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干旱胁迫相关的顺式作用元件及转录因子简介

干旱胁迫相关的顺式作用元件及转录因子简介
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干旱胁迫相关的顺式作用元件及转录因子简介

就像植物应答干旱胁迫的信号途径可以分为ABA依赖和不依赖两条一样,相关的顺式作用元件和转录因子也可以分为ABA依赖和不依赖两类。通常的分析方法是通过对干旱或ABA诱导表达基因的启动子序列进行比对辅以序列的删除与碱基的替换等手段可以得到保守的顺式序列。然后利用这些序列进行酵母单杂交筛选等得到相应的反式作用元件。当然,还需要通过凝胶阻滞实验、构建顺式元件序列与标记基因融合转化,通过对得到的反式元件基因进行超表达、RNAi 等手段对结果进行验证(Yamaguchi-Shinozaki and Shinozaki, 2005)。

ABREs是主要的ABA依赖的基因表达的顺式调节元件,该元件普遍存在于不同物种中,在植物受ABA诱导的基因的启动子区域通常以较高的丰度存在,并能与相应的DNA绑定蛋白结合(Guiltinan et al., 1990)。研究发现,ABRE是以组合的形式发挥作用的,即ABRC(ABA response complex)。比如一个ABRE 与一个ACGT-box及一个CE3(coupling element 3)(Shen et al., 1996),或者两个ABRE(Uno et al., 2000),甚至一个ABRE与一个DRE组合(Narusaka et al.,2003)。

通过酵母单杂交筛选得到了许多与ABRE结合并调控下游基因表达的反式作用元件,称之为AREB(ABA-responsive element binding protein)或ARF(ABRE binding factor),系亮氨酸拉链转录因子(bZIP),这些基因受ABA及其它非生物逆境的诱导,而且如上文所言,其激活也依赖于ABA-Dependent的磷酸化(Uno et al., 2000;Choi et al.,2000)。

通过对RD29A和RD29B的研究,发现了一个参与干旱、低温及高盐的不依赖于ABA的顺式作用元件,即DRE(Dehydration responsive element),该顺式元件与RD29A在干旱和高盐胁迫下的迅速诱导表达及在低温胁迫下的诱导表达有关(Yamaguchi-Shinozaki and Shinozaki, 1994)。同样,通过酵母单杂交筛选,找到了结合DREB的反式作用元件,DREB1A和DREB2A以及CBF1(DREB1B),其中DEEB1A与其同源基因受低温诱导,而DREB2A及其同源基因受干旱和高

盐的诱导(Liu et al.,1998;Stockinger et al.,1997)。

当然,无论是ABA-Dependent还是ABA-Independent途径,相关的顺/反式作用元件还有很多,这里就不再赘述了。

生物化学复习参考

远程教育生物化学复习参考 一、多选题A型(每题1分,总计30分) 1、属于酸性氨基酸的是 A. Lys B. Asn C. Gln D. Glu E. Cys 2、下列哪种氨基酸代谢产生SAM A. 色氨酸 B. 苏氨酸 C. 苯丙氨酸 D. 蛋氨酸 E. 脯氨酸 3、维持蛋白质分子中α-螺旋稳定的化学键是 A.肽键 B.疏水键 C.氢键 D.二硫键 E.离子键 4、下列哪个氨基酸不是 ..L-α-氨基酸 A. Gly B. Ala C. Val D. Leu E. Asp 5、酪氨酸tRNA的反密码子是5′-GUA-3′,它能辨认mRNA上的相应密码子是A. GUA B. AUG C. UAC D. GTA E. TAC 6、DNA变性后理化性质改变正确的是 A.溶液粘度不变 B.是循序渐进的过程 C.形成三股链螺旋 D. 260nm波长处的光吸收增高 E.正旋光性增高 7、DNA的Tm值描述正确的是 A.只与DNA链的长短有直接关系 B.与G-C碱基对含量成正比 C.与A-T碱基对含量成正比 D.与碱基组成无关 E.所有真核生物Tm都一样

