浙江农林大学 生物化学 问答

从生化原理解释：为什么人剧烈运动后感到肌肉酸痛而休息后可以消除酸痛？肌肉酸痛是由于乳酸发酵，恢复正常是由于糖异生。

测定酶活性时为什么要测定酶促反应的初速度？试讨论影响酶促反应的几个因子对酶促反应的影响。

影响酶促反应速度的因素包括底物浓度、酶浓度、环境PH值、环境温度、激活剂和抑制剂。

由8种氨基酸(Lys, Gly, Phe, Ala, Ser, Met, Tyr, Asp)组成的多肽，可与DNFB反应生成DNP-Ser。经糜蛋白酶处理，可生成三个肽段A(Lys, Phe, Gly)、B(Tyr, Asp, Ser) 和C(Ala, Met)；经胰蛋白酶处理生成两个肽段D(Met, Phe, Ala) 和E(Tyr, Lys, Gly, Ser, Asp)。与羧肽酶反应，得知C端是Ala，试确定此多肽的氨基酸顺序。Ser-Asp-Tyr-Gly-Lys-Phe-Met-Ala

写出考马氏亮兰法测定蛋白质含量的操作步骤。

包括蛋白质的提取，标准曲线制作与蛋白质含量的测定。

写出蛋白质聚丙烯酰胺电泳的主要操作步骤，并加以简单说明。

首先由RNA聚合酶的σ因子识别基因上游的启动子部位-35序列，然后结合-10序列，接着DNA在转录起点附近解链，开始合成RNA。在合成RNA过程中，DNA只有约70个核苷酸长度的范围解链，随着RNA聚合酶移动，前端解链，后端复合。到达转录终止位点时，由于依赖ρ因子或不依赖ρ因子的终止子结构促进转录过程终止。

竞争性抑制作用与非竞争抑制作用？

竞争性抑制作用是指抑制剂与底物结构相似，因而与底物竞争结合酶的活性中心，这种抑制作用属于可逆性的，当加大底物浓度时，这种抑制作用是可以解除的。竞争性抑制作用对米氏酶的影响是：Km增大，Vmax不变。

非竞争性抑制作用是指抑制剂与底物的化学结构并不相似，但可与酶的活性中心以外的部位结合，从而改变酶的催化活性。其影响是：Km不变，Vmax减小。什么是三羧酸循环？有什么重要意义？

三羧酸循环是指在线粒体的基质中发生的一系列循环反应。这种循环以乙酰CoA 和草酰乙酸合成柠檬酸开始，以重新生成草酰乙酸结束。在三羧酸循环过程中，生成电子传递体NADH和FADH，合成GTP，并放出二氧化碳。其意义是：为糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢的共同氧化分解途径；是生物体中主要生成能量的途径；可形成许多重要的中间产物。

写出糖酵解过程中的三个不可逆反应及催化该反应进行的酶。

（1）葡萄糖→6-磷酸-葡萄糖（己糖激酶）（2）6-磷酸-果糖→1,6-二磷酸-果糖（磷酸果糖激酶）（3）磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸（丙酮酸激酶）

试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。

（1）mRNA是遗传信息的传递者，是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。（2）tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。（3）rRNA 与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所。

复制有哪些特点？

（1）半保留复制：新和成的DNA分子一条链来自于亲代的DNA，另一条是新合成的。（2）半不连续复制：3ˊ→5ˊ方向母链为模板，新链5’→3’方向连续合成许多不连续的片段。（3）以dNTP为原料，以DNA双链为模板，遵循碱基配对原则，新链合成方向为5ˊ-3ˊ。

什么是呼吸链？简述NADH和琥珀酸（FADH2）呼吸链各组分成分是如何排列的。

答：呼吸链是指代谢脱下的成对氢原子通过多种酶和辅酶所催化的连锁反应逐步传递，最终与氧结合生成水；酶和辅酶按一定顺序排列在线粒体内膜，此过程与细胞呼吸有关，此传递链称为呼吸链。NADH→FMN→CoQ→Cytb→Cytc1→Cytc →Cytaa3→O2(FAD→CoQ)

什么是蛋白质的变性，引起蛋白质变性的因素有哪些？

答：蛋白质受理化因素的作用时，次级键受到破坏，导致天然构象的破坏，使蛋白质的生物活性丧失的现象称为蛋白质变性。变性的因素：物理因素有：热、紫外线、X射线、超声波、高压、搅拌、剧烈振荡、研磨等；化学因素有：强酸、强碱、有机溶剂、尿素、重金属盐、生物碱试剂、去污剂等。

简述DNA双螺旋结构的特点？

答：（1）主链：由脱氧核糖和磷酸基通过酯键交替连接而成。主链有两条，他们似麻花状绕一共同轴心以右手方向盘旋，相互平行而走向相反形成双螺旋构型。（2）碱基对：碱基位于螺旋的内侧，它们以垂直于螺旋轴的取向通过糖苷键与主链糖基相连。同一平面的碱基在两条主链间形成碱基对。配对碱基总是A与T、G与C。（3）大沟和小沟：大沟和小沟分别指双螺旋表面凹下去的较大沟槽和较小沟槽。小沟位于双螺旋的互补链之间，而大沟位于相邻的双股之间。（4）结构参数：螺旋直径2nm；螺旋周期包含10对碱基；螺距3.4nm；相邻碱基4对平面的间距0.34nm。

什么叫突变，简述突变的类型。

答：DNA分子中的核苷酸序列发生突然而稳定的改变，从而导致DNA的复制以及后来的转录和翻译产物随之发生变化，表现出异常的遗传特性，称为DNA的突变。突变的类型有：（1）碱基对的置换：转换：两种嘌呤或两种嘧啶之间互换；颠换：嘌呤与嘧啶或嘧啶与嘌呤之间互换。（2）移码突变：由插入或缺失单个或2个碱基而改变整个碱基序列、阅读框架的突变。

为什么说三羧酸循环是联系糖、脂、蛋白质三大代谢的枢纽？

答：（1）TCA循环是乙酰CoA最终氧化生成CO2和水的途径；（2）糖代谢产生的碳骨架最终进入TCA循环氧化；（3）脂肪分解产生的甘油可通过糖有氧氧化进入TCA循环氧化，脂肪酸经β-氧化产生的乙酰CoA可进入TCA循环氧化；（4）蛋白质分解产生的氨基酸经脱氨后碳骨架可进入TCA循环，同时，TCA 循环的中间产物可作为氨基酸的碳骨架接受NH3后合成非必需氨基酸。所以三羧酸循环是联系糖、脂、蛋白质三大代谢的枢纽。

DNA和RNA各有几种合成方式，各由什么酶催化新链的合成？

答：DNA合成包括：（一）DNA→DNA，DNA指导下的DNA合成：（1）DNA 半不连续复制：DNA聚合酶III、DNA聚合酶I、DNA连接酶；（2）DNA修复合成：DNA聚合酶、DNA连接酶。（二）RNA→DNA，RNA指导下反向转录合成DNA：逆转录酶。

RNA合成包括：（一）DNA→RNA，以DNA为模板转录合成RNA:RNA聚合酶；（二）RNA→RNA，以RNA为模板合成RNA：复制酶；（三）RNA→DNA→RNA：RNA转录酶。

