检验自动化与信息化
医学检验自动化的概况
自动化:是机器设备或生产过程在不需要人工直接干预的情况下,按预期的目标实现测量、操纵等信息处理和过程控制的统称。
自动化技术:就是探索和研究实现自动化过程的方法和技术。它是涉及机械、微电子、计算机等技术领域的一门综合性技术。
【主要组成】:计算机、前处理、反应模块、监测计算模块、机械手模块
【功能】:随计算机与电子技术的发展:向通用化、全自动、微量化、组合式(模块)方向发展。
即:测定技术与反应类型增多、测试速度快、通道多、软件功能强、自动化程度高、样品与试剂用量少、人工干预少。
采用生物技术与机电控制技术有机融合,集生物技术、机械设计、精密仪器、工业控制、电机技术、传感技术、通讯技术、计算机技术于一体自动化分析仪工作站。
工作站:采用模块化设计的思路,实现良好的可扩展性。结合条码技术,再通过实验室信息系统与医院信息系统相连,可达到整个数据共享,乃至远程共享(如独立实验室)。
临床检验自动化仪器
【发展与现状】
20世纪末以来:自然科学基础学科与医学基础学科结合-电脑化、自动化、微量化
21世纪:现代信息网络技术(远程诊断)与系统生物工程(包括分子生物学)、临床医学结合。
最常用的临床检验,借助先进的检测技术,对来自离体的血液、尿液、粪便以及分泌物和排泄物等标本进行理学、化学、病原学和显微镜形态学的检查,以简便、快速的检测结果,基本满足临床医学检验筛检疾病的需求。
【发展历程与趋势】
自动化、一体化(全实验室自动化)、小型化、高通量。
全实验室自动化(Total Laboratory Automation, TLA):是指将临床实验室相互有关或互不相关的自动化仪器串联起来,构成流水线作业的组合,形成大规模的全检测过程的自动化。
体现在:①提升快速回报结果的能力。②将检验报告的误差减少到最小:来源于样本的50%,来源于分析的不到30%。③全面提升临床检验的管理。
实验室信息系统(Laboratory Information System,LIS):是指利用计算机技术及计算机网络,实现临床实验室的信息采集、存储、处理、传输、查询,并提供分析及诊断支持的计算机软件系统。
主要任务:是协助检验师对检验申请单及标本进行预处理,检验数据的自动采集或直接录入,检验数据处理、检验报告的审核,检验报告的查询、打印等。
LIS是HIS系统的一个重要的组成部分,其主要功能是将检验的实验仪器传出的检验数据经分析后,生成检验报告,通过网络存储在数据库中,使医生能够方便、及时的看到患者的检验结果.
显微镜
一些基本概念
1、分辨率(鉴别距离):显微镜能分辨的最小距离,用D表示。显微镜的鉴别距离越小,分辨率越高。
D=0.61λ / (n sinα)
D:分辨率、λ:光波的波长、N:介质折射率、α:物镜镜口角
提高分辨率的方法:
(1)增大物镜的数值孔径:在物镜和盖玻片之间充以n较大的油,如香柏油n =1.52,不仅使n 增大,而且使孔径角α也增大。
(2)用短波长的光照射:如紫外光显微镜,电子显微镜。
需要知道的几个重要的分辨率:人眼:0.2mm/250mm;光学显微镜:0.2μm;电子显微镜:0.2nm
称为孔径角。2、孔径角:由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线L和进入物镜中心光线OA之间的夹角
3、数值孔径:又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积,通常缩写为NA,即NA=n*sinβ
显微镜的数值孔径与其放大率成正比,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像亮度成正比。
4、放大率:在显微镜下所看到的物像和实际物体之间的大小比例叫显微镜的放大率或放大倍数。显微镜下物像的放大主要由物镜、镜筒长度、目镜所决定。适合的放大倍数决定于物镜的数值孔径,一船应为数值孔径500――1000倍。
显微镜的放大率(amplification)或称放大倍数,是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值,常记作M,M=maq
M是显微镜的总放大倍数;m是物镜的放大倍数;a是目镜的放大倍率,一般表达为明视距离(正常视力者为25cm)与目镜焦距之比;q为在双目显微镜中所增设的棱镜所起的放大倍数,一般取值为1.6倍。
5、视野:目镜中观察到的物像的一定范围叫视野。显微镜的总放大率小的时候所能看到的标本的范围大,而总放大率愈大所能看到的标本的局部愈小。所以说视野与显微镜的总放大率成反比。
6、工作距离:工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。在物镜数值孔径一定的情况下,工作距离短孔径角则大。数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。
物镜镜头标识
Manufacturer:制造商
Nosepiece Mounting Thread:(换镜转盘)安装螺纹
Flat-Field Correction:平场校正/
Aberration:字面意思是“偏差校正”,对于显微镜而言应该是“像差校正”
Lateral Magnification:横向放大率/
Numerical Aperture:数值孔径
Specialized Optical Properties:光学特性
Immersion Medium:浸没介质or浸泡
媒介(此为油浸)
Tube Length:镜筒长
Working Distance:工作距离
Magnification Color Code:放大率色码
Cover Slip Thickness:盖玻片厚度
Spring-Loaded Retraction Stopper:弹簧缓冲or弹簧收缩塞
光学显微镜
基本结构:
使用方法
一、低倍镜的使用:
1.对光:转动粗调节螺旋,降低载物台;旋转物镜转换器,使10倍物镜头对准镜台孔;然后升高聚光镜,打开光圈,将反光镜的凹面对准光源,直至视野明亮为止。
2.将要观察的切片放在载物台上,固定好,并将要观察的部位移至中央。
3.调焦距:旋转粗调螺旋,升高载物台,至物镜距玻片约0.5cm时,再缓慢降低镜台,直到看清图像为止。
4.调节两瞳孔间的距离:一边用双眼自目镜中观察,一边用双手握住两个目镜管,前后或左右移动,直到双眼看到一共同视野为止。
5.为使右眼图像更清晰,可轻轻转动微调螺旋,欲使左眼图像清晰,需旋转镜管长度调节环。
二、高倍镜的使用:
用低倍镜看清图像后,将要进一步放大的结构移至视野中央,一边从侧面观察,一边旋转物镜转换器,将高倍镜头对准镜台孔;升高聚光镜,将光线调节到最亮的程度;然后,稍微转动微调螺旋,即可观察到清晰的图像。
三、油镜的使用:
用低倍镜看清图像后,将所要观察的结构移至视野中央,在标本所要观察的部位滴一滴镜油,旋转物镜转换器,将油镜头对准镜台孔,使油镜头下端与镜油接触,然后,轻轻转动微调螺旋,即可看清物像。使用油镜时,应把聚光镜的光圈充分开大。用完油镜后,必须用擦镜纸蘸清洗剂,将镜头和玻片擦净。
四、显微镜的综合使用
实验时要把显微镜放在座前桌面上稍偏左的位置,镜座应距桌沿6~7 cm左右。
打开光源开关,调节光强到合适大小。
转动物镜转换器,使低倍镜头正对载物台上的通光孔。
将所要观察的玻片放在载物台上,使玻片中被观察的部分位于通光孔的正中央。
先用低倍镜观察(4X)。观察之前,先转动粗动调焦手轮,使载物台上升,物镜逐渐接近玻片。需要注意,不能使物镜触及玻片,然后,通过目镜观察,并转动粗调焦手轮,使载物台慢慢下降,直到看清物像。
如果像偏离视野,可慢慢调节载物台移动手柄。
瞳距调节:左右推拉目镜,使两目镜距离与自己两眼距离相等。
屈光度调节
高倍物镜观察:把物像中需要放大观察的部分移至视野中央。将高倍物镜转入光路(一般具有正常功能的显微镜,低倍物镜和高倍物镜基本齐焦,在用低倍物镜观察清晰时,换高倍物镜应可以见到物像,但物像不一定很清晰),微动调焦手轮进行调节。
根据需要调节孔径光阑的大小或聚光器的高低,使光线符合要求(一般将低倍物镜换成高倍物镜观察时,视野要稍变暗一些,所以需要调节光线强弱)。
观察完毕,应先将物镜镜头从通光孔处移开,并检查物镜是否沾水沾油,检查处理完毕后即可装箱。
维护
1、显微镜要轻拿轻放。
2、严禁将表面有水的载片放到显微镜上。
3、从低倍转入高倍应能看到图象,否则需转入低倍另行调节、查找原因。
4、每次使用完毕后将将光源亮度调至最低。
5、临时不用显微镜只需将光源亮度调至最低而无需关闭。忌频繁开关显微镜电源。
6、镜头脏污只能用专用工具经专门程序清洗。
7、使用完毕等灯箱冷却后罩上防尘罩或放入箱内,并存于干燥无尘处。
【以上内容均可能在《检验医学专业实验IV》笔试的考卷中出现】
生化分析仪
自动生化分析仪器(automatic biochemical analyzer),是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理和打印报告,以及实验后的清洗等步骤自动化的仪器。
【特点】灵敏、准确、快速、节约、标准化
【分类】
1、根据同时可测定项目数量分:单通道/多通道~
2、根据仪器自动化程度分:全自动化/半自动化~
3、根据仪器的功能及复杂程度分:小型/中型/大型/超大型~
4、根据仪器反应装置结构不同连续流动式/离心式/分离式/干化学式~
一、简述分立式自动生化分析仪的基本结构
包括两个系统:样品处理系统和检测系统。①样品处理系统包括:样品架、试剂仓、样品和试剂取样单元、搅拌系统。②检测系统包括:光源、分光装置、比色杯、恒温装置、清洗装置、信号转换与传输装置。
二、简述什么是袋式分立式自动生化分析仪
其试剂装在均匀透明的塑料夹中形成特殊的测试管,一袋一检测。测试袋被连续传系统送到分析区,在混合器处经机械敲击,样品和试剂充分混合反应,在比色计处经特殊装置的作用,测试袋形成光径1cm的比色杯,检测后的废测试袋被排出。最后的结果由计算机系统报告。【特点】该类仪器污染少、灵活、准确,分析项目可达60项。但测试袋是一次性的。
干化学式自动生化分析仪
【测定方法】
多为差示电位法(见下图)
以及反射光度法(见下图)
分立式/连续流动式自动生化分析仪在结构上有哪些区别?
