抗坏血酸含量测定

抗坏血酸含量测定

试剂配制：

6%和10% (wt/vol) TCA（三氯乙酸），室温放置（~20℃）

43% (vol/vol) H3PO4 (1:1稀释85% H3PO4)，室温放置

3% (wt/vol) FeCl3，室温放置

75 mM phosphate buffer (pH 7.0)，用磷酸氢二钾和磷酸氢二钾配制

10 mM DTT，冰浴

0.5% (wt/vol) NEM，冰浴

4% (wt/vol) α-α-bipyridyl，用70%乙醇溶解，冰浴

ASA标品根据样品浓度配制（标曲）

试验步骤：

1.植物材料（约40mg）分装到离心管中，并立即在液氮中冷冻；

2.加入1mL 6% TCA 到2 mL离心管中，离心（13000 g, 4℃5min），并将上清

液转移到一个新的2mL离心管中。（所有提取物保持在冰上并立即开始测定）；

3.抗坏血酸试验测定空白、标准和样品，同时测定还原型AA和总AA（每个

样品四次测定）；

4.加入10μl 75mM磷酸盐缓冲液和20μl 6% TCA（空白），AA标准品(0.15

-10mM)或20μl 上清至96 孔板；

5.加10μl 10mM DTT到离心管中，室温孵育10分钟；

6.加10 0.5% NEM到提取总AA管中除去多余的DTT并孵育至少30 s；

7.加20μl水至还原型AA测定管中，将DTT和NEM的体积加到总AA测定试

管中；

8.加入50μl 10% TCA, 40 μl 43% H3PO4, 40 μl 4% α-α-bipyridyl 和20 μl 3%

FeCl3至所有测定管中；

9.37℃孵育1 h；

10.测定525nm下吸光值。

计算：

抗坏血酸含量的测定

抗坏血酸含量的测定 植物学实验技术 一、原理 还原型抗坏血酸（AsA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反应形成红色螯合物。在534nm波长的吸收值与AsA含量正相关，故可用比色法测定。脱氧抗坏血酸（DAsA）可由二硫苏糖醇（DTT）还原成AsA。测定AsA总量，从中减去还原型AsA，即为DAsA含量。 二、仪器与用具 离心机；分光光度计；研钵；试管。 三、试剂 5%三氯乙酸（TCA）；20%TCA；无水乙醇溶液；0.4%磷酸－乙醇溶液；0.5%BP－乙醇溶液；0.03%FeCl3－乙醇溶液；0.6g/L DTT；Na2HPO4－NaOH溶液：以0.2mol/L Na2HPO4和1.2mol/L NaOH等量混合；60mmol/L DTT－乙醇。 四、方法 1. 制作标准曲线配制浓度为2mg/L，4mg/L，6mg/L，8mg/L，10mg/L，12mg/L，14mg/L的AsA系列标准液。取各浓度标准液1.0ml于试管中，加入1.0ml 5%TCA、1.0ml乙醇摇匀，再依次加入0.5ml 0.4%H3PO4－乙醇、1.0ml 0.5%BP－乙醇、0.5ml 0.03%FeCl3－乙醇，总体积5.0ml。将溶液置于30℃下反应90min，然后测定A534。以AsA浓度为横坐标，以A534为纵坐标绘制标准曲线，求出线性方程。 2. 提取取植物叶片1.0g，按1∶5（W/V）加入5%TCA研磨，4000r/min离心10min，上清液供测定。 3. 测定 （1）AsA测定取1.0ml样品提取液于试管中，按上述相同的方法进行测定，并根据标准曲线计算AsA含量。（2）DAsA测定向1.0ml样品液中加入0.5ml 60mmol/L DTT－乙醇溶液，用Na2HPO4－NaOH混合液，将溶液PH调至7~8，置于室温下10min，使DAsA还原。然后加入0.5ml 20%TCA，把PH调至1~2。按AsA相同方法进行测定，计算出总AsA含量，从中减去AsA，即得DAsA含量。

D—异抗坏血酸钠

D—异抗坏血酸钠 D——异抗坏血酸钠（D-sodium erythorbate ）又名赤藻糖酸钠，是一种白色至黄色的粉末,易溶于水,水溶液呈中性,是强氧化剂。是一种新型生物型食品抗氧、防腐保鲜助色剂，安全性高、可靠有效。近几年,我国采用D——异抗坏血酸纳作保鲜剂,用于水果、蔬菜的保鲜已取得十分明显的效果。D——异抗坏血酸钠虽然没有维生素C那样的抗坏血病作用,但其抗氧化作用却大大超过维生素C,而且价格便宜,其生产成本只是抗坏血酸的三分之一左右,其对热的稳定性也比抗坏血酸强。因此国内外已广泛用作食品抗氧剂。 D——异抗坏血酸钠作为一种新型生物型食品抗氧、防腐、保鲜助色剂，它能防止腌制品中致癌物质—亚硝胺的形成，根除食品饮料的变色、异味、混浊等不良现象。D——异抗坏血酸钠也是一种很强的还原剂，其作用机制是捕捉氧气，减少食品中氧化物的形成，防止色、香、味的退变。现在，D——异抗坏血酸钠广泛用于肉类、鱼类、蔬菜、水果、酒类、饮料及罐头食品的防腐、保鲜和助色。D——异抗坏血酸钠作用广泛，以下是关于它的一些应用范围。 低温肉制品 我们小组选择的主题是对低温肉制品中的添加剂做调查和了解。而低温肉制品是指在70 ——80摄氏度的制熟温度下生产的一类肉制品，该类肉制品保持了肉原有的组织结构和天然成分，并且其营养素破坏少，所以肉味纯正，色泽诱人，故深受人们的喜爱。但其保存期是一个受到关注的问题。因为低温加热的肉制品由于加热温度较低杀菌不完全而使其货架期较短，这为产品的贮藏、运输和销售带来很多局限性。但是现在可以用于食品中的添加剂种类众多，所以对保存期的问题已经有了较好的解决（如防腐剂，抗氧化剂等等，我们小组调查的低温

