(等电点) 值以下时，它因带正电荷而下移，如果柱中有两种蛋白组分，pI 值较大（高）者会超过另一组分，移动至柱下部pH 较高的位点进行聚焦（交换）。 5、亲和层析洗脱方法有非专一性洗脱，特殊洗脱，专一性洗脱。 6、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度，其中影响晶体大小的主要因素有过饱和度，温度，搅拌速度，晶种。 7、常用的吸附剂有活性炭、硅胶和白陶土等。 8、在萃取过程中被提取的溶液称为料液，其中欲提取的物质称溶质，而用以进行萃取的溶剂称为萃取剂。达到萃取平衡后，大部分溶质转移到萃取剂中，这种含有溶质的萃取剂溶液称为萃取液，而被萃取出溶质以后的料液称为萃余液。 9、从细胞培养液中提取有效组分时,往往需要除去细胞及蛋白质,常用的除去细胞及蛋白质的方法有加入凝聚剂，加入絮凝剂，变性沉淀，等电点沉淀等。 10、影响絮凝效果的主要因素有絮凝剂的分子量，絮凝剂的用量，溶液pH值，搅拌速度和时间。 11、色谱介质按分离机理分为反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱，亲和色谱。 12、基因治疗中常用的非病毒载体有裸露DNA 、基因缝合线法、脂质体载体和哺乳动物人工染色体。 13、四环类抗生素是一类以四并苯（萘并萘）为母核的一族抗生素；链霉素是氨基糖苷类抗生素；红霉素是分子内含有14元环大环内酯类抗生素; 写出青霉素的化学结构通式。14、请列举应用基因药物来治疗肿瘤的几种方案：导入抑癌基因或细胞因子、自杀基因、抑制血管生成、反义药物、导入MHCI 类抗原基因、导入MDRI基因等方法。 二、名词解释（每小题3 分，共30 分） 1、酶促半合成人胰岛素： 以猪胰岛素为原料，利用胰蛋白酶的转酰胺作用（1 分）将猪胰岛素B 链之30 位丙氨酸转化（1 分）为苏氨酸即得人胰岛素（1 分）。 2、亲和膜： 结合亲和技术和膜分离技术的优点，利用亲和配基修饰的微滤膜（2 分）为亲和吸附介质,纯化目标蛋白质（1 分）。 3、全排阻： 当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较大的分子完全不能进入颗粒内部，只能从颗粒间隙流过，称“全排阻”（2分）。其流经体积最小，等于外水体积V0 （1分）。 4、类分离： 将分子量极为悬殊的两类物质分开（2 分），如蛋白质与盐类（1 分），称作类分离或
8生物制药工艺学习题集 离子交换法
第八章离子交换法 一、填空题 1、离子交换剂由、和组成。平衡离子带 为阳离子交换树脂，平衡离子带称阴离子交换树脂。 2、常见的离子交换剂有，，等。 3、离子交换树脂的基本要求有、、 、和。 4、影响离子交换选择性的因素主要有、、 、、等。 5、请写出下列离子交换剂的名称和类型：CM-C的名称是，属于交换纤维素; DEAE-C的名称是，属于交换纤维素;。 6、色谱聚焦（chromatofocusing）是一种高分辨的新型的蛋白质纯化技术。它是根据，结合，能分离几百毫克蛋白质样品，洗脱峰被聚焦效应浓缩，分辨率很高，操作简单。 7、写出下列离子交换剂类型：732 ，724 ，717 ，CM-C ,DEAE-C ，PBE94 。 8、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中，当柱中某位点之pH 值下降到蛋白质组分值以下时，它因带电荷而，如果柱中有两种蛋白组分，pI值较者会超过另一组分，移动至柱下部pH较的位点进行。 9、影响离子交换选择性的因素有、、、 、。 二、选择题 1、用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时，吸附量很低，这是因为（） A.偶极排斥 B.离子竞争 C.解离低 D.其它 2、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（） A.羟型阴 B.氯型阴 C.氢型阳 D.钠型阳 3、在尼柯尔斯基方程式中，K值为离子交换常数，K＞1说明树脂对交换离子吸引力（） A.小于平衡离子 B.大于平衡离子 C.等于平衡离子 D.其它
三、名词解释 1、蛇笼树脂： 2、尼柯尔斯基方程式： 3、偶极离子排斥作用： 四、问答题 1、简述离子交换纤维素的特点有哪些？ 2、请以CM-C 为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些？并说出各种方法的洗脱原理。 3、请以DEAE-C 为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些？并说出各种方法的洗脱原理。 4、由下图，利用给出的两种离子交换剂（E 1，E 2）分离3种蛋白质（P 1、P 2、P 3），用箭头流 程图表示(并指出E 1，E 2的类型)。 5、下图为离子交换法应用实例，请填写生产工艺流程中的空格（可选因素：阴离子交换树脂，阳离子交换树脂， 0.05mol/L 氨水，0.1mol/L 氨水，2mol/L 氨水）。简述从“滤液”开始，以后步骤的分离原理？
生物制药工艺学习题第七章凝胶层析
第七章凝胶层析 一、填空题 1、凝胶层析的分离原理有、、。这三种分离原理是互相补充的，在通常情况下起主导作用；的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时才起作用。 2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而，颗粒强度随浓度上升而。 3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响。一般来说，细粒凝胶柱流速低，洗脱峰窄，分辨率，多用于等。粗粒凝胶柱流速高，洗脱峰平坦，分辨率，多用于等。 4、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大倍以上的柱体积， 以上的柱比，较吸液量、较粒的凝胶固定相。5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括、、 、。 6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于，其越小，凝胶孔径越；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖
于。 二、选择题 1、凝胶层析中，有时溶质的>1，其原因是（） A.凝胶排斥 B.凝胶吸附 C.柱床过长 D.流速过低 2、凝胶层析中，有时小分子溶质的<1，其原因是（） A.水合作用 B.凝胶吸附 C.柱床过长 D.流速过低 3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（） A.分子量最大的 B.体积最大的 C.分子量最小的 D.体积最小的 4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（） A.观察柱床有无沟流 B.观察色带是否平整 C.测量流速 D.测量层析柱的外水体积 5、在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（） A.粗且长的 B.粗且短的 C.细且长的 D.细且
短的 三、名词解释 1、全排阻： 2、类分离： 3、分级分离： 4、柱比： 5、操作压： 6、全渗入： 7、分离度： 四、问答题 1、试述公式0 各字母的物理意义。 2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？ 3、凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。 第七章凝胶层析（答案） 一、填空题 1、凝胶层析的分离原理有平衡排除理论、扩散分离理论、流动