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理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用

理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用
理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用

理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用

浙江中医药大学14级临床医学本部三班张伊娜

【摘要】目的:研究乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl、低温台氏液、缺氧对离体家兔肠肌的作用及机制。方法:向浸有离体家兔肠肌的38℃台氏液中依次滴加乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl各2滴,将38℃台氏液迅速换成25℃的台氏液,停止供氧及恢复供氧,用生物信号采集处理系统记录肠肌的收缩情况。结果:滴加乙酰胆碱、NaOH后,肠肌收缩张力和频率都增大;滴加肾上腺素、HCl和将38℃的台氏液迅速换成25℃台氏液后,肠肌收缩张力与频率都降低;停止供氧后,肠肌收缩早期张力及频率增强,晚期减弱。通气后频率先降低又逐渐恢复正常。结论:一定浓度乙酰胆碱、NaOH可促进肠肌的运动;一定浓度的肾上腺素、HCl以及低温会抑制肠肌的运动;短时间的缺氧能使肠肌收缩一开始增强,随后减弱。

【关键词】理化因素;小肠平滑肌;家兔;电活动

1实验材料和方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物

家兔(雌雄不限)。

1.1.2实验材料和器械

微机化生物信号采集处理系统(RM6240系统),麦氏浴槽,张力换能器,铁支架,双凹夹,恒温水浴箱,气泵,温度计,烧杯,螺旋夹,棉线,L型固定钩,剪刀,眼科镊,注射器,持针器,手术圆针,手术盘,搪瓷碗等;台氏液,乙酰胆碱(10-4mol/L),肾上腺素(10-4mol/L),氢氧化钠,盐酸,阿托品等。

1.2实验方法

1.2.1实验装置准备和仪器参数设置

安装麦氏浴槽,在麦氏浴槽中加固定量(10-15mL)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度温度在38℃。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气体一个个逸出为止。换能器输出线连接微机生物信号采集处理系统,仪器参数设置:RM6240,点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。1.2.2离体家兔肠肌制备

取家兔一只,用木槌猛击兔头枕部使其昏迷,迅速剖开腹腔找到胃,以胃幽门与十二指肠交界处为起点,先将肠系膜沿肠缘剪去,再剪取20-30cm肠管,用4℃台氏液冲洗,除去肠管内容物。冲洗干净后将肠管剪成数小段(约1~1.5cm),换以新鲜台氏液备用(注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能)。取小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中(此过程一直通有空气),在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管畅通,勿使其封闭。

1.2.3标本固定

肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入38℃麦氏浴槽中,再将肠管另一端系结在张力换能器的悬梁壁上。

1.2.4实验观察

1.2.4.1待离体肠肌稳定后,记录一段正常张力曲线。然后用滴管加ACh(10-4mol/L)2

滴于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后立即从排水管放出浴槽内含ACh的台氏液,然后从侧管加入38℃的新鲜台氏液,重复2次(每次用针管抽取20mL),以洗去残余药物,使之降到无效浓度,再加入与一开始等量的台氏液。待张力恢复到用药前的水平后进行下一项实验。

1.2.4.2用滴管加肾上腺素(10-4mol/L)2滴于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理含肾上腺素的台氏液。待张力恢复到正常水平后进行下一项实验。

1.2.4.3用滴管加2滴NaOH于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理含NaOH的台氏液。待张力恢复到用药前的水平后进行下一项实验。

1.2.4.4用滴管加2滴HCl于浴槽内(实际操作中因效应不明显,我们小组最后是加了4滴),观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理含HCl的台氏液。待张力恢复到正常水平后进行下一项实验。

1.2.4.5将38℃的台氏液迅速换成25℃的台氏液,观察并记录其张力曲线,等待温度回升张力恢复到正常水平后进行下一项实验。

1.2.4.6用滴管加阿托品2滴于浴槽内,等3min后用滴管加ACh(10-4mol/L)2滴于浴槽内,观察并记录其张力曲线,然后按相同步骤处理台氏液。待张力恢复到正常水平后进行下一项实验。

1.2.4.7关闭电源停止供氧,5min后恢复供氧,观察并记录其张力曲线[1]。

2实验结果

实验名称:理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用

实验日期:2016.4.7

实验人员:张伊娜谢来娣陈扬扬龚丽芬龚青青

图一各种因素对家兔离体肠肌的作用

图二乙酰胆碱对家兔离体肠肌的作用 图三肾上腺素对家兔离体肠肌的作用

图像描述:加入2滴乙酰胆碱后,曲线迅速上升, 图像描述:加入2滴肾上腺素后,曲线逐渐下降 频率加快,收缩幅度、强度增加,表明小肠平滑 及基线下移。收缩幅度、强度减小,频率减慢, 肌张力增加,自律性增加。 表明小肠平滑肌张力减小,自律性降低。

图四氢氧化钠对家兔离体肠肌的作用 图五盐酸对家兔离体肠肌的作用

图像描述:加入2滴氢氧化钠后,曲线呈上升态 图像描述:加入4滴盐酸后,曲线逐渐下降,收缩 但略显不规则,频率加快,收缩幅度有所减小、 幅度、强度减小,频率减慢,表明小肠平滑肌张力 强度增加,表明小肠平滑肌紧张性增加,张力增 减小,自律性降低。

加,但收缩性降低。

图六25℃台氏液对家兔离体肠肌的作用

图像描述:替换25℃台氏液后,曲线呈下降状态,频率降低,振幅、强度下降,表明小肠平滑肌张力减小,自律性降低。

图七阿托品+ACh对家兔离体肠肌的作用

图像描述:加入阿托品后,曲线先稍有下降后又迅速恢复正常,3min后加入ACh,曲线无明显变化,表明小肠平滑肌张力及自律性没什么改变。

图八缺氧对家兔离体肠肌的作用

图像描述:停止氧供后,曲线瞬间上升,频率和幅度增强,后来频率和幅度略微有所减小,表明缺氧早期小肠平滑肌张力及自律性增强,晚期减弱。通气后频率先降低又逐渐恢复正常。

