离子和药物对离体蛙心的影响1

西安交通大学医学院教案

课程名称机能实验学授课方式_________ 任课教研室_________ 任课教师_________ 授课年级_________ 授课时间_________

离子和药物对离体蛙心的影响

【实验目的】

1.掌握离体蛙心灌流的实验方法。

2.掌握各种理化因素对心脏活动的影响机制。

3.进一步熟悉和掌握生物信号采集和处理系统。

【实验原理】

心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行，一旦适宜的环境被破坏，例如离子浓度或酸碱度的急剧改变等，心脏的活动就会受到影响。在整体内，心脏的活动受自主神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力量增强，心率加快；而迷走神经兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱，使心肌收缩力量减弱，心率减慢。

蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似于血浆的任氏液灌流，在一定时间内，可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。改变任氏液的组成成分，如改变Na+﹑K+﹑Ca2+ 的浓度及酸碱度等，心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变。

1.K+对心脏活动的影响

总体看来心脏对细胞外K+浓度变化比较敏感；但不同部位心肌的敏感性不同，心房肌最敏感，房室束-浦肯野纤维系统次之，窦房结敏感性较低。

①K+对心肌细胞兴奋性的影响

细胞外[K+]↑时，对兴奋性的影响与其浓度升高的程度有关。当[K+]轻度或中度升高时，细胞内外K+浓度梯度减小，K+外流力量减小，静息电位（RP）的绝对值减小，与阈电位（TP）的差值减小，细胞的兴奋性因而升高；当细胞外K+浓度显著增高时，RP的绝对值减小到－55mV左右时，Na+通道失活，开放效率降低，细胞的兴奋性降低或丧失，严重时，可导致心肌停搏于舒张状态。

【K+】↑-------R P↓-----兴奋性↑

【K+】↑↑-------R P↓↓-----RP

②K+对心肌细胞收缩功能的影响

【K+】↑-------I K1通透性↑----AP时程↓---2期内流的钙↓----收缩性↓

【K+】↑↑-----心肌停在舒张状态

③K+对心率的影响

【K+】↑-------对P细胞自律性没有影响

-------对浦肯野cell----RP↑-----If↓---自律性↓

---- IK1通透性↑-----抵消If---自律性↓

2.Ca2+对心脏活动的影响

细胞外Ca2+在心肌细胞膜上对Na+的内流有竞争性的抑制作用，称为膜屏障作用。因此，细胞外Ca2+浓度发生变化时，与Na+的内流和Ca2+的内流相关的电活动都将受到影响，而对静息电位则无明显作用。

①Ca2+对心肌细胞兴奋性的影响

当细胞外Ca2+浓度升高时，对Na+的屏障作用增加，由于这种抑制作用，触发Na+快速内流产生0期去极化就比较困难，即TP上移，从而与RP的差距增大，兴奋性降低。

②Ca2+对心肌细胞收缩性的影响

当细胞外Ca2+浓度↑，细胞膜对Ca2+的通透性升高，使Ca2+内流加快，心室肌细胞平台期Ca2+内流增加，心肌收缩力增强增快；当细胞外Ca2+浓度过高时，心脏将停搏于收缩状态，称为钙僵直。

3.无钙任氏液对心脏活动的影响

当用无钙任氏液完全置换普通任氏液后，细胞外Ca2+浓度降低为0，平台期内流的Ca2+减少，使心肌的收缩能力减弱。

4.去甲肾上腺素对心脏活动的影响

去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的β肾上腺素能受体结合，激活腺苷酸环化酶（AC），使细胞内cAMP浓度升高，激活PKA和细胞内的蛋白质磷酸化过程，使心肌细胞膜上的钙通道激活，动作电位平台期Ca2+内流增加，心肌收缩力增强；此外去甲肾上腺素能加强4期的内向电流If，使心率加快。

5.乙酰胆碱对心脏活动的影响

乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M型胆碱能受体结合，抑制AC，细胞内cAMP 浓度降低，肌浆网释放的Ca2+减少，心肌的收缩力量减弱，心率减慢。乙酰胆碱可促进窦房结细胞K+的外流，最大复极电位增大，自律性降低。此外还抑制4期的内向电流If，使心率减慢。

6.3%乳酸对心脏活动的影响

加入乳酸后，细胞外H+浓度升高，H+可与Ca2+竞争性肌钙蛋白的结合位点，

从而抑制了Ca2+与肌钙蛋白结合，心肌收缩力量减弱。当再加入2.5%NaHCO3后，解除了H+对Ca2+的竞争性作用，恢复心肌收缩力量。

【实验材料】

1. 动物：蟾蜍。

2. 试剂和药品：任氏液、0.65%NaCl、1%KCl、2%CaCl2、3%乳酸、

2.5%NaHCO3、1/10,000去甲肾上腺素、1/100,000乙酰胆碱。

3. 装置和器材：铁支架、双凹夹、蛙心杠杆、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙手术器械、滴管、棉线、张力换能器、计算机及生物信号采集处理系统。【实验方法】

1. 清洗蟾蜍，破坏脑和脊髓, 暴露心脏。

2. 在主动脉左侧分支下穿两根线，右侧分支下穿一根线，动脉主干下穿一根线备用。先结扎动脉干右侧分支，再用玻璃针将心脏翻至背面，在静脉窦以外结扎前后腔静脉（注意勿扎住静脉窦）。将心脏翻至腹面结扎动脉干左侧分支远端，然后用眼科剪刀在左侧分支近心端剪一斜口。取一蛙心套管，注入适量任氏液，用右手拇指堵住套管外口，食指和无名指夹持蛙心套管，用左手提起动脉干左侧分支远端结扎线，将蛙心套管的尖端自斜口插入动脉腔内，插至动脉圆锥时略向后退，在心室收缩时，沿心室后壁方向向下插入心室。插管进入心室后，管内液面会随着心室跳动而上下波动。最后用近心端备用线结扎并固定蛙心套管和动脉管壁，并将结扎线固定于套管侧壁的小突起上。提起套管，在结扎线远心端分别剪断动脉干左﹑右侧分支和前﹑后腔静脉，将心脏离体。迅速用任氏液反复换洗套管内液体至完全澄清。用双凹夹将蛙心套管固定于铁支架上备用。在心室舒张时，用蛙心夹夹住心尖约１毫米，将蛙心夹上的棉线向下绕过滑轮，并且向上连接到张力换能器上，再将张力换能器连接到计算机的相应接口。启动计算机并开启生物信号采集处理系统。

3. 实验数据的采集和处理选用BL-420E/F生物信号采集与处理系统，可用系统设计好的模块进行实验，也可自己选择通道和张力信号。前者步骤是菜单→实验项目→循环实验→蛙心灌流实验，用已确定好的实验程序进行实验。一旦选定，会有相应的参数设定对话框出现，根据实验具体情况设定所需参数，观察正常的心脏收缩曲线。后者的步骤是输入信号到1通道，选择张力信号，开始记录，

并根据具体情况调整放大倍数、扫描速度等参数。

4. 观察项目

①描记正常心脏收缩曲线：曲线幅度代表心室收缩的强弱，单位时间内的曲线个数代表心跳频率。曲线向上移动表示心室收缩，其顶点水平代表心室收缩所达到的最大程度；曲线向下移动表示心室舒张，其最低点即基线水平代表心室舒张的最大程度。