8、DNA上的外显子是 A.不被转录的序列 B.被转录但不被翻译的序列 C.被转录也被翻译的序列 D.调节基因序列 E.以上都不对 9、下列关于DNA复制的叙述错误 ..的是 A.有DNA指导的RNA聚合酶参加 B.有RNA指导的DNA聚合酶参加 C.为半保留复制 D.以四种dNTP为原料 E.有DNA连接酶参加 10、真核生物DNA复制中催化前导链合成的酶是A. polⅠ B. polα C. polβ D. polγ E. polδ 11、原核生物的RNA聚合酶的核心酶组成是A.α2ββ′σ B.α2ββ′ C.α2β′σ D.αββ′ E.α2βσ 12、可使原核生物转录过程终止的是 A. ρ因子 B. 核心酶 C. σ因子 D. 全酶 E. α亚基 13、原核生物辨认转录起始点的是 A.α亚基 B.β亚基 C.β′亚基 D.σ亚基 E.α2ββ′ 14、关于密码子的正确描述是 A.密码子中可以有稀有碱基 B.密码子中任何碱基的突变都会影响翻译C.每个密码子都对应一种氨基酸 D.多种氨基酸都有两个以上的密码 E.不同生物的密码子是不同的 15、蛋白质分子中没有遗传密码的氨基酸是A.丝氨酸