3实验讨论

3.1乙酰胆碱对家兔离体肠肌的作用

在浴槽中加入2滴乙酰胆碱后,可见离体肠管活动增强,曲线上升,收缩频率变快,幅度和强度增加。出现上述现象的机理,认为与消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性Ca2+专用通道,另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对ACh 敏感,小剂量ACh即引起开放;后一类通道对ACh相对不敏感,只有大剂量ACh才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高,进而激活肌纤蛋白——肌凝蛋白——ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。

3.2肾上腺素对家兔离体肠肌的作用

在浴槽中加入2滴肾上腺素后,可见离体肠管活动减弱,曲线下降,收缩频率变慢,幅度和强度减小。出现上述现象的机理,目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两种受体有关,而α受体又可分为α1和α2受体两种亚型。β受体又分为β1、β2和β3受体三种亚型[2]。肾上腺素作用于α2受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使K+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降。同时,肾上腺素还作用于β受体,一方面它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多,cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca泵活动,使肌浆上Ca2+浓度降低,亦使肌张力降低;另一方面β受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超极化,促进了肠肌肌张力的降低。

3.3氢氧化钠对家兔离体肠肌的作用

小肠的 PH约为 7.0~8.0,过高或过低的PH都会影响肠肌的收缩。在浴槽中加入2滴NaOH后,使台氏液的 PH值刚好处于 7.0~8.0之间,处于肠肌收缩的最适PH,因此可观察到肠肌运动加强,曲线呈上升态但略显不规则,频率加快,强度增加。但亦有实验

结果发现加入NaOH后肠肌收缩减弱,或先抑制后兴奋等。这可能与以下两种说法有关:1.如果NaOH对小肠肌理化环境影响的结果与小肠正常所处的碱性环境一致,会使细胞内酶的活性增高从而使肌张力增强;过碱则使肌张力减弱,因为不是小肠的适宜生活环境。

2.NaOH在增强碱性环境的同时,可改变肌膜对离子的通透性,增加了胞外Na+的浓度从而使Na+的内流增强,从而促进了细胞内贮存的Ca+大量释放[3]。

3.4盐酸对家兔离体肠肌的作用

在浴槽中加入4滴HCl后(我们小组加入2滴HCl发现现象不明显,因此改加4滴),台氏液的 PH低于肠肌的最适PH范围,可见肠肌收缩减弱。出现上述现象的机理,细胞外 H+升高时,Ca2+通道的活性受到抑制,使得Ca2+内流减少;同时可干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程,H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低,使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量减少。

3.5低温对家兔离体肠肌的作用

38℃的台氏液替换25℃后,可见肠肌收缩减弱,曲线呈下降状态,频率降低,振幅、强度下降。肠肌运动最适宜的温度在37.5℃+0.5℃范围,高于或低于该温度都会影响结果。当温度降到25℃时,酶活性降低,各离子通道开放数量减少,从而使肠管兴奋性下降。

3.6阿托品+ACh对家兔离体肠肌的作用

当加入阿托品时,离体肠管所对应的曲线先稍有下降后趋于正常,下降是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体拮抗剂与M受体结合了,影响了递质作用于M受体,从而影响了冲动的传导,导致了收缩降低。后来在滴加阿托品3min后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以曲线仍然正常。

3.7缺氧对家兔离体肠肌的作用

停止氧供后,曲线瞬间上升,频率和幅度有略微增强,后来频率和幅度略微有所减小,通气后又逐渐恢复正常。出现上述现象的机理可能是由于缺氧,肠肌运动得不到能量供给,故肠肌运动在缺氧开始一段时间代偿性升高;由于ATP有限,故随后运动张力和收缩幅度减弱。恢复氧供后,肠肌得到能量供给,代偿运动消失,故造成肠肌收缩活动短暂降低,由于ATP供应恢复正常,故随后逐渐恢复正常。

4实验结论

一定浓度乙酰胆碱、NaOH可促进肠肌的运动,原因是乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得相应离子通道开放,肌浆中Ca2+增高,而一定浓度的碱性环境使得肠肌收缩处于最适PH;一定浓度的肾上腺素、HCl以及低温会抑制肠肌的运动,原因是肾上腺素主要作用于α2受体,使K+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低。同时H+增多使肠肌收缩偏离其最适PH。低温会抑制相关酶活性,从而抑制了肠肌收缩;短时间的缺氧能使肠肌收缩一开始增强,随后减弱,可能缺氧早期代偿性活动增强,晚期减弱。

5参考文献

[1]陆源, 孙霞, 饶芳. 机能学实验教程[M]. 第3版. 北京: 科学出版社, 2016:140-141.

[2]朱大年. 生理学[M]. 第八版. 北京: 人民卫生出版社, 2009:286.

[3]王鸿利. 氢氧化钠和盐酸对家兔小肠平滑肌作用机制的初步探讨[J]. 新乡医学院学报, 1986, 03(03):9-12.

实验4离体家兔肠肌运动 (1)

实验4 离体家兔肠肌运动 [摘要] 目的:观察HCl、NaOH、18摄氏度台氏液和肾上腺素乙酰胆碱对离体家兔肠肌运动的影响。方法:利用RM6240系统采集实验数据,并进行统计分析。结果:统计分析得最大张力较对照组的P<0.01,最小张力的P<0.05,张力差值>0.05, 说明8个小组的最大张力和最小张力较对照组差异显著,张力差值差异不显著。结论:肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度影响,HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有加强作用,NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。 [关键词] 离体家兔肠肌;张力; 1材料 1.1实验动物家兔。 1.2主要仪器张力换能器,微机生物信号采集处理系统,麦氏浴槽,超级恒温器;兔手术台,通气管,手术器械。 1.3主要试剂台氏液,HCl,NaOH,肾上腺素,乙酰胆碱溶液。 2方法 2.1体家兔肠肌标本制备:取健康家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹部,找到十二指肠取出15cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将十二指肠剪成1.5cm8段,在台氏液培养皿中将每段肠肌在其两端对角壁处缝针穿线并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。 2.2标本固定:肠管一端连线系于张力换能器的悬臂梁上,然后放入37氏度麦氏浴槽中,再将肠管另一端系于与曹固定钩上,调节肌张力至2-3g。 2.3实验系统连接及参数设置: (1)麦氏浴槽中加15ml台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5摄氏度。通气管接百分之95氧气+百分之5的二氧化碳混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。 (2)能器接输出线接微机生物信号处理系统,仪器参数:开启RM6240系统,点击第一通道,选择“张力”。 3 实验观察 3.1 滴加HCl,观察并记录其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。 3.2 滴加NaOH,观察并记录其收缩幅度,待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。 3.3用18摄氏度的台氏液灌流肠肌,观察并记录其收缩幅度,待恢复正常。 3.4加入肾上腺素溶液后,观察其反应。反应稳定后换液冲洗。 3.5 加入乙酰胆碱溶液,观察并记录其反应。 3.6 统计方法结果以+ S 表示,用Excel统计函数进行数据统计。 4. 实验结果 数据分析统计结果如下表: 得结果当p<0.05差异显著;p>0.05差异不显著。 与对照组比较:*P<0.01 , **P<0.05 , ***P>0.05,前两者差异显著,后一者差异不显著。 5.讨论 1正常情况下,我们观察到离体十二指肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收