②吸出插管内全部任氏液，全部换入同等量的无钙任氏液, 观察心搏曲线变化，待效应出现后，用新鲜任氏液反复换洗直至心搏曲线恢复正常。

③加入1~2滴2% CaCl2于任氏液中，观察心搏曲线的变化，待效应出现后，用新鲜任氏液反复换洗至曲线恢复正常。

④加入1~2滴1%KCl于任氏液中，观察心搏曲线的变化，待效应刚出现时，立即用新鲜任氏液反复换洗直至心搏曲线恢复正常。

⑤加入1~2滴1/10,000去甲肾上腺素，观察心搏曲线的变化，待效应出现后，用新鲜任氏液反复换洗直至心搏曲线恢复正常。

⑥加入1滴1/10,000的乙酰胆碱，观察心搏曲线的变化，待效应刚出现时，立即用新鲜任氏液反复换洗直至心搏曲线恢复正常。

⑦加入1滴3%乳酸，观察心搏曲线的变化，待效应出现后，加入1滴

2.5%NaHCO3, 再观察心搏曲线的变化，至心搏曲线基本恢复时，再用新鲜任氏液反复换洗直至心搏曲线恢复正常。

【注意事项】

1.每项实验都应有前后对照，并及时作上标记，以免混淆。

2.加药物时，先加入1~2滴，如作用不明显时可再补加。

3.换洗时不要让空气进入心室。

4.连接蛙心夹和张力换能器的棉线松紧度要合适。

5.随时滴加任氏液于心脏表面使其保持湿润。

6.当每种化学药物（尤其是抑制心脏活动的药物）作用已明显时，应立即换洗，

以免心肌受损。反复用任氏液换洗数次，待心跳恢复正常后进行下一步实验。

7.在实验过程中始终保持套管内的液面在相同高度。

【讨论思考】

1. 实验过程中蛙心套管内的灌流液面为什么都应保持相同的高度？

参考答案：实验过程中蛙心套管内的灌流液面都应保持相同的高度，因为套管内的灌流液形成的压力对蛙心室来说既是前负荷又是后负荷，而不论是前负荷还是后负荷都可以影响心肌的收缩活动。所以在实验中保持蛙心套管内的灌流液面在保持相同的高度，以避免其对结果的影响。

2. 决定和影响心肌内环境稳态的主要理化因素是什么？为什么？

参考答案：决定和影响心肌内环境稳态的主要理化因素是Na+﹑K+﹑Ca2+、去甲肾上腺素、乙酰胆碱的浓度以及酸碱度等可以影响心肌细胞动作电位和收缩的物质。

3. 蛙心灌流实验对你有何启发？

参考答案：内环境的稳态对心肌正常生理功能的维持是非常重要的（不同的同学可能有不同的答案）。

【教学要求】

知识点：K+、Ca2+和H+对心肌功能的影响

操作重点：掌握离体蛙心灌流模型的制备，要求每个同学至少制备一个模型。

1. 心肌细胞动作电位的产生过程

①去极化过程-------0期

机制：适宜刺激→部分Na+通道开放→ Na+少量内流→膜去极化，膜电位绝对值↓→TP→ Na+通道大量开放→再生性Na+内流→膜电位绝对值↓↓→0mV→ +30 mV

②复极化过程（1 4期）

1期（快速复极初期）产生的机制：一过性K+外流（Ito）

2期（平台期）产生的机制：

●L型Ca2+通道开放→Ca2+内流

●I K通道→K+外流

●I K1通道→K+外流

3期（快速复极末期）产生的机制：I K和I K1通道→K+外流

4期（恢复期）Na+-K+泵；Na+-Ca2+交换体

2. 决定和影响心肌电生理特性的因素

?决定和影响兴奋性的因素

静息电位与和阈电位之间的电位差；离子通道的性状（备用、激活和失活）。

?决定和影响自律性的因素

最大舒张电位和阈电位之间的差距；4期自动除极化速度。

?决定和影响传导性的因素

●结构因素：心肌细胞的结构。

●生理因素：0期去极化的速度和幅度；临近未兴奋部位心肌的兴奋性。

一、钾离子：

1）对兴奋性的影响：

【K+】↑-------R P↓-----兴奋性↑

【K+】↑↑-------R P↓↓-----RP

【K+】↑-------I K1通透性↑―――AP时程↓―――ECG：Q-T间期↓，T波高尖

【K+】↓----虽然推动钾外流的动力增加，但I K1通透性↓――R P↓--兴奋性↑

【K+】↓-------I K1通透性↓------ AP时程↑―――ECG：Q-T间期↑，T波低平

2）自律性

【K+】↑-------对P细胞自律性没有影响

-------对浦肯野cell----RP↑-----If↓---自律性↓

---- IK1通透性↑-----抵消If---自律性↓

3）传导性

【K+】↑↑-------RP↓↓----INa失活-----快反应细胞传导性↓

心肌缺血时-----ATP↓----- I K-ATP开放----【K+】↑↑-------RP↓↓----INa失活-----快反应细胞传导性↓

【K+】↓----虽然推动钾外流的动力增加，但I K1通透性↓---R P↓---细胞传导性↓

4）收缩性

【K+】↑-------I K1通透性↑----AP时程↓---2期内流的钙↓----收缩性↓【K+】↑↑-----心肌停在舒张状态

二、钙离子：

1）对兴奋性的影响：

【Ca2+】↑----对INa有屏障作用-----TP↑----兴奋性↓

【Ca2+】↑----I Ca-L↑----激活钙依赖性钾流I K－Ca↑----AP时程↓ERP↓【Ca2+】↓----对INa有屏障作用-----TP↓----兴奋性↑