酶作用专一性的机制

（1）锁钥学说：认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样。

（2）诱导契合学说：该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状。

三种DNA聚合酶（原核）

⑴DNA聚合酶Ⅰ:它具有5→' 3 '聚合酶功能；3’→ 5’外切酶活性及5’→3’外切酶活性。

⑵DNA聚合酶Ⅱ：具有3’→ 5’外切酶活性。可能在修复紫外光引起的DNA 损伤中起作用。

⑶DNA聚合酶Ⅲ：是DNA复制的主要聚合酶。具有5’→3’DNA聚合酶活性。

简述体内有氧代谢的主要途径，并计算1分子葡萄糖彻底分解所产生的能量

糖的有氧分解的过程分为三个阶段：

１、由葡萄糖或糖原的葡萄糖单位分解生成丙酮酸，反应在细胞液中进行；２、由丙酮酸氧化脱羧生成乙酰辅酶（acetyl-coenzymeA乙酰CoA），反应在线粒体中进行；

３、由乙酰CoA经三羧酸循环（tricarboxylic acid cycle，TCAC）氧化分解生成CO2和H2O，反应在线粒体中进行。

一分子葡萄糖彻底氧化分解的产能情况

葡萄糖到丙酮酸2ATP+2NADH=7A TP 或2A TP+2FADH2=5ATP

2丙酮酸到2乙酰CoA 2NADH=5ATP

2乙酰CoA 经过TCA反应到4CO2 10×2=20A TP

因此1分子葡萄糖被完全分解共产生32或30个ATP

Km的重要意义

答①Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度，单位是mol/L 。

②Km是酶的特征性常数之一。

③Km可近似表示酶对底物的亲和力。

④同一酶对于不同底物有不同的Km值。

Km值和Vmax的意义：Km值的物理意义是酶促反应为最大速率一半时的底物浓度。当Km值接近ES解离常数时，Km值可表示酶对底物亲和力的大小，值愈小，表示亲和力越大。Km值是酶的特征性常数，只与酶的结构、底物和反应环境有关，与酶的浓度无关。

Vmax是指酶被底物完全饱和时的反应速率。

糖类的生理功能：1.作为体内主要的供能物质。

2.糖是人体组织结构的重要成分。

3.核糖与脱氧核糖是体内合成核苷酸的原料。

4.糖类可提供体内合成脂类和某些氨基酸的碳骨架。

什么是酶原、酶原激活？有何生理意义？

无活性的酶前体称酶原。

②酶原在一定条件下，可转化成有活性的酶，此过程称酶原的激活。

③保护机体，适应需要。

简述生物氧化的特点。

1、环境温和② CO2的生成是有机酸脱羧

③H2O的产生是代谢物脱氢经呼吸链传递给氧,化合成H2O。

④能量逐步释放合成ATP

⑤生物氧化的速度可调控。

试述乙酰辅酶A的来源与去路

来源：去路：

(1)脂肪酸

(1) 丙酮酸（2）胆固醇

(2) 氨基酸（3）三羧酸循环

(3) 脂肪酸（4）酮体

简述葡萄糖酵解（无氧呼吸）与葡萄糖有氧氧化的异同点。

⑴温和条件下极高的催化效率⑵高度特异性⑶对环境因素的敏感性⑷酶活性的可调节性

磷酸戊糖途径生理意义

答：①5-磷酸核糖是体内合成核酸的必须原料

②NADPH+H+作为供氢体起重要作用

③参与羟化反应

④是糖代谢与核苷酸及核糖代谢交汇

糖异生与无氧酵解酶的不同？

答：无氧酵解：己糖激酶或葡糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶糖异生：葡萄糖-6-磷酸酶、果糖二磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶

生物化学的发展：

1．叙述生物化学阶段：是生物化学发展的萌芽阶段，其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。

2．动态生物化学阶段：是生物化学蓬勃发展的时期。就在这一时期，人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。

3．分子生物学阶段：这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。

糖的有氧氧化：

葡萄糖在有氧条件下彻底氧化分解生成C2O和H2O，并释放出大量能量的过程称为糖的有氧氧化。绝大多数组织细胞通过糖的有氧氧化途径获得能量。此代谢过程在细胞胞液和线粒体内进行，一分子葡萄糖彻底氧化分解可产生36/38分子ATP。糖的有氧氧化代谢途径可分为三个阶段：

1．葡萄糖经酵解途径生成丙酮酸：

2．丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA：

3．经三羧酸循环彻底氧化分解：

糖有氧氧化的生理意义：

1．是糖在体内分解供能的主要途径：⑴生成的A TP数目远远多于糖的无氧酵解生成的ATP数目；⑵机体内大多数组织细胞均通过此途径氧化供能。

2．是糖、脂、蛋白质氧化供能的共同途径：糖、脂、蛋白质的分解产物主要经此途径彻底氧化分解供能。

3．是糖、脂、蛋白质相互转变的枢纽：有氧氧化途径中的中间代谢物可以由糖、脂、蛋白质分解产生，某些中间代谢物也可以由此途径逆行而相互转变。

在糖、脂和氨基酸的分子结构中都有所谓α－、β－结构，它们各指的是什么？答：糖中的α－、β－结构是指单糖在引入环状结构后产生的新构型。脂类中是指脂肪酸结构中碳原子与羧基的相对位置，紧邻羧基的碳原子称为α－碳原子，再过去为β－碳原子。氨基酸中与脂肪酸类似。

金属离子的作用：

1. 稳定构象：稳定酶蛋白催化活性所必需的分子构象；

2. 构成酶的活性中心：作为酶的活性中心的组成成分，参与构成酶的活性中心；

3. 连接作用：作为桥梁，将底物分子与酶蛋白螯合起来。

核酸分子对紫外光的吸收特性；核酸变性的特征；

核酸的紫外吸收特性：核酸和核苷酸类物质在A260 处有最大吸收值，可利用此性质对核酸或核苷酸进行定量。

DNA 的变性：在水溶液中，双股DNA 分子由于某些物理因素或化学因素的影响，双螺旋结构中的碱基堆积力和碱基对之间的氢键遭到破坏，双螺旋结构解聚，形成两条随机卷曲的单核苷酸链的过程称为DNA 的变性。

影响DNA 复性的因素：DNA 分子的大小，离子强度，DNA 的浓度

DNA 双螺旋结构及维持其稳定的力；分子杂交；

DNA 双螺旋结构的特征：

（1）两条反向平行的DNA 链绕同一个中心轴旋转，相互缠绕，形成右手螺旋（2）DNA 链的磷酸核糖骨架位于螺旋的外侧。碱基包含在螺旋内部，碱基平面与中心轴垂直，糖环平面与中心轴平行，其中A 与T，G 与 C 分别以氢键相配对