实验十 传出神经系统药物对离体家兔肠管平滑肌

传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响 实验目的 1、掌握离体平滑肌的实验方法。 2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用 教学时数2学时 实验原理 一、离体实验 1、所用组织:心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验 2、特点:实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间,可进行大量 药物的筛选。 3、要求:离体实验需在一定生理环境下进行,模拟体内环境。 (1)温度:38±0.5℃ (2)通氧气:1-2气泡/s (3)营养液:含有一定离子和葡萄糖的溶液,不同的组织所选用的营养液不同。 二、离体肠管实验 1、肠管的选择:根据实验目的的不同进行选择 (1)小肠:十二指肠、空肠、回肠 (2)自律性:频率较慢,起博点位于十二指肠,自律性自上而下渐弱。 (3)空肠多做定性实验,回肠多做定量实验 2、肠内受体及作用原理 (1)受体:家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。 (2)作用:α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张;M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。 (3)药品对受体的作用:

1、氯化乙酰胆碱(Ach):M受体激动剂,乙酰胆碱可兴奋M受体,使小肠收缩幅度 增加,蠕动加强。 2、阿托品(Atro):M受体阻断药,为竞争性拮抗剂,单独用药对肠管无作用,可阻断 M受体,对抗乙酰胆碱的M样作用,使肠管收缩幅度降低。 3、肾上腺素(Ad):α、β受体激动剂,可激活α、β受体(主要是β2受体),α、β 受体激动可产生与M受体激动相反的效应,表现为肠管舒张,小肠蠕动减弱。 4、氯化钙(Bacl2):①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合,使平滑肌收缩,②Ba2+可使细 胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩,Bacl2并非作用于受体,所以阿托品不能对抗这一作用。 实验材料 1.动物:家兔 2.药品①5X10-4氯化乙酰胆碱 ②0.5%硫酸阿托品 ③0.1%盐酸肾上腺素 ④20%BaCL2 3、器材:RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张 力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量 筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。 实验方法 一、首先调试RM6240系统,使进入肌张力测定状态. 1.在主菜单中用鼠标选择<实验>中的<消化>,选择系统显示<平滑肌生理特性>。 2.在界面右侧控制参数区选择<张力>,〈选择3g〉,扫描速度1.0s/div,确定信号输入,选择〈通道2〉,在工具菜单选择快速归零(空载时钩上无任何东西)。 3.在主菜单中选择〈示波〉,进入示波状态。

不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响

不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响 浙江中医药大学 【摘要】目的观察乙酰胆碱(Ach)、肾上腺素(E)、氢氧化钠溶液(NaOH)、盐酸溶液(HCl)、温度以及缺空气条件对家兔离体肠肌运动的因素。方法使用RM6240生物信号采集处理系统,通过不同因素(Ach、E、NaOH、HCl、温度(25℃)以及缺空气条件)对家兔离体肠肌进行作用,记录肠肌收缩幅度变化曲线及数据结果并分析机理。结果Ach、NaOH可使肠肌收缩明显,E、HCl、25℃条件、缺空气使肠肌收缩变弱。结论Ach、NaOH兴奋肠肌,促进肠肌收缩活动,E、HCl、25℃条件、缺空气抑制肠肌收缩活动。 【关键词】离体肠肌;家兔;收缩运动 【Abstract】 Objective Observation acetylcholine (Ach) and epinephrine (E), sodium hydroxide solution (NaOH), hydrochloric acid solution (HCl), temperature and lack of air condition of rabbit in vitro intestinal muscle movement factors. Methods Use RM6240 biological signal collection and disposal system, through the different factors (Ach, E, NaOH, HCl, temperature (25℃) and lack of air condition) of rabbit in vitro intestinal muscle for effect, record intestinal muscle contraction amplitude variation curve and data results and analysis mechanism. Results Ach, NaOH can make the intestinal muscle contraction obvious, E, HCl, 25℃condition, lack of air make intestinal muscle contraction become weak. Conclusions Ach, NaOH excited intestinal muscle, promote intestinal muscle contraction activities, E, HCl, 25℃condition, lack of air inhibit intestinal muscle contraction activities. 【Key Words】In vitro intestinal muscle; Rabbit; Contraction movement 1.材料与方法 1.1实验对象:家兔1只,浙江中医药大学动物实验中心提供。 1.2实验药品:台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。 1.3实验仪器:恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。 1.4实验方法与步骤 1.4.1安装好实验装置,将恒温浴槽调至38℃。 1.4.2用木棰猛击家兔后脑延髓部,致其昏迷后立即打开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处,取出十二指肠回肠,放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干长约2cm的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短环固定在通气麦氏浴槽内,另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在38℃的加有台式液的麦氏浴槽内,并调整好台式液充气量(小气泡连接不断)。 1.4.3实验准备:调节扎线与张力换能器,开启张力换能器,启动计算机RM6240生物信号采集系统,启用一通道,调节参数,使基线归零,使图形位于屏幕中央,便于观察。1.4.4 实验观察项目: (1)在屏幕曲线显示正常时,向麦氏浴槽中滴入两滴乙酰胆碱,观察并记录其收缩幅度,记录足够波形后换液冲洗。 (2)向麦氏浴槽中滴入两滴肾上腺素,观察并记录其收缩幅度,记录足够波形后换液冲洗。