【Ca2+】↓----I Ca-L↓----激活钙依赖性钾流I K－Ca↓----AP时程↑ERP↑

2) 对自律性的影响

3) 传导性

【Ca2+】↑----对I Na有屏障作用-----TP↑----传导速度↓

----对I Na有屏障作用-----I Na内流↓----传导速度↓

----缝隙连接关闭------传导速度↓

4）收缩性

【Ca2+】↑----2期内流的钙↑-----通过CICR, 细胞内高钙-----收缩性↑

【Ca2+】↑↑心肌停在收缩状态

三、PH值：

1）兴奋性：

PH值↓----抑制I Na---- TP↑----兴奋性↓

---抑制I K1----RP↑----钠通道备用程度↓---兴奋性↓

---降低I Na单通道的开放概率----兴奋性↓

2）传导性

PH值↓----缝隙连接关闭------传导速度↓

----抑制I Na---- 0期去极化速度↓----传导速度↓

离体蛙心灌流及药物对心脏的影响

离体蛙心灌流及药物对心脏的影响 一、实验目的： 1、学习蛙心灌流方法。 2、了解离体心脏的自律性与环境中各因素变化的关系，观察理化因素 对蛙心活动的影响。 二、实验对象：蟾蜍 三、实验方法： 1、标本制备： 取蟾蜍→破坏CNS→固定→剪皮→打开胸腔（暴露胸骨柄，用镊子把胸骨柄捏起来，用粗剪刀剪断，沿胸骨将锁骨剪断，去除多余的骨头，注意勿将心脏剪破）→用眼科剪小心剪开心包膜→暴露心脏→在主动脉叉下方穿一根丝线备用→用蛙心夹在心舒张期夹住心尖部→在左侧主动脉分叉处2-3mm处剪一剪口→将盛有一定量任氏液的蛙心插管插入到主动脉球→将插入到主动脉球的套管稍向后退，再向左下逆时针旋转90°，插入心室→结扎固定→剪断血管和背面静脉窦以下组织，游离标本 2、连接装置： 蛙心管内保持2ml灌流液，用木夹夹住蛙心套管，蛙心夹的线与张力换能器相连，换能器与电脑的相应通道相连。 3、运行电脑： 打开电脑→Medlab→实验/常用生理实验→离体蛙心灌流 四、实验结果： 分别观察正常心脏活动曲线及加入不同溶液后的心脏活动曲线的变化。 曲线规律：心脏节律； 曲线疏密：心率 曲线基线：心室舒张最大程度 顺序观察项目药量心肌(率、力)变化 正常任氏液灌流正常 1 0.65%NaCl 灌流 1~2d 2 2% CaCl 2 3 1%KCl 1~2d 4 1:10000 NA 1~2d 5 1:100000 ACh 1~2d 6 3% LH 1~2d 2.5% NaHCO3 2~4d 7 1:100000 Isop 1ml +任氏液1ml 8 1:1000 prop 0.2ml+任氏液1.8ml 出现效应后，抽出一半液体后 立即加入Isop1ml

离体蛙心灌流实验

实验五离体蛙心灌流实验 一实验目的 1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。 2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。 二实验原理 心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。 1、任氏液：正常对照 含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4 和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。 2、0.65%NaCl灌流： 3、2%CaCl2灌流 4、 1%KCl灌流

5、1:10000 E 灌流 6、1:10000 Ach灌流 7、心得安 β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。 8.、阿托品 M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。 三实验器材 微机生物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。 四实验步骤 1、标本制备（观看视频） 2、仪器及标本的连接 3、具体软件操作： 1）离子试剂：任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任氏液清洗→2%CaCl2溶液→任氏液清洗 2）药物试剂：肾上腺素（E）→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach，任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。 五实验结果

图1 离体蛙心灌流

心内科常用药大全

总得来说心内用药分五类：扩冠降压抗凝调脂抗心律失常 first:扩冠，即扩张冠状动脉，增加心脏血供 这种药小时候看电视就经常见到，那些有心脏病的老头子，不行了就含一片，一下就好了，不含折腾不了几下就要倒下。 他们含的就是硝酸酯类药：短效：硝酸甘油 长效：单硝酸异山梨酯等 作用机制：扩张冠状动脉和静脉为主，扩张静脉的作用可以使回心血量减少，从而减轻心脏的负担，使心脏供血相对性的增加。 副作用：低血压，头痛，眩晕。 与其他药物相互作用：1.与B受体阻滞剂和钙离子通道阻滞剂存在相加和协同作用 2.与ACEI同用可进一步改善心绞痛患者的运动心电图缺血指标，有益改善急性心梗的预后。 3.与其它扩血管药，降压药，三环类抗抑郁药（盐酸阿米替林）同服扩血管降压作用会增加。 4.与地高辛合用可降低后者血药浓度 sec:降压药，共5类，代号为：A(ACEI)，A(ARB)，B(B受体阻滞剂），C（Ca离子通道阻滞剂），利（利尿剂） 1.钙离子通道阻滞剂：络活喜 (苯磺酸氨氯地平) 作用机制：阻止钙离子内流，使平滑肌松弛，心肌收缩力下降，血压下降。 适应症：1.冠脉疾病；2.糖尿病；3.收缩压为主的高血压；4心衰 副作用：眩晕，头痛恶心；水肿，低血压，心动过速（突然的血压下降，反射性引起心跳加快来代偿） 相互作用：1.与胺碘酮合用，可进一步抑制窦性心率或加重窦房传导阻滞，避免合用。（因为胺碘酮抑制钾通道，使复极时间及整个动作电位时间延长，再加上钙通道阻滞，窦房结、房室结4期自动去极化速率减慢，抑制了正常起搏点，导致心律失常） 2.与B受体阻滞剂合用治疗心绞痛和高血压有效，但二氢吡啶类钙离子通道阻滞药与之合用可致严重低血压 3.芬太尼进行麻醉时，更不能使B受体阻滞剂和钙通道阻滞剂合用。 4.对地高辛几无影响作用（由于地高辛在心内常用，中毒剂量和治疗量又比较近，所以经常要考虑） B受体阻滞剂：倍他乐克 ?作用：减慢心率，使心排血量降低，以及外周循环顺应性改变以保持外周血流量，还可抑制肾素释放。 ?适应症：1.高危冠状动脉疾病 2.心衰 3.陈旧性心梗4.糖尿病 ?副作用：轻心动过缓，虚弱，嗜睡，胃肠紊乱 ?重收缩性心力衰竭，气管痉挛，低血糖，高血糖，加重外周动脉疾病，梦魇，失眠，阳痿，高甘油三酯血症，HDL下降 ?禁忌症：哮喘，2-3度传导阻滞，收缩性心力衰竭加重，脆弱糖尿病 这个药最要注意的是严重心衰时使用时，其负性肌力和负性时变作用会导致心排血量降低，加重心衰症状，故在心衰尚未缓解前慎用。对于心律60以下的也要慎用，因为会减慢传导，我亲眼见到一房扑120心率患者，吃这个药之后，变成交界性逸搏了. 药物相互作用 ?1.与单胺氧化酶抑制剂药（抗抑郁的）合用，可致极度低血压，应禁止合用 2. 奎尼丁可使本药的清除下降，导致心动过缓、疲乏、气短等。 3. 普罗哌酮可增加本药浓度，引起卧位血压明显降低。

生理学实验报告-蛙心灌流

实验名称： 蛙类离体心脏灌流 课程名称：生理学实验 指导教师：龙天澄张碧鱼陈笑霞 实验人：叶永锋08344031 学院：海洋学院 实验时间：2009年12月09日

一、【目的要求】 1、学习斯氏离体蛙心灌流法。 2、了解心肌的生理特性。 3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh)等对离体心脏活动的影响。 二、【原理】 将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。血钾浓度过高时（高于7.9mmol/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。 三、【实验仪器】 青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：5 000肾上腺素、1：10 000乙酰肌碱、300U／mL肝素。 四、【方法与步骤】 1、斯氏蛙心插管法 （1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中， 按前面的方法暴露心脏。仔细识别心脏周围的大 血管(见右图)。在左主动脉下方穿一线，于动脉 圆锥处结扎(动物个体小时，结扎位置可靠上些)。 再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备 用。左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪 在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜 口。选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量 (套管内2～3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶 液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口)。此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入)。用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液)，再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。用任氏液反复冲洗心室内余血，