①、前者各个样品和试剂在各自的试管中起反应,后者是在同一管道中起反应
②、前者采用加样器和加液器组成的稀释器来加样和加试剂,而不用比例泵。
③、前者一般没有透析器。恒温器必须能容纳需保温的试管和试管架,所以比管道式分析仪的体积要大。
自动生化分析仪器的基本结构
一、样品处理系统,包括:样品装载和输送装置、闭盖穿刺、开盖闭盖装置、试剂仓、样品和试剂取样单元、搅拌系统
二、检测系统,包括:光源、分光装置、比色杯、恒温装置、清洗装置、信号转换与传输装置。
三、计算机系统,包括:微处理器和主机电脑、显示器、系统及配套软件、数据接口。
一些小知识点
1、自动生化仪的光源:
卤素灯,工作波长为325nm~800nm,使用寿命较短。
氙灯,工作波长为285nm~750nm ,寿命长。
2、连续流动式自动生化分析仪中气泡的作用是防止管道中的:交叉污染
3、连续流动式自动生化分析仪可分为:空气分段系统式和试剂分段系统式
4、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪
5、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分析仪
6、自动生化分析仪自动清洗样品探针的主要作用是:防止交叉污染
7、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头
8、干化学式自动生化分析仪所用的光学系统是:反射比色计
9、干化学式自动生化分析仪的化学试纸片中接受样品的结构是:塑胶层。
10、离心式自动生化分析仪的待测样品在离心力作用下,在各自反应槽内与试剂混合并完成化学反应,这种测定模式称为:同步分析。
11、自动生化分析仪最常用的温度是:37℃
12、自动生化分析仪比色杯的材料多采用:石英玻璃
13、大多数生化分析仪的光径是:0.5~1 cm
14、大多数生化分析仪获得单色光用:蚀刻式光栅
离心机
离心,是利用旋转运动的离心力以及物质沉降系数的差异或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。颗粒沉降的速度取决于离心机转速、颗粒的质量、大小和密度。应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现该技术的仪器是离心机。相关概念
转速(rpm):每分钟转过的转数
角速度(ω):每秒钟转过的弧度数
↓两者的关系
离心机最高转速:标在离心机上的最高转速
转头最高转速:标在转头上的最高转速
注意:同一转头在不同型号离心机上最高转速有可能是不同的。
↓相对离心力(RCF):是离心力与重力的比值
↓相对离心力与转速的换算:
分类(按转速)
低速离心机:最大转速在10000rpm以内,RCF在15000g以内,主要用作血浆、血清、尿液、胸腹水及脑脊液等有形成分的分离。
高速离心机:最大转速为20000~25000rpm,最大RCF为89000g,主要用作DNA、RNA的分离及对各种生物细胞、无机物溶液、悬浮液和胶体溶液的分离、浓缩、提纯样品等。
超速离心机:转速可达50000~80000rpm,RCF可达51000g以内,主要用作亚细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等分离。
结构
转动装置、速度控制系统、真空系统、温度控制系统、安全保护装置
使用的注意事项
1.使用各种离心机时,必须事先平衡离心管和其内容物,要对称放置。
2.装载溶液时不能装的太多,以防离心时甩出,造成转头不平衡、生锈或被腐蚀。
3.离心时应随时观察离心机上的仪表是非正常工作,如有异常声音应立即停机检查,及时排除故障。
4.做好离心机转头的清洗、消毒等保护工作。
5.对于低温离心样品时可将转头、离心管、样品等置冰箱预冷后再离心。
紫外-可见光分光光度计
分光光度计:指能够从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器。
光的吸收定律(朗伯-比尔定律):当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度与液层厚度b及溶液浓度c的乘积成正比。
721型分光光度计波长校正(镨钕滤光片校正法):
1、先将波长盘调到580nm处,观察仪器射出的光应为黄色,如若不是调节准直镜最左侧波长校正螺丝,使光为黄色。
2、在比色皿架上垂直放上镨钕滤光片,然后从520nm向530nm处慢慢转动波长盘,正常应在529±3nm处有一个吸收峰。
血细胞分析仪
血细胞分析仪(BCA):是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液学自动分析仪(AHA)。ABCC代表早期的低档次BCA,AHA外延过大。
常见血细胞分析仪品牌:库尔特、希思美康、迈瑞、雅培、光电、拜耳
血液分析仪的检测原理
1、电阻抗法(库尔特原理,三分群血细胞分析仪):
悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液是非导电的颗粒,当体积不同的血细胞(或类似颗粒)通过计数小孔时,可引起小孔内外电流或电压的变化,形成与血细胞数量相当、体积大小相应的脉冲电压,从而间接区分出血细胞群,并分别进行计数。
2、VCS技术中,V代表体积。C代表电导。S代表光散射(五分群血细胞分析仪),
电导性(conductivity,C) :高频电磁探针,测量细胞内部结构,细胞内核浆比例。
体积(volume,V) :电阻抗原理测定细胞体积和数量。
光散射(scatter,S):细胞内粗颗粒的光散射强度要比细颗粒更强。
它采用三个独立的能量来源在流动池内检测白细胞,将这三者结合,可以将白细胞分为五群(三种粒细胞和淋巴、单核细胞),每个细胞接受三维分析,定义到三维散点图的相应位置。
血细胞分析仪的基本结构:机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机、键盘控制系统。
1、机械系统:包括机械装置(如全自动有进样针、分血器、稀释器、混匀器、定量装置等)和真空泵,以完成样本的定量吸取、稀释、传送、混匀,以及将样本移入各种参数的检测区。
2、电学系统:包括主电源、电压元器件、控温装置、自动真空泵电子控制系统,以及仪器的自动监控、故障报警和排除等。
3、血细胞检测系统:国内常用的血细胞分析仪,使用的检测技术可分为电阻抗检测技术和光散射检测技术两大类
①电阻抗检测技术:由检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成
②流式光散射检测技术:由激光光源、检测装置和检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。
4、血红蛋白测定系统由光源、透镜、滤光片、流动比色池和光电传感器等组成。
5、计算机控制系统
哪些情况需要显微镜复检,及其意义
1、需要镜检的标准:目前即使是最先进的血细胞分析仪也不能完全取代人工镜下白细胞分类。因此,各实验室应根据所使用的仪器型号、性能和实验室条件,制定出手工复检方案,建立涂片复检制度。只有在WBC、Hb、Plt均在正常范围内,细胞散点图和直方图均正常,仪器无报警显示情况下,仪器分类结果才可作为筛选数据报告。
2、通过镜检达到的目的:通过显微镜检查,核实仪器出现的各类报警是否真实存在,有无原始及幼稚细胞,有无血细胞形态异常,有无小红细胞、红细胞碎片、微小血凝块、巨大血
小板、血小板聚集等,并估计白细胞、血小板数量,必要时对结果进行校正后才能发出报告(如有核红细胞存在时对白细胞计数进行校正)。
血液凝固分析仪
血液凝固分析仪(ACA)是采用一定分析技术,对血栓与出血有关成分自动检测的临床常规检验仪器。
在血栓/出血实验室中最基本的设备就是血液凝固分析仪(简称血凝仪)
血凝仪的测检测原理
主要检测方法有:凝固法、底物显色法、免疫学法、干化学法等。
1、凝固法原理:是通过检测血浆在凝血激活剂作用下发生一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,再由计算机分析所得最终结果,称生物物理法。按测量原理分为电流法、超声分析法、光学法和磁珠法四种。
①光学法(比浊法):是根据血浆凝固过程中浊度的变化,导致光强度变化来测定相关因子
②磁珠法原理:是根据磁珠运动的幅度随血浆凝固过程中黏度的增加而变化来测量凝血功能的方法。根据仪器对磁珠运动测量原理的不同,又可分为光电探测法和电磁珠探测法。
2、产色底物法原理:实质为光电比色原理,是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性,也称生物化学法
3、免疫学方法原理:以纯化的被检物质为抗原,制备相应的抗体,然后利用抗原抗体反应对被检物进行定性或定量测定。全自动血凝仪多使用免疫比浊法。
光学法与磁珠法原理主要区别
1、光学法原理:是用光探测凝固过程中血浆浊度的(吸光度)变化来判断终点;
2、光电磁珠法原理:是用光探测钢珠振幅衰减程度来判断终点;
3、双磁路磁珠法原理:是用电磁探测钢珠振幅衰减程度来判断终点。
血凝仪的基本结构
1、半自动血凝仪的基本结构:主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样器、检测系统(光学、磁场)及微机组成
2、全自动血凝仪基本结构:包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等
两者的优缺点比较:
1、半自动血凝仪:手工加样加试剂;操作简便;应用检测方法少;价格便宜;速度慢;测量精度好于手工,但低于全自动
2、全自动血凝仪:自动化程度高;检测方法多;通道多,速度快;测量精度好
流式细胞仪
流式细胞术(FCM)
【定义】:以流式细胞仪为主要工具,对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒细胞的各种成分进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。
FCM是诸如生物学、生物技术、计算机科学、流体力学、激光技术、高等数学、临床医学、分子生物学、有机化学和生物物理学等到学科知识综合运用的结晶。
现代流式细胞术,更是由于结合了单克隆抗体技术、定量细胞化学和定量荧光细胞化学的应用,使其在生物学、临床医学、药物学等等众多研究领域的应用有了更加突飞猛进的发展。【结构及作用】
①流动室及液流驱动系统——保证细胞单个通过检测区
②激光光源及光束形成系统——使检测细胞发出继发荧光
③光学系统——规范散射光、继发荧光
④信号检测、存贮、显示、分析系统——使检测结果完美的表达出来
⑤细胞分选系统——保证细胞的分选功能
细胞分析原理