分子生物学简答题

分子生物学:研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。 C值反常:也称c值谬误,指c值往往与种系进化复杂性不一致的现象,及基因组的大小与遗传复杂性之间没有必然的联系,某些较低等的生物c值却很大。DNA重组技术:又称基因工程。将不同的DNA片段按照预先的设计定向连接起来,在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状的技术。 GU-AG法则:多数细胞核mRNA前体中内含子的5’边界序列为GU,3’边界为AG,因此,GU表示供体衔接点的5’端,AG 表示接纳点的3’端序列,习惯上,把这种保守序列模式称为GU-AG法则。 RNA干涉:是利用双链小RNA高效,特异性降解细胞内同源MRNA,从而阻断体内靶基因的表达,使细胞内出现靶基因缺失表性的方法。 摆动假说:crick为解释反密码子中子某些稀有成分的配对(如I)以及许多氨基酸中有两个以上密码子而提出的假设。编码链/有义链:在DNA双链中,与mRNA 序列(除t/u替换外)和方向相同的那条DNA,又称有义链 模板链:指双链DNA中能够作为模板通过碱基互补原则指导mRNA前体的合成的DNA链,又称反义链 操纵子:原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控原件组成的基因表达单元。 反式作用因子:能直接或间接识别或结合在各类顺式作用元件中核心序列上参与调控靶基因转录效率的pro。 基因定点突变:向靶DNA片段中引入所需的变化,包括碱基的添加,删除,或改变基因家族:在基因组进化中,一个基因通过基因重复发生了两个或更多的拷贝,这些基因即构成一个基因家族,是具有显著相似性的一组基因,编码相似的蛋白质产物 基因敲除技术:针对一个序列已知打包功能未知的基因,从DNA水平上设计实验,彻底破坏该基因的功能或消除其表达机制,从而推测该基因的生物学功能 基因组DNA文库:某一生物体全部或部分基因的集合,将某个生物的基因组DNA 或cDNA片段与适当的载体体外重组后,转化宿主细胞,所谓的菌落或噬菌体的集合即为…… 基因治疗:是将具有治疗价值的基因即“治疗基因“装配于带有在人体细胞中表达所必备元件的载体中,导入人体细胞,通过靶基因的表达来治疗遗传疾病 聚合酶链反应:指通过模拟体内DNA复制方式在体外选择性的将DNA某个特定区域扩增出来的 魔斑核苷酸:在应急反应过程中,由大量GTP合成的ppGpp和pppGpp,它们的主要作用可能是影响RNA聚合酶与启动子结合的专一性,诱发应急反应,帮助细菌度过难关 弱化子:原核生物操纵子中能明显减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列 同工tRNA:几个代表AA,能够被一个特殊的氨酰—tRNA合成酶识别的Trna 顺式作用元件:存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子,增强子等,本身不编码任何pro,仅提供一个作用位点,与反式作用因子相互作用参与基因表达调控 原位杂交技术:用标记的核苷酸探针,经放射自显影或非放射检测体系,在组织,细胞及染色体水平上对核苷酸进行定位和相对定量研究的手段 转座/移位:遗传信息从一个基因座转移至另一个基因座的现象,由可移问位因子介导的遗传物质的重排 管家基因:维持细胞正常生长发育的必需基因,所以细胞中均需表达的一类基因转座子:是存在染色体上的可自主复制和移位的基本单位,参与转座子易位及DNA 链整合的酶称为转座酶 原癌基因:正常细胞中与病毒癌基因具有显著同源性的基因,本身没有致癌作用,但是经过致癌因子的催化下激活成为致 癌基因,使正常细胞向恶性转化。 SP序列:mRNA中用于结合原核生物核糖 体的序列 无义突变:在蛋白质的结构基因中,一个 核苷酸的改变可能是代表某个AA的密码 子变成终止密码子(UAG UGA UAA),使 pro合成提前终止,合成无功能或无意义 的多肽,这称— 错义突变:由于结构基因中某个核苷酸的 变化使一种AA的密码子变成另外一种AA 的密码 指导RNA:与已正确编码的RNA序列互补 的一小段RNA,被用来作为向未经编辑的 RNA中插入碱基的模板。 上游启动子元件:将TATA区上游的保守 序列称为— 启动子:与基因表达启动相关的顺式作用 原件,是结构基因的重要成分。它是一段 位于转录起始位点5’端上游区大约 100~200bp以内的具有独立功能的DNA序 列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA 准确地相结合并具有转录起始的特异性。 细菌转化:是一种细菌菌株由于捕获了来 自供体菌株的DNA而导致性状特征发生 遗传改变的过程,提供转化DNA的菌株叫 做供体菌株,接受转化DNA的菌株被称作 受体菌株。 实时定量PCR技术:利用带荧光检测的 PCR仪对整个PCR过程中扩增DNA的累积 速率绘制动态变化图。 基因工程:在体外将核算分子插入病毒, 质粒或其他载体分子,构成遗传物质的新 组合,使之进入新的宿主细胞内并获得持 续稳定增殖能力和表达。 应答原件:能与某个(类)专一蛋白因子 结合,从而控制基因特异表达的DNA上游 序列。 增强子:是指能使与它连锁的基因转录频 率明显增加的DNA序列(1.5分)。