钙离子肾上腺素乙酰胆碱对离体蛙心活动有何影响

钙离子、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蛙心活动有何影响?为什么? 高钙可见蛙心收缩力增强,但舒张不完全,以致收缩基线上移.在钙离子浓度较高的情况下,心脏会停止在收缩状态,称为“钙僵”. 心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关.心肌肌浆网不发达,储钙能力差,易受细胞外钙离子浓度高低影响,当钙离子浓度升高至10-5M水平时,作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的钙离子,这就引起肌钙蛋白分子构型的改变,从而触发肌丝滑行,肌纤维收缩.当肌浆中钙离子浓度降至10-7M时,钙离子与肌钙蛋白解离,心肌随之舒张.用高钙任氏液灌注蛙心,使得肌浆中的钙离子浓度不断升高,钙离子与肌钙蛋白结合数量不断增加,甚至达到只结合不解离的程度,于是,心肌出现钙僵. 滴加肾上腺素后,可见蛙心收缩增强,心脏舒张完全,心博曲线幅度明显增大.因为肾上腺素使心肌收缩能力增强.机理为肾上腺素与心肌细胞膜上的β受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜钙离子通透性,导致肌浆中钙离子浓度增高,使心肌收缩增强.另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与钙离子亲和力,促使肌钙蛋白对钙离子的释放速率增加；提高肌浆网膜摄取钙离子的速度,刺激钠-钙离子的交换,使复极期向细胞外排出钙离子的作用加速.这样,使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显加强. 滴加乙酰胆碱后,可见蛙心收缩减弱,收缩曲线基线下移,心率减慢.最后,心跳停止于舒张阶段,出现类似高钾时的变化.因为乙酰胆碱使心肌的收缩能力减弱.机理为乙酰胆碱与心肌细胞M受体结合,一方

面提高心肌细胞膜钾离子通道的通透性,促使钾离子外流,将引起（1）窦房结细胞复极时钾离子外流增多,最大复极电位绝对值增大；IK衰减过程减弱,自动除极速度减慢.这两方面因素导致窦房结自律性降低,心率减慢.（2）复极过程中钾离子外流增加,动作电位2、3期缩短,钙离子进入细胞内减少,使心肌收缩力减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制钙离子通道,减少钙离子内流,使心肌细胞收缩减弱. 综述 钙离子是机体各项生理活动不可缺少的离子。它对于维持细胞膜两侧的 钙离子碱性还原棒生物电位，维持正常的神经传导功能。维持正常的肌肉伸缩与舒张功能以及神经－肌肉传导功能，还有一些激素的作用机制均通过钙离子表现出来。它的主要生理功能均是基于以上的基本细胞功能，主要有以下几点： 1.钙离子是凝血因子，参与凝血过程； 2.参与肌肉（包括骨骼肌、平滑肌）收缩过程； 3.参与神经递质合成与释放、激素合成与分泌； 4.是骨骼构成的重要物质。 其中几个重要作用的产生机制如下： 钙离子传导神经信号 机制：促进神经递质分泌。 当第一个细胞兴奋时，产生了一个电冲动，此时，细胞外的钙离

离子及药物对离体蛙心的影响

西安交通大学医学院教案 课程名称机能实验学授课方式_________ 任课教研室_________ 任课教师_________ 授课年级_________ 授课时间_________

离子和药物对离体蛙心的影响 【实验目的】 1.掌握离体蛙心灌流的实验方法。 2.掌握各种理化因素对心脏活动的影响机制。 3.进一步熟悉和掌握生物信号采集和处理系统。 【实验原理】 心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行，一旦适宜的环境被破坏，例如离子浓度或酸碱度的急剧改变等，心脏的活动就会受到影响。在整体内，心脏的活动受自主神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力量增强，心率加快；而迷走神经兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱，使心肌收缩力量减弱，心率减慢。 蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似于血浆的任氏液灌流，在一定时间内，可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。改变任氏液的组成成分，如改变Na+﹑K+﹑Ca2+ 的浓度及酸碱度等，心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变。 1.K+对心脏活动的影响 总体看来心脏对细胞外K+浓度变化比较敏感；但不同部位心肌的敏感性不同，心房肌最敏感，房室束-浦肯野纤维系统次之，窦房结敏感性较低。 ①K+对心肌细胞兴奋性的影响 细胞外[K+]↑时，对兴奋性的影响与其浓度升高的程度有关。当[K+]轻度或中度升高时，细胞内外K+浓度梯度减小，K+外流力量减小，静息电位（RP）的绝对值减小，与阈电位（TP）的差值减小，细胞的兴奋性因而升高；当细胞外K+浓度显著增高时，RP的绝对值减小到－55mV左右时，Na+通道失活，开放效率降低，细胞的兴奋性降低或丧失，严重时，可导致心肌停搏于舒张状态。 【K+】↑-------RP↓-----兴奋性↑ 【K+】↑↑-------RP↓↓-----RP

1、蛙心灌流实验报告

蛙心灌流实验 实验目的 1、学习斯氏或八木氏离体蛙心灌流法。 2、了解心肌的生理特性。 3、观察Na+、K+、Ca2+及肾上腺素（Adr）、乙酰胆碱（Ach）等对离体心脏活动的影响。实验原理 动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发生改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件。 实验材料与用品 1、材料：蟾蜍、斯氏蛙心套管、套管夹、支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板（蜡盘）、常用手术器械、滴管、废液缸、棉线 2、药品：任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2 、1%KCl、0.01% 肾上腺素、0.01%乙酰胆碱 3、仪器：计算机采集系统、张力传感器 实验步骤 1、取一只蟾蜍，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨，暴露心脏。用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。 2、识别心脏的各个部分，包括心房、心室、静脉窦等，并观察心跳。 3、插蛙心插管，制备离体蛙心。在左主动脉下穿一线结扎，靠近动脉窦，接着在左右主动脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。 4、用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主动脉距分叉3mm处向心脏剪一斜口，右手将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入，先进入动脉圆锥，然后在心室收缩时，向前略向左推动蛙心插管，使之经主动脉瓣插入心室腔内（注意：为了使蛙心插管顺利插入心室，应使心室与动脉圆锥成一条直线）。进入心室的标志是随着心室搏动，均有血液喷入插管，插管的液面随着心搏而升降。结扎插管并将结扎线固定于插管侧面的小钩上，以防止标本滑脱。在蛙心插管插入心室后，用吸管及时吸出管内的血液，更换新鲜任氏液。提起插管，剪断主动脉左、右侧分支，轻轻提起插管和心脏，在静脉窦下方绕一线，将左右肺静脉及前后腔静脉一起结扎（切勿损伤静脉窦），在结扎线下方剪去所有牵连的组织，将心脏摘出。用任氏液反复冲洗（10~25滴/min的速度缓慢点滴）任氏液。至插管内任氏液完全澄清无色为止。以后做实验注意每次换液时，插管内液面应保持相同的高度。