1、样品进入流动室:将悬浮分散的单细胞悬液,经特异荧光染料染色后,放人样品管。在气体压力的作用下,悬浮在样品管中的单细胞悬液形成样品流垂直进入流式细胞仪的流动室,沿流动室的轴心向下流动。
2、鞘液的作用:流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕细胞悬液的鞘液流,鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆柱流束,自喷嘴的圆形孔喷出,与水平方向的激光束垂直相交,相交点称为测量区。
3、信号的产生与接收:染色的细胞在测量区受激光照射后发出荧光,同时产生光散射。这些信号分别被光电倍增管和光电二极管接收,经过计算机储存、计算、分析这些数字化信息,就可得到细胞大小和核酸含量等指标。
细胞分选原理
当某类细胞的特性与要分选的细胞相同时,流式细胞仪就会在这类细胞形成液滴时给含有这类细胞的液滴充以特定的电荷,带有电荷的液滴向下落入偏转板间的静电场时,依所带电荷的符号分别向左偏转或向右偏转,落入指定的收集器内。
【信号(非荧光信号)】
前向散射光(FS):反映颗粒大小。
侧向散射光(SS):反映颗粒内部结构复杂程度、表面的光滑程度~
【常用荧光素】
PI、PE、FITC、藻红蛋白-花青素PC5、叶绿素蛋白PerCP、藻红蛋白-德克萨斯红ECD、花青素5Cy5(与APC一样,要求激发光为630nm左右)
【主要测试和研究功能】分析细胞周期时相、细胞DNA、RNA含量、细胞凋亡及其相关蛋白表达含量、细胞表面抗原、细胞亚型、细胞分选等。
1、免疫学:淋巴细胞及其亚群分析、淋巴细胞功能分析、免疫分型、肿瘤细胞的免疫检测。机体免疫状态的监测、免疫细胞的系统发生及特性研究等
2、血液学:血液细胞的分类、分型,造血细胞分化的研究;检测母体血液Rh(+)或抗D 抗原(+)细胞,了解胎儿是否可能因Rh血型不和而发生严重溶血;检测血液中循环复合物可以诊断自身免疫性疾病;血液病及淋巴瘤的发病机制
3、细胞生物学:细胞周期分析(细胞周期、DNA倍体、细胞表面受体和抗原表达的相互关系);进行免疫活性细胞的分型与纯化、分析淋巴细胞亚群与疾病的关系;染色体、精子和精细胞研究
4、肿瘤学:DNA倍体含量测定;对白血病、淋巴瘤、肺癌等多种实体瘤细胞进行检测;研究各种肿瘤抗原、肿瘤蛋白、致癌基
5、艾滋病:采用三参数荧光标记技术可对T淋巴细胞及其亚群进行分析,并通过动态监测T细胞亚群区别HIV感染者和AIDS发病者
6、自身免疫性疾病:在强直性脊柱炎时,FCM可利用HLA-B27/HLA-B7双标记抗体检测HLA-B27阳性细胞,又可排除交叉反应
7、药物学:检测药物在细胞中的分布和研究药物的作用机制,筛选新药。
核酸扩增仪
【原理】PCR技术的本质是核酸体外扩增
加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在Taq DNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复“变性→退火→引物延伸”过程至25~40个循环,呈指数级扩大待测样本中的核酸拷贝数。
【临床应用】感染性疾病的分子诊断和研究、遗传性疾病的分子诊断和研究、恶性肿瘤的分子诊断和研究、PCR扩增仪在移植配型中的应用、在法医学,卫生安全和分子生物学其他领域的应用。
定量PCR是目前常用的一种PCR技术,基本原理?该方法与常规方法比,哪些优缺点?采用荧光染料SYBR Green Ⅰ法进行定量PCR,可能会产生哪些问题?这些问题如何解决?【原理】:通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件对结果进行分析,计算待测样品的初始模板量。
【优点】:①实时在线监控;②降低反应的非特异性;③结果分析更快捷方便;④降低污染几率
【缺点】:使用荧光染料由于没有序列特异性,可结合到任何dsDNA上,必须区分目标信号和假信号。
【解决】:即进行溶解曲线分析。
PCR与体内DNA生物合成的比较
尿液自动分析仪器
尿液干化学法检测
【原理】:尿液的化学成分使多联试带上的试剂模块发生颜色变化,颜色深浅与尿液中化学成分的浓度成正比。当试带进入尿液干化学分析仪比色槽时,各试剂模块依次受到仪器光源照射并产生不同的反射光,仪器接受不同强度的光信号后,将其转换为相应的电信号,经微电脑处理,计算出各检测参数的反射率,与标准曲线比较校正,最后以定性或半定量方式自
动输出结果。
【公式】:R(%)=(Tm*Cs)/(Ts*Cm)
【组成】:
1.机械系统
2.光学系统:(1)光源(2)单色装置(3)光电检测器
3.电路系统: 将电信号放大,经模/数转换后送微处理器(computer unit, CPU)处理,计算最终检测结果。然后将结果输出到屏幕显示并打印。
4.微处理器( CPU )
【检测参数及其原理】:
【结构】
多联试带的多层膜结构:①尼龙膜;②绒制层(包括试剂层和碘酸盐层);③吸水层;④塑料底层
【注意事项】
1.仪器必须定期用标准色板校正。
2.用尿液质控液做好室内及室间质控试验。
3.所用的试剂带必须优质稳定。
4.尿标本必须要新鲜。
5.注意干化学法与湿化学法之间的差异。
6.尿干化学测定结果受多因素影响,分析结果时一定要结合临床。
尿沉渣(urinary sediment):是指尿液排出体外经离心沉淀,在显微镜下看到的有形成分,如:来自肾脏或尿道脱落、渗出的细胞和肾脏发生病理改变形成的各种管型、结晶、感染的微生物和寄生虫等。
尿沉渣检查(Examination of urinary sedimends):是临床检验常规检查项目,由传统的离心显微镜检查法发展到了非离心尿沉渣流式细胞仪检测法,提高了对尿有形成分识别能力,新的尿沉渣远程会诊系统问世将极大地拓宽尿沉渣检验的内容和范围。
【常用检查方法】
①、UF-100流式细胞仪法:采用流式细胞原理、电阻抗、电导率等复合技术相结合,尿中有形成分被两种荧光染料染色,经氩激光照射后产生不同的荧光强度和散射光强度同时电阻不同。
优点:速度快、灵敏度高、自动化程度高、重复性好、备有质控用的参考粒子易于标准化。缺点:不能检出滴虫、胱氨酸、脂肪滴或药物结晶
②、尿沉渣工作站检查法:带摄像头的显微镜、定量沉渣计数池与电脑三位一体连接,全自动计算机控制,从编号到打印报告一体化的流式作业。
优点:染色效果好、图像清晰、精度高、效率高,减少实验室污染、可联机网络化、还可用于多种体液实验。
缺点:细胞数太多不易计数。
临床免疫检验仪器
酶免疫技术:是将酶高效催化反应的专一性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种免疫标记检测技术。
是将酶与抗原或抗体结合成酶标记结合物(酶标抗原/抗体),酶标结合物既保留了抗原/抗体的免疫学活性,同时也保留了酶对底物的催化活性。在酶标记抗体(抗原)与抗原(抗体)的特异性反应完成后,加入酶作用的相应底物,通过酶催化底物产生显色反应,对抗原或抗体进行定位、定性或定量的测定。
常用的酶:辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(ALP)、β-半乳糖苷酶(β-Gal)
常用的底物:HRP有邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)。ALP为对-硝基苯磷酸酯(p-NPP)。β-Gal为4-甲基伞形酮-β-D半乳糖苷(4MUG)
常用的标记方法:交联法(戊二醛~)和直接法(改良过碘酸钠法)
一、酶标仪
一般简单的酶标仪只有读数、数据处理的功能,还需要配置孵育箱,洗板机,人工操作步骤繁琐。
全自动酶联免疫系统集加样品、加试剂、孵育、震荡、洗板和酶标仪功能于一体。
二、自动酶免疫分析系统:
在酶标仪的基础上再配置:加样系统、温育系统、洗板系统、判读系统、机械臂系统、液路动力系统、软件控制系统
【优点】
1、自动化程度高:前后处理一体化设计,减少人与样品的接触机会,降低污染。能进行各种自动安全检测。
2、稳定:只要避免人为操作错误,可连续数年良好工作。
3、准确:不存在交叉污染,确保结果准确。
4、高速:加注、读板速度快
5、扩展性:软件可升级,样本量增加,可联机使用
6、用户做主更多:开放式试剂;WINDOW操作系统;中/英/日自选操作界面;自定义编程;自动/自定义时间表;无限存档。
发光免疫分析(CLIA):是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。
【优点】:消除放射性危害/ 无半衰期限制,试剂稳定性、有效期延长/ 实现连续、动态、重复测定/ 适合于复合标记系统多指标测定/ 操作简单,反应快,易实现自动化/ 灵敏度和线性范围超过以往技术。
临床上以化学发光免疫分析、微粒子化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析三种技术最为常用。
一、全自动化学发光免疫分析系统:采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。
1、分析方法
该类分析技术有两种方法:竞争法(测定小分子抗原物质)、夹心法(测定大分子抗原物质)2、仪器组成:一般由主机和微机两部分组成:
(1)主机部分:包括
原材料配备部分:反应杯、样品盘、试剂盘、纯净水、清洗液、废水在机器上的贮存和处理装置。
液路部分:过滤器、密封圈、真空泵、管道、样品及试剂探针。
机械传动部分:传感器、运输轨道。
光路检测部分:光电倍增管和线路控制板。
(2)微机系统:
功能:程控操作、指示判定、数据处理、故障诊断、自动监视
二、全自动微粒子化学发光免疫系统:采用微粒子化学发光技术对人体内的微量物质以及药物浓度进行定量测定,具有高度的特异性、高度的敏感性和高度的稳定性等特点。
1、分析方法:采用磁性微粒作为固相载体,以碱性磷酸酶作为发光剂,扩大测定的范围。以免疫测定方法为基础:竞争法/夹心法。
过程:抗原抗体结合→加入碱性磷酸酶标记的抗体→形成固相包被复合物→在电磁场中进行2~3次洗涤分离→加入底物→通过光量子阅读系统记录发光强度→在标准曲线上计算出待测抗原的浓度。
2、仪器组成:微电脑控制系统、样品处理系统、实验运行系统、中心供给和控制系统
三、全自动电化学发光免疫分析系统:
1、分析原理与过程:
待测标本与包被了抗体的顺磁性微粒和发光剂标记的抗体共同温育(形成磁性微珠包被抗体—抗原—发光剂标记抗体复合物)→吸人流动室,缓冲液冲洗→磁性微粒流经电极表面时,被电极下的磁铁吸引,而游离的发光剂标记抗体被冲洗走→同时在电极加电压,启动电化学发光反应,使发光试剂标记物三氯联吡啶钉[Ru(bpy)3]2+TPA在电极表面进行电子转移,产生电化学发光
光的强度与待测抗原的浓度成正比。
2、分析方法:
应用三种抗原抗体反应方法:抑制免疫法(检测小分子量蛋白抗原)、夹心免疫法(检测大分子量物质)、桥联免疫法(检测抗体如IgG、IgM)
