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临床检验仪器第十三章PCR核酸扩增仪习题

临床检验仪器第十三章PCR核酸扩增仪习题
临床检验仪器第十三章PCR核酸扩增仪习题

第十三章PCR核酸扩增仪

一、名词解释

1.PCR技术:聚合酶链反应(PCR)是一种体外核酸扩增技术。

2.TaqDNA聚合酶:存在于水生嗜热菌的嗜热DNA聚合酶,可在74℃复制DNA,在95℃仍具有酶活力。

3.水浴锅PCR核酸扩增仪:属于第一代PCR基因扩增仪,以不同温度的水浴锅串联成一个控温体系。

4.压缩机PCR核酸扩增仪:于第二代PCR基因扩增仪,由压缩机自动控温,金属导热。

5.Overshooting:升温过程中,由于一些加热元件,比如半导体、金属块上积蓄的能量仍然会传给PCR体系,造成实际的温度高于设定的温度,即overshooting现象。

6.Undershooting:在降温过程中也会出现惯性,造成实际的温度短时间内会低于设定温度。

7..半导体PCR核酸扩增仪:属于第三代PCR基因扩增仪,由半导体自动控温,金属导热。

8.离心式空气加热PCR扩增仪:属于第三代PCR基因扩增仪,由金属线圈加热,采用空气作为导热媒介。

9.梯度PCR仪:带梯度PCR功能的基因扩增仪,在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出最适合的反应条件。

10原位PCR仪:带原位扩增功能的基因扩增仪。

11.原位PCR技术:即在细胞内进行PCR扩增,组织细胞的形态不被破坏,是原位杂交与PCR技术结合而形成的新技术。

12.荧光实时定量PCR技术:在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,通过检测荧光信号,实时监测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。

13.位置的边缘效应:指PCR基因扩增仪最外周的样品孔温度与中间的样品孔差异,不均一,从而导致外周样品孔的PCR扩增效率不佳。

14.模块温控模式:仪器根据探测器直接探测的承载样品金属基座温度进行控制,该模式适用于长时间的静态孵育。

15.反应管温控模式:仪器根据探测器所探到的温控模块的温度由计算机计算出样品管内或PCR板孔内样品液的温度来进行控制。

16.Ct值:C代表cycle,t代表threshold,Ct值的含义是,每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数,每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。

二、选择题

【A型题】在五个选项中选出一个最佳答案。

1.以下哪种物质在PCR反应中不需要(D)

A.Taq DNA聚合酶

B.dNTPs

C.Mg2+

D.RNA酶

E.合适PH缓冲液

2.以下哪种酶可耐高温(A)

A.Taq DNA聚合酶

B.Hind III

C.T4连接酶

D.RNA酶

E.Klenow片段

3.PCR反应的正确过程应为(B)

A.退火—变性—延伸

B.变性—退火—延伸

C.退火—延伸—变性

D.变性—延伸—退火

E.延伸—变性—退火

4.PCR技术的本质是(C)

A.核酸杂交技术

B.核酸重组技术

C.核酸扩增技术

D.核酸变性技术

E.核酸连接技术

1.TaqDNA聚合酶促反应最适温度(C)

A.37℃

B.50~55℃

C.70~75℃

D.80~85℃

E.94~95℃

2.温度均一性较好的PCR仪为(E)

A.水浴锅PCR核酸扩增仪和压缩机PCR核酸扩增仪

B.半导体PCR核酸扩增仪和离心式空气加热PCR核酸扩增仪

C.压缩机PCR核酸扩增仪和半导体PCR核酸扩增仪

D.压缩机PCR核酸扩增仪和离心式空气加热PCR核酸扩增仪

E.水浴锅PCR核酸扩增仪和离心式空气加热PCR核酸扩增仪

3.一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为(B)

A.普通PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.荧光PCR仪

E.实时PCR仪

4.能在细胞内进行PCR仪扩增的PCR仪为(C)

A.普通PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.荧光PCR仪

E.实时PCR仪

5.PCR技术扩增DNA,需要的条件是(A)

①目的基因;②引物;③四种脱氧核苷酸;④DNA聚合酶等;⑤mRNA;⑥核糖体

A.①②③④

B.②③④⑤

C.①③④⑤

D.①②③⑥

E.③④⑤⑥

1.PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为(B)

A.模板

B.引物

C.dNTP

D.镁离子

E.PH缓冲液

2.下述哪种PCR仪扩增样品可以了解样品中DNA原始拷贝数(D)

A.普通PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.荧光实时PCR仪

E.定性PCR仪

3.以下是经过PCR扩增后得到的Ct值,哪个样品的DNA原始拷贝数最多(A)

A.样品A,Ct=20

B.样品A,Ct=22

C.样品A,Ct=24

D.样品A,Ct=26

E.样品A,Ct=28

13.以空气为加热介质的PCR仪是(C)

A.金属板实时定量PCR仪

B.96孔板式实时定量PCR仪

C.离心式实时定量PCR仪

D.各孔独立控温的定量PCR仪

E.荧光实时定量PCR仪

14.下述哪个PCR扩增仪可能具有多色多通道检测系统(D)

A.普通PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.荧光定量PCR仪

E.定性PCR仪

15.下述哪个PCR扩增仪对温度控制要求最高(B)

A.普通PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.荧光定量PCR仪

E.定性PCR仪

16.控温精度最高的控温方式是(D)

A.水浴锅控温

B.压缩机控温

C.半导体控温

D.离心式空气加热控温

E.都一样

17.在PCR扩增过程中,下列哪个步骤对温度精度要求最高(B)

A.变性

B.退火

C.延伸

D.退火和变性

E.都一样

18.在PCR扩增过程中,用同样的样品,同样的PCR反应程序,同一个PCR仪,最后的结果差异非常明显,其可能的原因是下列哪个(B)

A.温度的准确性差

B.温度的均一性差

C.升降温的速度低

D.不同模式下的相同温度特性差

E.热盖温度不准

19.PCR核酸扩增仪最关键的部分是(A)