它可 以在启动子的上游,也可以在启动子的下 游,绝大多数增强子具有组织特异性(1.0 分)。 分子伴侣:是结合其他不稳定蛋白质并稳 定其构象的一类蛋白质(1.0分)。通过 与部分折叠的多肽协调性地结合与释放, 分子伴侣促进了包括蛋白质折叠、寡聚体 装配、亚细胞定位和蛋白质降 负调控:阻遏蛋白结合在操作子位点,阻 止基因的表达。没有调节蛋白时操纵元内 结构基因是表达的,而加入调节蛋白后结 构基因的表达活性被关闭,这种调节称为 负调节。 应急因子:是指与核糖体相结合的蛋白质 RelA,当空载的tRNA进入A位时,它催 化GTP形成pppGpp或催化GDP形成 ppGpp。 信号肽:在蛋白质合成过程中N端有 15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质 的跨膜。 密码的简并性:由一种以上密码子编码同 一个氨基酸的现象称为密码的简并性 移码突变(frame-shift mutation):在 mRNA中,若插入或删去一个核苷酸,就 会使读码发错误,称为移码,由于移码而 造成的突变、称移码突变 简答题 1原核生物与真核生物基因组的不同? 答:原核基因组:常仅由一条环状双链DNA 分子组成,结构简单;基因组中只有一个复 制起点;具有操纵子结构,转录的RNA为多 顺反子;有重叠基因(1、基因内基因 2、部 分重叠基因 3、一个碱基重叠);无内含子; 编码pro的DNA在基因组中所占比例较大; 结构基因为单贝 真核基因组:真核基因组庞大,一般都远 大于原核生物;真核基因组存在大量的重复 序列;真核基因组的大部分为非编码序列, 占整个基因组序列的90%以上;真核基因组的 转录产物为单顺反子;真核生物为断裂基因、 有内含子结构;真核基因组存在大量的顺式 作用原件;真核基因组中存在大量的DNA多 态性;真核基因组具有端粒结构。 2比较RNA转录与DNA复制的异同? 答:相同:都以DNA链作为模板;合成方向 均为5’—3’;聚合反应均是通过核苷酸之间 形成的3’,5’—磷酸二酯建使核苷酸链延长 不同:复制转录 模板:两条链均复制;模板链转录(不对称 转录) 原料:dNDP ; NTP 酶:DNA聚合酶;RNA聚合酶 产物:子代双链DNA;mRNA,tENA,rRNA 配对:A---T ,G---C; A—U,T---A,G---C 引物:RNA引物;无 试比较转录与复制的区别。: 1,目的不同,所使用的酶、原料及其它辅助 因子不同,转录是合成RNA,复制是合成DNA; 2,方式不同:转录是不对称的,只在双链DNA 的一条链上进行,只以DNA的一条链为模板, 复制为半不连续的,分别以DNA的两条链为 模板,在DNA的两条链上进行;3,复制需要 引物,转录不需要引物;,4复制过程存在校 正机制,转录过程则没有;5转录产物需要加 工,复制产物不需要加工;6复制与转录都经 历起始、延长、终止阶段,都以DNA为模板, 新链按碱基互补原则,5'→3’方向合成。 3、 RNA转录的基本过程? 转录的基本过程包括:模板识别、转录起始、 转录的延伸和终止。 模板识别:RNA聚合酶与启动子DNA双链相互 作用并与之结合; 转录起始:RNA聚合酶结合在启动子上以后, 是启动子附近的DNA双链解旋并解链,形成 转录泡以促使底物核糖核苷酸与模板DNA的 碱基配对,当RNA链上第一个核苷酸键产生 标志着转录的起始,一旦RNA聚合酶成功地 合成9个以上核苷酸并离开启动子区,转录 就进入正常的延伸阶段。 转录的延伸:RNA聚合酶释放因子离开启动子 后,核心酶沿模板DNA链移动并使新生成RNA 链不断伸长,在解链区形成RNA—DNA杂合物。 转录终止:当RNA链延伸到转录终止位点时, RNA聚合酶不再形成新的磷酸二酯建,DNA— RNA杂合物分离,转录泡瓦解,DNA恢复成双 链状态,DNA聚合酶和RNA链都从模板上释放 出来,转录终止。 4.DNA复制的过程和机制? 答:分三个阶段:即复制的起始、延伸、终 止。 复制的起始:DNA解旋解链,形成复制叉,引 发体组装,然后在引发酶的催化下以DNA链 为模板合成一段短的RNA引物。 延伸:DNA链的延伸由DNA聚合酶催化以亲代 DNA链为模板引发体移动,从5’—>3’方向 聚合子代DNA链,前导键的合成以5’—>3’ 方向随着亲本双链体的解开而连续进行复 制,后随链在合成过程中,一段亲本DNA单 恋首先暴露出来,然后以与复制叉移动相反 方向,按5’—>3’方向合成一系列冈崎片段。 终止:当子链延伸到终止位点时,DNA复制终 止,切除RNA引物,填充缺口,在DNA连接 酶的催化下将相邻的DNA片段连接起来形成 完整的DNA长链。 5、真核生物与原核生物在翻译的起始过程中 有哪些区别? 答:真核生物的起始tRNA是met-tRNA met 原核是fmet-tRNA fmet; 真核生物核糖体小亚基识别mRNA的帽子结 构,而原核生物通过与mRNA的SD序列结合; 真核生物小亚基先与met-tRNAmet结合再与 mRNA结合,而原核生物小亚基先与mRNA结合 再与fmet-tRNAfmet结合;真核生物有较多 的起始因子参与,且核糖体较大为80S,而原 核生物有较少的起始因子参与,且核糖体较 小为70S 6.简述蛋白质生物合成过程。,以大肠杆菌为 例: (1)氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活 化以获得能量才能参与蛋白质合成,由氨酰 -tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨 酰-tRNA。 (2)肽链合成的起始:由起始因子参与,mRNA 与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨 酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物, 整个过程需GTP水解提供能 (3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开 始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A 位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始 氨基酸或肽酰基形成肽键,tRNA f 或空载tRNA 仍留在P位.最后核糖体沿mRNA5’→3’方 向移动一个密码子距离,A位上的延长一个氨 基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程 需延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供 (4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码 UAA、UAG或UGA时,终止因子RF-1、RF-2 识别终止密码,并使肽酰转移酶活性转为水 解作用,将P位肽酰-tRNA水解,释放肽链, 合成终止。 7.试比较真核生物与原核生物mRNA转录的主 要区别。 答:转录单元:原核生物常为多顺反子转录, 真核生物常为单顺反子转录。酶:RNA聚合酶 核心酶加p因子,原核生物为RNA聚合酶Ⅱ 聚合酶加转录因子。转录产物:真核生物不 需加工与翻译相偶联真核生物需加工与翻译 分开。转录过程:无核小体的结局和组装的 过程,原核生物有核小体的结局和组成的过 程。转录终止“原核生物两种方式分别是依 赖P因子的终止和不依赖P因子的终止,真 核生物转录的终止加尾修饰同步进行。反应 部位:原核生物在类核,真核生物在核内。 8.比较原核和真核生物mRNA的区别? 答:(1)、原核生物mRNA5’端无帽子结构,3’ 端没有或只少较短的polyA结构,真核生物 5’端存在帽子结构,3’端具有polyA尾巴. (2)、许多原核生物mRNA可能以多顺反子形 式存在,而真核生物几乎都是单顺反子(3)原 核生物mRNA的半衰期短,转录与翻译是紧密 相连的,两个过程不仅发生在同一细胞间里, 而且几乎是同步进行的,真核生物mRNA的录 翻译是发生在不同空间和时间范畴内的。(4) 原核生物以AUG作为起始密码有时以GUG, UUG作为起始密码,真核几乎永远以AUG作为 起始密码。 9.乳糖操纵子调控机理 答:是大肠杆菌中控制半乳糖苷酶诱导合成 的操纵子。包括调控元件P(启动子)和O(操 纵基因)阻遏子(I),以及结构基因lacZ(编 码半乳糖苷酶)、lacY(编码通透酶)和lacA (编码硫代半乳糖苷转乙酰基酶)。转录时 RNA聚合酶首先与启动子结合,通过操纵区向 右转录,转录从O区中间开始,按Z→Y→A 方向进行,每次转录出来的一条mRNA上都带 有这3个基因,转录的调控是在启动区和操 纵区进行的。 1、无乳糖时,调节基因lacI编码阻遏蛋白, 与操纵子基因O结合后抑制结构基因转录, 不产生代谢乳糖的酶。 2、只有乳糖存在时,乳糖可以与lac阻遏蛋 白结合,而使阻遏蛋白不与操纵基因结合, 诱导结构基因转录,代谢乳糖的酶产生以代 谢乳糖。 3、葡萄糖和乳糖同时存在时,葡萄糖的降解 产物能降低cAMP的含量,影响CAP与启动基 因结合,抑制结构基因转录,抑制代谢乳糖 的酶产生。 10、色氨酸操纵子及机制? 答:负责色氨酸的生物合成,当培养基中有 足够的色氨酸时,这个操纵子自动关闭,缺 乏时操纵子打开,trp基因表达,色氨酸或与 其代谢有关的某种物质在阻遏过程中起作 用。由于trp体系参与生物合成而不是降解, 它不受葡萄糖或cAMP-CAP的调控。 弱化作用:当色氨酸达到一定浓度、但还没 有高到能够活化R使其起阻遏作用的程度时, 产生色氨酸合成酶类的量已经明显降低,而 且产生的酶量与色氨酸的浓度呈负相关。先 导序列起到随色氨酸浓度升高降低转录的作 用,这段序列就称为衰减子或弱化子。在trp 操纵元中,对结构基因的转录阻遏蛋白的负 调控起到粗调的作用,而衰减子起到细调的 作用。 11.原核生物和真核生物复制的差异? 答:原核真核 复制起点:一般为单复制起点;一般为多复 制起点 主要的酶:DNA聚合酶Ⅲ;DNA聚合酶& 单链复制叉复制速度:快;慢 复制的延伸:无核小体的解聚及诚信组装; 有核小体…… 终止:两个复制叉相遇终止复制(环形DNA); 端粒酶复制末端完成复制(线性DNA) 12原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的 起始过程有什么区别。 .(1)起始因子不同:原核为IF-1,IF-2, IF-2,真核起始因子达十几种。 (2)起始氨酰-tRNA不同:原核为 fMet-tRNA f ,真核Met-tRNAi (3)核糖体不同:原核为70S核粒体, 可分为30S和50S两种亚基,真核为80S 核糖体,分40S和60S两种亚基