另:钉标记用于DNA/RNA探针分析
3、仪器组成:由样品盘、试剂盒、温育反应盘、电化学检测系统及计算机控制系统组成
化学发光免疫技术可分为均相反应(不需分离)和非均相反应(需要分离)
非均相分离方式有:固相分离、过滤分离、珠式分离、顺磁性颗粒分离。
【化学发光剂】
直接化学发光剂:鲁米诺和吖啶酯(常用)
间接化学发光剂:鲁米诺及其衍生物、AMPPD、酞菁/二甲基噻吩衍生物/Eu螯合物
【标记技术】
常用标记方法:碳二亚胺缩合法、过碘酸钠氧化法、重氮盐偶联法
影响标记的因素:发光剂的选择、被标记蛋白质的性质、标记方法的选择、原料比、标记率、温度、纯化与保存。
发光免疫技术的临床应用
主要应用于以下方面的检测:甲状腺系统、性腺系统、血液系统、肿瘤标记物、心血管系统、血药浓度、感染性疾病、其他检测(Ig、血清皮质醇、尿皮质醇、尿游离脱氧吡啶等)
临床微生物检验仪器
自动血培养仪器:主要功能是检测标本中是否有微生物存在,计算机自动扫描进行连续监测,当微生物生长代谢导致某些生长指数超标时,仪器自动报警提示有细菌生长。
【原理】通过自动监测培养基(液)中的混浊度、pH值、代谢终产物CO2的浓度、荧光标记底物或代谢产物等的变化,定性地检测微生物的存在。
【基本结构与功能】培养瓶、培养仪(包括恒温/振荡培养/监测装置)、数据管理系统
【特点】培养基营养丰富;以连续恒温振荡方式培养;培养瓶多采用不易碎材料制成;采用封闭式非侵入性的瓶外监测方式;自动连续监测;培养瓶采用双条形码技术;培养瓶可在随时放入培养系统,进行跟踪检测;数据处理功能较强;设有内部质控系统;用途广泛。
自动微生物鉴定及药敏分析系统:主要功能是将培养基上分离的可疑致病菌配制成纯菌液,放入自动微生物鉴定及药敏分析系统中,通过计算机自动扫描、读数、分析、最后报告鉴定及药敏结果。
【原理】自动鉴定采用微生物数码鉴定原理,药敏分析的实质是微型化的肉汤稀释试验
1、数码鉴定,是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码,建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并
将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。
2、微量稀释,是指将抗生素微量稀释在条孔或条板中,加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育,仪器每隔一定时间自动测定细菌生长的浊度,或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解,观察细菌的生长情况。得出待检菌在各药物浓度的生长斜率,经回归分析得到最低抑菌浓度MIC值,并根据CLSI标准得到相应敏感度:敏感“S”、中介“I”和耐药“R”。
【基本结构】测试卡/板、菌液接种器、培养和监测器、数据管理系统
【特点】自动化程度较高、功能范围大、检测速度快、系统具有较大的细菌资料库、使用一次性测试卡或测试板、数据处理软件功能强大、软件和测试卡(板)大多可不断升级更新、设有内部质控系统。
简述临床微生物鉴定仪在细菌鉴定中的优点
1、快速:最快的6-8小时就能发报告
2、简便:操作设计简单,鉴定和药敏同时进行,省工省力
3、可靠的专家系统:能根据鉴定的细菌结果对药敏结果进行适当的修正,为临床提供可靠的培养报告,或提醒工作人员对鉴定结果、药敏结果进行重复试验,修正结果或发现罕见的耐药表型。
临床检验仪器复习题及 答案 集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)
《临床检验仪器学》 一、选择题 1.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射 2、VCS白细胞分类技术不包括:细胞化学染色技术 3.毛细管粘度计不适合检测:全血 4、尿液分析仪的测试项目中,与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖 5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理: 光散射和细胞化学染色 6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比 7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光 8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 11、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱 13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律 14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清蛋白 15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗 16、BacT/Alert血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳
17、密度梯度离心法又称为:区带离心法 18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度区带离心法 19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度 20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感程度取决于:电极的玻璃膜 22、PCO 电极属于:气敏电极 2 23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极 24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器 26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪 27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分析仪 28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头 29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪 30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板 31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR仪 32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪
第一章概论 一、名词解释: 1.灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器时所产生的响应信号值变化大小的反应能力,它反映仪器能够检测的最小被测量。 2.误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(即真值)之间的差异称为误差,误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(即输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围即为噪音。 4.最小检测量:检测仪器能确切反映的最小物质含量。最小检测量也可以用含量所转换的物理量来表示。如含量转换成电阻的变化,此时最小检测量就可以说成是能确切反应的最小电阻量的变化量了。 5.精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 6.可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下执行其功能的能力它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 7.重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 8.分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输出量)的最小值。 9.测量范围:在允许误差极限内仪器所能测出的被检测值的范围。 10.线性范围:输入与输出成正比例的范围。也就是反应曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围 11.响应时间:表示从被检测量发生变化到仪器给出正确示值所经历的时间。 12.频率响应范围:为了获得足够精度的输出响应,仪器所允许的输入信号的频率范围。 第四章紫外——可见分光光度计 1.分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器称为分光光度计。它具有分析精密度高、测量范围广、分析速度快和样品用量少等优点。根据所使用的波长范围不同可分为紫外光区、可见区、红外光区以及万用(全波段)分光光度计等。 2.吸收光谱:光照射到物质时,一部分光会被物质吸收。在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。每一种物质都有其特定的吸收光谱,因此可根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量。 3.朗伯-比尔定律:是比色分析的基本原理,表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的定量关系。当用一束单色光照射吸收溶液时,其吸光度 A 与液层厚度 b 及溶液浓度的乘积 c 成正比,此即朗伯-比尔定律。数学表达式为: A=kbc。它适用于分子吸收和原子吸收。 4.摩尔吸光系数(ε):摩尔吸光系数表示在一定波长下测得的液层厚度为 1cm, 溶液浓度 c 为1mol/L 时的稀溶液吸光度值。吸光系数与入射光波长、溶液温度、溶剂性质及吸收物质的性质等多种因素有关。当其它因素固定不变时,吸光系数只与吸收物质的性质有关,可作为该物质吸光能力大小的特征数据。 6.单色器:将来自光源的复合光分解为单色光并分离出所需波段光束的装置,是分光光度计的关键部件。主要由入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜组成。 7.吸收池:又称为比色皿、比色杯、样品池或液槽等,是用来盛放被测溶液的器件,同时也决定着透光液层厚度,可用塑料、玻璃、石英或熔凝石英制成。在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作;在紫外区,需用能透紫外线的石英或熔凝石英制作。 8.光电管:利用碱金属的外光电效应制成的光电转换元件。按电极结构不同可分为中心阳极式、中心阴极式和平行平板式几种,按管内充气与否又可分为真空光电管与充气光电管两种。光电管的质量取决于阴极灵敏度、线性范围、最大、最小可测能量等几个重要技术指标。 9.光电倍增管:利用外光电效应与多级二次发射体相结合而制成的光电元件,由一个表面涂有光敏材料的阴极和若干个(通常为 9 个~13 个)二级电子发射极(打拿极)组成,其灵敏度比光电管高 200 多倍。有三个重要指标:波长效应、灵敏度和噪声水平。 10.波长准确度:指仪器波长指示器上所示波长值与仪器此时实际输出的波长值之间的符合程度。可用二者之差来衡量分光光度计的准确性。 11.波长重复性:是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时,峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来作为衡量分光光度计的准确性指标之一。 12.光度准确度:指仪器在吸收峰上读出的透射率或吸光度与已知真实透射率或吸光度之间的偏差。该偏差