A.温度控制系统

B.荧光检测系统

C.软件系统

D.热盖

E.样品基座

20.“位置的边缘效应”是指(D)

A.温度的准确性欠佳

B.温度的均一性欠佳

C.边缘升降温速度快

D.边缘升降温速度慢

E.梯度模式和标准模式温度不一致

21.PCR扩增仪升降温速度快有很多优点,下述哪一项应除外(C)

A.缩短反应时间

B.提高工作效率

C.消除位置的边缘效应

D.缩短非特异性反应时间

E.提高反应特异性

22.在梯度模式下得出最佳反应条件,并以此条件在标准模式下单独做,但结果却不如人意,最有可能的原因是(E)

A.样品孔温度与设定温度不一致

B.样品孔之间的温度有差异

C.样品孔位置的边缘效应较高

D.升降温速度不够快

E.不同模式温度特性有差异

23.定量PCR扩增仪的关机次序一般为(A)

A.关软件—关PCR仪—关电脑

B.关软件—关电脑—关PCR仪

C.关PCR仪—关软件—关电脑

D.关PCR仪—关电脑—关软件

E.关电脑—关PCR仪—关软件

【X型题】每题的备选答案中有两个或两个以上正确答案。

1.PCR技术每一个循环均包含以下哪些环节(BCD)

A.酶切

B.变性

C.退火

D.延伸

E.连接

2.以下哪些酶可用于PCR反应(AC)

A.Klenow

B.Hind III

C.Taq DNA聚合酶

D.RNase

E.DNase

3.目前常用的PCR核酸扩增仪控温方式有(CD)

A.水浴锅控温

B.压缩机控温

C.半导体控温

D.离心式空气控温

E.金属控温

4.普通PCR核酸扩增仪除通常的定性PCR仪外,还包括(ABCDE)

A.水浴式PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.变温金属块式PCR仪

E.变温气流式PCR仪

5.按变温方式不同,PCR核酸扩增仪可分为(ADE)

A.水浴式PCR仪

B.梯度PCR仪

C.原位PCR仪

D.变温金属块式PCR仪

E.变温气流式PCR仪

6.目前市场上实时荧光定量PCR仪一般有哪些类别(ADE)

A.金属板实时定量PCR仪

B.梯度定量PCR仪

C.原位定量PCR仪

D.离心式实时定量PCR仪

E.各孔独立控温的定量PCR仪

7.下述产品哪些属于金属板实时定量PCR仪(BCD)

A.Light Cycle TM荧光定量PCR仪

B.ABI 7500荧光定量PCR仪

C.MJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪

D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪

E.Rotor-Gene 3000荧光定量PCR仪

8.下述产品哪些属于离心式实时定量PCR仪(AE)

A.Light Cycle TM荧光定量PCR仪

B.ABI 7500荧光定量PCR仪

C.MJ公司Chromo 4荧光定量PCR仪

D.Bio-rad公司iCycler荧光定量PCR仪

E.Rotor-Gene 3000荧光定量PCR仪

9.PCR核酸扩增仪的温度控制主要是指(ABD)

A.温度的准确性控制

B.温度的均一性控制

C.退火温度控制

D.升降温速度控制

E.延伸温度控制

10.荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括(BC)

A.发光二极管

B.激发光源

C.检测器

D.光度计

E.光电倍增管

11.荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定,可能的原因有(ABE)

A.滤光片发霉

B.光源损耗

C.半导体模块故障

D.荧光染料污染

E.光电倍增管灵敏度下降

三、简答题

1.什么是聚合酶反应(PCR)技术?

PCR技术的本质是核酸扩增技术,通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述“变性→退火→引物延伸”过程至25-40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数,可以在体外对目的核酸进行大量复制。

2.PCR核酸扩增仪的工作关键是什么?经历了怎样一个发展过程?

PCR基因扩增仪工作关键是温度控制。其发展过程为:水浴锅PCR仪属于第一代PCR 基因扩增仪,以不同温度的水浴锅串联成一个控温体系;压缩机PCR仪属于第二代PCR基因扩增仪,由压缩机自动控温,金属导热,控温较第一代PCR基因扩增仪方便;半导体PCR仪属于第三代PCR基因扩增仪,由半导体自动控温,金属导热,控温方便,体积小,相对稳定性好;离心式空气加热PCR仪属于第三代PCR基因扩增仪,由金属线圈加热,采用空气作为导热媒介,温度均一性好,各孔扩增效率高度一致。

3.PCR核酸扩增仪按照变温方式的不同可分为哪几类?分别有什么特点。

PCR基因扩增仪按照变温方式通常有以下三类:

(1)水浴式PCR仪:变温快、时间准、温度均一,但体积大,自动化程度不高。(2)变温金属块式PCR仪:通过半导体加热和冷却,并由微机控制恒温和冷热处理过程。装置比较牢固耐用,温度变换平稳,有利于保持Taq DNA聚合酶的活性。(3)变温气流式PCR仪:以空气作为热传播媒介,由大功率风扇及制冷设备提供外部冷空气而制冷。成本较低;安全程度高。微机配上软件,可灵活编程。

4.什么是梯度PCR仪?它有什么优点?

梯度P CR 仪是由普通P CR 仪衍生出的带梯度P CR 功能的基因扩增仪。在反应过程中每个孔的温度控制条件可以在指定范围内按照梯度变化,根据结果,一步就可以摸索出最适合的反应条件。使用梯度P CR 仪,多次实验可在一台仪器上完成,既节省实验时间,提高实验效率,又节约实验成本。

5.何谓荧光实时定量PCR(RQ-PCR)技术?

荧光实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技术即在PCR 反应

体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实的反映了体系中

模板的增加,通过检测荧光信号,从而实时监测整个P CR 反应过程,最后通过

标准曲线对未知模板进行定量分析。

6.荧光实时定量PCR仪有哪些种类,各有什么特点?