心内科常用药

心内科常用药文件编码（GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968）

心内科常用药 马来酸桂哌齐特（克林澳）----改善循环、扩血管 马来酸桂哌齐特注射液为钙离子通道阻滞剂，通过阻止Ca2+跨膜进入血管平滑肌细胞内，松弛，脑血管、冠状血管和外周血管扩张 凯时前列地尔---扩血管 【适应症】1治疗慢性动脉闭塞症（血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化症）引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，改善心脑血管微循环障碍。2脏器移植术后抗栓治疗，用以抑制移植血管内的血栓形成。3动脉导管依赖性先天性心脏病，用以缓解低氧血症，保持导管血流以等待时机手术治疗。4用于慢性肝炎的辅助治疗。本品具有易于分布到受损血管部位的靶向特性。 【不良反应】1．休克：偶见休克，要注意观察，发现异常现象时，立刻停药，采取适当的措施。2．注射部位：有时出现血管疼、发红，偶见发硬，瘙痒等。3．循环系统：有时出现加重心衰，肺水肿，胸部发紧感，血压下降等症状，一旦出现立即停药。另外，有时出现发红、血管炎，偶见脸面潮红，心悸。4．消化系统：有时出现腹泻、腹胀，不愉快感，偶见腹痛，食欲不振，呕吐，便秘。5．肝脏：偶见GOT、GPT上升等肝功能异常。6．精神和神经系统：有时头晕、头痛、发热，疲劳感，偶见发麻。7．皮肤：有时出疹或瘙痒感，偶见荨麻疹。8．血液系统：偶见嗜酸细胞增多，白细胞减少。9．其他：偶见视力下降，口腔肿胀感，脱发，四肢疼痛，浮肿，发热感，不适感。 【禁忌】1．严重心衰（心功能不全）患者。2．妊娠或可能妊娠的妇女。3．既往对本制剂有过敏史的患者。 速碧林(低分子肝素钙注射液)---抗凝 [适应症]预防血栓栓塞性疾病，特别是预防外科手术后血栓栓塞性疾病

电解质及药物对离体蛙心活动的影响

电解质及药物对离体蛙心活动的影响 【教学对象与学时】 一、教学对象：五年制本科 二、学时：4学时 【目的要求】 1、掌握Straud离体蛙心的灌流方法 2、观察钠、钾、钙三种离子与肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、乙酰胆碱、强心甙、氨茶碱等对离体心脏的作用 【课堂提问及解答】 一、离体蛙心如何制备？ 蟾蜍双毁髓，将双毁髓的蟾蜍仰卧固定在蛙板上，夹起胸骨后端的腹部皮肤剪一小口，再将手术剪由切口处伸人皮下向左右两恻锁骨外恻方向剪开皮肤，并向头端掀开。用镊子提起胸骨后端的腹肌并剪一小口，将手术剪由切口处伸人腹腔内，紧贴胸壁（以免损坏心脏和血管）沿皮肤切口剪开肌肉，剪断左右鸟骨和锁骨，使创口呈倒三角形。用眼科镊提起心包膜并用眼科剪剪开即可暴露心脏。 在暴露心脏的主动脉干下方引两根线，一条在主动脉上端结扎作插管时牵引用，另一根则在动脉圆锥上方，系一松结用于结扎固定蛙心插管。左手持左主动脉远心端的结扎线，用眼科剪在松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手将盛有少许任氏液，大小适宜的蛙心插管由此剪口处插入动脉圆锥，当插管头到达动脉圆锥时，再将插管稍向后退，并转向心室中央方向，在心室收缩期插入心室，判断蛙心插管是否进入心室可根据插管内的任氏液液面能否随心室的舒缩而上下波动。如蛙心插管已进入心室，则将预先准备好的松结扎紧，并固定在蛙心插管的侧钩上以免蛙心插管滑出心室。剪断主动脉左右分支。轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎线应尽量下压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组织，将蛙心游离出来即可。

二、肾上腺素、乙酰胆碱、强心甙、氨茶碱这几种药物中能增强心脏收缩张 力的是哪几个？ 肾上腺素、强心甙、氨茶碱 【实验原理介绍】 蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似其血浆的任氏液，在一定时间内可以保持心脏节律性收缩舒张，改变灌流液成分，心脏收缩舒张幅度与频率会随之变化。 【重点和难点】 一、重点 1、Straud离体蛙心的制备与灌流方法； 2、BL-420生物信息记录系统检测记录心肌收缩张力曲线。 二、难点 1、0.65%NaCl对心肌收缩张力曲线影响的机制 2、乙酰胆碱对心肌收缩张力曲线影响的机制 【观察指标】 心功能：心跳频率、幅度，心肌收缩张力曲线和舒缩程度 【实验方法与步骤】 一、实验动物：蟾蜍 二、实验分组：共6组 三、药品、器材：生物信息记录仪、张力传感器、蛙类手术器械一套、玻璃分针、滤纸、棉球、浇杯2个、缝线、滴管2支、蛙心夹、铁支架、双凹夹2个、试管夹、蛙心插管、任氏液、0.65%NaCl、3%ＣaCl2、1%KCl、1:10 000肾上腺素、1:100 000乙酰胆碱、1:100 00异丙肾上腺素、25:1000氨茶碱(2.5%)、25:100 000毒K(0.025%) 四、观察指标：心功能：心跳频率、幅度，心肌收缩张力曲线和舒缩程度 五、实验步骤： 1、Straud离体蛙心制备 （一）蟾蜍双毁髓术 （1）枕骨大孔的定位： 左手握住躯干及肢体，右手母指与食指握住蟾蜍的唇尖部前后摇动，在其头部背面可见一明显的凹陷点即为枕骨大孔处或左手握住蟾蜍躯干及肢体，食

心内科常用药 (1)

心内科常用药 马来酸桂哌齐特（克林澳）----改善循环、扩血管 马来酸桂哌齐特注射液为钙离子通道阻滞剂，通过阻止Ca2+跨膜进入血管平滑肌细胞内，松弛，脑血管、冠状血管和外周血管扩张 凯时前列地尔---扩血管 【适应症】1治疗慢性动脉闭塞症（血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化症）引起的四肢溃疡及微小血管循环障碍引起的四肢静息疼痛，改善心脑血管微循环障碍。2脏器移植术后抗栓治疗，用以抑制移植血管内的血栓形成。3动脉导管依赖性先天性心脏病，用以缓解低氧血症，保持导管血流以等待时机手术治疗。4用于慢性肝炎的辅助治疗。本品具有易于分布到受损血管部位的靶向特性。【不良反应】1．休克：偶见休克，要注意观察，发现异常现象时，立刻停药，采取适当的措施。2．注射部位：有时出现血管疼、发红，偶见发硬，瘙痒等。3．循环系统：有时出现加重心衰，肺水肿，胸部发紧感，血压下降等症状，一旦出现立即停药。另外，有时出现发红、血管炎，偶见脸面潮红，心悸。4．消化系统：有时出现腹泻、腹胀，不愉快感，偶见腹痛，食欲不振，呕吐，便秘。5．肝脏：偶见GOT、GPT上升等肝功能异常。6．精神和神经系统：有时头晕、头痛、发热，疲劳感，偶见发麻。7．皮肤：有时出疹或瘙痒感，偶见荨麻疹。8．血液系统：偶见嗜酸细胞增多，白细胞减少。9．其他：偶见视力下降，口腔肿胀感，脱发，四肢疼痛，浮肿，发热感，不适感。 【禁忌】1．严重心衰（心功能不全）患者。2．妊娠或可能妊娠的妇女。3．既往对本制剂有过敏史的患者。 速碧林(低分子肝素钙注射液)---抗凝