一选择题 (1)A型题(单项选择题,每题1分,共30分) 1.具有吞噬传递免疫信息在特异免疫中起重要作用的细胞是() A中性粒细胞 B 单核细胞 C淋巴细胞 D 嗜碱性粒细胞 E红细胞 2.冲液后,计数池每个大格的体积是() A 0.1u l B 0.01 ul C 1.0 ul D 0.0001 ul 3.血片经过瑞氏染色后,成熟红细胞呈鲜红色,白细胞核染色呈浅灰色, 其原因是PH为() A 5.4 -6 B 7.4-8 C 6.5-7 D 8.2-8.6 E 8.7-9.4 4.三种粒细胞区别的要点是() A细胞大小 B特异性颗粒 C染色质结构 D浆颜色 E核浆比例 5.下列除了哪种疾病外,均是中性粒细胞增加的疾病() A猩红热 B尿毒症 C 流行性感冒 D 铅中毒 E化脓性阑尾炎 6.嗜酸性粒细胞一般分叶核常为() A一叶 B二叶 C三叶 D四叶 E 五叶 7.在血液中,中性粒细胞杆状核以上幼稚细胞增多称为() A核左移 B核右移 C中毒颗粒 D 逆行性变化 E杜勒氏小体 8.一种血红蛋白衍生物是棕红色,在波长540nm处,有一较宽的吸光带, 它是() 9.大面积烧伤患者红细胞和血红蛋白相对增高的原因是() A红细胞生成增多 B红细胞寿命延长 C 红细胞破坏减少 D 血液浓缩 E白细胞生成减少
10.诊断铅中毒的最佳指标是() A.网织红细胞增多B低色素红细胞增多 C 靶红细胞增多D 点彩红细 胞增多 11使血沉明显加快的原因是() A红细胞数量增多 B 大红细胞贫血 C 镰刀形红细胞贫血 D 球形红细胞贫血 E 红细胞凝集成团 12.关于魏氏血沉发测定下列哪项是错误的() A.深静脉血1.6ml B 用血沉管吸抗凝血至零刻度 C与0.4ml抗凝剂混匀 D垂直立于血沉架上 E 室温静置半小时 13.关于血沉的说法下列哪项是错误的() A.正常男性血沉生理变化不大 B 新生儿血沉加快C妇女月经期血沉可 加快 D 年龄超过50岁的老年人血沉可加快E 高原地区的居民血沉低于平原地区的居民 14.欲中和A型血清的天然抗体,可加哪一种唾液() A A型分泌型唾液 B B型分泌型唾液 C O型分泌唾液 D A B型分 泌唾液 E 任何唾液 15.用标准血清鉴定血型,下列哪项的结果应判断为A型血() A与抗A不凝,抗B凝抗A+B凝 B与抗A凝,抗B不凝抗A+B凝 C 与抗A凝,抗B凝抗A+B不凝 D与抗A不凝,抗B不凝抗A+B凝 E与抗A不凝,抗B凝抗A+B不凝
《临床检验仪器学》 一、选择题 I.流式细胞仪检测细胞的大小的信号是.:前向角散射2、VCS白细胞分类技术不包括: 细胞化学染色技术3.毛细管粘度计不适合检测:.全血4、尿液分析仪的测试项目中, 与酸碱指示剂无关的项目是:尿葡萄糖5.血细胞分析仪中对网织红细胞的检测原理:光散射和细胞化学染色6、关于光学显微镜的分辨率,下列有误的是:与照明光的波长成反比7、流式细胞仪中的光电倍增管接收:荧光8、前向角散射可以检测:被测细胞的大小 9、流式细胞仪测定的标本,不论是外周血细胞,还是培养细胞,首先要保证是:单细胞悬液 10、电阻抗型血细胞分析仪的缺点是只能将白细胞按体积大小分为:三个亚群或二个亚群 II、有关血细胞分析仪的叙述不正确的是:高档次血细胞分析仪白细胞的分类计数很准确 12、双磁路磁珠法中,随着纤维蛋白的产生增多,磁珠的振幅逐渐:减弱13、毛细管黏度计工作原理的依据是:泊肃叶定律14、尿蛋白定性干化学检测法只适用于检测:清 蛋白15、流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理是:应用流式细胞术和电阻抗16、BacT/Alert 血培养瓶的底部含一个传感器,用于检测:二氧化碳17、密度梯度离心法又称为:区带离心法18、根据样品组份的密度差别进行分离纯化的分离方法是:等密度 区带离心法19、等密度区带离心法对于密度梯度液柱的要求是:液柱顶部的密度明显小于样品组份的密度,液柱底部的密度明显大于样品组份的密度20、表示从转轴中心至试管最内缘或试管顶的距离的转头参数是:Rmin 21、pH玻璃电极对样本溶液pH的敏感 程度取决于:电极的玻璃膜22、PCO2电极属于:气敏电极23、临床上大量使用的电解质分析仪,测量?样本溶液中离子浓度的电极是:离子选择电极24、通常血气分析仪中毛细管pH玻璃电极的pH测定范围是:0?10 25、为将血气分析仪气路系统所提供的气体饱和湿化,需经过的装置是:湿化器26、世界上最早的自动生化分析仪是:管道式自动生化分析仪27、具有空气分段系统的自动生化分析仪是:连续流动式自动生化分 析仪28、离心式自动生化分析仪特有的关键部件是:转头29、自动分析仪中采用“顺序分析”原理的是:连续流动式自动生化分析仪30、微孔板固相酶免疫测定仪器(酶标仪)的固相支持是:PVC微孔板31、以空气为加热介质的PCR仪是:离心式实时定量PCR 仪32、能在细胞内进行PCR扩增的PCR仪为:原位PCR仪33、PCR反应正确过程应为:变性一退火一延伸34、一步就可以摸索出最适合反应条件的PCR仪为:梯度PCR仪35、PCR基因扩增仪最关键的部分是:温度控制系统36、试剂空白变化速率:是在反应温度下试剂自身吸光度随时间的变化37、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升级。 38、全自动血凝仪中的免疫学方法,通常选用:免疫比浊法39、自动生化分析仪工作较长时间后个别项目出现系统误差,则首先考虑日因素是:.标准品是否变质40、比色杯清洗步骤中可以忽略的是:经吹干后可以继续循环使用41、使用(区带)转头离心时 不需要离心管,样品直接加至其中即可42、使用电阻加热和半导体冷却的PCR仪的恒 温方法属:变温金属块恒温法43、含2个加样针、灌注式加试剂装置、双圈反应盘的自 动生化分析仪的取样周期为6s,则测定单试剂法的工作效率为(1200 )测试/h 44、测最电流变化的电极是:P02电极45、血培养仪的检测信号不包括:温度46、按血凝仪检测原理,下述中不属于凝固法的是:免疫比浊法47、流式细胞术尿沉渣分析仪应用的原理是:流式细胞术和电阻抗原理48、含1个加样针、1个加试剂针、 单圈反应盘的自动生化分析仪的取样周期为 4.5s,贝删定单试剂法的工作效率为(800 ) 测试/h 49、关于底物消耗限额参数,不正确的是:目的是提高监测精密度50、全自动尿沉渣分析仪中F1几乎极低而Fsc大小不等可以为:红细胞51、以下哪项不是微生物自动鉴定与药敏分析系统的性能特点:数据管理系统功能强大,但系统软件大多不可以不断升
精心整理 临床检验基础病例分析题一 病例:患者,男,45岁,上腹饱胀,厌食,体重减轻,消瘦和进行性贫血,胃痛呈持续性,进食后加重。 查体:上腹部有肿块,质坚硬,有压痛,可移动,腹腔内有积液。 12患者4常,体重无变化。既往体健,个人史、家族史无特殊。 体检:T 39.5℃,P 98次/分,R 22次/分,BP 122/83mmHg 。发育正常,营养中等,神志清楚,无皮疹,浅表淋巴结不大,咽部无充血,扁桃体不大,颈静脉无怒张,胸廓无畸形,呼吸平稳,左上肺叩浊,语颤增强,有湿哕音,心界不大,心率105次/分,律齐,无杂音,腹软,肝脾未及。
实验室检查:RBC:5.5×1012/L,Hb 145g/L,WBC:12.5×109/L;分类Nsg 75%,E 1.5%,L 22%,PLT 205×109/L,尿常规(-),粪便常规(-)。 1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据。 答:根据以上资料,初步诊断为:左侧肺炎(肺炎球菌性可能性大)。 其诊断依据为: ① ② ③ 2 天/28 查体: 苍白,贫血貌,皮肤粘膜无出血点,浅表淋巴结不大,巩膜无黄染,舌乳头正常,心肺无异常,肝脾不大。 实验室检查:血液检查:Hb:64 g/L,RBC:3.6×1012/L,MCV:78fl,MCH:18pg,MCHC:299g/L,HCT 28%,RDW 18%,外周血涂片红细胞以小红细胞为主;WBC:5.6
×109/L,分类:Nsg 68%,L 25%,M 2%,PLT:240×109/L,Reti 2.0%。尿蛋白(-),镜检无异常,大便隐血(-),血清铁9.5 μrnol/L(9~27μrnol/L)。1.根据以上资料,请做出初步诊断并简述其诊断依据? 答: (1)根据以上资料,该患者初步诊断为:①缺铁性贫血? ②月经过多原因待查? (2) :299g/L 2 答: 急诊。 查体:急性病容,巩膜疑有黄染。右上腹有明显压痛伴肌紧张: 实验室检查:WBC 12.4×109/L,中性粒细胞80%,淋巴细胞20%:B超:胆囊明显增大,囊壁增厚,可见反射很强的胆石数个,最大约1.5cm,提示胆囊炎、胆石症。