VC和抗坏血酸钠

异抗坏血酸钠 异维生素C 钠，又名D- 异抗坏血酸钠、赤藻糖酸钠，是一种新型生物型食品抗氧、防腐保鲜助色剂。能防止腌制品中致癌物质- 亚硝胺的形成，根除食品饮料的变色、异味和混浊等不良现象。广泛用于肉类、鱼类、蔬菜、水果、酒类、饮料及罐头食品的防腐保鲜助色。主要以大米为主要原料，采用微生物发酵生产获得产品。按国家GB8273 - 87 标准生产。用量和具体适用范围按2760执行。 用途：D-异抗坏血酸钠为食品行业中重要的抗氧保鲜剂，可保持食品的色泽，自然风味，延长保质期，且无任何毒副作用，在食品行业中，主要用于肉制品，水果，蔬菜，罐头，果酱，啤酒，汽水，果茶，果汁，葡萄酒等。 贮藏及运输：本产品应密闭存放于通风、干燥、阴暗的库房中,不得与有毒物质混放在一起,运输中要求与存放相同。 异VC钠, 异VC酸, 异维生素C钠，又名D-异抗坏血酸钠，是一种新型生物型食品抗氧化保鲜。根除食品饮料的变色、异味和混浊等不良现象。广泛用于肉类、鱼类、蔬菜、水果、酒类、饮料及罐头食品的保鲜。本品按国家GB8273-87标准生产，符合美国FCC（IV）版标准。 异VC酸，又名D—异抗坏酸，它的作用与D-异抗坏血酸钠相似. 维生素C在食品加工中的应用 维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。 英文名称：Vitamin C ，Ascorbic Acid 分子式：C6H8O6；分子量：176.12u；CAS号：50-81-7；酸性，在溶液中会氧化分解。 物理性质 外观：无色晶体；熔点：190 - 192℃；沸点：（无）；紫外吸收最大值：245nm；荧光光谱：激发波长－无nm，荧光波长－无nm； 溶解性：水溶性维生素；推荐摄入量：每日60毫克；最高摄入量：引起腹泻之量； 缺乏症状：坏血病；过量症状：腹泻；主要食物来源：柑桔类水果、蔬菜等 主要用做营养强化剂和护色剂 营养强化剂我就不讲了，是人体必须的维生素。 护色剂主要是因为VC有抗氧化的作用，而食品色变的一个主要原因就是氧化褐变。一般果蔬汁中应用的比较广泛。

维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较

维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较 目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果. 为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以"维生素C 或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显. 一．荧光法 1．原理 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。 2．适用范围 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3. 注意事项 3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。 3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。 3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。 二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）

循环伏安法测定维生素C片中抗坏血酸的含量

循环伏安法测定维生素C片中抗坏血酸的含量 温仕君 （暨南大学化学工程与工艺2012051590）摘要：本文通过用循环伏安法测定维生素C片中抗坏血酸的含量达到以下目的要求：①学习循环伏安法测定电极反应参数的基本原理及方法；②熟悉循环伏安法的实验技术；③了解可逆波、不可逆波的循环伏安图的特点。 利用抗坏血酸具有强还原性的特点，电解抗坏血酸的溶液，在铂工作电极上发生氧化还原反应，利用电流的极值点与浓度的关系就可对抗坏血酸进行定量分析，测得维生素C片中抗坏血酸的含量为该法具有快速简便的特点而得到广泛的应用。 关键词：循环伏安法抗坏血酸维生素C片 1引言 利用被分析物氧化还原反应而对物质进行定量分析的方法很多，最常见的是滴定法，如碘量法测维生素C的含量，但是滴定法只能进行常量分析，而且碘很昂贵，如长期使用该法成本非常高。随着实验技术手段的不断发展，循环伏安法已经越来越成熟，该法不仅能够进行微量分析，还能测定电极反应的性质[1,2]。目前，循环伏安法已经广泛应用于各个领域，如药物成分分析，食品分析等。在以后的科研工作中，伏安分析法将发挥更大的作用。 2实验部分 2.1实验原理 循环伏安法将对称的三角波扫描电压（如图1）施加于电解池的电极上，记录工作电极上的电流随电压变化的曲线，及循环伏安图。在三角波的前半部分，电极上若发生还原反应（阴极过程），得到一个峰形的阴极波；而在三角波的后半部分，则得到一个峰形的阳极波。一次三角波电压扫描，电极上完成一个氧化还原循环。当工作电极被施加的扫描电压激发时，其上将产生响应电流。以该电流（纵坐标）对电位（横坐标）做图，就得到了循环伏安图（如图2所示）。 图一图二