目前市场上实时荧光定量PCR仪一般可分三类。

(1)金属板式实时定量PCR仪:可容纳的样本量大,无需特殊耗材,但温度均一性欠佳,有边缘效应,标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致。

(2)离心式实时定量PCR仪:能保障标准曲线和样品之间反应条件的一致性。但可容纳样品量少,有的需用特殊毛细管作样品管,增加了使用成本。

(3)各孔独立控温的定量PCR仪:各孔独立控温,适合多指标快速检测。但是上样不如传统方法方便,而且需要独特的扁平反应管,使用成本较高。

7.PCR核酸扩增仪的温度控制包括哪些方面?

PCR 基因扩增仪的温度控制是决定PCR 反应能否成功的关键,主要包括温度的准确性、均一性以及升降温速度等方面。

(1)温度的准确性是指样品孔温度与设定温度的一致性;(2)温度的均

一性是指样品孔间的温度差异,关系到不同样品孔之间反应结果的一致性;(3)升降温的速度:升降温速度快,可以缩短反应进行的时间,提高工作

效率,并提高P CR 反应特异性。对梯度P CR 仪来说,除此以外,还必须考虑仪器

在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。

8.为什么反应管温控比模块温控更准确?

反应管温控模式下,仪器根据探测器所探测到的温控模块的温度由计算机计算出样品管内或PCR板孔内样品液的温度来进行控制。由于精确的算法能自动补偿时间,确保反应混合物按照程序设定的时间维持预设温度,所以准确度更高。

9.实时荧光定量PCR扩增仪的荧光检测系统主要由哪两部分组成?

激发光源和检测器

10.P CR扩增仪的热盖有什么作用、使用时应注意什么?

目前PCR 仪通常都配备热盖,可使样品管顶部温度达到150℃左右,避免

蒸发的反应液凝集于管盖而改变PCR 反应体积。无需加石蜡油,减少了后续

实验的麻烦。旋转加压的热盖需注意旋转压力的控制,过松则使热盖没有充

分接触反应管而影响结果;过紧则会导致反应管变形,甚至可能造成热盖的

机械故障。

11.简述PCR扩增仪的操作规程。

普通PCR 扩增仪的操作通常为打开电源,仪器自检,设置温度程序或调出储存的程序,运行即可。定量P CR 扩增仪的操作一般都是先打开P CR 仪电源,再打开相连电脑中的相应软件,分别设置温度程序、采集通道,并可根据不同仪器的要求进行一些特殊设置,在仪器中放好P CR 管,盖好仪器,运行设置好的反应程序。关机时通常先关软件,再关P CR 仪,最后关电脑。

12.定量PCR扩增仪常见故障有哪些,如何解决?

定量P CR 扩增仪常见故障及解决方法为:

(1)荧光染料污染样品孔,解决方法是请工程师清洁样品孔;(2)PCR 管融化,原因可能是温度传感器出问题或是热盖出问题,需工程师检修;

(3)个别孔扩增效率差异很大,需工程师检修;(4)荧光强度减弱或不稳定。需更换光源;或需工程师调试检修;(5)仪器工作时噪音不正常,可自行检查 PCR管是否放好;或请工程师检修;(6)仪器采集荧光时噪音不正常。需工程师检修,或更(7)机器搬动过后不能正常工作或不能正常采集荧光信号。请工程师换配件;

重新调试。(8)PCR反应假阴性:PCR反应假阴性的原因很多,其中PCR仪控温不准也是一个重要原因,可使用电子测温仪校准温度。

13.简述PCR扩增仪的实际应用。

PCR基因扩增仪广泛应用于医学领域,主要包括:感染性疾病的分子诊断和研究;遗传性疾病的分子诊断和研究;恶性肿瘤的分子诊断和研究;PCR扩增仪在移植配型上的应用;PCR扩增仪在法医学上的应用;PCR扩增仪在分子生物学中其他领域的应用。

14.P CR核酸扩增仪可分为几类?

根据DNA扩增的目的和检验的标准可以将PCR仪分为普通定性PCR仪和实时荧光定量PCR仪。

普通定性PCR仪按照变温方式不同,可分为水浴式PCR仪、变温金属块式PCR 仪和变温气流式PCR仪三类;按照功能用途PCR核酸扩增仪可分为梯度PCR仪和原位PCR仪。

实时荧光定量PCR仪根据其结构的不同,可分为金属板式实时荧光定量PCR仪、离心式实时定量PCR仪和各孔独立控温的荧光定量PCR仪三类。

15.P CR扩增仪的性能指标有哪些?

(1)温度控制;、

(2)荧光检测:Ct值重复性误差;荧光检测范围;仪器的检测通道数量

(3)其他:样品基座容量和样品数;软件功能。

临床检验仪器复习题及答案

临床检验仪器复习题及 答案 集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)

《临床检验仪器学》 一、选择题 1.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射 2、VCS白细胞分类技术不包括:细胞化学染色技术 3.毛细管粘度计不适合检测:全血 4、尿液分析仪的测试项目中,与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖 5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理: 光散射和细胞化学染色 6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比 7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光 8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 11、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱 13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律 14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清蛋白 15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗 16、BacT/Alert血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳

17、密度梯度离心法又称为:区带离心法 18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度区带离心法 19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度 20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感程度取决于:电极的玻璃膜 22、PCO 电极属于:气敏电极 2 23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极 24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器 26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪 27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分析仪 28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头 29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪 30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板 31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR仪 32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪

临床检验仪器学(DOC)

第一章概论 一、名词解释: 1.灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。 2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。 4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。 5.精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 6.可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 7.重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。 9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。 10.线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围 11.响应时间:表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。 12.频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。 第四章紫外——可见分光光度计 1.分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。 2.吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。 3.朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度的乘积 c 成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: A=kbc。它适用于分子吸收和原子吸收。 4.摩尔吸光系数(ε):摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为 1cm, 溶液浓度 c 为1mol/L 时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特征数据。 6.单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。 7.吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。 8.光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、中心阴极式和平行平板式几种,按管内充气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。 9.光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为 9 个~13 个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高 200 多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。 10.波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。 11.波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。 12.光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。该偏差