[适应症] 预防血栓栓塞性疾病，特别是预防外科手术后血栓栓塞性疾病治疗血栓栓塞性疾病,如严重的冠心病心绞痛 在血液透析中预防血凝块形成 [剂量用法] 速碧林不能用于肌肉注射 在预防和治疗血栓栓塞性疾病，应皮下注射速碧林 在血液透析中预防血凝块形成，每次血透开始时应从动脉端给予单一剂量速碧林皮下注射时通常的注射部位是腹壁前外侧，左右交替。针头应垂直而不是斜着进入捏起的皮肤皱褶。应用拇指和食指捏住皮肤皱褶直到注射完成。 潘妥洛克（成分：泮托拉唑）---制酸 适应症与其它抗菌药物（克拉霉素、阿莫西林和甲硝唑）伍用能够根除幽门螺杆菌感染。十二指肠溃疡，胃溃疡，中、重度反流性食管炎。 诺和灵R（通用名：生物合成人胰岛素）---短效 诺和锐---降糖—中效 易善复（成分:多烯磷脂酰胆碱胶囊）---保肝 [适应症] 胶囊：脂肪肝，肝硬化，肝中毒，急、慢性肝炎。针剂：脂肪肝（也见于糖尿病人），肝硬化，肝性昏迷，肝中毒症，急、慢性肝炎。 普未克、可必特---松弛支气管 弥可保---营养神经 【别名】甲钴胺，钴宾酰胺，弥可保 【适应症】末梢性神经障碍。因缺乏维生素Ｂ１２引起的巨红细胞性贫血。胸腺五肽---增强免疫

离子与药物对离体蛙心活动的影响

离子与药物对离体蛙心活动的影响 Effects of Several Drugs and Extracellular Ions on Isolated Toad Heart [摘要]目的学习Straub氏法灌流蟾蜍离体心脏方法，研究离子和药物对离体蛙心活动的影响以及作用机制。方法制备离体蛙心标本，采用Straub氏法完成蛙心插管，分别灌流低钙、高钙、高钾溶液，肾上腺素以及普萘洛尔、乙酰胆碱以及阿托品，用张力换能器和RM6240生物信号采集处理系统描记心搏曲线并测量记录数据。结果：无钙任氏液灌流，心脏舒张末期张力增大，而收缩末期张力明显减小，心率无显著改变；高钙任氏夜灌流，心脏舒张末期张力减小，而收缩期张力明显增大，心率无明显改变；高钾任氏夜灌流，心脏舒张末期张力增大，而收缩期张力明显减小，心率无明显改变；灌流液中加Ach，心脏舒张末期张力增大，收缩末期张力减小，心率减慢；加入Ach后滴加atp，心脏舒张末期张力变小，收缩期张力变大，心率无显著改变；灌流液中加入Adr，心脏舒张期张力减小，收缩期张力增大，心率无明显改变；Pro处理后加入Adr，心脏收缩末期张力减小，舒张末期张力和心率无显著改变。结论细胞外Ca2+浓度增大，心肌的收缩性明显增强；细胞外K+浓度升高，心肌收缩力明显减弱；乙酰胆碱使心脏收缩性减弱，阿托品可拮抗乙酰胆碱减弱心肌收缩性的作用；肾上腺素使心脏收缩增强，普萘洛尔可拮抗肾上腺素加强心脏收缩性的作用。 [关键词] 蟾蜍离体心脏灌流K+Ca2+ 肾上腺素乙酰胆碱 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性和收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。血钾浓度过高时(高于7.9mmol/L)，心肌兴奋性、自律性、传导性、收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。血钙浓度升高时，心肌收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。肾上腺素可使心率加快、传导加快和心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。【1】心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心

蛙心灌流实验报告

实验二离体蛙心灌流实验 专业：学号：姓名： 一、实验目的 1.学习离体器官（蛙心）灌流的方法。 2.观察理化因素对蛙心活动的影响。 二、实验原理 蛙心的灌流:蛙心无营养性血管，离体之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间，心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。 心肌： 1. 含有NaCl、CaCl 2、KCl、NaH 2 PO 4 、 Na 2 HPO 4 和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。灌流： %CaCl 2 灌流： %KCl灌流： :10000 E 灌流 :10000 Ach灌流 7.心得安 β 1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β 1 受体结合，使E不能发挥作用。 8.阿托品 M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。 三、实验器材 离体蛙心 任氏液、l％KCl溶液、2％CaC1 2 溶液、%NaCl溶液、1:10000 肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、心得安、阿托品 四、实验步骤

五、 结果与分析 心率：34次/min 最大收缩力： 最小收缩力： 图1 正常脉搏曲线 心率：35次/min 最大收缩力： 最小收缩力： 图2 %NaCl 灌流脉搏曲线 分析：细胞外液中Ca 2+浓度降低，2期Ca 2+内流减少，胞浆中Ca 2+减少，心肌收缩力降低。 任氏剂 %NaCl 任氏液清洗 2%CaCl 2 任氏液清洗 1%KCl 任氏液 2.药物试剂 E 任氏液清洗 心得安+E 任氏液清洗 Ach 任氏液清洗 阿托品+Ach 任氏液 1.离子试剂

心率：38次/min 最大收缩力： 最小收缩力： 图3 2%CaCl 灌流脉搏曲线 2 分析：心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。心肌肌浆网不发达，储钙能力差，易受细胞外钙离子浓度高低影响。细胞外液中Na+与Ca2+有竞争性抑制，细胞外液Ca2+浓度升高，细胞兴奋时内流Ca2+增加，心肌收缩力增强。慢反应细胞4期去极速度加快，心率增快。 心率：21次/min 最大收缩力： 最小收缩力： 图4 1%KCl灌流脉搏曲线 分析： K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制，细胞外液中K+浓度升高，K+抑制细胞膜对Ca2+转运，因此进入细胞内Ca2+降低，心肌的兴奋—收缩耦联作用减小，心肌收缩力减弱。 心率：35次/min 最大收缩力： 最小收缩力： 图5 肾上腺素灌流脉搏曲线 分析：肾上腺素与心肌细胞膜上的β 受体结合，心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透 1 性增强，肌浆中Ca2+浓度升高，心肌收缩力增强。而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力下降，肌钙蛋白对钙离子的释放增强，肌浆网膜摄取钙离子的速度加快，钠-钙离子的交换增加，复极期向细胞外排出钙离子增多，心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加强。

实验5离体蛙心灌注

实验五离体蛙心灌注 目的 学习离体蛙心灌流的方法；观察内环境理化因素的相对恒定对维持心脏正常节律性活动的重要作用；了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。 原理 动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发生改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件。 器材与药品 蛙心陶罐、蛙心夹、常用蛙手术器械、铁架台、双凹夹、滴管、小烧杯、氯化钠溶液（1%NaCl）、氯化钙溶液（2%Ca Cl）、氯化钾溶液（1%KCl）、肾上腺素（1/10000Ad）、乙酰胆碱（1/100000Ach）、任氏液（Ri/lger’s solution新鲜配制）等。 步骤 （1）取一只蟾蜍或蛙，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨，暴露心脏。用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。 （2）识别心脏的各个部分，包括心房、心室、静脉窦等，并观察心跳。 （3）插蛙心插管，制备离体蛙心。先在左右主动脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。再在左主动脉下穿一线结扎。用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主动脉距分叉3mm处向心脏剪一斜口，右手将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入，先进入动脉圆锥，然后在心室收缩时，向前略向左推动蛙心插管，使之经主动脉瓣插入心室腔内（注意：为了使蛙心插管顺利插入心室，应使心室与动脉圆锥成一条直线）。进入心室的标志是随着心室搏动，均有血液喷入插管，插管的液面随着心搏而升降。结扎插管并将结扎线固定于插管侧面的小钩上，以防止标本滑脱。注意在蛙心插管插入心室后，用吸管及时吸出管内的血液，更换新鲜任氏液。