异抗坏血酸钠抗氧化性及应用

异抗坏血酸钠抗氧化性及应用 应用化学系0601 刘元 随着当今科学技术日异月新的发展,加上营养科学认识的普及和深化，人们对食品提出了更高、更新的要求，如何满足食品的方便化、高档化、多样化和营养化这些要求之余，避免食品腐败变质、延长食品保质期和货架期、改善保持食品色泽稳定性、减免对人体的伤害则对抗氧化剂的要求也越来越高越严格。下面简单介绍一种世界消耗量最大的抗氧化剂——异抗坏血酸（Vc）钠。 一：异抗坏血酸钠（异Vc钠）的抗氧化作用机理 异抗坏血酸钠是水溶性抗氧化剂。它的抗氧化反应机理是:分子结构中具有易于脱氢的基团,在水溶液中容易与游离氧发生反应,从而除去氧,达到抗氧化的效果，是一种氧清除型抗氧剂。干燥状态在空气中稳定，水溶液遇铁离子、铜离子,热易变质。与食用酸(柠檬酸、苹果酸等)、柠檬酸钠、EDTA等结合使用效果更好。 二：异抗坏血酸钠（异Vc钠）的应用 食品特别是油脂或含油脂的食品在贮藏、运输过程中容易被氧化引起食品变质，降低食品营养，使风味和颜色劣变，并且产生有害物质，危及人体健康。添加化学抗氧化剂异Vc钠是一种简单、经济而又理想的方法。 国外将它作为抗氧化剂广泛用于饮料、果酱、葡萄酒、冻鱼和腌肉之中。在国内，也做抗氧化剂用于清真牛肉香肠、重组兔肉加工、发酵工艺、猪脯肉制品、水果罐头、果汁饮品、茶饮料、植物蛋白饮料、

啤酒、酱菜类、面制品、保健食品等中。 对于氧化酶的酶促反应所引起的食品褐变,则可通过添加还原性的抗氧化剂异抗坏血酸钠来抑制。如在抑制了鲜切梨褐变的发生中JAAbbott和JGButa(2(X)2，20(刃)采用就是采用添加异抗坏血酸钠，也常用于拉面、烩面面坯中来防止因氧化而变色，抗面筋老化，且提高筋力，若与0.3g/kg的丙酸钙搭配使用，抗氧、保鲜效果更好。 在降血压、利尿、肝糖原生成色素排泄、解毒等方面的作用，异抗坏血酸钠的抗氧化能力远远超过维生素c钠，已成为国内外竞相研发的重点。异Vc钠在性价比上具有优势而被国内外广泛应用。 下面列举了的几种较前沿的研究方向： （1）在发酵过程中，添加3.29/L或1.69/L的异抗坏血酸钠，可有效地减少氧对两歧双歧杆菌的胁迫作用，使发酵液中的活菌数分别增加到1.06x109CFU/ml、1.29X109CFU/mL，也使培养高密度具有许多优良特性的乳酸菌(如双歧杆菌属和乳杆菌属) 成为当今的研究热点。 （2）在保鲜防腐方面，使用D-异抗坏血酸钠氧化剂延长猪肉脯的保存期,是一种很值得推广应用的新法。此法还不多见。 （3）异抗坏血酸钠能还原亚硝酸钠为亚硝酸,然后产生一氧化氮,同时又能将三价铁的氧化型肌红蛋白还原成二价铁的氧合及还原型肌红蛋白,加速和增强腌制红色的产生。有实验已经证明异抗坏血酸钠的护色效果较好,能使肉制品在放置7d时还能观察到一定的红色。作为发色助剂时，常和肉制品发色剂亚硝盐搭配使用，既能抑制

抗坏血酸药品中维生素C含量的测定(碘量法)

抗坏血酸药品中维生素C 含量的测定 一、实验目的 1.掌握碘标准溶液的配制注意事项； 2.通过维生素C 的测定了解直接碘量法和间接碘量法的过程； 3.掌握碘量法测定抗坏血酸药品中维生素C 含量的原理和方法。 二、实验用品 1.仪器 全自动分析天平；台秤；碘量瓶；玻璃棒；洗瓶；试剂瓶；烧杯；酸式滴定管；量筒；胶头滴管；容量瓶；移液管；洗耳球。 2.试剂 分析纯O H O S 23225Na ?，分析纯2I ； 7221-r mol 017.0O C K L ?标准溶液；)s (KI 、KI 溶液100-1 L g ?，使用前配制；淀粉指示剂1 -g 5L ?；） （s a 32CO N ；l HC 溶液1 -mol 6L ?；败坏血酸片。 三、实验原理 抗坏血酸又名维生素C ，分子式686O H C 。由于分子中的烯二醇基具有还原性，能被2 I 定量地氧化成二酮基，其反应式为： 碱性条件下可使反应向右进行完全，但因维生素C 还原性很强，在碱性溶液中尤其易被空气氧化，在酸性介质中较为稳定，故反应应在稀酸（如稀乙酸、稀硫酸或偏磷酸）溶液中进行，并在样品溶于稀酸后，立即用碘标准溶液进行滴定。根据滴定消耗的2I 标准溶液的体积，便可计算出抗坏血酸药品中维生素C 的含量。 计算公式：%100m %100m m 68622?=?= 药品 药品维生素O H C I I C M V C W 2I 标准溶液的配制和标定：由于通常使用的市售2I 试剂纯度不高，故需先配成近似浓度，然后在进行标定。2I 微溶于水而易溶于KI 溶液中，但在稀的KI 溶液中溶解得很慢，故配制2I 溶液时应先在较浓的KI 溶液中进行，待溶解完全后再稀释到所需浓度。2I 溶液可以用32s O A 为基准物对I 2溶液进行标定,但32s O A （俗称砒霜）有剧毒，故用322a O S N 标准溶