临床检验基础试题

一选择题 (1)A型题(单项选择题,每题1分,共30分) 1.具有吞噬传递免疫信息在特异免疫中起重要作用的细胞是() A中性粒细胞 B 单核细胞 C淋巴细胞 D 嗜碱性粒细胞 E红细胞 2.冲液后,计数池每个大格的体积是() A 0.1u l B 0.01 ul C 1.0 ul D 0.0001 ul 3.血片经过瑞氏染色后,成熟红细胞呈鲜红色,白细胞核染色呈浅灰色, 其原因是PH为() A 5.4 -6 B 7.4-8 C 6.5-7 D 8.2-8.6 E 8.7-9.4 4.三种粒细胞区别的要点是() A细胞大小 B特异性颗粒 C染色质结构 D浆颜色 E核浆比例 5.下列除了哪种疾病外,均是中性粒细胞增加的疾病() A猩红热 B尿毒症 C 流行性感冒 D 铅中毒 E化脓性阑尾炎 6.嗜酸性粒细胞一般分叶核常为() A一叶 B二叶 C三叶 D四叶 E 五叶 7.在血液中,中性粒细胞杆状核以上幼稚细胞增多称为() A核左移 B核右移 C中毒颗粒 D 逆行性变化 E杜勒氏小体 8.一种血红蛋白衍生物是棕红色,在波长540nm处,有一较宽的吸光带, 它是() 9.大面积烧伤患者红细胞和血红蛋白相对增高的原因是() A红细胞生成增多 B红细胞寿命延长 C 红细胞破坏减少 D 血液浓缩 E白细胞生成减少

10.诊断铅中毒的最佳指标是() A.网织红细胞增多B低色素红细胞增多 C 靶红细胞增多D 点彩红细 胞增多 11使血沉明显加快的原因是() A红细胞数量增多 B 大红细胞贫血 C 镰刀形红细胞贫血 D 球形红细胞贫血 E 红细胞凝集成团 12.关于魏氏血沉发测定下列哪项是错误的() A.深静脉血1.6ml B 用血沉管吸抗凝血至零刻度 C与0.4ml抗凝剂混匀 D垂直立于血沉架上 E 室温静置半小时 13.关于血沉的说法下列哪项是错误的() A.正常男性血沉生理变化不大 B 新生儿血沉加快C妇女月经期血沉可 加快 D 年龄超过50岁的老年人血沉可加快E 高原地区的居民血沉低于平原地区的居民 14.欲中和A型血清的天然抗体,可加哪一种唾液() A A型分泌型唾液 B B型分泌型唾液 C O型分泌唾液 D A B型分 泌唾液 E 任何唾液 15.用标准血清鉴定血型,下列哪项的结果应判断为A型血() A与抗A不凝,抗B凝抗A+B凝 B与抗A凝,抗B不凝抗A+B凝 C 与抗A凝,抗B凝抗A+B不凝 D与抗A不凝,抗B不凝抗A+B凝 E与抗A不凝,抗B凝抗A+B不凝

临床检验仪器复习题及参考答案汇总.doc

《临床检验仪器学》 一、选择题 I.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射2、VCS白细胞分类技术不包括: 细胞化学染色技术3.毛细管粘度计不适合检测:.全血4、尿液分析仪的测试项目中, 与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理:光散射和细胞化学染色6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 II、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清 蛋白15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗16、BacT/Alert 血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳17、密度梯度离心法又称为:区带离心法18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度 区带离心法19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感 程度取决于:电极的玻璃膜22、PCO2电极属于:气敏电极23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量?样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分 析仪28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR 仪32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪33、PCR反应正确过程应为:变性一退火一延伸34、一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为:梯度PCR仪35、PCR基因扩增仪最关键的部分是:温度控制系统36、试剂空白变化速率:是在反应温度下试剂自身吸光度随时间的变化37、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升级。 38、全自动血凝仪中的免疫学方法,通常选用:免疫比浊法39、自动生化分析仪工作较长时间后个别项目出现系统误差,则首先考虑日因素是:.标准品是否变质40、比色杯清洗步骤中可以忽略的是:经吹干后可以继续循环使用41、使用(区带)转头离心时 不需要离心管,样品直接加至其中即可42、使用电阻加热和半导体冷却的PCR仪的恒 温方法属:变温金属块恒温法43、含2个加样针、灌注式加试剂装置、双圈反应盘的自 动生化分析仪的取样周期为6s,则测定单试剂法的工作效率为(1200 )测试/h 44、测最电流变化的电极是:P02电极45、血培养仪的检测信号不包括:温度46、按血凝仪检测原理,下述中不属于凝固法的是:免疫比浊法47、流式细胞术尿沉渣分析仪应用的原理是:流式细胞术和电阻抗原理48、含1个加样针、1个加试剂针、 单圈反应盘的自动生化分析仪的取样周期为 4.5s,贝删定单试剂法的工作效率为(800 ) 测试/h 49、关于底物消耗限额参数,不正确的是:目的是提高监测精密度50、全自动尿沉渣分析仪中F1几乎极低而Fsc大小不等可以为:红细胞51、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升

医学检验考习题库-临床检验基础病例分析题

精心整理 临床检验基础病例分析题一 病例:患者,男,45岁,上腹饱胀,厌食,体重减轻,消瘦和进行性贫血,胃痛呈持续性,进食后加重。 查体:上腹部有肿块,质坚硬,有压痛,可移动,腹腔内有积液。 12患者4常,体重无变化。既往体健,个人史、家族史无特殊。 体检:T 39.5℃,P 98次/分,R 22次/分,BP 122/83mmHg 。发育正常,营养中等,神志清楚,无皮疹,浅表淋巴结不大,咽部无充血,扁桃体不大,颈静脉无怒张,胸廓无畸形,呼吸平稳,左上肺叩浊,语颤增强,有湿哕音,心界不大,心率105次/分,律齐,无杂音,腹软,肝脾未及。