（3）右手螺旋的平均直径是 2.0nm，两个相邻的碱基对之间的纵向距离为0.34nm，

每个螺旋的螺距为3.4nm，因此每个螺旋含有10 对脱氧核苷酸，每个脱氧核苷酸旋转36度角

（4）在双螺旋的表面，存在两个大小不同的沟槽，称为大沟和小沟。

维持DNA 双螺旋结构的作用力：

两条DNA 链间互补碱基对之间的氢键

碱基堆积力：是主要的作用力盐键

分子杂交：具有一定同源性的两条来源不同的核酸单链(DNA或RNA)在适宜的条件下通过碱基对之间非共价键（主要是氢键）的生成，形成稳定双链杂交体的过程

酮体的概念；脂肪酸合成与分解的主要区别；

肪酸β氧化产生的乙酰CoA，在肌肉细胞中可进入TCA 循环进行彻底氧化分解；但在肝脏及肾脏细胞中还有另外一条去路，即形成乙酰乙酸、D-β-羟丁酸和丙酮，这三者统称为酮体。

脂肪酸合成的碳源主要来自糖酵解产生的乙酰CoA。脂肪酸合成步骤与氧化降解步骤完全不同。脂肪酸的生物合成是在细胞液中进行，需要CO2 和柠檬酸参加；而氧化降解是在线粒体中进行的。

DNA、tRNA、mRNA、rRNA 在蛋白质生物合成中的作用；

mRNA 是以DNA 的一条链为模板，以碱基互补配对原则，转录而形成的一条单链，主要功能是实现遗传信息在蛋白质上的表达，是遗传信息传递过程中的桥梁

tRNA 的功能是携带符合要求的氨基酸，以连接成肽链，再经过加工形成蛋白质rRNA 是组成核糖体的主要成分。核糖体是合成蛋白质的工厂。rRNA 是单链，它包含不等量的A 与U、G 与C，但是有广泛的双链区域。但16 S 的rRNA3’端有一段核苷酸序列与mRNA 的前导序列是互补的，这可能有助于mRNA 与核糖体的结合。

真核细胞中各条代谢途径在细胞的什么部位进行；

细胞质：糖酵解、磷酸戊糖途径、糖异生(生成草酰乙酸之后的反应)

线粒体内膜上(也可算作线粒体内)：氧化磷酸化

线粒体基质：丙酮酸氧化、TCA、糖异生(生成草酰乙酸之前的反应)、脂肪酸β-氧化、氨基酸代谢

乙醛酸循环体(一种植物细胞器)：乙醛酸循环

浙江大学生物化学丙实验报告3,4

,. 实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶蛋白含量的测定、蔗糖酶活力测定及其分离纯化效果的评价 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛、袁平、朱耀仁、蔡玉林 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、蔗糖酶蛋白含量的测定——Folin-酚法 ①学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法； ②掌握分光光度法制作标准曲线，准确测定未知样品的蛋白质含量； ③掌握分光光度计的使用方法。 2、蔗糖酶活力测定——3.5－二硝基水杨酸法 ①掌握酶活力测定的基本原理和方法； ②学习酶的比活力的计算。 二、实验内容和原理 1、Folin-酚测定法 Folin-酚试剂是由甲、乙两种试剂组成的。甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钾钠组成，在碱性条件下蛋白质中的肽键与酒石酸钾钠铜盐起作用，生成紫红色络合物；乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成，在碱性条件下，铜-蛋白质络合物以及蛋白质中的酪氨酸残基（酚基）和色氨酸还原磷钼酸-磷钨酸试剂（乙试剂）产生深蓝色（钼蓝和钨蓝的混合物），其色泽深浅与蛋白质含量成正比。可用500nm 波长比色测定，适于测定蛋白质含量0.05～0.5g/L 。 优点： 简单、迅速、灵敏度高；反应较稳定。 缺点： 该反应受多种因素的干扰。 2、蔗糖酶活力测定 蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），是一种水解酶。它能催化非还原性双糖（蔗糖）的1,2－糖苷键裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖（还原糖）。因此，每水解1mol 蔗糖，就能生成2mol 还原糖。还原糖的测定有多种方法，例如：纳尔逊－索模吉试剂比色法，斐林试剂法等。 专业： 农业资源与环境 姓名： 李佳怡 学号： 3130100246 日期： 2015.5. 26 地点： 生物实验中心310 装 订 线

浙江大学生物化学(乙)第1次

您的本次作业分数为：100分单选题2.生成酮体和胆固醇都需要的酶是（）。 A HMG-CoA 合成酶 B HMG-CoA还原酶 C HMG-CoA裂解酶 D 乙酰乙酰硫激酶 E 转硫酶正确答案:A 单选题 3.乳糖操纵子的调节水平在（）。 A 复制 B 转录 C 转录后 D 翻译 E 翻译后正确答案:B 单选题 4.变构效应物对酶结合的部位是（）。 A 活性中心与底物结合的部位 B 活性中心的催化基团 C 酶的-SH基 D 活性中心以外的特殊部位 E 活性中心以外的任何部位正确答案:D 单选题 5.1分子葡萄糖经糖酵解分解为2分子乳酸时，其底物水平磷酸化次数为（）。 A 1 B 2 C 3 D 4 E 5 正确答案:D 单选题 6.酶的辅基具有下述性质（）。 A 是一种结合蛋白 B 与酶蛋白结合比较疏松 C 由活性中心的若干氨基酸残基组成 D 决定酶的专一性 E 与酶蛋白亲和力较大，一般不能用透析等物理方法彼此分开正确答案:E 单选题 7.体内转运一碳单位的载体是（）。 A 生物素 B 磷酸吡哆醛

C 四氢叶酸 D 二氢叶酸 E CoA 正确答案:C 单选题 8.原核生物转录的终止因子是（）。 A α B ρ C β D σ E Γ 正确答案:B 单选题 10.下列哪一物质含有高能键？（） A 6-磷酸葡萄糖 B 1,6-二磷酸果糖 C 1,3-二磷酸甘油酸 D 烯醇式丙酮酸 E 乳酸正确答案:C 单选题 12.肝脏不能氧化利用酮体是由于缺乏（）。 A HMGCoA合成酶 B HMGCoA裂解酶 C HMGCoA还原酶 D 琥珀酰CoA转硫酶 E 乙酰乙酰CoA硫解酶正确答案:D 单选题 14.下列关于遗传密码的基本特点，哪一点是错误的？（） A 密码无标点 B 一种氨基酸只有一种遗传密码 C 有终止密码和起始密码 D 密码专一性主要由头两个碱基决定 E 病毒、原核细胞或真核细胞都利用同一套遗传密码正确答案:B 单选题 16.三羧酸循环的第一个产物是（）。 A 乙酰CoA B 草酰乙酸 C 柠檬酸 D 苹果酸

(整理)年浙江农林大学硕士学位研究生入学考试试题与答案——339农业知识综合一.