实验七 药物对离体肠的作用

实验七药物对离体肠的作用 【目的】1.观察药物对离体兔肠的作用,联系其临床应用。 2.探讨药物的作用机制,提高同学们综合分析及探索问题的能力。 【材料】 器材铁支架、恒温水浴箱、麦氏浴槽、L形通气钩、橡皮管(一端连玻璃管)水温度计、球胆、螺旋夹、延伸棒、双凹夹、杠杆、描笔、记纹鼓、记录仪或计算机系统、木棰、解剖用手术器械一套、缝针、手术线、胶泥、培养皿、1ml 注射器、烧杯、5号针头、100ml量筒、酒精灯、恒温装置一套、蛙心夹。 药品台氏液、10-4乙酰胆碱溶液、1%阿托品、0.1%扑尔敏、10-5磷酸组织胺溶液、1%氯化钡溶液、1%毛果芸香碱溶液、10-4水杨酸毒扁豆碱溶液、10-4盐酸新福林溶液、10-5异丙肾上腺素溶液、10-4普萘洛尔溶液。 动物家兔。 【方法】取家兔一只,击头致昏,立即剖腹,剪下空肠和回肠上半段,置于盛有台氏液的烧杯或培养皿内,将肠系膜沿肠壁分离掉,用台氏液把肠内容物冲净,将肠剪成2~2.5cm长的肠段备用。如不即时应用,可将肠段放入台氏液中,置于冰箱保存,一般可保持活力12h左右。实验前,先调好恒温装置,温度保持在37~38°C。在麦氏浴管中盛入5ml台氏液,并标记好液面高度。由球胆输入空气(每秒1~2个气泡)。然后取肠管一段,一端固定于通气管的小钩上,放入麦氏浴管中,另一端用线连接在描记杠杆上(或接张力换能器联记录仪或计算机)。待离体肠段稳定5~10min后,描记一段正常收缩曲线,继而依次于麦氏浴管中加药进行实验。加入一次药液,至作用明显后,用台氏液连续冲洗2次,等到曲线恢复到用药前的水平,又随之描记一段基线,再加入第二个药液。如果肠管反应不灵敏,可更换另一段肠段。 给药的顺序: (1)10-4乙酰胆碱液20μg; (2)1%毛果芸香碱溶液2ml; (3)10-4水杨酸酸毒扁豆碱液20μg。 第二组药物

不同因素对家兔离体肠肌运动的影响

不同因素对家兔离体肠肌运动的影响 姓名:浙江中医药大学200*级********专业 * 班 * 组学号:摘要:目的研究0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、1当量NaOH、1当量HCl、25℃台氏液、缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法本实验取家兔离体肠肌,并用生物信号采集处理系统记录其在不同因素作用下的张力曲线。结果实验结果显示当滴加0.01%乙酰胆碱、NaOH刺激离体肠肌时,张力曲线明显上升,且频率加快,当用0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等条件刺激离体肠肌时,张力曲线则下降,且频率减慢。结论0.01%乙酰胆碱、NaOH能促进肠肌的运动,而0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等因素则抑制肠肌的运动。 前言 肠道平滑肌有壁内神经丛,因此有自动节律性收缩的特性,其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节[1]。平滑肌对某些化学物质(如:酸、碱等)及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。小肠平滑肌的电活动有快波和慢波两种基本形式。慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢电变化,是一种肌源性的电活动,不依赖植物神经系统的支配[2],慢波的存在是使平滑肌保持一种起步的机能状态。 本文在肠段表面依次给予0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液、缺氧等因素刺激,观察、记录其对小肠收缩情况的影响,为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响,提供理论依据。 关键词:不同因素、离体肠肌、运动 材料和方法[1] 1.材料 家兔;麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理系统;台式溶液、0.01%乙酰胆碱、0.01%肾上腺素、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液。

家兔离体小肠平滑肌生理特性

家兔离体小肠平滑肌生理特性 ,实验目的, 1(通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。 2(学习动物离体组织器官灌流的实验方法。 ,实验原理, 消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。 在一定时间内,离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中,观察当模拟内环境因素发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。 该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性,被称为生物学检定法。 ,器械与材料, 兔(大白鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1?10000)、乙酰胆碱(1?100000)、0.5mg/ml 阿托品、 0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。1,CaCl2、心得安、阿托品、自己准备可影响消化的药物。 ,方法与步骤,

1(恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽,浸漫度务必超过2支加热管。然后在药液管及预液管加适量台氏液,二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台氏液,使预液管预温的台氏液通向药液管。恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约40?(此温度是水浴槽中加热管旁的水温,与药液管内的温度相差2,3?),为了药液管内的温度得到准确控制,须采用外加温度计调整。最后打开供氧开关,即可产生空气气泡供氧,微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出,不能过快以免液面振动而影响记录。肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管,用弹簧夹控制出液量。 2(水浴里的水恒温38?,营养管内充满台氏液。要不断供应空气或O2,通过可调节供气旋钮控制气流速度,使气泡一个一个地进入台氏液中。 3(用铁锤击兔或大白鼠的头部,昏迷后,立即剖开腹腔,取出十二指肠至结肠间的肠段,剪成约3,4cm 小段,放入室温台氏液内轻轻冲洗,以除去肠的内容物。边洗边通入空气或O2,把肠段夹入另一盛有新鲜台氏液的培养皿内,继续通气备用。 4(将肌肉张力换能器(10g)固定于铁架台上,张力换能器输入端与系统的第1 通道中相连,进入计算机生物信号采集处理系统,选择“新建实验”中“张力”模块的生理特性实验项目并对控制面板参数进行设置。 5(营养管内的溶液保持37?,然后取出一小段肠,用缝针将肠的一端穿线结扎(只结扎半边肠腔)。肠的一端结扎线系于带夹的固定支架底端S 形小钩上,将支架放入营养管内并固定于管边缘。肠的另一端则连于张力换能器的应力臂上。使肠段完全浸浴在台氏液中,并立即通气。让肠段稳定20min,便可以描记其活动曲线。 6(实验项目 (1)观察、记录38?台氏液中的肠段节律性收缩曲线。