实验室检查:RBC:5.5×1012/L,Hb 145g/L,WBC:12.5×109/L;分类Nsg 75%,E 1.5%,L 22%,PLT 205×109/L,尿常规(-),粪便常规(-)。 1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据。 答:根据以上资料,初步诊断为:左侧肺炎(肺炎球菌性可能性大)。 其诊断依据为: ① ② ③ 2 天/28 查体: 苍白,贫血貌,皮肤粘膜无出血点,浅表淋巴结不大,巩膜无黄染,舌乳头正常,心肺无异常,肝脾不大。 实验室检查:血液检查:Hb:64 g/L,RBC:3.6×1012/L,MCV:78fl,MCH:18pg,MCHC:299g/L,HCT 28%,RDW 18%,外周血涂片红细胞以小红细胞为主;WBC:5.6

×109/L,分类:Nsg 68%,L 25%,M 2%,PLT:240×109/L,Reti 2.0%。尿蛋白(-),镜检无异常,大便隐血(-),血清铁9.5 μrnol/L(9~27μrnol/L)。1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据? 答: (1)根据以上资料,该患者初步诊断为:①缺铁性贫血? ②月经过多原因待查? (2) :299g/L 2 答: 急诊。 查体:急性病容,巩膜疑有黄染。右上腹有明显压痛伴肌紧张: 实验室检查:WBC 12.4×109/L,中性粒细胞80%,淋巴细胞20%:B超:胆囊明显增大,囊壁增厚,可见反射很强的胆石数个,最大约1.5cm,提示胆囊炎、胆石症。

临床检验仪器学复习题

《临床检验仪器学》复习题 一、名词解释 灵敏度线性范围预处理系统K系数TEM SEM STM 灵敏度数值孔径离子选择性电极血细胞分析仪(BCA) 尿液分析仪自动生化分析仪自动化程度电化学分析技术流式细胞术噪音线性范围响应时间漂移电化学分析技术参比电极待测电极预处理系统实验室自动化系统全实验室的自动化(TLA)临床实验室信息系统(LIS) 医院信息系统(HIS) 化学电池离心现象离心技术扩散现象相对离心力沉降系数沉降速度沉降时间自动化程度通道差孔间差零点漂移ELISA 化学发光电化学发光发光免疫分析技术电化学性质POCT 二、填空 高速(冷冻)离心机的结构包括_________、_________、_________、________、____________、_________、_________等. 临床实验室常用的离心方法包括、和三类. 显微镜的分辨率表达式是。 流式细胞仪主要在通常在____ 和____ 这两个角度接收并检测细胞散射光强度。 电子显微镜包括_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分。 电子透镜包括____ 和____ 两种。 扫描隧道显微镜是根据量子力学原理中的和而设计。 STM 的两种工作模式分别是____ 和____ 。 尿液分析仪的测试原理包括、和三个原理。 尿液分析仪的反射率= 。 尿液分析仪由:、和三部分组成。 尿有形成分检验包括和两方面的检验。 流式细胞仪主要接受细胞的____ 信号和____ 信号。 流式细胞仪的基本结构由_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分构成。 常用参比电极主要有____ 和____ 两种 流式细胞仪中鞘液的作用是。 自动血培养系统主要由、和所构成。 电子显微镜根据成像方式的不同可以分为____ 和____ 两种类型。 生化分析仪的光路按照单色器的位置可以分为____ 和____ 两种。 自动生化分析仪的类型按反应装置的结构可分为4类:_______________、_______________、_______________、_______________。 目前临床上常用的三类免疫标记方法是______________、___________________、____________________。 临床电化学分析仪器包括____ 和____ 两种 血气分析仪的包括基本电极包括_______________、_______________、_______________、_______________四种。 血气分析仪的pH系统使用和两种标准缓冲液来进行定标;氧和二氧化碳系统用两种混合气体来进行定标。第一种混合气中含;第二种含。 电化学发光免疫分析的发光反应底物有____ 和____ 两种 生化分析仪的分析效率是指。 A/D转换的含义是。 LCD器的中文全称是。 自动生化分析仪采用后分光的含义是指。 自动生化分析仪中的通道数是指。 微生物自动化系统一般可分_______________________和____________________________ 两类。 临床电化学分析仪主要有_____________、_____________两种。 单色器包括________、_____________、_____________三种类型。 样品前处理系统占检验总工作量的。 离心机按照离心速度大小分为________、_____________、_____________。 FCM分选指标包括________、_____________、_____________。

临床检验基础习题集

第一章血液标本采集和血涂片检查 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.静脉采血法的采血部位首选: A. 肘部静脉 B. 手背静脉 C. 内踝静脉 D. 股静脉 E. 颈静脉 2.WHO推荐成人皮肤采血部位为: A. 无名指指端内侧 B. 中指和无名指指端内侧 C. 中指指端内侧 D. 耳垂 E. 大拇趾 3.血细胞分析中最常用的染色法为: A. 吉姆萨染色 B. 瑞氏染色 C. HE染色 D. 罗氏染色 E. PAS染色 (二)、A1型题(否定型) 3. 下列那一种抗凝剂不能与血液中的钙离子结合: A. EDTA-K2 B. 草酸钠 C. 草酸铵 D. 肝素 E. 枸橼酸钠 四、论述题 1. 试述瑞氏染色法的原理及PH值对其的影响? 参考答案 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.A 2.A 3.B (二)、A1型题3.D 四、论述题 1. ①瑞氏染色法的原理:瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美兰组

成的复合染料。瑞氏染料溶于甲醇后,解离为带正电的美兰和带负电的伊红。由于各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力不同,因此染色后呈现不同的色彩。如血红蛋白和嗜酸颗粒为碱性可与酸性染料伊红结合染成红色。细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美兰或天青结合染成紫蓝色或蓝色。中性颗粒呈等电状态,与伊红和美兰均可结合染成紫红色。此染色过程既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。 ②PH值的影响:细胞各种成分均为蛋白质组成,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH值而定。在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红。在偏碱性环境中负电荷增多,易与美兰或天青结合,染色偏蓝。