生理学实验报告蛙心灌流

生理学实验报告-蛙心灌流

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蛙类离体心脏灌流 一、【目的要求】 1、学习离体蛙心灌流法。 2、观察Nａ＋,K+,Ｃa2+及肾上腺素(Adｒ),乙酰胆碱（ＡCｈ)，乳酸对离体心脏活动的影响。 二、【原理】 将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。 三、【实验仪器】 青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。套管夹、0．６5％ＮaＣl、２％ＣａＣl2、1%KCl、１：1０000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。 四、【方法与步骤】 １、斯氏蛙心插管法 (１)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入）。用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液）,再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。用任氏液反复冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液。保持套管内液面高度一致（１．５~２ｃm）,即可进行实验。 (2）将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液)。再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连(如右图）。注意:勿使灌流液滴到传感器上。调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。 2、实验观察 (1）记录正常心搏曲线 (2）改用0．65%ＮaCＩ溶液灌流,并作好加药标记,观察心搏变化。待曲线氏插管装置出现明显变化时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常。注意:换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线,同时保持灌流液面一致(以下同）。

离体蛙心灌流实验方法的比较研究

万方数据

?１４５６? 间上比双管法短（Ｐ＜０．０５）；双管法的心脏离体后存活时间明显长于单管法（Ｐ＜０．０５）；单管法对动脉瓣的损伤率、心律失常的发生率明显较双管法高（Ｐ＜０．０５）。实验结果见表１。 Ｆｉｇ１Ｄｉａｇｒａｍｏｆｏｎｅ—ｅａｎｕｌａｐｅｒｆｕｓｉｏｎｄｅｖｉｃｅ 图１单管灌流装置模式图 Ｆｉｇ２Ｄｉａｇｒａｍｏｆｔｗｏ—ｅａｎｕｌａｐｅｒｆｕｓｉｏｎｄｅｖｉｃｅ． 图２双管灌流装置模式图 表１两种方法优缺点比较 Ｆｉｇ１Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆａｄｖａｎｔａｇｅ矗ｄｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｗｉｔｈｔｗｏｐｅｒｆｕｓｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ（互±Ｓ．ｎ＝１２） Ｏｎｅ——ｅａｎｕｌａＴｗｏ——ｃａｎｌｌｌａ Ｔｉｍｅｏｆｅａｎｎｕｌａｔｉｏｎ（ｍｉｎ）４８．３５±７．２８５９．９５±２１．２３。 Ｔｉｍｅｏｆｉｓｏｌａｔｅｄｈｅａｒｔ（ｍｉｎ）６４．３０±２１．１８６０．１０±１８．４８ Ｈｅａｒｔｓｕｒｖｉｖａｌｔｉｍｅ（ｈ）１．７１±１．４０２．５７±０．５９＋ Ｄａｍａｇｅｏｆａｏｒｔｉｃｖａｌｖｅ（％）５８．３０。 Ａｒｒｈｙｔｈｍｉａ（％）６６．７２５．０。 ＲｅｃｏｒｄｉｎｇａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｓｙｓｔｅｍＳａｍｅＳａｍｅ ＣｏｓｔｏｆｄｅｖｉｃｅＬｏｗｅｒＨｉｇｈｅｒ。Ｐ＜０．０５ｍｏｎｅ—ｅａｎｕｌａｍｅｔｈｏｄ． 讨论 离体心脏灌流是研究心脏功能的重要手段之一，广泛应用于医学、生物学、药学等教学和科研工作中。采用离体心脏灌流系统可以直观地观察心脏的活动，研究心脏舒缩功能，心率和节律变化，前后负荷及各种体液因素等对心脏功能的影响【５Ｊ。采用蛙心脏进行离体心脏灌流是较为常用的一种模型，因其稳定，经济，一直被人们广泛采用。进行离体心脏灌流实验，首先需要保证心脏在体外较长时间存活，然后根据实验目的进行灌流和施加实验因素。无论是心脏离体前的插管、血流冲洗等操作，还是心脏离体后用人工溶液代替血液进行灌流，均使心脏脱离了生理性神经体液环境。因此，使离体心脏较长时问存活，并维持良好的状态对于完成实验和取得可靠实验数据极为重要。本研究比较了当前应用较为普遍的两种方法，并探讨了它们各自的优缺点。 本研究结果表明，单管法插管数量少，操作相对简单，缩短离体前等血管分离和插管等所需时间，可为完成各实验项目赢得足够在体外存活时间。其缺点是需将套管从主动脉经过动脉瓣插入心室，血液在心室收缩时射入动脉和插管内，而舒张时返流回心室，这样不仅打破了心脏单方向泵血的生理特征，而且，由于易发生心脏瓣膜及心肌损伤，使心律失常发生率增高，导致实验失败。常常影响实验结果的客观性及实验的顺利进行。离体心脏在体外的存活时间也较双管法短。双管法虽然需要对腔静脉和主动脉进行分别插管（双管），插管所需时问较管法要长，但因其不通过主动脉瓣，对主动脉瓣及心室肌的损伤机会大大减小，灌流液从静脉插管进入心脏，从动脉插管流出，使心脏血液单方向流动，符合心脏工作的生理特征。因此，心脏在体外存活时间反而较单管法长，而且一旦插管成功，各实验项目应能够得以顺利进行。采用双管法主要缺点除插管操作时间比单管法长外，因其灌流装置略复杂，需要特殊定制，费用较单管法实验装置高。从用途方面分析，双管灌流法还可用于研究心输出量，以及前、后负荷对心脏功能的影响等。如在双管法中改变Ｂ管中的液体量即容量负荷，改变Ａ管的口径（即后负荷）；而单管法的输入和输出均在同一管中，不适用于此项研究。 作者认为在离体蟾蜍心脏灌流实验中，采用双管法能使心脏瓣膜完好无损，保证血液单一方向流动，心脏存活时间长，能观察和记录心肌收缩力和心输出量，且记录的实验结果准确，便于整理分析，得出正确结论。而且由于实验成功机率高，减少了实验动物及试剂的消耗，值得在教学及科学研究工作推广应用。 ［参考文献］ ［１］ＭｃＫｅａｎＴ，ＳｅｈｅｒｚｅｒＡ，ＰａｒｋＨ．Ｈｙｐｏｘｉａａｎｄｉｓｅｈａｅｍｉａｉｎｂｕｆｆｅｒ—ｐｅ删ｔｏａｄｈｅａｎｓ［Ｊ］．Ｊ脚Ｂｉｄ，１９９７，２００ （１９）：２５７５—２５８１． ［２］ＨｕｓｓｅｉｎＡＡ，ＮａｂｉｌＺＩ，ＺａｌａｔＳＭ，ｅｔａ１．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｖｅｎｏｍｓｆｒｏｍｔｈｒｅｅｓｐｅｃｉｅｓｏｆｂｅｅｓ：ｅｆｆｅｃｔｓｏｎｈｅａｒｔａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄｂｌｏｏｄ［Ｊ］．ＪＮａｔＴｏｘｉｎｓ，２００１，１０（４）：３４３—３５７．［３］任京力，赵树进，杨太成，等．肾上腺素能ｐ。受体亚型特异性抗体的制备及鉴定［Ｊ］．中山医科大学学报，２００２， ２３（１）：３７—３９，４３． ［４］高兴亚，汪晖，戚晓红，等主编．机能实验学［Ｍ］．北京：科学出版社，２００２．７２—７４． ［５］黄敏，冬冬主编．医学机能实验学［Ｍ］．北京：科学出版社，２（１０２．４８—５０． ［６］胡还忠主编．医学机能学实验教程［Ｍ］．北京：科学出版社，２００２．１３３—１３６． ［７］朱建平主编．生理科学实验教程［Ｍ］．北京：科学出版社，２００３．８２—８５． ［８］徐怡，汤剑清，刘少金，等．蛙心灌流实验中值得注意的几个问题［Ｊ］．数理医药学杂志，２００２，１５（５）：４０３— ４０４． ［９］季淑梅，王庆山，范振中，等．介绍一种简单、新型的主要用于蛙心灌注实验的计滴装置［Ｊ］．中国应用生理 学杂志，２００４，２０（１）：９５—９７．　万方数据