《临床检验仪器学》复习题 一、名词解释 灵敏度线性范围预处理系统K系数TEM SEM STM 灵敏度数值孔径离子选择性电极血细胞分析仪(BCA) 尿液分析仪自动生化分析仪自动化程度电化学分析技术流式细胞术噪音线性范围响应时间漂移电化学分析技术参比电极待测电极预处理系统实验室自动化系统全实验室的自动化(TLA)临床实验室信息系统(LIS) 医院信息系统(HIS) 化学电池离心现象离心技术扩散现象相对离心力沉降系数沉降速度沉降时间自动化程度通道差孔间差零点漂移ELISA 化学发光电化学发光发光免疫分析技术电化学性质POCT 二、填空 高速(冷冻)离心机的结构包括_________、_________、_________、________、____________、_________、_________等. 临床实验室常用的离心方法包括、和三类. 显微镜的分辨率表达式是。 流式细胞仪主要在通常在____ 和____ 这两个角度接收并检测细胞散射光强度。 电子显微镜包括_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分。 电子透镜包括____ 和____ 两种。 扫描隧道显微镜是根据量子力学原理中的和而设计。 STM 的两种工作模式分别是____ 和____ 。 尿液分析仪的测试原理包括、和三个原理。 尿液分析仪的反射率= 。 尿液分析仪由:、和三部分组成。 尿有形成分检验包括和两方面的检验。 流式细胞仪主要接受细胞的____ 信号和____ 信号。 流式细胞仪的基本结构由_________、_________、_________ 、___________ 、____________五部分构成。 常用参比电极主要有____ 和____ 两种 流式细胞仪中鞘液的作用是。 自动血培养系统主要由、和所构成。 电子显微镜根据成像方式的不同可以分为____ 和____ 两种类型。 生化分析仪的光路按照单色器的位置可以分为____ 和____ 两种。 自动生化分析仪的类型按反应装置的结构可分为4类:_______________、_______________、_______________、_______________。 目前临床上常用的三类免疫标记方法是______________、___________________、____________________。 临床电化学分析仪器包括____ 和____ 两种 血气分析仪的包括基本电极包括_______________、_______________、_______________、_______________四种。 血气分析仪的pH系统使用和两种标准缓冲液来进行定标;氧和二氧化碳系统用两种混合气体来进行定标。第一种混合气中含;第二种含。 电化学发光免疫分析的发光反应底物有____ 和____ 两种 生化分析仪的分析效率是指。 A/D转换的含义是。 LCD器的中文全称是。 自动生化分析仪采用后分光的含义是指。 自动生化分析仪中的通道数是指。 微生物自动化系统一般可分_______________________和____________________________ 两类。 临床电化学分析仪主要有_____________、_____________两种。 单色器包括________、_____________、_____________三种类型。 样品前处理系统占检验总工作量的。 离心机按照离心速度大小分为________、_____________、_____________。 FCM分选指标包括________、_____________、_____________。
第一章血液标本采集和血涂片检查 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.静脉采血法的采血部位首选: A. 肘部静脉 B. 手背静脉 C. 内踝静脉 D. 股静脉 E. 颈静脉 2.WHO推荐成人皮肤采血部位为: A. 无名指指端内侧 B. 中指和无名指指端内侧 C. 中指指端内侧 D. 耳垂 E. 大拇趾 3.血细胞分析中最常用的染色法为: A. 吉姆萨染色 B. 瑞氏染色 C. HE染色 D. 罗氏染色 E. PAS染色 (二)、A1型题(否定型) 3. 下列那一种抗凝剂不能与血液中的钙离子结合: A. EDTA-K2 B. 草酸钠 C. 草酸铵 D. 肝素 E. 枸橼酸钠 四、论述题 1. 试述瑞氏染色法的原理及PH值对其的影响? 参考答案 一、选择题 (一)、A1型题(标准型) 1.A 2.A 3.B (二)、A1型题3.D 四、论述题 1. ①瑞氏染色法的原理:瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美兰组
成的复合染料。瑞氏染料溶于甲醇后,解离为带正电的美兰和带负电的伊红。由于各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力不同,因此染色后呈现不同的色彩。如血红蛋白和嗜酸颗粒为碱性可与酸性染料伊红结合染成红色。细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美兰或天青结合染成紫蓝色或蓝色。中性颗粒呈等电状态,与伊红和美兰均可结合染成紫红色。此染色过程既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。 ②PH值的影响:细胞各种成分均为蛋白质组成,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH值而定。在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红。在偏碱性环境中负电荷增多,易与美兰或天青结合,染色偏蓝。
名词解释 分辨率:显微镜可分辨的两点间的最小距离,即为显微镜的分辨率,它主要取决于照明波长以及物镜的球差系数。 朗伯比尔定律:光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关;在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光。 离子选择性电极:离子选择性电极是一类利用膜电势测定溶液中离子的活度或浓度的电化学传感器,当它和含待测离子的溶液接触时,在它的敏感膜和溶液的相界面上产生与该离子活度直接有关的膜电势。 数值孔径:数值孔径描述了物镜收光锥角的大小,而后者决定了显微镜收光能力和空间分辨率。数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数,是判断两者性能高低的重要标志。 鞘流技术:为了避免计数中血细胞从小孔边缘处流过及湍流,涡流的影响,发明的技术。具体做法是用一毛细管对准小孔管,细胞混悬液从毛细管喷出。同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区,保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞流,四周被鞘液围绕。 问答题 1、影响电泳的因素 答:电场强度、溶液的PH值、溶液的离子强度、电渗作用、粒子的迁移率、吸附作用 2、离心机的离心方法 答:差速离心法、密度梯度离心法、分析性超速离心法 3、酸度计的测定原理以及常用电极 答:酸度计的测定原理:酸度计的主体是一个精密电位计,将电极插在被测溶液中,组成一个电化学原电池,通过测量原电池的电动势并直接用PH值表示出来。传感电极根据被测液氢离子浓度不同而产生不同的电位,根据能斯特方程式,酸度计将所检测到的微小电压变化值换算成PH值。 常用电极有参比电极和测量电极,参比电极包括甘汞电极和Ag-AgCl电极,测量电极为玻璃电极 简答题 1、朗伯比尔定律的成立条件 答:①入射光为单色光②溶液浓度不能过大 2、分光光度计的类型 答:单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计 3、血细胞计数器的测量原理 答:当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号,脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比,根据欧姆定律,细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度越大。经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。 4、常用的色谱仪有哪两种以及各自的特点 答:常用的色谱仪有气相色谱仪和液相色谱仪两种。 气相色谱仪具有高分辨率、高速度、高灵敏度以及选择性好等优点。但它只能用于被气化物
第一章概论 1、一个优良的检验仪器应具有(P3):灵敏度、分辨率和精度高,噪音和误差小,可靠性、稳定性和重复性好,响应时间短,测量范围、示值范围、频率响应范围和线性范围宽等性能指标。 2、最小检测量与分辨率的区别?(P5) 答:①分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量)的最小值。 3、精确度与灵敏度的区别?(P3) 答:①灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。②精确度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。③区别: 4、精确度(P5):对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。 5、重复性(P5):在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。 6、准确度和精确度的区别。(P5) 第二章离心机 1、简述分析型超速离心机的工作原理。(P26) 答:分析型超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴联接成一个高速的驱动装置,此轴可使转子在旋转时形成自己的轴。转子在一个冷冻的真空腔中旋转,其容纳了两个小室:分析室和配衡室。配衡室是一个经过精密加工的金属块,作为分析室的平衡用。分析室的容量一般为1ml,呈扇形排列在转子中,其工作原理与一个普通水平转子相同。分析室有上下两个平面的石英窗,离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质,可以通过对紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或折射率的不同对沉降物进行监测。在分析室中物质沉降时重粒子和轻粒子之间形成的界面就像一个折射的透镜,在检测系统的照相底板上产出一个“峰”。