临床检验仪器学

名词解释 分辨率:显微镜可分辨的两点间的最小距离,即为显微镜的分辨率,它主要取决于照明波长以及物镜的球差系数。 朗伯比尔定律:光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关;在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光。 离子选择性电极:离子选择性电极是一类利用膜电势测定溶液中离子的活度或浓度的电化学传感器,当它和含待测离子的溶液接触时,在它的敏感膜和溶液的相界面上产生与该离子活度直接有关的膜电势。 数值孔径:数值孔径描述了物镜收光锥角的大小,而后者决定了显微镜收光能力和空间分辨率。数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数,是判断两者性能高低的重要标志。 鞘流技术:为了避免计数中血细胞从小孔边缘处流过及湍流,涡流的影响,发明的技术。具体做法是用一毛细管对准小孔管,细胞混悬液从毛细管喷出。同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区,保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞流,四周被鞘液围绕。 问答题 1、影响电泳的因素 答:电场强度、溶液的PH值、溶液的离子强度、电渗作用、粒子的迁移率、吸附作用 2、离心机的离心方法 答:差速离心法、密度梯度离心法、分析性超速离心法 3、酸度计的测定原理以及常用电极 答:酸度计的测定原理:酸度计的主体是一个精密电位计,将电极插在被测溶液中,组成一个电化学原电池,通过测量原电池的电动势并直接用PH值表示出来。传感电极根据被测液氢离子浓度不同而产生不同的电位,根据能斯特方程式,酸度计将所检测到的微小电压变化值换算成PH值。 常用电极有参比电极和测量电极,参比电极包括甘汞电极和Ag-AgCl电极,测量电极为玻璃电极 简答题 1、朗伯比尔定律的成立条件 答:①入射光为单色光②溶液浓度不能过大 2、分光光度计的类型 答:单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计 3、血细胞计数器的测量原理 答:当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号,脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比,根据欧姆定律,细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度越大。经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。 4、常用的色谱仪有哪两种以及各自的特点 答:常用的色谱仪有气相色谱仪和液相色谱仪两种。 气相色谱仪具有高分辨率、高速度、高灵敏度以及选择性好等优点。但它只能用于被气化物

临床检验仪器学-复习大纲

第一章概论 1、一个优良的检验仪器应具有(P3):灵敏度、分辨率和精度高,噪音和误差小,可靠性、稳定性和重复性好,响应时间短,测量范围、示值范围、频率响应范围和线性范围宽等性能指标。 2、最小检测量与分辨率的区别?(P5) 答:①分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量)的最小值。 3、精确度与灵敏度的区别?(P3) 答:①灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。②精确度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。③区别: 4、精确度(P5):对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 5、重复性(P5):在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 6、准确度和精确度的区别。(P5) 第二章离心机 1、简述分析型超速离心机的工作原理。(P26) 答:分析型超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴联接成一个高速的驱动装置,此轴可使转子在旋转时形成自己的轴。转子在一个冷冻的真空腔中旋转,其容纳了两个小室:分析室和配衡室。配衡室是一个经过精密加工的金属块,作为分析室的平衡用。分析室的容量一般为1ml,呈扇形排列在转子中,其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质,可以通过对紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或折射率的不同对沉降物进行监测。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,在检测系统的照相底板上产出一个“峰”。

临床检验仪器的常用性能指标

临床检验仪器的常用性能指标:灵敏性,误差,噪音,最小检测量,精确度,可靠性,重复性,分辨率,测量范围和示值范围,线性范围,响应时间,频率响应范围。 光学显微镜的工作原理:利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。由两组会聚透镜组成光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组成为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足,是通过仪器的机械调焦系统来实现的。 光学显微镜的基本结构:包括光学系统(物镜、目镜、聚光镜及反光镜)和机械系统(聚光镜升降、调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件) 光学显微镜照明设置部件:光源、滤光器、聚光镜、玻片。 光的吸收定律:即郎伯-比尔定律,是比色分析的基本原理。表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的函数关系。A=-lg I/I0=lg I0/I=lg 1/T=kbc 电阻抗型血细胞分析仪的计数原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电解质比稀溶液大。当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。最后得出WBC、RBC、PLT。(该原理称库尔特血细胞检测原理 血细胞分析仪测定Hb的原理:除干式离心分层型、无创型外,各种BCA对Hb测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,RBC溶解释放出Hb,后者与溶血剂中有关成分形成Hb衍生物,进入Hb测试系统。在特定波长(多为530~550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含Hb含量成正比。与不同型号BCA配套的溶血剂不同,形成Hb衍生物也不同,吸收光谱也有差异,但最大吸收峰都接近540nm,因为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm,仪器Hb的校正必须以HiCN值为标准。 尿液分析:是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液的物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化。在尿沉渣检查中能够看到的有形成分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细

临床检验仪器学(第二版)

临床检验仪器学第四讲第12章血细胞分析仪 (Blood Cell Analyzer) 南京医科大学第一临床医学院 临床医学工程处 刘坚

?血细胞分析仪(Blood Cell Analyzer)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的 常规检验仪器。 ?血液分析仪主要完成以下两大功能: ⑴血细胞计数:红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白。 ⑵血细胞分类:白细胞中的淋巴、中性、嗜酸、嗜碱、单核、 幼稚细胞;红细胞中的网织红细胞。 ?根据计数/分类的测定值计算间接测定值 红血球容积比(HCT)、平均红血球血红蛋白含量(MCH)、 血小板容积比(PCT),等等

1947年Coulter 发明了小孔电阻抗法 通过测量细胞的体积大小对细胞进行分类计数 主要是用来计数红、白细胞 该技术一直被各种血液分析仪沿用至今 1953年库尔特家族研制出全世界第一台血细胞计数仪:Model A Wallace H. & Joseph R. Coulter

血细胞计数(Blood count) 早期的血液分析仪主要用来计数红、白细胞全血细胞计数(Complete Blood cell Count) 增加光电比色系统用来同时测定血红蛋白 血小板可在同一仪器上与红细胞一起计数 利用直接测量到的项目运算得到间接计算 项目(如血球压积等参数) 不包括白细胞分类计数 测定标本采用机外人工处理的预稀释方式

白细胞分类计数 (Differential Leukocyte Cell Count) 带电脑的显微镜下辨认细胞的图象识别技术 效率低,受制片、染色技术的影响大 在计数细胞数不多时,重复性较差 没有得到普遍推广 阻抗法仪器检测白细胞“二分群、三分群” 仪器内部结构的进一步完善 微处理器分辨力的进一步提高 特殊溶血剂的应用 无法对细胞内部结构进行分析,准确性有限

临床检验仪器学.