离子及药物对离体蛙心脏活动得影响

一实验目得 １、学习制备离体蛙心脏及离体心脏灌流得方法。 2、观察钠离子、钾离子、钙离子3种离子，去甲肾上腺素、乙酰胆碱、温度、酸碱度等 因素对心脏活动得影响。 3、通过实验使学生初步对递质、受体、受体兴奋剂及受体阻断剂得概念有所感知． 二实验原理 心脏正常得节律性活动必须在适宜得理化环境中进行，一旦适宜得环境被破坏，例如酸碱度及离子浓度得急剧改变等,心脏得活动就会受到影响。在整体内,心脏得活动受自主神经得双重支配,交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力量增强,心率加快;而迷走神经兴奋时,其末梢释放乙酰胆碱,使心肌收缩力量减弱,心率减慢。强心甙类药物能够增强心肌收缩能力,减慢心率。 青蛙心脏离体后,用理化特性近似于血浆得任氏液灌流,在一定时间内,可保持其比较稳定得节律性收缩与舒张。改变任氏液得组成成分，如改变Na+﹑K+﹑Ｃa2＋得浓度及酸﹑碱度等,心脏跳动得频率与幅度就会发生相应得改变。当血钾离子过高时，心肌兴奋性、自律性、传导性与收缩性均降低,表现为收缩力减弱、心动过缓与传导阻滞,严重时心脏可停搏于舒张期。而血钙离子升高时,心肌收缩力增强，但过高时可使心室停搏于收缩期。而血钙离子降低时,心肌收缩力减弱。血钠离子轻微变化对心肌影响不明显,只有发生明显变化时才会影响心肌得生理特性,钠离子剧烈升高时心脏得兴奋性与自律性虽升高，但兴奋得传导性与收缩性却下降，严重时可使心脏停搏于舒张期。 三使用仪器、材料 1、实验仪器：生物信号采集处理系统，张力换能器,小动物手术器械，蛙板,细线,滴管， 烧杯,蛙心夹,蛙心插管,滴管，万能支架等 ２、实验材料：0、４%肝素—任氏液插管用，任氏液,0、65％氯化钠，２%氯化钙,1％氯化钾,1％乳酸,2、5%碳酸氢钠,１:１００00肾上腺素,1：1000０乙酰胆碱,１:500０阿托品等溶液 四、实验步骤 1、双毁髓法处死青蛙 2、蛙类离体心脏制备 3、实验装置连接 4、记录不同离子及药物对心脏收缩得影响 先描记正常得蛙心搏动曲线作为对照,注意观察心搏频率、心室得收缩与舒张程度。然后依次把NaCl溶液、ＣaCl2溶液、KCl溶液、肾上腺素、乙酰胆碱、NaHCO3溶液、乳酸,阿托品（最后)灌到离体蛙心中,观察心搏曲线变化。 五.实验结果及分析 (１)Ｎａ+对蛙类离体心脏活动得影响 如下图所示，曲线得疏密:反映心跳得频率(心率caｄiac rhytｈmicity,CＲ);曲线得规律性:反映心跳得节律;曲线得幅度：反映心肌收缩得强弱（心肌收缩能力ｃaｒdiac ｃｏntｒａctilｉty,CT)。 (g)

心内科常用药及常用英文简称

1、降压药 （1）ACEI： （洛丁新）贝拉普利 10mg*15片 （雅施达）培哚普利片 4mg*10s （依苏）马来酸依那普利片 10mg*16 卡托普利片 25mg*100 （久保克）依那普利氢氯噻嗪片 6.25mg*8（社保不报）（2）ARB （苏适）厄贝沙坦片 0.15*7 氯沙坦钾（科索亚）片 50mg*7 替米沙坦片（美卡素） 80mg*7片 （代文）结沙坦胶囊 80mg*7 颉沙坦（托平）胶囊 80mg*7 （3）CCB （拜新同）硝苯地平控释片 30mg*7s （波依定）非洛地平缓释片 5mg*10s （络活喜）苯磺酸氨氯地平 5mg*7 尼莫地平薄膜包衣片 30mg*20 尼莫地平 20mg*50片 苯磺酸氨氯地平（压氏达）片 5mg*14 硝苯地平缓释片 10mg*30s 硝苯地平片 10mg*100 （4）β受体阻滞剂 （倍他乐克）美托洛尔 50mg*20片

（倍他乐克）美托洛尔 25mg*20片盐酸普萘洛尔片 10mg*100 （康忻）富马酸比索洛尔片 5mg*10 （5）利尿剂 吲哒帕胺片 2.5mg*30 螺内酯片（氨体舒通） 20mg*100 氢氯噻嗪片 25mg*100 （6）a受体阻滞剂 盐酸哌唑嗪片 1mg*100片盐酸乌拉地尔（亚定宁）注射液 25mg/支特拉唑嗪（高特灵）片 2mg*28 2、调脂药 （1）他汀类 阿乐（阿托伐他汀钙）片 10mg*7 阿托伐他汀钙（立普妥）片 10mg*7 阿托伐他汀钙（立普妥）片 20mg*7 辛伐他汀（舒降之）片 20mg*7 （2）贝特类 （冠之柠）非诺贝特咀嚼片 0.2*10 （耐复伦）非诺贝特胶囊（∏） 0.2*10 3、抗血小板 （波立维）硫酸氯吡格雷片 75mg*7片(泰嘉)氢氯吡格雷片 25mg*20 阿司匹林肠溶片（拜阿司匹灵） 0.1g*30片