水果中维生素C含量的测定

水果中维生素C含量的测定 佛山三中高中部陈荣智招树满何衍健 指导老师丘晓琳 0 引言 维生素C的功效早已被人们广泛接受，从营养补充剂、维生素C糖果、到涂在脸上的含有维生素C的保养品，全都标榜着能让你更白皙、更健康。德国营养研究会建议，每人每天应摄取50~100mg的维生素C，才能刚好让血中的维生素C浓度达到饱和，如果摄取超过此范围，身体也无法多吸收，等于浪费。而30mg的维生素C是人体1天摄取维生素C的最少值，如果低于30mg，身体就会缺乏维生素C，使部份机能无法正常运作，长期下来，甚至出现坏血 症。当下，人们讲究“食疗”，倡导“天然”，认为从天然产物摄取维生素C 更安全、更能适应人体的需要。故，我们必须思考“吃什么，怎样吃”的问题。基于这点，本课题对普遍认为含维生素C较多的水果中的维生素C的含量以及对处理过的水果（如加热）中维生素C含量进行了测定，以求得从天然产物中摄取维生素C的较佳方案。 1 维生素C简介 1.1.1维生素C的结构及性质 维生素C （Vitamin C ，Ascorbic Acid，分子式： C6H8O6 ；分子量：176.12u；分子结构如左图）又叫抗坏血 酸，是一种水溶性维生素，水溶液呈酸性，在溶液中会氧化 分解。 1.1.2维生素C主要生理功能 1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合； 2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。 3、改善铁、钙和叶酸的利用。 4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血。； 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 1.1.3维生素C的药物作用 近代研究表明VC对人体健康至关重要： 1．坏血病。血管壁的强度和VC有很大关系。微血管是所有血管中最细小的，管壁可能只有一个细胞的厚度，其强度、弹性是由负责连接细胞具有胶泥作用的胶原蛋白所决定。当体内VC不足，微血管容易破裂，血液流到邻近组

抗坏血酸检测的实验步骤

动物血清中抗坏血酸（Vc）的测定 一、实验目的 抗坏血酸（Ascorbic Acid）又叫维生素C（Vitamin C），是一种水溶性维生素.正常成人体内的抗坏血酸代谢活性池中约有1500mg抗坏血酸，最高储存峰值为3000mg抗坏血酸.抗坏血酸在氧化还原代谢反应中起调节作用，缺乏它可引起坏血病.抗坏血酸是一种强力的抗氧化剂、抗病毒和抗炎剂.广泛存在于食品和生物样本中，是一种免疫刺激剂.因此检测抗坏血酸在上述样本内的分布和含量就显得非常重要。 二、实验原理 三、实验仪器 试管、移液枪、漩涡混匀器、水浴锅、离心机、可见分光光度计。 四、试剂的配制 1.试剂一应用液的配制（5ml）：试剂一储备液：双蒸水=1：14稀释，混匀制 备。 2.试剂二应用液的配制：用时取一支粉剂加0.36 ml的冰醋酸再加水至40 ml, 溶解，4℃保存。 3. 试剂三应用液的配制：因溶解困难，使用前2-4h加无水乙醇60 ml充分 溶解，制备，4 ℃保存。 4. 试剂四应用液的配制：用时取0.15 ml 试剂四储备液加水至25 ml制备， 避光保存。（现用现配） 5.试剂五：液体6 ml，4 ℃保存。 6.600 ug/ml标准品应用液的配制：取一支标准品粉末溶于10 ml试剂一应用 液中，充分混匀，4℃保存。 6ug/ml标准品应用液的配制：取600 ug/ml Vc标准应用液再用试剂一应用液100倍稀释备用，现用现配。 注意：维生素C标准品易氧化，因此，最好在样本上清液制备好后再配标准，并在10 min内进行检测。 五、实验步骤 1.取实验小鼠，断颈处死，摘除眼球，眼眶取血至1.5 ml EP管，取完血液， 然后静置半小时，然后3000 rpm, 离心15 min,然后取上清至新1.5 ml EP 管，3000 rpm, 离心15 min,取上清备用 2.上清液的制备：取步骤一中上清0.15 ml加试剂一应用液0.45 ml,漩涡混 匀，放置15 min分钟后离心，3500-4000转/分，离心10分钟，上层清亮 液体为上清液。 3.上清液中Vc的测定：

抗坏血酸含量测定(分光光度计法)

植物生理学模块实验指导 李玲主编 科学出版社 一、维生素C含量的测定方法（分光光度计法） 【实验目的】 学习利用分光光度计法测定维生素C（抗坏血酸）含量的原理和方法。 【实验原理】 维生素C（抗坏血酸）具有较强的还原力，可以把铁离子（Fe3+）还原成亚铁离子（Fe2+），亚铁离子与红菲啰啉（4,7-二苯基-1,10-菲啰啉，BP）反应形成红色螯合物。此化合物在波长534nm处具有强的吸收峰，且吸光度与反应液中抗坏血酸含量呈正相关。因此，可用比色法来测定抗坏血酸含量。 【器材与试剂】 1.实验仪器与用具 离心机、分光光度计、研钵、电子天平、容量瓶（50ml和100ml）、漏斗、滤纸、离 心管、试管。 2.实验试剂 50g/L三氯乙酸（TCA）溶液：称取5g三氯乙酸（分析纯），用蒸馏水溶解，稀释至100ml。 0.4%磷酸-乙醇溶液：量取0.47ml 85%磷酸溶液加入到无水乙醇中，并用无水乙醇稀释至100ml。 5g/L BP-乙醇溶液：称取0.25g BP（纯度>97%）加入到无水乙醇中溶解，并用无水乙醇稀释至50ml。 0.3g/L FeCl3-乙醇溶液：称取0.03g FeCl3加入到100ml无水乙醇中，摇匀。