临床检验仪器学 第一章概论 1. 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。 2. 误差:当对某物理量进行检测时, 所测得的数值与标称值 (真值之间的差异。误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(输入为零时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4. 精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念, 其高低是用误差来衡量的, 误差大则精度低,误差小则精度高。 5. 可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下,执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 6. 重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件下, 在一个不太长的时间间隔内, 连续多次检测同一参数, 所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关, 重复性反映一台设备固有误差的精密度。 7. 分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量的最小值。 8. 线性范围:输入与输出呈正比例的范围,也就是反映曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。 1. 临床检验仪器具有哪些特点?

答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。 2. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些? 答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高;可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。 3. 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的? 答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。 4. 临床检验仪器有哪些主要部件? 答:通常,临床检验仪器有取样装置、预分离系统、分离系统、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。 第二章显微镜技术和显微镜 1. 光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物体形成放大影像的精密光学仪器, 由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成, 其核心是物镜和目镜中的两组透镜, 其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像, 再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。 2. 荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。 3. 相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度, 用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。 4. 激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点, 使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像, 而焦面以外的

临床检验仪器学考试重点知识总结

第一章概论 1.临床检验仪器常用性能指标(可能考问答题) 1灵敏度 2 误差3噪声4最小检测量5精确度6可靠性7重复性8分辨率9测量范围和示值范围10线性范围11响应时间12 频率影响范围 1 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比。 2 误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与真值之间的差异。 3 噪音:检测仪器在没有加入被检物品时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4 最小检出量:检验仪器能确切的反应最小物质含量。 5 精确度:检测值偏离真值的程度。 6 可靠性:仪器在规定时期内及在保持运行不超限的情况下执行其功能的能力,反应仪器是否耐用的一项指标。 第二章离心机 1.离心技术:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术 2. 离心机的工作原理:利用离心转子高速旋转产生的强大离心力,迫使液体中的微粒克服扩散,加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离。颗粒的沉降速度取决于离心机的转数、颗粒的质量、大小和密度。 3. 离心力:由于物体旋转而产生的力,物体作圆周运动所产生的向心力的反作用力。

4. 相对离心力:通常颗粒在离心过程中的离心力是相对于颗粒本身所受的重力而言,因此把这种离心力叫做相对离心力。 5. 离心机的分类:按转数分为:低速、高速、超高速。 6. 离心机的最大容量:离心机一次可分离样品的最大体积,m ×n,一次可容纳最多离心管×一个离心管容纳样品最大体积。 7. 沉降系数:颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。 8. 离心机的基本结构 低速离心机的结构较简单,由电动机,离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。其最大转速在10000r/min以内,相对离心力在15000xg以内。 高速(冷冻)离心机最大转速为20000~25000r/min 超速(冷冻)离心机最大转速可达50000~80000r/min 9. 差速离心法:差速离心法又称分步离心法,根据分离物的沉降速度不同,采用不同的离心速度和时间分步离心的方法。10. 差速离心法的优缺点: 优点:操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开,并可使用容量较大的角式转子;分离时间短、重复性高;样品处理量大。 缺点:分辨率有限、分离效果差,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,不能一次得到纯颗粒;壁效应严重,特别是当颗粒很大或浓度很高时,在离心管一侧会出现沉淀,颗

c16全自动核酸提取仪操作说明

c16全自动核酸提取仪操作说明 仪器构造简介: 1 触控屏HID-Pro 320 2 仪器前门 3 样品盘适配器 4 LED指示灯 5 触摸感应器 1 带滤芯的枪头 2 收集管 3 枪头、洗脱管放置架 4 压板 5 样品槽(可直接放置试 剂板或加装适配器后放置 试剂条) 6 传送轨道 7 试剂条适配器

样品架穿孔工具 1 InnuPure接口 2 网络接口 3 USB接口 简易操作说明: 1.插上仪器电源线,打开仪器背部的电源开关,仪器前面LED指示灯显示红色,此时仪器 为待机状态。用手指轻触触摸感应器圆形键一秒钟(注意,不要使劲按),手指拿开后LED指示灯由红色变为绿色,此时仪器为工作状态。 开机后界面如下图所示:

Menu:菜单 Select protocol:选择程序 Tools:工具 Settings:一般设置 2.样品准备和纯化 1)样品盘放入样品架,打开夹板。 2)将试剂板放入样品槽。试剂板上的红线要 与样品槽上的红点对齐。 3)将条管适配器放入样品槽。同样适配器上 的红点要与样品槽上的红点对齐。

4)将试剂条放入样品槽。注意:有“AJ”字样的一头朝向样品盘上刻字的一边。 5)试剂条管放完后,放下压板。 6)放入枪头和收集管。注意:没放试剂条的位 置不要放。 7)将试剂条管第一和第三孔刺穿,可以使用穿 孔工具也可以使用干净的枪头。(“AJ”字样边为第一 孔) 8)将裂解后的样品加入第一孔。(具体操作详见 试剂盒说明) 9)准备好的样品盘放入仪器内,轻推,样品盘 会自动进入。