2012年硕士学位研究生入学考试试题 考试科目: 农业知识综合一满分：150分考试时间：180分钟 注意：所有试题答案写在答题纸上，答案写在试卷上无效。 土壤学部分 一、名词解释（每题得分2分，共10分） 1、土壤 2、矿物 3、粒级 4、阳离子交换量 5、土壤养分 二、选择题（单选题、每题得分1分，共10分） 1、下列矿物中无解理的是（）。 A、正长石 B、斜长石 C、石英 D、白云母 2、与花岗岩具有相同矿物成分的岩石是（）。 A、闪长岩 B、安山岩 C、流纹岩 D、辉长岩 3、下列岩石中是变质岩的为（）。 A、大理岩 B、石灰岩 C、白云岩 D、石英斑岩 4、属于2：1型次生矿物的是（）。 A、三水铝石 B、蒙脱石 C、高岭石 D、氧化铁 5、某土壤容重为 1.2g/cm3，问该土壤1公顷（1万平方米）30厘米土层的干重是（）。 A、3600吨 B、1200吨 C、3000吨 D、360吨 6、盐基常接近于饱和的土壤是（）。 A、石灰性土 B、红壤 C、砖红壤 D、黄壤 7、下列离子中交换能力最强的是（）。 A、 Na+ B、NH+4 C、Mg2+ D、H+ 8、土壤氮形态中，（）是最主要形态。 A、有机态氮 B、NO3- C、NH4+ D、NO2-

9、下列肥料中属于生理酸性肥的是（）。 A、尿素 B、硝酸铵 C、硫酸铵 D、碳酸氢铵 10、土壤容重与下列哪种因素无关（）。 A、温度 B、质地 C、有机质含量 D、孔度 三、简答题（共20分；答题要求：对影响因素要简单阐述理由） 1、比较以下两组矿物的异同。（4分） a、正长石与斜长石 b、白云母与黑云母 2、比较砂土和粘土的肥力特点。（4分） 3、什么是土壤有效水？影响有效水最大含量范围的因素有哪些？（4分） 4、土壤空气与大气交换的方式有哪2种？（4分） 5、为什么土壤微生物数量与活性可以作为衡量土壤肥力的指标？（4分） 四、问答题（共10分） 1、详细阐述土壤有机质的肥力作用。 植物生理学部分 一、名词解释（每小题2.5分，共25分） 1、共质体途径 2、伤流 3、诱导酶 4、荧光现象 5、原初反应 6、抗氰呼吸 7、临界暗期 8、糖酵解 9、抗性生理 10、冷害 二、简答题（每小题5分，共25分） 1、水分在植物生命活动中的作用？ 2、植物必需元素必须符合的3个条件？

浙大生化(丙)课堂期中试卷

生物化学（丙）期中试卷 一．判断题 1.1分子的NADH+H+经呼吸链氧化可产生 2.5分子ATP。 2.蛋白质变性的本质是蛋白质分子的高级结构被破坏，一级结构则保持完整。 3.琥珀酸脱氢酶和NADH脱氢酶的辅助因子都是FAD。 4.磺胺药可使乙酰胆碱酯酶的Km上升，Vmax不变。 5.ATP的主要功能是为机体提供能量和提供活性磷酸基团。 6.糖异生是指由丙酮酸、琥珀酸CoA、6-磷酸果糖、苹果酸等物质转变为葡萄糖的过程。 7.蛋白质三级结构的稳定力包括氢键、盐键、疏水相互作用、范德华力、二硫键、配位键 等次级键。 8.同源蛋白质的种属差异性说明一级结构的局部改变并不会影响蛋白质的功能。 9.同工酶是指功能相同，但结构和性质不同的一类酶。 10.限制性内切酶是指在一特殊序列处将DNA的两条链同时切断的一类酶。 11.ATP是磷酸果糖激酶I的底物，因此对该酶的活性起别构激活作用。 12.反馈抑制作用是指反应的产物对催化反应的酶的抑制作用。 13.硫辛酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和辅酶A都可以作为酰基的载体起传递作用。 14.酶催化高效性的机理是通过酸碱催化、温度效应、共价催化等因素降低了反应的活化能。 15.蛋白质的基本化学键是肽键、核酸的基本化学键是3’,5’-磷酸二酯键。 二．单选题 1.根据酶催化反应的性质，延胡索酸酶属于： (1)水解酶类(2)合成酶类(3)裂合酶类(4)转移酶类 2.当[S]=2Km时，V的值是： (1)2Vmax(2)2/3Vmax(3)1/3Vmax(4)1/2Vmax 3.下列酶催化的反应无CO2参与的是： (1)6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (2)苹果酸酶 (3)3-磷酸甘油醛脱氢酶 (4)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 4.1分子的F1，6-2P被彻底氧化分解为CO2和H2O可产生的高能化合物分子数为（通过 α-磷酸甘油穿梭）： (1)32(2)30(3)34(4)28 5.在2,4-二硝基苯存在下一分子FADH2通过呼吸链可产生的ATP分子数是： (1)1(2)0(3)1.5(4)2.5 6.DNA的双螺旋结构中，主要的稳定力是： (1)氢键 (2)疏水相互作用 (3)范德华力 (4)离子键 7.下列代谢途径既不发生在细胞液也不发生在线粒体中的是： (1)EMP途径(2)TCA途径(3)HMP途径(4)乙醛酸循环 8.蛋白质的特征吸收波长是：(1)260nm(2)280nm(3)340nm(4)500nm 9.下列代谢途径中能为机体提供NADPH+H+的代谢途径是： (1)糖酵解途径(2)乙醛酸循环途径(3)磷酸戊糖途径(4)呼吸链 10.在酶的活化和去活化中，磷酸化和去磷酸化常发生在那个氨基酸残基：

浙江大学考研生物化学真题及答案

一是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破坏者 8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是体内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点 26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三名词解释4/24 1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project 四综合题10/40 1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异同 3 请对中心法则加以阐述 4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,请说明其工作原理并简述用该法分离蛋白质的实验操作步骤

浙江大学生物化学丙实验报告1

实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 蔗糖酶的提取 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法； 2、巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。 二、实验内容和原理 1、实验内容： 蔗糖酶的提取、分离纯化 2、实验原理： ①酵母细胞破碎 细胞破碎的常用方法 液体剪切法固体剪切法压力和研磨 物理法、化学渗透法、酶溶 本实验采用研磨的方法。通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取出来。 ②蔗糖酶的初步分离纯化 蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。 本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集样品。 由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯 操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。 三、实验材料与试剂

1、实验材料 市售干酵母粉10g/组(3～4人） 2、实验试剂 石英砂，95%乙醇(-20℃），20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液。 四、实验器材与仪器 电子天平（称量干酵母粉）；研砵（每组一套）；50ml高速离心管（4支/组、4孔50ml离心管架一个/组）；托盘天平（离心管平衡用）；高速冷冻离心机；恒温水浴箱（50℃）；量筒（50ml）、微量移液枪（1000ul)及枪头或移液管（1ml)、玻棒、滴管等;1.5ml离心管（留样品Ⅰ、Ⅱ用）及离心管架；制冰机；－20℃冰箱。 五、操作方法和实验步骤 1、酵母细胞破粹（干磨法） ①称量：称取市售干酵母粉10g+约3-5 g石英砂放入研钵 ②研磨(干磨)：至尽可能成细粉末状（约15min） ③加液+研磨：量取总体积40 ml的20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液，分2次加研磨10min， 使呈糊状液体； ④离心：将糊状液体转移到2支50ml离心管中，两支离心管平衡后(托盘天平上)，离心10min （条件：4℃、12000r/min） ⑤收集+测量：收集上清液并量出体积V1（样品I），另留1ml上清液（样品I ）放置－20℃冰箱保存用于蔗糖酶蛋白含量测定、蔗糖酶活力测定和SDS-PAGE分析 2、热处理 ①水浴热处理：将上步抽提液（样品I），迅速放入50℃恒温水浴，保温30min， 并每隔5min用玻璃棒温和搅拌提取液。 ②冰浴冷却：保温后迅速用冰浴冷却5min ③离心：将热处理后的样品I转移至两支50ml离心管中，平衡后，离心10min。 （条件：4℃，12000r/min） ④收集+测量：收集上清液并量出体积V2（样品Ⅱ），另留1ml上清液（样品Ⅱ）放置－20℃冰箱保存（用于蔗糖酶蛋白含量测定、测定蔗糖酶活力和SDS-PAGE分析。 3、有机溶剂（乙醇）沉淀 ①冰浴：将热处理后的上清液加入相同体积的－20℃的95%乙醇，冰浴中温和搅动混匀，