分子生物学期末模拟试题

海南大学海洋学院分子生物学期末模拟试题 11海科曾奇整理(红色字体为非常重要部分,需要其他什么科目模拟题的小伙伴请给我留言)第一题:名词解释 1.C值:一种生物单倍体基因组DNA的总量。 2.半保留复制:每条子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则 是新合成的,我们把这种复制方式称为DNA的半保留复制。 3.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自 我催化的作用。 4.魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产 生一个应急反应,停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 5.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核 苷酸序列。 6.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序 列、筛选目的基因等方面广泛应用。 7.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 8.操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息 区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。

9.顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因 调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 10.反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接 结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 11.增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转 录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。 12.启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 13.转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过 程。 14.错义突变:DNA分子中碱基对的取代,使得mRNA的某一密码 子发生变化,由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸,使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变。 15.翻译:将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始,按每3个核苷酸代表一个氨基酸的原则,依次合成一条多肽链的过程。 16.转座子:存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。 17.断裂基因:真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相 间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。 18.基因组文库:将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段, 并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。这些存在于所

分子生物学习题集第九章

第九章真核生物的基因表达调控 一、名词解释 1.操纵子 2. 顺式作用元件 3. 反式作用因子 4、启动子 5、增强子 6、基因表达 二、简答题 1、真核细胞表达外源基因的条件? 2、简述真核生物转录水平的调控机制? 3、简述真核生物转录后水平的调控机制? 4、受体的特点? 5、表皮生长因子介导的信号传导途径? 6、cAMP信号转导途径? 7、简述IP3-Ca2+信号途径: 8、原核生物与真核生物启动子的主要差别? 9、比较原核生物与真核生物基因组结构的异同,并指出真核生物细胞的RNA 内含子剪接的主要方式。 10、比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。 答案: 一、名词解释 1.操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子。 2. 顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 3. 反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 4、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 5、增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特

殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远。 6、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 二、简答题 1、真核细胞表达外源基因的条件? 答:首先必须具备哺乳动物细胞表达的功能元件。要求哺乳动物细胞表达载体带有能在真核细胞中表达外源基因的真核转录调控元件;其次注意选择转染的受体细胞,不同类型的细胞具有不同的特性;最后要注意选择适当的选择标记。2、简述真核生物转录水平的调控机制? 答:真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA 聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。A、转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合。转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成。B、反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用。3、转录起始的调控:⑴反式作用因子的活性调节:A.表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;B.共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;C.配体结合——许多激素受体是反式作用因子;D.蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用。⑶反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。⑷反式作