家兔离体肠肌

《医学机能实验学》学院: 专业:针灸推拿学 班级: 学号: 姓名: ******大学 2013/11/9

某些因素对家兔离体肠肌影响 姓名 (******大学**级针灸推拿专业1班6组,**学号) 摘要目的:观察不同因素(HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱)对家兔离体十二指肠活动的影响。方法:采用常规小肠平滑肌标本离体灌流的实验方法,观察不同剂量、浓度的HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱的对小肠平滑肌自发收缩活动的影响及其变化规律。结果:HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强效应,其收缩幅度与对照组比较差异有统计学意义,NaOH、肾上腺素对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制效应,其幅度变化与对照组比较差异有统计学意义。结沦:HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对大鼠十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强作用,NaOH、肾上腺素则有减弱作用。【1】。 关键词家兔离体肠肌 肠道平滑肌有壁内神经丛,因此有自动节律性收缩的特性,其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。本实验加入药物HCl NaOH 乙酰胆碱台氏液肾上腺素观察记录其对小肠收缩情况的影响,为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响,提供理论依据。【2】 1.材料 实验动物:选用体重为2~3kg的健康家兔1只,雌雄不限。 主要试剂与仪器:麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、HCL、NaOH、乙酰胆碱、台氏液、肾上腺素、RM6240系统生物机能实验系统等。 2.方法 2.1标本制备:击昏家兔,剖腹取长约2 cm十二指肠肠管;将肠管放入室温的台氏液中轻轻漂洗。肠内容物洗净后,肠段两端各系一条线,一端固定在标本钩上,另一端缚线连接张力传感器,整个肠管置于37 ℃台氏液中,台氏液内持续供95%O2与5%CO2混合气体,其间更换台氏液1次,待收缩活动平稳后用RM6420生物机能实验系统记录平滑肌收缩活动曲线。 2.2灌液10ml,离体小肠稳定10min,记录一张对照张力曲线,滴加HCl溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。 2.3灌液10ml,记录一张对照张力曲线,滴加NaOH溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。 2.4灌液10ml,记录一张对照张力曲线,滴加18℃台氏液溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。 2.5灌液10ml,,记录一张对照张力曲线,滴加1:10000肾上腺素溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。 2.6灌液10ml,记录一张对照张力曲线,滴加1:100000乙酰胆碱溶液两滴,观察小肠张力变化,反应稳定后,换液两遍。 2.7数据采集:计算给药前小肠平滑肌肠段的张力、收缩波平均振幅、平均张力作为对照值,采集给药后的相应值。

试验药物对家兔离体肠管的影响

药物对家兔离体肠管的影响 【目的】 1.观察乙酰胆碱和阿托品对家兔离体肠管的作用,并分析其作用机制。 2.学习离体肠管的实验方法。 【原理】 消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。给予离体肠管以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。 肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的Ach即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用——兴奋肠道平滑肌:收缩增强、张力增高。阿托品与M胆碱受体结合,能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。氯化钡的兴奋肠道平滑肌作用为Ba2+的毒性表现,其作用机制与激动M胆碱受体无关。 【材料】 1.动物:家兔。 2.药物:1×10-5乙酰胆碱溶液、0.5mg/mL硫酸阿托品溶液、0.1g/mL氯化钡溶液、台氏液。 3.器材:RM6240BD多道生物信号分析处理系统(匹配微机、显示器、打印机);麦氏浴槽,恒温电热器,压力换能器,空气泵;手术缝合器械等。 【方法】 1.取材:取家兔1只,左手执其髂上部,右手握木锤向其枕骨部猛击致死。迅速剖腹,取十二指肠、空肠及回肠,置于盛有冷台氏液的器皿中,沿肠壁剪去肠系膜,并将肠管剪成数段,轻轻压出肠内容物,再换冷台氏液继续冲洗肠管数遍,最后将肠管剪成2~3cm的小段备用。 2.制备离体肠管标本:取备用兔肠一段,两端分别作穿透肠壁(单侧或双侧)的缝合结扎并留线。 3.联接安装离体肠管实验装置:浴槽与恒温电热器联接,恒温电热器中的水温保持在38±0.5℃。离体肠管标本一端用线扎于L型通气管上,放入盛有30mL台氏液的浴槽内,固定L型通气管。标本另一端用线与压力换能器相连,后者联通RM6240BD多道生物信号分析处理系统。用空气泵向浴槽内缓慢输入气泡(2个/s)。 4.调试实验系统:打开相应软件“RM6240并口”,选择“实验/药理学专用实验/离体肠管实验(兔);工具/坐标滚动;等等”,并正确设置参数(时间常数为直流,灵敏度3g,滤波频率10Hz,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。),显示离体肠管活动曲线,并调节基础张力至2g左右。 5.加药:用注射器依次向浴槽内加入下列药物,实时显示并记录曲线变化。 (1)1×10-5乙酰胆碱溶液0.1~0.2mL,当肠管收缩显著时,立即加入; (2)0.5mg/mL硫酸阿托品溶液0.1mL,当描记曲线下降到基线时再加入; (3)1×10-5乙酰胆碱溶液,剂量同(1),若作用不明显,接着追加1次。 (4)0.1g/mL氯化钡溶液0.1mL,待作用稳定后立即加入; (5)0.5mg/mL硫酸阿托品0.1mL。 【结果】 打印肠管收缩曲线图,并在曲线中相应位置注明所加药物及剂量。 【注意事项】 ①控制好浴槽内温度:38±0.5℃。 ②冲洗干净制作离体肠管标本所需的肠管;离体肠管标本在制作时与使用前应置于冷台氏液中。 ③全程操作中,不宜过度牵拉肠管。给药前调好肠肌张力,不要过紧或过松,以不影响肠肌收缩功能及对药物的反应性为原则。实验过程中不得再调整张力。 ④浴槽内台氏液应该浸没肠管,实验中应结合标本大小控制液量,依据标本大小和液量调整加药量。 ⑤不要把药液直接加在标本上。 ⑥用作给氧的气泡不能太大或太快,避免其对描记波形的干扰。 ⑦重做实验时,先取出标本、放液,冲洗浴槽三遍后再加入台氏液(可先预热),当浴槽内温度适宜时,重置(新)标本,重新实验。 ⑧离体肠管标本不宜过长,两端结扎点相距不超过2cm。 ⑨本实验体系还可检验其他多种类别药物对离体肠管的影响,如拟肾上腺素药、抗肾上腺素药,拟组胺药、抗组胺药等。 ⑩检测每一种药物对离体肠平滑肌的影响时,都需换液后操作,分步进行。