最新浙大生物化学试题

浙江大学2001年攻读硕士学位研究生入学考试题 考试科目:生物化学,编号555 注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效 一是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP 生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸是α螺旋破坏者 8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是体内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点 26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸 三名词解释4/24 1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid ) 4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project 四综合题10/40 1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异

浙江大学生物化学丙实验报告1

专业：农业资源与环境 姓名：李佳怡 ____________ 学号：_J6 _______________ 日期： __________________ 地点：生物实验中心310课程名称：生物化学实验（丙） 实验名称：蔗糖酶的提取 一、实验目的和要求（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 七、实验结果与分析（必填） .指导老师：方祥年 成绩:_ _同组学生姓名：金宇尊、鲍其琛 二、实验内容和原理（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 六、实验数据记录和处理 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、 学习掌握蔗糖酶的提取、分离纯化的基本原理和方法; 2、 巩固理论知识，学会学以致用并发现新问题。 二、实验内容和原理 订 1、实验内容: 线 蔗糖酶的提取、分离纯化 2、实验原理: ① 酵母细胞破碎 液体剪切法―超声波法.机械搅拌法.高压匀浆法 固体剪切法一压力和研磨 非机械法——> 物理法.化学渗透法.酶溶 本实验采用研磨的方法。通过固体剪切法（研磨）将酵母细胞破碎，把蔗糖酶从酵母细胞中提取岀 来。 ② 蔗糖酶的初步分离纯化 蛋白酶常用的初步分离纯化方法有：盐析、选择性变性、有机溶剂沉淀等。 本实验采用选择性变性（加热）、有机溶剂（乙醇）沉淀等方法对蔗糖酶进行初步的提纯以及收集 样品。 由于一般酶蛋白在常温下分离纯化过程中易变性失活，为了能获得尽可能高的产率和纯度，在提纯 操作中要始终保持酶的活性，如在低温下操作等，这样才能得到较好地分离提纯效果。 实验报告 细 胞 破碎 的 常 用 方 法

三、实验材料与试剂 1、实验材料 市售干酵母粉10g/组（3?4人） 2、实验试剂 石英砂，95%乙醇（-20*0,20mmol/L Tris-HCl 缓冲液。 四、实验器材与仪器 电子天平（称量干酵母粉）：研碎（每组一套）：50ml高速离心管（4支/组、4孔50ml离心管架一个/组）；托盘天平（离心管平衡用）：高速冷冻离心机：恒温水浴箱（50°C）；量筒（50ml）、微量移液枪（lOOOu 1）及枪头或移液管（1ml）、玻棒、滴管等;离心管（留样品I、II用）及离心管架：制冰机：一20°C冰箱。 五、操作方法和实验步骤 1、酵母细胞破粹（干磨法） ①称量：称取市售干酵母粉10計约3-5 g石英砂放入研钵 ②研磨（干磨）：至尽可能成细粉末状（约15min） ③加液+研磨：呈:取总体积40 ml的20mmol几Tris-HCl缓冲液，分2次加研磨lOmin, 使呈糊状液体； ④离心：将糊状液体转移到2支50ml离心管中，两支离心管平衡后（托盘天平上），离心lOmin （条件:4°C、12000r/min） ⑤收集+测量：收集上淸液并量出体积VI （样品I）,另留1ml上淸液（样品I ）放置一20°C冰箱保存 用于蔗糖酶蛋白含量测眾、蔗糖酶活力测定和SDS-PAGE分析 2、热处理 ①水浴热处理：将上步抽提液（样品I）,迅速放入50°C恒温水浴，保温30min, 并每隔5min用玻璃棒温和搅拌提取液。 ②冰浴冷却：保温后迅速用冰浴冷却5min ③离心：将热处理后的样品I转移至两支50ml离心管中，平衡后，离心10min a （条件：4°C, 12000r/min） ④收集+测量：收集上淸液并量出体积V2 （样品II）,另留1ml上淸液（样品II ）放宜一20°C冰箱保存（用于蔗糖酶蛋白含量测左、测左蔗糖酶活力和SDS-PAGE分析。 3、有机溶剂（乙醇）沉淀 ①冰浴：将热处理后的上淸液加入相同体枳的一20°C的95%乙醇，冰浴中温和搅动混匀，

浙江大学考博生物化学03-13年试卷

2003年秋 一、名词 变性与复性构型和构象Km 氧化磷酸化脂肪酸ß-氧化核糖体中心法则辅酶与辅基人类基因组计划和后基因组计划分子伴侣 二、论述 1 生物大分子中结构与功能的关系（10） 2 糖酵解过程（10） 3 选择一种分离方法，叙述其原理和操作过程（15） 4 生物化学的最新前沿进展（15） 2004年春 一、名词 ATP 构型和构象Km 分解与合成代谢核糖体中心法则Sanger 反应变性与复性启动子基因表达 二、论述 1．生物中大分子物质构成的基本结构（10） 2葡萄糖转化二氧化碳和水过程中相应步骤和酶（10） 3凝胶电泳的原理及应用（15） 4．生物化学的最新前沿进展（15） 2004年秋 论述 1.蛋白质模体和结构域（15） 2.生物膜结构特征和生物学功能（15） 3.生物体在同化和进化中能量的转化形式与关系（15） 4. DNA复制和转录的原理（15） 5.真核生物基因的表达和表达的调节（20） 6.比较离子交换、分子排阻、和亲和层析的分离原理（20） 2005年春 论述 1蛋白质模体和结构域（15） 2生物膜结构特征和生物学功能（15） 3生物体在同化和进化中能量的转化形式与关系（15） 4 DNA复制和转录的原理（15） 5真核生物基因的表达和表达的调节（20） 6比较离子交换、分子排阻、和亲和层析的分离原理（20） 2006年 论述 1．生物化学研究的内容与目标 2．生物膜及其功能 3．蛋白膜质体与结构域 4．水对生物体的重要作用 5．DNA复制和转录的原理