100μg/ml 标准抗坏血酸溶液：称取10mg 抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用），用50g/L TCA 溶液溶解，定容至100ml，即1ml溶液含100μg抗坏血酸。现用现配，保存于棕色瓶中，低温冷藏。 3.实验材料 苹果、梨、香蕉、柑橘等果实。 【实验步骤】 1.制作标准曲线 取7支试管，编号，按表1加入各种溶液，将混合液置于30℃反应60min，然后以0号试管混合液为参照，于波长534nm处测定吸光度值。以抗坏血酸质量为横坐标，吸光度为纵坐标汇至标准曲线，求的回归方程。 表1 制作抗坏血酸标准曲线试剂含量 项目试管号 0 1 2 3 4 5 6 抗坏血酸标准液/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 50g/L TCA/ml 2.0 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 无水乙醇/ml 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 混匀、摇匀 0.4%磷酸-乙醇溶液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 5g/L BP-乙醇溶液/ml 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 0.3g/L FeCl3-乙醇溶液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 相当于抗坏血酸量/μg0 10 20 30 40 50 60 2.提取 洗净新鲜果实，吸干，剪碎后混匀，分别称取5g 样品置于研钵中，加入20ml 50g/L TCA溶液，在冰浴条件下研磨成浆状，转入到100ml容量瓶中，并用50g/L TCA 溶液定容至刻度，混合、提取10min后，过滤收集滤液备用。 3.测定

抗坏血酸(维生素C)的测定方法

抗坏血酸（维生素C）的测定方法（1） 在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。 一、荧光法 1．原理 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。 2．适用范围 GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器 3．1．实验室常用设备。 3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。 3．3．打碎机。 4．试剂 本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。 （1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。 （2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。 （3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。 （4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。 （5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。临用前配制。（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。 （7） 0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。 变色范围：pH=1.2 红色 pH=2.8 黄色 pH＞4.0 兰色 （8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于110~120℃烘箱中干燥，备用。 （9）标准 抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）：准确称取50mg抗坏血酸，用溶液（4.1）溶于50ml容量瓶中，并稀释至刻度。 抗坏血酸标准使用液（100μg/ml）: 取10ml抗坏血酸标准液，用偏磷酸-乙酸溶液稀释至100ml。定容前试pH值，如其pH＞2.2时，则应用溶液（4.3）稀释。 标准曲线的制备：取下述"标准"溶液（抗坏血酸含量10μg/ml）0.5、1.0、1.5和2.0ml 标准系列，取双份分别置于10ml带盖试管中，再用水补充至2.0ml。 5.操作步骤 5.1 样品制备 全部实验过程应避光。 称取100g鲜样，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。如呈红色，即可用偏磷酸-乙酸溶液稀释，若呈黄色或兰色，则用偏磷

实验十五 抗坏血酸含量测定

实验十五抗坏血酸含量测定（2,6-二氯酚靛酚法） 一、目的 学习维生素C的生理功能和性质，掌握用2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C 的原理和方法。 二、原理 维生素C是一种水溶性维生素，是人类营养中最重要的维生素之一，人体缺乏维生素C时会出现坏血病，因此它又被称为抗坏血酸。此外维生素C还具有预防和治疗感冒以及抑制致癌物质产生的作用。 维生素C的分布很广，尤其在水果（如弥猴桃、橘子、柠檬、山植、袖子、草莓等）和蔬菜（觅菜、芹菜、青椒、菠菜、黄瓜、番茄等）中的含量更为丰富。 不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。 维生素C在金属铜和抗坏血酸氧化酶存在下极易氧化，因此，在用铜制品做食品时，维生素C易丢失。此外在碱性溶液中，维生素C也易被破坏，而在酸性溶液中比较稳定。利用它具有的还原性质可测定其含量。还原型抗坏血酸能被染料2，6-二氯酚靛酚氧化为脱氢型，该染料在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色，被还原后变为无色。因此用2，6-二氯酚靛酚滴定含有维生素C的酸性溶

液时，维生素C尚未全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色，当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2，6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现淡红色。用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。 三、仪器、试剂和材料 1．仪器 （1）天平 （2）组织捣碎机 （3）微量滴定管（5ml） （4）容量瓶（50ml） （5）刻度吸管（5ml，10ml） （6）锥形瓶（100ml） 2．试剂 （1）l％草酸溶液：草酸1g溶于100ml蒸馏水中 （2）2％草酸溶液：草酸2g溶于100ml蒸馏水中 （3）抗坏血酸标准溶液（0.1 mg／ml）：精确称取10mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）用1％草酸溶液溶解并定容至100ml。此溶液应贮存于棕色瓶中，最好临用前配制。 （4）0．05％2, 6-二氯酚靛酚溶液：称取500mg 2, 6-二氯酚靛酚溶于300ml 含104mg碳酸氢钠（A.R）的热水中，冷却后用蒸馏水稀释至1000ml，滤去不溶物，贮存于棕色瓶中，4℃冷藏可稳定一周，临用前以标准抗坏血酸标定。 3．材料 新鲜水果或蔬菜 四、操作步骤 1．提取抗坏血酸 取新鲜水果或蔬菜50g，加入50ml 2％草酸溶液，用组织捣碎机打成匀浆。过滤取得滤液，滤饼可用少量2％的草酸洗几次，合并滤液，记录滤液体积。2．2, 6-二氯酚靛酚溶液的标定 准确吸取4.0 ml抗坏血酸标准液（含0.4g抗坏血酸）于100ml锥形瓶中，加16ml 1％草酸溶液，用2, 6-二氯酚靛酚滴定至淡红色（15秒内不褪色即为终点）。记录所用染料溶液的体积，计算出lml染料溶液所能氧化抗坏血酸的量。 3．样品滴定 准确吸取样品提取液两份，各20ml，分别放入两个100ml锥形瓶中，滴定方法同2中的操作，另取20ml 1％草酸作空白对照滴定。 五、结果处理 取两份样品滴定所耗用染料体积的平均值，代入下式计算100g样品中还原型抗坏血酸的含量： 杭坏血酸含量（mg／100g样品）＝（V1－V2）·V·M·100/V3·W 式中，V1为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数；