实验 家兔离体肠肌活动得影响实验

实验5 家兔离体肠肌活动得影响实验 【摘要】目得研究0、01%乙酰胆碱(Ach)、0、01%肾上腺素(E)、NaOH溶液、HCl溶液、25℃台氏液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动得影响。方法家兔离体小肠平滑肌标本得制备,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。常用统计学方法与统计学指标。结果滴加0、01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH 溶液后,肠肌运动张力与频率都增大;滴加0、01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张力与频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力与频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌运动张力与频率逐渐降低。结论0、01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0、01%肾上腺素(E)、1NHCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素 目录 1、实验材料与方法 (1) 1、1、实验材料 1 1、2、实验方法: 2 2、实验结果: (3) 3、实验讨论(见附页) (4) 4、实验结论: (4) 5、参考文献: (4) 附页 (4) 1.实验材料与方法 1.1.实验材料 1.1.1.实验动物:兔子(浙江中医药大学动物实验中心) 1.1. 2.实验材料与器械:家兔,麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、 电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术 圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。 1.1.3.实验药品:台氏液:(0、8%NaCl、0、02%KCl、0、026%MgSO477H2O、0、0065% NaH2PO4、0、02%CaCl2、0、1%NaHCO3)、0、1%葡萄糖溶液。1:10 000 肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。

不同因素对家兔离体肠肌运动的影响(自己的).

不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响 摘要 :目的研究 0.01%乙酰胆碱 (Ach 、 0.01%肾上腺素 (NE 、 1当量 NaOH 、 1当量 HCl 、 20℃台氏液及缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法向浸有离体家兔肠肌的 37℃的台氏液依次滴加 0.01%Ach、 0.01%NE、 1当量NaOH 、 1当量 HCl 、停止供氧及迅速换成 17℃的台氏液,并用生物信号采集处理系统记录肠肌的收缩情况。结果滴加 0.01%Ach、 1当量 NaOH 后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加 0.01%NE、 1当量 HCl 肠肌运动张力与频率迅速降低; 将 37℃的台氏液迅速换成 20℃的台氏液后, 肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅速降低后逐渐增大。停止通氧后, 肠肌运动张力和频率逐渐降低;恢复通氧后,肠肌运动张力和频率逐渐升高。结论一定浓度 Ach 、 NaOH 可促进肠肌的运动;一定浓度的 NE 、HCl 可以抑制肠肌的运动;低温能使肠肌运动暂时减弱;短时缺氧使肠肌运动在一开始有增强的现象,而后减弱。 关键词不同因素;离体肠肌;运动 1. 材料和方法 [1] 1.1实验材料:家兔。 1.2实验仪器:麦氏浴槽、超级恒温箱、空气泵、恒温离体小肠灌流装置、微调固定器、张力换能器、生物信号采集处理系统、木锤、止血钳、手术刀、 20ml 注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、钢碗。 1.3实验药品和试剂:台氏液、 0.01%乙酰胆碱 (Ach 、 0.01%肾上腺素 (NE 、NaOH 、 HCl 。 1.4离体家兔肠肌制备:取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm 长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠, 沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约 30cm , 放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中, 用

离体小肠平滑肌的生理特性

一实验目的 1、学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法; 2、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动,观察若干刺激对离体小肠运动的影响。 二实验原理 动物的胃肠道由平滑肌组成,胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性,如兴奋性、传导性和收缩性之外,尚有自己的特性,主要表现为紧张性和自动节律性收缩,可以形成多种形式的运动,主要有紧张性收缩,蠕动。此外,胃还有明显的容受性舒张,小肠还有分节运动及摆动。如果将动物的小肠平滑肌离体,放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等因子十分接近机体的内环境的溶液中时,可保持离体小肠段长时间地存活下来,并可以观察到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分敏感,而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液,将小肠的一端固定,另一端连张力换能器,即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。 三使用仪器、材料 1、仪器:细线,注射器,恒温平滑肌槽,计算机生物信号采集处理系统,张力换能器,万 能支架,螺旋夹,双凹夹,温度计,橡胶管,制氧机等。 2、材料:台氏液,1:5000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,1%CaCl2溶液,1mol/LHCl溶液, 1mol/LNaOH溶液,阿托品等。 四. 实验步骤 1、开启恒温平滑肌槽电源,使其恒温工作点定在37摄氏度。 2、猝死兔子,剪取2-3cm长的十二指肠,用台氏液漂洗,置于低温台氏液中备用。 3、连接各种仪器,将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接,让制氧机正常为台 氏液供氧,进入计算机生物信号采集处理系统。 4、先后观察、记录37摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线,待中央标本槽内的台氏液 温度稳定在37摄氏度后,停氧1min ,记录肠段节律性收缩曲线,恢复供氧,待台氏液中的小肠稳定后,分别换成22℃,45℃的台氏液,记录肠段节律性收缩曲线。再灌流37℃台氏液待肠段活动恢复后,依次滴加1mol/LNaOH溶液,1mol/LHCl溶液,1%CaCl2溶液1:5000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验在观察到明显变化后,都应用预先准备好的37℃台氏液冲洗3次。 五实验结果及分析 (1)缺氧对离体小肠活动的影响 从图一可以看出,正常情况下,离体家兔肠段收缩频率为17次/min,收缩张力最小值为26.8g,最大值为35g。对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回原来状态,其节律为16次/min, 收缩张力最小值为23.7g,最大值为34.6g。 张力:g

传出神经药物对离体肠肌的作用

1、正常小肠平滑肌运动的节律、波形和幅度 正常:最大值6.82g,最小值0.64g,呼吸率:17.0次/分 2、给予0.01%乙酰胆碱2滴 正常:最大值6.82g,最小值0.64g,呼吸率:17.0次/分 给药后:最大值8.40g,最小值0.76g,呼吸率:16.4次/分 现象: 分析:乙酰胆碱为M胆碱受体激动药,加入2滴乙酰胆碱后,能激动M受体, (1)使钙离子内流增加,激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统,使胃肠平滑肌收缩加强,蠕动加强(2)使钠泵活动变化,使静息电位降低,平滑肌兴奋性升高,从而导致收缩频率加强。 给予0.01%阿托品2~4滴,1min后再加入乙酰胆碱2滴 正常:最大值5.84g,最小值0.76g,呼吸率:17.6次/分 阿托品给药后:最大值3.09g,最小值1.95g,呼吸率:15.6次/分 乙酰胆碱给药后:最大值3.41g,最小值1.87g,呼吸率:14次/分 分析:阿托品为M受体阻断药,竞争性拮抗剂,可阻断M受体,抑制乙酰胆碱的M样作用,能解除平滑肌痉挛,使肠肌收缩幅度降低,再次加入Ach,竞争性阻断阿托品,因此曲线没变化。