6．氨基酸以R基分几类，写出其三字母、单字母的缩写 7．比较亲和层析、离子交换、分子排阻的原理 8．举例说明四种非共价键在蛋白质、核酸分子中的作用 9．构型与构象10. 生物体能量转化及其关系 未知年份 论述题 1.双向电泳的原理及步骤 2.单克隆抗体与多克隆抗体的定义 3.生物化学的定义与研究内容 4.蛋白质中二、三结构域的定义 5. DNA 的复制过程 2007年 一、名词解释 氧化磷酸化、折叠、第二信使、沉默子、反义RNA、胴体、一碳单位、别构酶、冈崎片段、基因文库 二、论述题 1.乙酰COA在脂肪氧化中的作用 2. RNA的分离纯化与鉴定 3.乳糖操纵子 4.真核生物基因表达的调控因子及其作用 5.肝糖原的激素影响及分子原理 6.生物重大研究进展与动物科学对其的指导意义 2008 年 论述 1.生物膜的组成及其功能 2.脂类的功能 3.蛋白质合成过程中和DNA复制过程中的化学防错 4.血红蛋白和BPG的结构和功能 5. ATP和NAD+的结构和功能 6.名词解释：糖酵解、乙醛酸循环、卡尔文循环、TCA循环 7.设计动力学试验，验证反应实质 2010年生物化学真题回忆版： 20种氨基酸的分类，简写 实验题2个关于分子实验和蛋白质实验的 电泳的原理和分类层析 化学渗透学说 蛋白组学和研究进展 c3植物和c4植物的区别 G蛋白介导的信号转导机制 生化题都是大题，回忆出大概内容，题目记不住了。 祝大家考博成功！

2016年浙江农林大学食品化学考研真题

2016年浙江农林大学食品化学考研真题 一、填空题：（每空1分，共25分） 1. 水分吸附等温线的制作方法有和两种。同一种食品采用这二种方法作出的曲线不完全重合的现象，被称为。 2. 食品发生酶促褐变反应必须具备3个条件，即、和。 3. 小麦粉面团形成的主要原因是含有，包括和。 4. 长期高温条件下，油脂的粘度升高，酸价，泡沫量。 5. 根据维生素溶解性质的不同，可将其分为和两大类。其中前者主要有、、VE和VK等，后者包括、。其中，在食品加工和贮藏过程最易损失，可以延缓油脂的氧化酸败。 6. 人体必需的常量元素有、、、、钾、氯和钠7种，是体内含量占体重> %的元素。 7. 发芽、变绿的马铃薯不能食用的原因是含有大量的。 二、判断题：（每题1分，共25分） 1. 人的舌前部对酸味最敏感，人的腮两边对甜味敏感。 2. 鱼油的主要成分是DHA和EPA。 3. 相同水活度时，回吸食品的含水量比解吸食品的含水量小。 4. 果蔬干制过程丢失的水分主要是自由态水。 5. 凡是糖类都有甜味。 6. 和直链淀粉相比，支链淀粉更易老化。 7. 蛋白质在它们的等电点时比在其他pH时，对变性作用更稳定。 8. 溶解度越大，蛋白质的乳化性能也越好，溶解度非常低的蛋白质，乳化性能差。 9. 豆浆是油包水型的乳浊液。 10. 过氧化值可表明油脂酸败程度。

11. 当油脂酸败严重时，可加入大量的抗氧化剂使情况逆转。 12. 氧化型酸败是油脂中的饱和脂肪酸自动氧化而造成的。 13. 植物中矿物质以游离形式存在为主。 14. α型油脂中脂肪酸侧链为无序排列，它的熔点低，密度小，不稳定。 15. 琼脂可以形成热可逆性凝胶。 16. 食品中的铁有Fe2＋和Fe3＋两类，其中Fe2＋易于吸收。 17. 从溶解性上来说，胡萝卜素类不溶于水，叶黄素类溶于水。 18. 脱涩是使可溶性多酚类物质生成不溶性物质即变无涩。 19. VA具有调节钙、磷代谢，预防佝偻病和软骨病等生理功能。 20. 血红素结构中的金属元素是Fe3＋。 21. 花青素在酸性条件下显红色。 22. 霉变的花生中可能含有黄曲霉毒素，可通过加热的方式将其破坏。 23. 光敏氧化的速度比自动氧化约快1500倍。 24. 叶绿素结构中的金属元素是Mg2+。 25. B族维生素在大米的碾磨中损失随着碾磨精度的增加而减少。 三、名词解释：（每题3分，共 18 分） 1. 水分活度 2. 生理碱性食品 3. 淀粉老化 4. 焦糖化反应 5. 油脂过氧化值（POV） 6. 蛋白质变性 四、问答题：（每题 6分，共42 分）

浙江大学生物化学丙实验报告5

实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称：蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 检测分析及蛋白质相对分子质量测定 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习SDS －聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE)的基本原理和操作方法 2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 检测分析 3、学习测定蛋白质相对分子质量(Mr)的方法 二、实验内容和原理 （1）实验内容 1、SDS －PAGE 凝胶制作； 2、蔗糖酶分离纯化产物的SDS －PAGE 电泳分离； 3、洗脱测定并计算相对分子质量。 （2）实验原理 1、电泳 是带电颗粒在电场作用下，作定向运动即向着与其电荷相反的电极移动的现象。 2、电泳法分离、检测蛋白质混合样品 主要是根据各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带净电荷多少等因素所产生的电泳迁移率的差别。 3、区带电泳 是样品物质在一惰性支持物上进行电泳,因电泳后，样品不同组分形成带状区间，故称区带电泳。 4、聚丙烯酰胺凝胶（PAG) 由丙烯酰胺和交联试剂N,N ’-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在有催化剂（如过硫酸铵或核黄素）和增速剂（如N,N,N ’,N ’-四甲基乙二胺，TEMED ）的情况下聚合而成的。

5、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) 是在恒定的、非解离的缓冲系统中来分离蛋白质，这主要是由蛋白质样品所带的电荷和分子质量的差异性进行分离；在电泳过程中仍保持蛋白质的天然构象、亚基之间的相互作用及其生物活性。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳可分为 ⑴连续系统凝胶缓冲液的pH值及凝胶浓度不变。该电泳系统具有电荷效应、分子筛效应； ⑵不连续系统凝胶缓冲离子成分、pH值、凝胶浓度、电位梯度不连续，由浓缩胶和分离胶组成。由于浓缩胶的堆积（浓缩）作用，可使样品（即使是稀释样品）在浓缩胶和分离胶的界面上先浓缩成一窄带，然后在一定浓度（或一定浓度梯度）的凝胶上进行分离。该电泳系统具有浓缩效应、电荷效应、分子筛效应。 7、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 以PAG为支持物的电泳，由于各种蛋白质所带静电荷、分子量大小和形状不同而有不同的迁移率。为消除静电荷对迁移率的影响，在整个电泳体系中加入一定量的阴离子去污剂“十二烷基硫酸钠（简称SDS）”和“强还原剂（巯基乙醇）”后，蛋白质样品就会与SDS结合形成带负电荷复合物，而SDS作为一种变性剂和助溶剂，它能破坏蛋白质分子内和分子间的非共价键，并结合到蛋白质分子上，使分子去折叠，破坏蛋白质分子内的二级和三级结构，使蛋白质变性而改变原有的空间构象。另外，SDS－蛋白质复合物在强还原剂（巯基乙醇）存在下，可打开蛋白质分子内或肽链间的二硫键，并能避免重新氧化，这样分离出的谱带即为蛋白质亚基。蛋白质亚基的电泳的迁移率主要取决于亚基的相对分子质量大小，而电荷的因素可以忽略。 8、蛋白质亚基相对分子质量的测方法 在聚丙烯酰胺凝胶系统中，加入一定量的SDS时，蛋白质－SDS复合物在水溶液中的形状，近似于雪茄烟形的长椭圆棒。不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样，约为1.8nm，而长轴则随蛋白质的分子量成正比变化。这样的蛋白质-SDS复合物在凝胶中的迁移率，不再受蛋白质原有电荷和形状的影响，而只主要取决于它的椭圆棒的长度即蛋白质的相对分子质量的大小，而其他因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。由于蛋白质的相对分子质量不同，所形成复合物的相对分子质量不同，在电泳中反映出不同的迁移率。当蛋白质或亚基的相对分子质量在15,000～200,000之间时，电泳迁移率与相对分子质量的

浙江大学生物化学丙实验报告.