D—异抗坏血酸钠

D —异抗坏血酸钠 D --- 异抗坏血酸钠（D-sodium erythorbate ）又名赤藻糖酸钠，是一种 白色至黄色的粉末，易溶于水,水溶液呈中性，是强氧化剂。是一种新型生物型食品抗氧、防腐保鲜助色剂，安全性高、可靠有效。近几年，我国采用D一一异抗 坏血酸纳作保鲜剂，用于水果、蔬菜的保鲜已取得十分明显的效果。D一一异抗坏血酸钠虽然没有维生素C那样的抗坏血病作用，但其抗氧化作用却大大超过维生素C,而且价格便宜，其生产成本只是抗坏血酸的三分之一左右，其对热的稳定性也比抗坏血酸强。因此国内外已广泛用作食品抗氧剂。 D——异抗坏血酸钠作为一种新型生物型食品抗氧、防腐、保鲜助色剂，它能防止腌制品中致癌物质一亚硝胺的形成，根除食品饮料的变色、异味、混浊等 不良现象。D一一异抗坏血酸钠也是一种很强的还原剂，其作用机制是捕捉氧气，减少食品中氧化物的形成，防止色、香、味的退变。现在，D——异抗坏血酸钠 广泛用于肉类、鱼类、蔬菜、水果、酒类、饮料及罐头食品的防腐、保鲜和助色。D 一一异抗坏血酸钠作用广泛，以下是关于它的一些应用范围。低温肉制品我们小组选择的主题是对低温肉制品中的添加剂做调查和了解。而低温肉制品是指在70 ——80摄氏度的制熟温度下生产的一类肉制品，该类肉制品保持了肉原有的组织结构和天然成分，并且其营养素破坏少，所以肉味纯正，色泽诱人，故深受人们的喜爱。但其保存期是一个受到关注的问题。因为低温加热的肉制品由于加热温度较低杀菌不完全而使其货架期较短，这为产品的贮藏、运输和销售带来很多局限性。但是现在可以用于食品中的添加剂种类众多，所以对保存期的问题已经有了较好的解决（如防腐剂，抗氧化剂等等，我们小组调查的低温肉制品中主要用的食品添加剂有卡拉胶，乳酸链球菌素，亚硝酸钠，D――异抗坏血 酸钠和诱惑红）。但是肉制品中含有一定量的脂肪，脂肪转化成的油脂在微生物、水分、热、光等作用下易发生氧化，油脂氧化过程中产生的过氧化脂质能导致肉制品的外观、质地和营养质量变劣。如脂肪发生腐败、褪色、褐变，不但降低产品质量和营养价值，甚至产生有害物质，引起食物中毒。所以为了防止肉制品氧化可以着重从原料、加工工艺、保藏等环节上采取相应避光、降温干燥、排气等措施,然后配合使用一些安全、高效的抗氧化剂，可以防止香肠或肉制品中油脂的氧化，延长货架期，达到防腐的效果。在我们看到的低温肉制品的添加剂中，可以发现很多都使用了D异抗坏血酸钠。 D——异抗坏血酸钠在肉制品中可以防止肉类变质，与亚硝酸盐。硝酸盐联合使用可以提高肉类制品的发色效果，保持色泽，防止亚硝胺类（如亚硝酸盐）形成，改善风味，切口不易褪色。例如，在香（腊）肠、火腿、腌腊肉、熏肉等中可以用作发色助剂，保持色泽，防止亚硝胺类形成，改善风味，切口不易褪色。 （如以下产品有添加D一一异抗坏血酸钠：雨润-台湾风味香肠，金锣-香甜王（玉米肠），金锣-金锣王中王-无淀粉级火腿肠，双汇-王中王-优级火腿肠，双汇- 鸡肉火腿肠，何美尔-经典美式火腿片，雨润-意式烟熏腊五花肉丁，双汇-Q趣儿等等）o 其他方面的应用 在腌菜中，可以保持色泽，也可以防止亚硝胺类的形成，（如有友-鲜笋，一 见香-下饭菜-酱腌菜等等）。 果汁及酱类，在装瓶时加入，保持天然VC，防止退色，保持原有风味（如康师傅-茉莉蜜茶-调味茶饮品，天喔茶庄蜂蜜柚子茶，天喔茶庄蜂蜜雪梨茶，康师傅-本味茶庄-茉莉花茶，农夫果园，农夫山泉-水溶C10Q康师傅-水蜜桃，

抗坏血酸含量测定

抗坏血酸含量测定 试剂配制： 6%和10% (wt/vol) TCA（三氯乙酸），室温放置（~20℃） 43% (vol/vol) H3PO4 (1:1稀释85% H3PO4)，室温放置 3% (wt/vol) FeCl3，室温放置 75 mM phosphate buffer (pH 7.0)，用磷酸氢二钾和磷酸氢二钾配制 10 mM DTT，冰浴 0.5% (wt/vol) NEM，冰浴 4% (wt/vol) α-α-bipyridyl，用70%乙醇溶解，冰浴 ASA标品根据样品浓度配制（标曲） 试验步骤： 1.植物材料（约40mg）分装到离心管中，并立即在液氮中冷冻； 2.加入1mL 6% TCA 到2 mL离心管中，离心（13000 g, 4℃5min），并将上清 液转移到一个新的2mL离心管中。（所有提取物保持在冰上并立即开始测定）； 3.抗坏血酸试验测定空白、标准和样品，同时测定还原型AA和总AA（每个 样品四次测定）； 4.加入10μl 75mM磷酸盐缓冲液和20μl 6% TCA（空白），AA标准品(0.15 -10mM)或20μl 上清至96 孔板； 5.加10μl 10mM DTT到离心管中，室温孵育10分钟； 6.加10 0.5% NEM到提取总AA管中除去多余的DTT并孵育至少30 s； 7.加20μl水至还原型AA测定管中，将DTT和NEM的体积加到总AA测定试 管中； 8.加入50μl 10% TCA, 40 μl 43% H3PO4, 40 μl 4% α-α-bipyridyl 和20 μl 3% FeCl3至所有测定管中； 9.37℃孵育1 h； 10.测定525nm下吸光值。 计算：