10) 根据起始样本选择合适的程序,点击开始即可。 11) 纯化完成后样品盘会自动退出,盖子盖好纯化产物放冰箱保存待用。 3. 软件功能介绍 ① 菜单: 设置新用户、设置开机密码等 ② 日期时间: 设置日期 时间 ③ 选择程序: 开始、导入、删除程序 ④ 工具: 自动校正、仪器初始化、磁力测试等仪器自检功能 ⑤ 一般设置: 用户管理、语言、更新等 ⑥ 版本信息

临床检验仪器第十章临床微生物检测仪器习题

第十章临床微生物检测仪器 一、名词解释 1.自动血培养检测和分析系统:主要由培养系统和检测系统组成。培养系统包括培养基、恒温装置和震荡培养装置。检测系统由计算机控制,对血培养实施连续、无损伤瓶外监测。通过自动监测培养基中的混浊度、pH 值、代谢终产物CO2 的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化,定性地检测微生物的存在。 2.检测导电性和电压的血培养系统:血培养基中因含有不同电解质而具有一定导电性。微生物在生长代谢的过程中可产生质子、电子和各种带电荷的原子团 (例如在液体培养基内CO2 转变成CO3- ) ,通过电极检测培养基的导电性或电压 可判断有无微生物生长。 3.应用测压原理的血培养系统:许多细菌生长过程中,常伴有吸收或产生气体现象,如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉汤中生长时,由于消耗培养瓶中的氧气而首先表现为吸收气体。而厌氧菌生长时最初均无吸收气体现象,仅表现为产生气体(主要为 CO2),因此可利用培养瓶内压力的改变检测微生物的生长情况。 4.采用光电检测原理的血培养系统:微生物在代谢过程中必然会产生终代谢产 物C O2,引起培养基p H 值及氧化还原电位改变。利用光电比色检测血培养瓶中某 些代谢产物量的改变,可判断有无微生物生长。 5.BacT/Alert自动血培养系统:系统在每个培养瓶底部装置一带含水指示剂的CO2 感受器,当培养瓶内有微生物生长时,其释放出的CO2 可渗透至感受器, 并与感受器指示剂上饱和水发生化学反应,产生游离氢离子使pH 值降低,感 受器上的指示剂由绿变黄。感受器上方的光发射二极管每 10min 发一次光投 射到感受器上,再由一光电探测器测量其产生的反射光。反射光强度传送至 微机后,会自动连续记忆并绘成生长曲线图,由微机分析判断阴性或阳性, 以此确定是否有微生物生长。 6.Bactec9000自动血培养系统:系统利用荧光法作为检测手段,其C O2 感受器上含有荧光物质。当培养瓶中有微生物存在时,产生的C O 可与感受器中的水发生反应 产生H + ,使pH 值降低,酸性环境促使感受器释放出荧光物质。从光发射二极管发射 的光激发荧光感受器而产生荧光。光电比色检测仪每10min 直接对荧光强度进行检测,此荧光强度随C O2 的产生量增多而增强。数据传输到计算机后,生长监测系 统根据荧光的线性增加或荧光产量的增加等特有标准,分析细菌的生长情况,最终判断阳性或阴性。 7.Vital血培养系统:系统采用同源荧光技术来监测微生物的生长。与培养基结合

临床检验仪器

临床检验仪器 临床检验仪器具有哪些特点? 答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。 临床检验仪器常用的性能指标有哪些? 答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高;可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的? 答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。 光学显微镜的性能参数有哪些?这些参数间的影响和制约关系如何? 答:显微镜的性能参数主要有放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮度、镜像清晰度、工作距离和机械筒长。显微镜的数值孔径与其放大率成正比u,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像亮度成正比。因此,使用较大数值孔径的物镜,其放大率和分辨本领较高,淡视场、景深、工作距离较小。 电阻抗法血细胞分析仪的细胞计数原理 将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中,将小孔管(也称传感器)插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液,并有一个内电极,小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后,位于小孔管两侧电极产生稳定电流,稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔向小孔管内部流动,使小孔感应区内电阻增高,引起瞬间电压变化形成脉冲信号,脉冲振幅越高,细胞体积越大,脉冲数量越多,细胞数量越多,由此得出血液中血细胞数量和体积值。 联合检测型血细胞分析仪的细胞计数原理 血球悬浮在电解液中,用一定的电流通过传感器的内外两个电极,由于血细胞电阻抗很大,当血细胞通过两个电极时,电极间阻抗瞬间增大,形成幅度与血细胞体积成正比的电脉冲,根据脉冲的大小可测出细胞的体积。 根据不同分类标准,可将自动生化分析仪分成哪些类别? 答:根据仪器反应装置结构不同,可分为连续流动式、离心式(严格讲也属于分立式范畴)、分立式和干片式。根据仪器的功能及复杂程度,可分为小型、中型、大型及超大型。根据同时可测定项目数量不同,可分为单通道和多通道,单通道每次只能检测一个项目,多通道可同时检测多个项目。根据自动化程度不同,可分为全自动化和半自动化。 简述血气分析仪的基本结构及工作原理。 答:血气分析仪的基本结构可分为电极、管路和电路三大部分。 其工作原理是:被测血液样品在管路系统的抽吸下,进入样品室内的测量毛细管中。测量毛细管的管壁上开有四个孔,孔内分别插有pH、PCO2和PO2三支测量电极和一支参比电极。其中pH和pH参比电极共同组成对pH值的测量系统。血液样品进入样品室的测量管后,管路系统停止抽吸,样品同时被四个电极所感测。电极产生对应于pH、PCO2和PO2三项参数的电信号。这些电信号分别镜放大、模数转换后送到微处理机。经微机处理系统处理、运算后,再分别被送到各自的显示单元显示或打印机打印出测量结果。测量系统的所有部件包括温度控制、管道系统的动作等均由危机或计算机芯片控制。 实时荧光定量PCR仪的技术原理是什么? 将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,在特定光激发下发出荧光,荧光信号的变化真实反应了体系中模板的增加,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。

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