. 实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 质粒DNA 的微量制备及电泳检测 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习并掌握质粒DNA 的提取原理和方法； 2、了解琼脂糖凝胶电泳检测核酸的原理和操作； 3、学习并掌握对电泳检测结果的初步分析。 二、实验内容和原理 1、实验内容 ①质粒DNA 的提取 ②DNA 的琼脂糖凝胶电泳鉴定 2、实验原理 ①质粒： 质粒是一种染色体（核质体）外的寄生性的自主复制子，存在于细菌等细胞中，为双链闭环的DNA 分子，大小在1-200kb 之间，具有自主复制和转录功能, 能表达例如抗性、菌毒素等细胞非必需的遗传信息，但其复制和转录必须要利用依赖宿主细胞（细菌）基因组DNA 编码的一些酶和蛋白质。质粒能够自发的或人为的在细胞间转移，因此是基因工程技术中将外源基因导入受体细胞的重要载体。 ②从细菌细胞中抽提质粒DNA 的步骤： a 细菌培养使质粒大量扩增； b 收集和裂解细胞,并去掉细菌碎片和核质体DNA ； c 进一步除去蛋白、脂类、RNA 等杂质，分离和纯化质粒DNA 。 ③碱裂解法来分离纯化质粒DNA ： 在EDTA 存在下，经过SDS 处理使细胞膜裂解，从而使菌体充分裂解，利用在碱性条件下（NaOH ）， 使核质体DNA 与质粒DNA 的变性；加入乙酸钾，在中性条件下，核质体DNA 与质粒DNA 又存在复性的差异，质粒DNA 很快得以复性，而细菌核质体DNA 分子难以复性，核质体DNA 会缠绕附着在细胞膜碎片上专业： 农业资源与环境 姓名： 李佳怡 学号： 3130100246 日期： 2015.6.9 地点： 生物实验中心310 装 订 线

04级食品化学考试题A卷

西北农林科技大学本科课程考试试卷2006—2007学年第一学期《食品化学》课程A卷专业年级：04食工1－4 命题教师：刘邻渭审题教师：郭静 考生姓名：学号：考试成绩： 一、单项选择题（从下列各题四个备选答案中选出一个正确答案，并将其代号写在答题纸相应位置处。答案错选或未选者，该题不得分。每小题4分，共20分。） 1.纯水在哪种状态的结构最规则？ A. 气态 B. 超临界状态 C. 液态 D. 冰 2.在使用栅栏技术防止微生物引起食品腐败时，下面哪种参数最常用到？ A. 水分活度（a w） B. 水分含量 C. 结合水含量 D. 自由水含量 3.下列哪种双糖不属于还原糖？ A. 麦芽糖 B. 乳糖 C. 海藻糖 D. 纤维二糖 4.下列哪种特征值反映油脂的不饱和程度？ A. 酸价（酸值） B. 碘价（碘值） C. 皂化价（皂化值） D. 过氧化价（过氧化值） 5.下列哪种维持蛋白质高级结构的键在升温时加强？ A. 氢键 B. 疏水相互作用 C. 离子键 D. 偶极键 二、填空题（根据上下文填空，并将所填内容抄写到答题纸相应位置处。答案错误或未填抄者，该题不得分。每小题2分，共20分。） 1．构成果胶物质的最基本的糖单元是，低甲脂化果胶形成凝胶时，常采用盐作为交联剂。 2．淀粉是以直链淀粉为主的淀粉之间相互作用形成束状结晶的变化。脂肪对这种变化具有明显地作用。 3．一种脂肪可以形成多种结晶的现象称为现象。通过技术的运用，巧克力可以形成最需益的结晶形态，从而获得最好的品质。 4．脂肪的氧化分为自动氧化、氧化、酶催氧化和热氧化等。其中氧化不但可快速氧化不饱和脂，也可使饱和脂发生显著氧化。 5．蛋白质的凝胶形成是由蛋白质与水的相互作用和的相互作用共同决定的。明胶凝胶是性凝胶。

浙大《生物化学(药)》在线作业

1. 下列哪一项不是影响酶活性的主要因素（）。 A. 温度 B. Ph C. 激活剂 D. 酶的用量 2. 变构效应物对酶结合的部位是： A. 活性中心与底物结合的部位 B. 活性中心的催化基团 C. 酶的-SH基 D. 活性中心以外的特殊部位 3. 下列各项不属于蛋白质功能的是（)。 A. 催化功能 B. 运输功能 C. 运动功能 D. 提供能量 4. 1分子葡萄糖经糖酵解分解为2分子乳酸时，其底物水平磷酸化次数为 A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 5. 乳糜微粒中含量最多的组分是 A. 脂肪酸 B. 甘油三酯 C. 磷脂酰胆碱 D. 蛋白质 6. 下列何种作用不可能改变酶活性 A. 延长酶作用时间 B. 加入酶必需的激活剂 C. 变构酶分子发生变构效应 D. 某些酶蛋白发生化学修饰 7. 在什么情况下，一种蛋白质在电泳时既不向正级移动，也不向负极移动，而停留在原点？ A. 发生蛋白质变性 B. 与其它物质结合形成复合物 C. 电极缓冲液的pH正好与该蛋白质的pI相同 D. 电极缓冲液的pH大于该蛋白质的pI 8. 1分子葡萄糖酵解时净生成多少分子ATP A. 1

C. 3 D. 4 9. 乳糖操纵子的调节水平在（）。 A. 复制 B. 转录 C. 转录后 D. 翻译 E. 翻译后 10. 有关多肽链主链肽键形成的正确描述是（)。 A. 由一个氨基酸的α—氨基与另一个氨基酸的α—羧基形成 B. 由一个氨基酸的α—氨基与自身的α—羧基形成 C. 由一个氨基酸的侧链氨基与自身的α—羧基形成 D. 由一个氨基酸的侧链氨基与另一个氨基酸的α—羧基形成 11. 在糖原合成中每加上一个葡萄糖残基需消耗高能键的数目是 A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 12. 嘧啶从头合成途径首先合成的核苷酸为（）。 A. UDP B. ADP C. TMP D. UMP 13. 糖酵解途径的关键酶之一是 A. 乳酸脱氢酶 B. 果糖二磷酸酶-1 C. 6-磷酸果糖激酶 D. 6-磷酸葡萄糖酶 14. 在蛋白质三级结构中可存在如下化学键，但不包括： A. 氢键 B. 二硫键 C. 离子键 D. 磷酸二酯键 15. 1分子丙酮酸彻底氧化净生ATP分子数 A. 2 B. 3