⑴给予0.01%肾上腺素2滴 正常:最大值7.52g,最小值0.65g,呼吸率:18.4次/分 给药后:最大值1.21g,最小值0.10g,呼吸率:20.7次/分 现象:肠肌舒张加强 分析:肾上腺素为α、β肾上腺素受体激动药, A.激活β肾上腺素受体,引起肠肌中cAMP合成增多,cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+ 泵活动,使肌浆中Ca2+浓度降低,使肠肌收缩力下降, 自发性收缩频率和幅度减少 ⑵予0.1%普萘洛尔2滴,待出现变化时随即加入0.01%肾上腺素2滴 正常:最大值6.76g,最小值0.94g,呼吸率:18.5次/分 普萘洛尔给药后:最大值4.02g,最小值0.33g,呼吸率:16.3次/分 肾上腺素给药后:最大值2.24g,最小值0.66g,呼吸率:18.7次/分 分析:普萘洛尔为β肾上腺素受体阻断药, 正常:最大值2.89g,最小值0.13g,呼吸率:16.5次/分 酚妥拉明给药后:最大值4.48g,最小值0.26g,呼吸率:16.0次/分 分析:

药物对离体平滑肌的作用

药物对离体平滑肌受体的作用 [适用对象适用对象适用对象适用对象] 中药学、药学、药物制剂专业 实验目的:利用兔十二指肠或上段空肠,观察乙酰胆碱,阿托品及氯化钡对离体兔肠平滑肌的作用。 实验原理:离体兔肠平滑肌在适当的条件下可以保持较长时间的自动节律性收缩。根据受体在肠道平滑肌中分布的特点,可观察药物的作用,并可借助工具药分析其作用原理。 仪器设备:(动物与药品试剂) 1、动物:家兔2.5kg左右 2、药品与试剂:0.001%氯化乙酰胆碱溶液,0.1%硝酸毛果芸香碱溶液0.1%硫酸阿品托溶液0.05%溴化新斯的明溶液1%氯化钡溶液台氏液 3、仪器设备:BL-420E生物机能实验系统,张力换能器,HW-300型恒温平滑肌槽,多用电源插座,铁支架,双凹夹,L 型钩,培养皿,缝线,1ML注射器,10ML注射器,手术器械一套。 四、相关知识 1、由于肠肌上分布有M受体,当向营养液加入Ach(N 、M)受体激动药、阿品托(M受体阻断药)、毛果芸香碱(M受体激动药)、新斯的明(抗胆碱酯酶药)等药物时,可与相应的受体结合,激动或阻断M受体,引起肠肌收缩或松弛。

2、氯化钡是一种非受体作用的有毒化合物,对肠肌有直接的兴奋收缩作用,常用于药理实验中、 五、实验步骤 (一)仪器连接1、打开HW-300型恒温平滑肌,恒温37-38摄氏度。2、启动电脑,确认USB接口已经连通,打开BL-420E 生物机能实验系统软件,在“实验项目”下拉菜单中选择“消化道平滑肌活动”,或在“输入信号”下拉菜单中选择“1通道”的“张力”,在“1通道”连接张力换能器。 (二)制备标本取家兔1只,击头致死,剖腹,取出空肠或十二指肠,放入台氏液的器皿中,用吸管吸取台氏液将肠内空物冲净,剥离肠系膜。将肠管煎成2cm的肠段备用。肠管两端对角穿线,将其安放在有台氏液的平滑肌槽中,上端连接拉力换能器,下端系于L型钩上,通入空气供氧。 (三)药物对离体兔肠平滑肌的作用1、加药:待肠肌稳定10min 后,描记正常收缩曲线,然后依次加药并记录收缩曲线的变化,顺序如下:(1)0.001%Ach溶液0.2ml,当肠肌活动曲线降至基线时,台氏液连续冲洗3次; (2)重复(1),作用达到最高点时再加0.1%阿品托0.2ml,记录曲线变化后,台氏液连续冲洗3次; (3)1%氯化钡1.0ml作用达到最高峰时立即加入0.1%阿品托1.0ml,记录曲线变化;

实验不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响

实验5不同因素对家兔离体肠肌运动的影响 浙江中医药大学第二临床医学院 【摘要】目的:观察盐酸(HCl)、氢氧化钠(NaOH )、温度、肾上腺素(E)、乙酰胆碱(Ach)、缺空气对家兔离体肠肌运动的影响。 方法:分别给予离体家兔肠肌标本HCl、NaOH、低温、肾上腺素、乙酰胆碱、缺氧刺激,完成每次刺激并出现明显现象后用37℃台氏液冲洗肠肌标本,观察其收缩活动的特点并记录。 结果:滴加Ach、NaOH 后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加E、HCl、阿托品后肠肌运动张力与频率迅速降低;停止通空气后,肠肌运动张力先迅速增强后逐渐降低和频率逐渐降低。 结论:HCl和肾上腺素可抑制离体肠肌的运动,NaOH、乙酰胆碱和阿托品可增强离体肠肌的运动。 1.材料和方法 1.1实验材料:家兔。 1.2实验仪器:恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微 机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。 1.3实验药品:台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。1.4离体家兔肠肌制备: 取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠,沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中,用手术刀刮去肠管外的血管和系膜,将小肠段切割成小段,每小段肠约2cm 长,并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线。 1.5标本固定 1.5.1取出固定架,将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在固定架的 小钩,将固定架放回内槽,使小钩尽量靠近槽底(尽量减少台式液 的使用),重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重新连接至固 定架,并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。 1.5.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢 升降拉线,保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时, 肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。 1.5.3换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用20ml注 射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽 中,其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流 量调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段的运动。 1.6实验观察 1.6.1记录一段37℃的台氏液环境中小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩 活动的特点。 1.6.2待肠活动恢复后,向台氏液中加入0.01%乙酰胆碱(Ach)1滴,观察 小肠收缩活动的改变, 待反应稳定后冲洗1遍,再加入等量的37℃的 台氏液。