异抗坏血酸钠使用方法

异抗坏血酸钠为食品行业中重要的抗氧保鲜剂，可保持食品的色泽，自然风味，延长保质期，且无任何毒副作用，在食品行业中，现主要用于肉制品，水果，蔬菜，汽水，果茶，罐头，果酱，啤酒，果汁，葡萄酒等。那么异抗坏血酸如何使用呢，具体使用办法是什么呢?下边我们一起来了解一下吧。 一、异抗坏血酸具体使用办法 对肉制品的用量为0.5~0.8/kg。对冷冻鱼类，在冷冻前用0.1%-0.6%的水溶液浸渍。对果汁等饮料的使用量为0.01%~0.025%。苹果调味酱罐头， 0.15g/Kg（单用或与抗坏血酸合用量）午餐肉，熟肉末，熟猪前腿肉，熟火腿，0.5g/kg（单用与抗坏血酸及其钠盐合用量，以抗坏血酸计），桃子、苹果酱：2g/kg水果罐头0.75-1.5g/l，天然果汁0.08-0.11g/l，啤酒0.03g/l。 二、应用领域 1、肉制品中：作为发色助剂，保持色泽，防止亚硝胺类（如亚硝酸盐）形成，改善风味，切口不易褪色。腌制咸菜：保持色泽，改善风味。 2、冷冻鱼虾：保持色泽，防止鱼表面氧化产生腐臭味。

3、啤酒及葡萄酒：在发酵后加入，防止异味和混浊，保持色香味，防止二次发酵。 4、果汁及酱类：在装瓶时加入，保持天然VC，防止退色，保持原有风味。 5、水果储存：喷雾或配合柠檬酸使用，保持色泽风味，延长储存期。 6、罐头制品：在装罐前加入到汤汁，保持色香味。 7、用于面包中，可保持面包的色泽，自然风味和延长保质期，且无任何毒副作用。 8、中国<<食品添加剂使用卫生标准>规定用于面包.方便面.最大使用量为0.2g/kg,用于汤料，肉制品最大使用量1.0g/kg。 以上就是有关异抗坏血酸具体使用办法及应用领域的一些相关介绍，希望对您进一步的认识了解有所帮助。

D-异抗坏血酸钠在食品中的应用

D-异抗坏血酸钠在食品中的应用 摘要 D- 异抗坏血酸钠（d-sodium erythorbate）又名赤藻糖酸钠，是一种广泛用于食品中的抗氧化剂和防腐助色剂。国外在20世纪50年代便开始生产D-异抗坏血酸钠，我国在20世纪八十年代才开始生产，我国的D-异抗坏血酸钠的工业起步较晚，但是产量很高，目前已形成年产约600吨的量，还出口了包括美国、日本、澳大利亚等多个国家【1】，目前合成D-异抗坏血酸钠一般采用间接合成法，即先由细菌发酵D—葡萄糖产生2—酮基—D—葡萄糖酸(或钙盐),再经化学转化而成【2】。 关键词：D-异抗坏血酸钠抗氧化剂合成工艺食品应用 引言 随着科技的发展，食品的保质期限也越来越长，目前我们所能见到的几乎所有的食品都或多或少的具有食品添加剂。食品添加剂是为改善食品色、香、味等品质，以及为防腐和加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或者天然物质【3】，目前我国食品添加剂有23个类别，2000多个品种，包括酸度调节剂、抗结剂、消泡剂、抗氧化剂、漂白剂、膨松剂、着色剂、护色剂、酶制剂、增味剂、营养强化剂、防腐剂、甜味剂、增稠剂、香料等。其中抗氧化剂是一种重要的食品添加剂，抗氧化剂是指能防止或延缓食品氧化，提高食品的稳定性和延长贮存期的食品添加剂，因此抗氧化剂的正确使用不仅可以延长食品的贮存期、货架期，给生产者、消费者带来良好的经济效益，减少因为食物过期导致的经济损失，还能让消费者的必需食物更加安全。D-异抗坏血酸钠是一种重要的人工合成类抗氧化剂和防腐剂，它无毒副作用，能能防止食品中亚硝酸盐的形成，以延长食物的保质期，通常用于各类肉类的风干，果汁、果酱和酸奶的保存，鱼类的防腐助色等，它与现代人类的食物息息相关。