临床检验仪器的常用性能指标:灵敏性,误差,噪音,最小检测量,精确度,可靠性,重复性,分辨率,测量范围和示值范围,线性范围,响应时间,频率响应范围。 光学显微镜的工作原理:利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。由两组会聚透镜组成光学折射成像系统。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组成为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物体位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。相对于物镜的成像条件及最后二次成像于观察者的明视距离等条件的满足,是通过仪器的机械调焦系统来实现的。 光学显微镜的基本结构:包括光学系统(物镜、目镜、聚光镜及反光镜)和机械系统(聚光镜升降、调焦系统、载物台和物镜转换器等运动夹持部件以及底座、镜臂、镜筒等支持部件) 光学显微镜照明设置部件:光源、滤光器、聚光镜、玻片。 光的吸收定律:即郎伯-比尔定律,是比色分析的基本原理。表达了物质对单色光吸收程度与溶液浓度和液层厚度之间的函数关系。A=-lg I/I0=lg I0/I=lg 1/T=kbc 电阻抗型血细胞分析仪的计数原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电解质比稀溶液大。当血细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,其内外电极之间的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。最后得出WBC、RBC、PLT。(该原理称库尔特血细胞检测原理 血细胞分析仪测定Hb的原理:除干式离心分层型、无创型外,各种BCA对Hb测定都采用光电比色原理。血细胞悬液中加入溶血剂后,RBC溶解释放出Hb,后者与溶血剂中有关成分形成Hb衍生物,进入Hb测试系统。在特定波长(多为530~550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含Hb含量成正比。与不同型号BCA配套的溶血剂不同,形成Hb衍生物也不同,吸收光谱也有差异,但最大吸收峰都接近540nm,因为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm,仪器Hb的校正必须以HiCN值为标准。 尿液分析:是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液的物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化。在尿沉渣检查中能够看到的有形成分为红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细
第一章血液一般检验的基本技术 ㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时,通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 踝静脉 E 股静脉 [本题答案] 2. 静脉采血时,错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数
C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] 7. 关于抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] 8. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"基础知识"
A 草酸铵可使血细胞膨胀 B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾,钠和氯的测定 [本题答案] 9. ICSH建议,血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ
临床检验仪器学第四讲第12章血细胞分析仪 (Blood Cell Analyzer) 南京医科大学第一临床医学院 临床医学工程处 刘坚
?血细胞分析仪(Blood Cell Analyzer)是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的 常规检验仪器。 ?血液分析仪主要完成以下两大功能: ⑴血细胞计数:红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白。 ⑵血细胞分类:白细胞中的淋巴、中性、嗜酸、嗜碱、单核、 幼稚细胞;红细胞中的网织红细胞。 ?根据计数/分类的测定值计算间接测定值 红血球容积比(HCT)、平均红血球血红蛋白含量(MCH)、 血小板容积比(PCT),等等
1947年Coulter 发明了小孔电阻抗法 通过测量细胞的体积大小对细胞进行分类计数 主要是用来计数红、白细胞 该技术一直被各种血液分析仪沿用至今 1953年库尔特家族研制出全世界第一台血细胞计数仪:Model A Wallace H. & Joseph R. Coulter
血细胞计数(Blood count) 早期的血液分析仪主要用来计数红、白细胞全血细胞计数(Complete Blood cell Count) 增加光电比色系统用来同时测定血红蛋白 血小板可在同一仪器上与红细胞一起计数 利用直接测量到的项目运算得到间接计算 项目(如血球压积等参数) 不包括白细胞分类计数 测定标本采用机外人工处理的预稀释方式
白细胞分类计数 (Differential Leukocyte Cell Count) 带电脑的显微镜下辨认细胞的图象识别技术 效率低,受制片、染色技术的影响大 在计数细胞数不多时,重复性较差 没有得到普遍推广 阻抗法仪器检测白细胞“二分群、三分群” 仪器内部结构的进一步完善 微处理器分辨力的进一步提高 特殊溶血剂的应用 无法对细胞内部结构进行分析,准确性有限
第一章血液一般检验的基本技术㈠单项选择题(A型题) 1. 成人静脉采血时,通常采血的部位是(A1型题)"实践技能" A 手背静脉 B 肘部静脉 C 颈外静脉 D 内踝静脉 E 股静脉 [本题答案] B 2. 静脉采血时,错误的操作是(A1型题)“实践技能" A 从内向外消毒穿刺部位皮肤 B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上 C 见回血后松开压脉带 D 未拔针头而直接将血液打入容器 E 如需抗凝应轻轻混匀 [本题答案] D 4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能" A 红细胞计数 B 白细胞计数 C 血小板计数 D 白细胞分类计数 E 凝血象检查和血小板功能试验 [本题答案] E 6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识" A 阻止凝血酶的形成 B 阻止血小板聚集 C 除去球蛋白 D 与血液中的钙离子形成螯合物 E 除去纤维蛋白原 [本题答案] D 7. 关于抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"专业知识" A EDTA-Na2溶解度大于 EDTA-K2 B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物 C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝 D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定 E 枸橼酸钠可用于输血保养液 [本题答案] A 8. 对草酸盐抗凝剂,错误的叙述是(A1型题)"基础知识" A 草酸铵可使血细胞膨胀
B 双草酸盐可用于血细胞比容测定 C 对Ⅴ因子保护差 D 过去用于凝血象的检查 E 可干扰血浆中钾,钠和氯的测定 [本题答案] D 9. ICSH建议,血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识" A EDTA-K2 B EDTA C EDTA-Na2 D 肝素 E 枸橼酸钠 [本题答案] A 11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识" A 抗凝血酶Ⅰ B 抗凝血酶Ⅱ C 抗凝血酶Ⅲ D 抗凝血酶Ⅳ E 抗凝血酶Ⅴ [本题答案] C 13. 关于双草酸盐抗凝剂,错误的说法是(A1型题)"专业知识" A 草酸钾可使红细胞缩小 B 草酸铵可使红细胞胀大 C 不可用于血细胞比容测定 D 过去用于凝血象的测定 E 目前应用较少 [本题答案] C 14. 凝血象检查时,抗凝剂最好用(A1型题)"专业知识" A EDTA-K2 B 38g/dl枸橼酸钠 C 109mmol/L枸橼酸钠 D 肝素 E 草酸钠 [本题答案] C 16. 关于细胞成分的特性,正确的说法是(A1型题)"基础知识" A 嗜酸性颗粒为酸性物质 B 中性颗粒为酸性物质 C 细胞核蛋白为碱性物质 D Hb为碱性物质 E 淋巴细胞浆为嗜酸性物质
临床检验仪器学 第一章概论 1. 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。 2. 误差:当对某物理量进行检测时, 所测得的数值与标称值 (真值之间的差异。误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。 3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(输入为零时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4. 精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念, 其高低是用误差来衡量的, 误差大则精度低,误差小则精度高。 5. 可靠性:仪器在规定的时期内及在保持其运行指标不超限的情况下,执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。 6. 重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件下, 在一个不太长的时间间隔内, 连续多次检测同一参数, 所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关, 重复性反映一台设备固有误差的精密度。 7. 分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量的最小值。 8. 线性范围:输入与输出呈正比例的范围,也就是反映曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。 1. 临床检验仪器具有哪些特点?