实验15药物对离体豚鼠回肠的作用

药物对离体豚鼠回肠的作用 【摘要】目的:了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。方法:取离体豚鼠回肠1cm,利用RM6240系统和张力换能器,分别检测乙酰胆碱,组胺,阿托品,扑尔敏和BaCl2作用前后,回肠平滑肌张力的变化。结果:乙酰胆碱和组胺能使离体豚鼠回肠平滑肌的收缩幅度增高,用阿托品处理标本后,乙酰胆碱的收缩平滑肌效应被阻断(P<0.01);用扑尔敏处理标本后,组胺的收缩平滑肌效应被阻断(P<0.01);BaCl2能使离体豚鼠回肠平滑肌大幅度收缩,再用阿托品处理标本,BaCl2的收缩平滑肌效应被部分阻断。结论:乙酰胆碱为M胆碱受体激动药,组胺为H1受体激动药,BaCl2为肌肉兴奋剂,三者分别作用与回肠平滑肌时,使平滑肌收缩。阿托品为M胆碱受体阻断药,扑尔敏为H1受体阻断药,两者可以分别阻断乙酰胆碱和组胺对平滑肌的激动作用。 【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏M胆碱受体H1受体 胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。BaCl2为肌肉兴奋剂,能够使平滑肌强烈收缩[1]。 1.材料和方法 1.1 实验动物豚鼠1只(雄性,健康) 1.2 仪器离体装置,麦氏浴槽(25ml),HSS-1(B)超级恒温器(成都仪器厂),张力换能器,RM6240BD型生物信号采集处理系统(成都仪器厂),移液器20~200μl,100~1000μl各一把(Finnipipette),手术器械一套。 1.3 药品和试剂台氏溶液,10-2g/L氯化乙酰胆碱溶液,1g/L硫酸阿托品溶液,10-2g/L 磷酸组织胺溶液,10-3g/L扑尔敏溶液,10g/L BaCl2溶液。 1.4 实验方法 1.4.1 实验装置准备向麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦

【报告】实验4:某些因素对离体家兔肠肌的影响

实验4:某些因素对离体家兔肠肌的影响 (浙江中医药大学第一临床医学院) 关键词:离体家兔肠肌因素 一、实验目的 学习麦氏浴槽的使用方法及离体肠肌的实验方法。观察酸、碱、低温、肾上腺素、乙酰胆碱对离体肠肌的影响,并分析作用机制。 二、实验材料 (1)动物:家兔 (2)器械:动物手术器材(手术刀、手术剪、止血钳、弹簧夹、丝线、皿、注射器、手术缝针)供氧器、麦氏浴槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集处理系统。 (3)药品和试剂:HCl、NaOH、(25度)台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱溶液 三、实验方法 (1)实验装置准备和仪器参数设置:麦氏浴槽中加固定量(10~15ml)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37.5度。通气管接空气管道。用螺丝夹调节气体 管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号采 集处理系统:打开RM6240系统,“实验”-“药理学专用试验”-“离体家兔肠肌运动” (2)离体家兔肠肌标本制备:取家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培 养皿中,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将回 肠剪成数段(约1~1.5cm),换以新鲜的台氏液备用。取小段肠管置于盛有台氏液的培养 皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线并打结。 (3)实验观察: 1)加入乙酰胆碱溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。 2)加入肾上腺素溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。 3)滴加NaOH后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。 4)滴加HCl后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。 5)用25度台氏液灌流肠肌,观察其收缩幅度。 四、实验结果: 某些因素对家兔离体肠肌的影响 实验结论

离体肠段运动的描记(精)

离体肠段运动的描记 [实训项目任务] 观察在离体情况下肠的运动情况以及某些因素对肠运动的影响。 [实训原理] 肠平滑肌具有自动性节律性收缩的特性,并且受肠壁内神经从与外来植物性神经的支配。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。离体肠段运动的装置,还可以用来研究各种化学因素对平滑肌的影响。 [实训对象] 兔 [实训材料] 离体器官测定仪、张力换能器,计算机生物信号采集系统或生理记录仪,丝线、0.1%肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、台氏生理盐溶液、手术器械。 [实训方法及步骤] 1.实训准备取一只兔子,以手抓住后腿使头下垂,用木棒猛击后脑部致死。然后沿着腹白线迅速剖开腹腔,取出全部小肠放入冷的台氏液中,以降低代谢和氧耗量,充分洗去肠内容物,切取3-4cm的肠段(十二指肠或空肠),用缝针在肠壁之两端各穿上一条丝线,一端固定于平滑肌肌槽的通气管上,另一端通过张力换能器与计算机生物信号采集系统输入端连接。 平滑肌肌槽内台氏液的温度为38-39℃,并不断地通气至台氏溶液中。离体肠段的运动有时不立即开始,可能要经过10-30min才开始运动。 2.仪器连接将离体器官测定仪上的张力换能器与计算机生物信号采集系统或生理记录仪的输入端相联。 3.实训项目 ①记录离体肠段自动性收缩5min。

②温度对肠运动的影响:逐渐降低台氏液的温度至30℃,观察肠段运动有否改变? ③温度恢复正常水平后,加入0.1%肾上腺素数滴于平滑肌肌槽内,观察对肠段运动的影响。然后用台氏溶液(38-39℃)冲洗。 ④待肠段运动恢复至原来情况时,加0.01%乙酰胆碱数滴,这时肠平滑肌有何反应? [注意事项] 1.实验兔先禁食24h,在实验前一小时喂给饲料,可提高小肠平滑肌兴奋性。 2.敲击实验兔延髓致死后,应立即剖开腹腔取出十二指肠肠段,放入冷的台氏液中,以降低代谢和氧耗量,然后取两段小肠放入离体器官测定仪中,维持39℃,适度充氧,可保持小肠较好的兴奋性。 3.应使用新鲜的台氏液进行小肠体外实验。 [思考题] 1.离体小肠的运动有何特点? 2.影响小肠运动的因素有哪些?

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