异抗坏血酸的应用和研究进展

异抗坏血酸的应用和研究进展 摘要：异抗坏血酸是维生素C的一种光学异构体，主要用于食品的抗氧保鲜。本文主要介绍了异抗坏血酸及其钠盐的性质，生产技术，应用和发展概况。异抗坏血酸安全无毒，性质优良，业已得到广泛的应用。 关键词：异抗坏血酸异抗坏血酸钠性质生产技术应用 The Application and Research Progress of Erythorbic acid Abstract：Erythorbic acid is a stereoisomer of Vitamin C acting as a food antioxidant. This paper mainly summarizes the property, production technology, application and development survey of Erythorbic acid and its sodium salt production. Erythorbic acid has been widely used due to its safety and superior nature, Key words：Erythorbic acid Sodium isoascorbate property production technology application 前言 异抗坏血酸（Erythorbic acid）是L-抗坏血酸（维生素C）的异构体，与维生素C 的化学性质相似，具有强烈的还原作用。在生理效应方面，尽管异抗坏血酸的抗坏血病作用只有L-抗坏血酸的1/20，但在降血压、利尿、肝糖原生成、色素排泄、解毒等方面的作用，大致与L-抗坏血酸相同【1】。 异抗坏血酸及其钠盐—异抗坏血酸钠（Sodium isoascorbate）的用途十分广泛，归纳起来有：作为食品抗氧化剂和肉制品的防腐助色剂；作为药品或卫生用品的辅助材料；作为化工原料的稳定剂；作为除氧、抗蚀、除垢溶剂的重要组分；作为电解、电镀中的电解质；用于金属微粉的生产和重金属的回收；用于一些高分子聚合物的制取。此外，异抗坏血酸钠在纺织、建材和日用化工方面也有应用【2】。 尽管异抗坏血酸及其钠盐用途很广，但其主要的用途仍在食品加工方面。异抗坏血酸及其钠盐在天然食品中不存在，市场上的产品均为人工合成产品。目前异抗坏血酸的生产技术主要有三种：直接发酵法、间接发酵法和酶法【3】。在FAO/WHO联合食品添加剂专家委员会关于异抗坏血酸（异抗坏血酸钠）的毒理学评价报告中表明：异抗坏血酸没有任何明确的毒性或致癌作用，无阻碍机体吸收维生素C的作用。20世纪90年代以来，异抗坏血酸（异抗坏血酸钠）在国内外食品加工中得到了普遍采用【4】。异抗坏血酸及其钠盐广泛用于肉类罐头、果蔬罐头、啤酒、水果汁、果酱、冷冻水产品等。其能防止腌制品中致癌物质亚硝胺的形成，改善食品饮料中产生的变色、异味和混浊等不良现象。安全性高，价格低廉，是一种较好的食品添加剂。 1、基本性质【5】 异抗坏血酸又名D-抗坏血酸、异维生素C，为抗坏血酸的同分异构体。其分子式为 C6H8O6 ，相对分子质量176，化学结构式为：

蔬菜中维生素c的测定

蔬菜中维生素c的测定 制作人：薛钦时间：2016年5月20日 一、实验背景 ●维生素C又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。食物中的维生素 C被人体小肠上段吸收。一旦吸收，就分布到体内所有的水溶性结构中，正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C，最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下，维生素C 绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸 -2-硫酸由尿排出；另一部分可直接由尿排出体外。 维生素C的作用： ●1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合。 ●2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢，延长肌体寿命。 ●3、改善铁、钙和叶酸的利用。 ●4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，预防心血管病。 ●5、促进牙齿和骨骼的生长，防止牙床出血，防止关节痛、腰腿痛。 ●6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 ●7、水溶性强抗氧化剂，主要作用在体内水溶液中。 二、实验目的 ● 1.人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。 ● 2.维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标，也

可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。 ● 3.水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C含量，了解果蔬品质量 的高低。 ● 4.了解和掌握2,6-二氯酚靛酚测定维生素C含量的原理和方法。 三、实验原理 ●2，6—二氯靛酚是一种染料，其颜色反应表现为两种特性。一是 取决于氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态为无色；二是受其介质酸度的影响，在碱性介质中呈深蓝色，在酸性溶液介质中呈浅红色。 ●用蓝色的碱性染料标准液，滴定含VC的酸性浸出液，染料被还原 为无色，到达终点时，微过量的2、6—二氯靛酚染料在酸性溶液中呈浅红色即为终点。从染料消耗量即可计算出试样中还原型抗坏血酸量。 2.6-二氯酚靛酚滴定法 ●维生素C: 强的还原性 ●将染料2.6-D 还原成无色的2.6-二氯酚靛酚 ● 2.6-二氯酚靛酚:强的氧化性 ●中性/碱性: 蓝色酸性:红色

抗坏血酸(维生素C)的测定方法

抗坏血酸（维生素C）的测定方法 在测定维生素C的国标方法中，荧光法为测定食物中维生素C含量的第一标准方法，2、4－二硝基苯肼法作为第二法。 一、荧光法 1．原理 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。 2．适用范围 GB12392-90 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定 3．仪器 3．1．实验室常用设备。 3．2．荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。 3．3．打碎机。 4．试剂 本实验用水均为蒸馏水，试剂不加说明均为分析纯试剂。 （1）偏磷酸－乙酸液：称取15g偏磷酸，加入40ml冰乙酸及250ml水，搅拌，放置过夜使之逐渐溶解，加水至500ml。4℃冰箱可保存7～10天。 （2）0.15 mol/L硫酸：取10ml硫酸，小心加入水中，再加水稀释至1200ml。 （3）偏磷酸－乙酸－硫酸液：以0.15mol/L硫酸液为稀释液，其余同4.1.配制。 （4）50％乙酸钠溶液：称取500g乙酸钠（CH3COONa·3H2O），加水至1000ml。 （5）硼酸-乙酸钠溶液：称取3g硼酸，溶于100ml乙酸钠溶液（4.4）中。临用前配制。（6）邻苯二胺溶液：称取20mg邻苯二胺，于临用前用水稀释至100ml。 （7） 0.04%百里酚蓝指示剂溶液：称取0.1g百里酚蓝，加0.02mol/L氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75ml，磨溶后用水稀释至250ml。 变色范围：pH=1.2 红色 pH=2.8 黄色 pH＞4.0 兰色 （8）活性炭的活化：加200g炭粉于1L 1+9盐酸中，加热回流1~2h，过滤，用水洗至滤液