答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。 2. 临床检验仪器常用的性能指标有哪些? 答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高;可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。 3. 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的? 答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。 4. 临床检验仪器有哪些主要部件? 答:通常,临床检验仪器有取样装置、预分离系统、分离系统、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。 第二章显微镜技术和显微镜 1. 光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物体形成放大影像的精密光学仪器, 由光学系统、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成, 其核心是物镜和目镜中的两组透镜, 其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像, 再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。 2. 荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。 3. 相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度, 用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。 4. 激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点, 使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像, 而焦面以外的
第一章概论 1.临床检验仪器常用性能指标(可能考问答题) 1灵敏度 2 误差3噪声4最小检测量5精确度6可靠性7重复性8分辨率9测量范围和示值范围10线性范围11响应时间12 频率影响范围 1 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比。 2 误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与真值之间的差异。 3 噪音:检测仪器在没有加入被检物品时,仪器输出信号的波动或变化范围。 4 最小检出量:检验仪器能确切的反应最小物质含量。 5 精确度:检测值偏离真值的程度。 6 可靠性:仪器在规定时期内及在保持运行不超限的情况下执行其功能的能力,反应仪器是否耐用的一项指标。 第二章离心机 1.离心技术:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术 2. 离心机的工作原理:利用离心转子高速旋转产生的强大离心力,迫使液体中的微粒克服扩散,加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离。颗粒的沉降速度取决于离心机的转数、颗粒的质量、大小和密度。 3. 离心力:由于物体旋转而产生的力,物体作圆周运动所产生的向心力的反作用力。
4. 相对离心力:通常颗粒在离心过程中的离心力是相对于颗粒本身所受的重力而言,因此把这种离心力叫做相对离心力。 5. 离心机的分类:按转数分为:低速、高速、超高速。 6. 离心机的最大容量:离心机一次可分离样品的最大体积,m ×n,一次可容纳最多离心管×一个离心管容纳样品最大体积。 7. 沉降系数:颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。 8. 离心机的基本结构 低速离心机的结构较简单,由电动机,离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。其最大转速在10000r/min以内,相对离心力在15000xg以内。 高速(冷冻)离心机最大转速为20000~25000r/min 超速(冷冻)离心机最大转速可达50000~80000r/min 9. 差速离心法:差速离心法又称分步离心法,根据分离物的沉降速度不同,采用不同的离心速度和时间分步离心的方法。10. 差速离心法的优缺点: 优点:操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开,并可使用容量较大的角式转子;分离时间短、重复性高;样品处理量大。 缺点:分辨率有限、分离效果差,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,不能一次得到纯颗粒;壁效应严重,特别是当颗粒很大或浓度很高时,在离心管一侧会出现沉淀,颗
临床检验基础试题答案 一、选择题 1-5 : DEECB 6-10:BDACD 11-15: CCEBC 16-20: DAABC 二、填空题 1. ①大红细胞;②小红细胞,③棘形红细胞,④环形红细胞(面包圈红细胞),⑤新月形红细胞,⑥颗粒形红细胞,⑦皱缩红细胞,③影细胞,⑨红细胞碎片。 2. 皱缩、胀大、渗出。 3. 大小不均、中毒颗粒、空泡变性、Dvohie小体、退行性变。 4. 3 /HPF,镜下血尿,肉眼血尿。 5. 流动,凝胶。 三、名词解释 1、核右移:外周血的中性粒细胞以若5叶以上者超过3%^称为核象右移,此时常伴有白细胞总数减少。 2、中毒颗粒:中性粒细胞中比正常中性颗粒大,大小不等,分布不均匀,染色较深,呈黑色或紫黑色。有时颗粒很粗大,与嗜碱性粒细胞易混淆,有时又小而稀少,散杂在正常中性颗粒中。 3、渗出液:多为炎症性积液,炎症时由于病原微生物的毒素、缺氧以及炎症介质作用使用血管内皮细胞受损,血管通透性增加,以致血管内大分子物质和细胞通过血管壁而渗出血管外、组织间隙及浆膜腔所形成的积液。
四、简答题 1、异型淋巴细胞种类
I型(空泡型):胞体比正常淋巴细胞稍大,多为圆形、椭圆形或不规则形。核圆形、肾形或分叶状、常偏位。染色质粗糙,呈粗网状或小块状,排列不规则。胞质丰富,染深蓝色,含空泡或呈泡沫状。 H型(不规则型):胞体较大,外形常不规则,可有多数足。核形状及结构与I型相同或更不殊途同归,染色质较粗糙致密。胞质量丰富,染色淡蓝或灰蓝色,有透明感,边缘处着色较深蓝色。可有少数空泡。 皿型(幼稚型):胞体较大,核圆形或卵圆形。染色质细致呈网状排列,可见1-2个核仁,胞质深蓝色,可有少数空泡。 2、血沉增快的病理临床意义? ①各种炎症:细菌性急性炎症时,血中急性反应物质释放增多所致。风湿热的病理改变,结缔组织性炎病症,其活动期血沉增快。慢性炎症如结核病时,血沉增快。 ②组织损伤及坏死:较大的手术创伤可导致血沉增快,如无合并症,一般2-3周内恢复正常。心肌梗塞时血沉增快,,心绞痛时血沉正常,故可借血沉结果加以鉴别。 ③恶性肿瘤:良性肿瘤血沉多正常,恶性肿瘤病人增快的血沉,可因手术切除或化疗放疗较彻底而渐趋正常,复发或转移时又见增快。 ④各种原因导致的高球蛋白血症:亚急性感染性心内膜炎、黑热病、系统性红斑狼疮等所致的高球蛋白血症时,血沉常明显增快,慢性肾炎、肝硬化时血沉亦常增快。⑤贫血:轻度贫血对血沉尚无影响,若血红蛋白低于90g/L时,血沉可增快。 ⑥高胆固醇积压症:特别是动脉粥样硬化血胆固醇明显增高者,血沉常见增快。 3、大便OE试验临床意义是什么? 粪便隐血阳性见于①消化性溃疡、药物致胃粘膜损伤(如服用消炎痛、糖皮质激素等)、肠结核、克罗恩病、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病及胃癌、结肠癌等消化肿瘤时。②消化性溃疡和消化道肿瘤鉴别诊断:在消化性溃疡时呈间断性阳性。消化性