2019年浙江大学生物化学与分子生物学考研专业指导

2019年浙江大学生物化学与分子生物学考研专业指 导 一、招生人数 070 生命科学学院 生命科学学院招生规模74(其中学术学位74人，拟接收推免生44名左右，以最终确认录取人数为准）。 0710 生物学学术型 071010 生物化学与分子生物学 二、研究方向： 01蛋白质与酶工程 02生物化学与生物制药 03微生物生化与代谢工程 04动物生化与转基因工程 05植物生化与分子生物学 06海洋生化与分子生物学 三、考试科目： 初试科目：

①101政治 ②201英语一 ③727 细胞生物学 ④830生物化学与分子生物学（各50%） 复试内容：外语听、说能力、专业基础综合知识 欢迎理学、工学、农学、医学、药学等学科考生报考。生命科学学院100%招收学术学位研究生。 四、参考书目： 《生物化学》(下册) 王镜岩、朱圣庚、许长法高等教育出版社； 《生物化学》(上册) 王镜岩高等教育出版社； 《现代分子生物学》第二版，朱玉贤等主编，高等教育出版社； 《现代遗传学》赵寿元等主编，高等教育出版社。 《细胞生物学》翟中和高等教育出版社。 五、浙江大学生物化学与分子生物学近三年复试分数线

六、浙江大学生物化学与分子生物学考研经验： 1、零基础复习阶段（6月前) 本阶段根据考研科目，选择适当的参考教材，有目的地把教材过一遍，全面熟悉教材，适当扩展知识面，熟悉专业课各科的经典教材。这个期间非常痛苦，要尽量避免钻牛角尖，遇到实在不容易理解的内容，先跳过去，要把握全局。系统掌握本专业理论知识。对各门课程有个系统性的了解，弄清每本书的章节分布情况，内在逻辑结构，重点章节所在等。 2、基础复习阶段（6－8月) 本阶段要求考生熟读教材，攻克重难点，全面掌握每本教材的知识点，结合真题找出重点内容进行总结，并有相配套的专业课知识点笔记,进行深入复习，加强知识点的前后联系，建立整体框架结构，分清重难点，对重难点基本掌握。同时多练习相关参考书目课后习题、习题册，提高自己快速解答能力，熟悉历年真题，弄清考试形式、题型设置和难易程度等内容。要求吃透参考书内容，做到准确定位，事无巨细地对涉及到的各类知识点进行地毯式的复习，夯实基础，训练思维，掌握一些基本概念和基本模型。

浙江大学生物化学丙实验报告

. 实验报告 课程名称： 生物化学实验（丙） 指导老师： 方祥年 成绩：__________________ 实验名称： 离子交换柱层析分离纯化蔗糖酶 同组学生姓名： 金宇尊、鲍其琛 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、实验材料与试剂（必填） 四、实验器材与仪器（必填） 五、操作方法和实验步骤（必填） 六、实验数据记录和处理 七、实验结果与分析（必填） 八、讨论、心得 一、实验目的和要求 1、学习离子交换层析的基本原理； 2、学习离子交换层析分离蛋白质的基本方法和技术； 3、学习蔗糖酶活性检测的基本原理和方法。 二、实验内容和原理 （1）实验原理 1、离子交换层析： 以离子交换剂为固定相，液体为流动相进行。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。这些过程都是可逆的。在某一pH 值的溶液中，不同的蛋白质所带的电荷存在差异，因而与离子交换剂的亲和力就有区别。当洗脱液的pH 改变或者盐的离子强度逐渐提高时，使某一种蛋白质的电荷被中和，与离子交换剂的亲和力降低，不同的蛋白质按所带电荷的强弱逐一被洗脱下来，达到分离的目的。 离子交换剂是由基质、电荷基团（或功能基团）和反离子构成。 基质 电荷基团 反离子 电荷基团 反离子 电荷基团 反离子 基质 基质 — ＋ — ＋ 可逆交换 可逆交换 溶液中的离子 （交联纤维素、交联葡聚糖、交联琼脂糖) 阳离 阴离子交

由于蔗糖酶的pI偏酸性,所以在pH7.3 缓冲液的环境中，粗分离纯化样品蔗糖酶带负电荷，因此我们用阴离子交换剂达到分离蔗糖酶的目的。 2、酶活力检测(定性检测） 蔗糖酶（β-D-呋喃型果糖苷-果糖水解酶EC 3.2.1.26），能催化非还原性双糖（蔗糖）裂解，将蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。 本实验采用 3.5－二硝基水杨酸法，其原理是 3.5－二硝基水杨酸与还原糖共热（100℃）被还原成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比，由此来确定并收集蔗糖酶纯化样品。 （2）实验内容 1、离子层析分离纯化实验1中粗分离纯化的蔗糖酶样品Ⅲ； 2、定性检测判断所提取的蔗糖酶纯化样品多少。 三、实验材料与试剂 1、实验材料 蔗糖酶粗分离纯化样品Ⅲ 2、实验试剂 ① DEAE-Sepharose Fast Flow (弱碱性阴离子交换剂)； ②20mmol/L Tris-HCl pH7.3 缓冲液；

浙大考博辅导班：2019浙大生物系统工程与食品科学学院考博难度解析及经验分享

浙大考博辅导班：2019浙大生物系统工程与食品科学学院考博难度 解析及经验分享 浙江大学前身求是书院成立于1897年，是中国人自己最早创办的新式高等学府之一。经过一百多年的建设和发展，学校已成为一所基础坚实、实力雄厚，特色鲜明，居于国内一流水平，在国际上有较大影响的研究型、综合型大学，是首批进入国家“211工程”、“985工程”和“双一流”建设的若干所重点大学之一，可在哲学、经济学、法学、教育学、文学、历史学、理学、工学、农学、医学、管理学和艺术学等12个学科门类授予学术性学位，并有可授予博士专业学位类别4个，可授予硕士专业学位类别27个，是全国重要的研究生培养基地。 下面是启道考博辅导班整理的关于浙江大学生物系统工程与食品科学学院考博相关内容。 一、院系简介 浙江大学生物系统工程与食品科学学院(简称“生工食品学院”)是在原浙江农业大学农业工程学院和食品科学与营养系的基础上于1999年合并组建。 学院现设有生物系统工程和食品科学与营养等2个系，生物系统工程、食品科学与工程2个本科专业。 学院拥有农业工程、食品科学与工程2个一级学科博士学位授予点及2个一级学科博士后流动站，拥有农业机械化工程，农业生物环境与能源工程，农业电气化与自动化，农业水土工程，生物系统工程，食品科学，农产品加工及贮藏工程，粮食油脂及蛋白质工程，水产品加工及贮藏工程，食品安全等10个博士学位授予点及包括上述专业及机械设计及理论、发酵工程在内的12个硕士学位授予点。其中，农业机械化工程学科是浙江省重点学科、农业部重点学科和国家重点学科；食品科学学科是浙江省重点学科、农业部重点学科；农业生物环境工程与智能化设备实验室是农业部重点开放实验室。 学院师资力量雄厚，科研实力较强，教学研究设施完善，拥有近2万平方米建筑面积的集办公、教学、研究为一体的现代化综合大楼。学院坐落在浙江大学紫金港校区农生环组团大楼D座。 二、招生信息 浙江大学生物系统工程与食品科学学院博士招生专业有9个：