基因表达复习题

基因表达 一级要求单选题 1 基因表达调控的基本控制点是 A 基因结构活化 B 转录起始 C 转录后加工 D 蛋白质翻译及翻译后加工 E mRNA从细胞核转运到细胞浆 B 2 分解代谢物基因激活蛋白(CAP)对乳糖操纵子表达的影响是 A 正性调控 B 负性调控 C 正性调控、负性调控都可能 D 无调控作用 E 可有可无 A 3 阻遏蛋白识别操纵子中的 A 启动基因 B 结构基因 C 操纵基因 D 内含于 E 外显子 C 4 原核生物基因表达调控的乳糖操纵子系统属于 A 复制水平调节 B 转录水平调节 C 逆转录水平调节 D 翻译水平调节 E 翻译后水平调节 B 5 目前认为基因表达调控的主要环节是 A 基因活化 B 转录起始 C 转录后加工 D 翻译起始 E 翻译后加工 B 6 生物体调节基因表达最根本的目的是 A 适应环境 B 调节代谢 C 维持生长 D 维持分裂 E 维持分化 A 7 顺式作用元件是指 A 基因的5’侧翼序列 B 基因的3’侧翼序列 C 基因的5’、3’侧翼序列 D 基因5’、3’侧翼序列以外的序列 E 具有转录调节功能的特异DNA序列 E 8 一个操纵子通常含有 A 一个启动序列和一个编码基因 B 一个启动序列和数个编码基因 C 数个启动序列和一个编码基因 C 数个启动序列和数个编码基因 E 两个启动序列和数个编码基因 B 9 乳糖操纵子激活的直接诱导剂是 A β半乳糖苷酶 B 通透酶 C 葡萄糖 D 乳糖 E 别乳糖 E 10 lac阻遏蛋白结合乳糖操纵子上的 A P序列 B O序列 C CAP结合位点 D I基因 E Z基因 B 11 对乳糖操纵子来说 A CAP是正性调节因素,阻遏蛋白是负性调节因素 B CAP是负性调节因素,阻遏蛋白是正性调节因素 C CAP和阻遏蛋白都是正性调节因素 D CAP和阻遏蛋白都是负性调节因素 E cAMP- CAP是负性调节因素 A 12 lac阻遏蛋白由 A Z基因编码 B Y基因编码 C A基因编码 D I基因编码 E 以上都不是 D 13 真核生物用多种调节蛋白发挥生物学效应的作用方式是 A 提高RNA聚合酶的转录效率 B 降低RNA聚合酶的转录效率 C 提高DNA-蛋白质相互作用的特异性 D 降低DNA-蛋白质相互作用的特异性 E 以上都不是 A 14 有关操纵子学说的论述,下列哪一项是正确的? A 操纵子调控系统是真核生物基因调控的主要方式

分子生物学问答题

1.什么是转座? 转座因子在一个DNA分子内部或者两个DNA之间不同位置 间的移动。 2.病毒基因组有哪些特点?答:不同病毒基因组大小相差较大;不同病 毒基因组可以是不同结构的核酸;除逆转录病毒外,为单倍体基因组;病毒基因组有的是连续的,有的分节段;有的基因有内含子;病毒基因组大部分为编码序列;功能相关基因转录为多顺反子mRNA有基因重叠现象。 3.原核生物基因组有哪些特点?答:基因组由一条环状双链DNA组成; 只有一个复制起始点;大多数结构基因组成操纵子结构;结构基因无重叠现象;无内含子,转录后不需要剪接;基因组中编码区大于非编码区;重复基因少,结构基因一般为单拷贝;有编码同工酶的等基因;基因组中存在可移动的DNA序列;非编码区主要是调控序列。 4.真核生物基因组有哪些特点?答:每一种真核生物都有一定的染色 体数目;远大于原核基因组,结构复杂,基因数庞大;真核生物基因转录为单顺反子;有大量重复序列;真核基因为断裂基因;非编码序列多于编码序列;功能相关基因构成各种基因家族。 5.基因重叠有什么意义?答:利用有限的核酸储存更多的遗传信息,提 高自身在进化过程中的适应能力。 6.质粒有哪些特性? 答:在宿主细胞内可自主复制;细胞分裂时恒定地 传给子代;所携带的遗传信息能赋予宿主特定的遗传性状;质粒可以转移。 7.什么是顺式作用元件? 答:基因中能影响基因表达,但不编码RNA 和蛋白质的DNA序列。顺式作用元件主要包括启动子、增强子、负调控元件等。 8.简述原核基因表达的特点。答:(1)只有一种RNA聚合酶。(2)原核 生物的基因表达以操纵子为基本单位。(3)转录和翻译是偶联进行的。(4)mR

生物化学选择题

生化习题 选择题 1.含有2个羧基的氨基酸是:( A ) A.谷氨酸 B. 苏氨酸 C.丙氨酸 D. 甘氨酸 2.酶促反应速度V达到最大反应速度Vmax的80%时,底物浓度[S]: ( D ) A. 1 Km B. 2 Km C. 3 Km D. 4 Km 3.三碳糖、六碳糖与七碳糖之间相互转变的糖代谢途径是:( D ) A.糖异生 B.糖酵解 C.三羧酸循环 D.磷酸戊糖途径 4.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度:( B ) A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用 C.非竞争性可逆抑制作用 D 反竞争性抑制作用 5.鸟氨酸循环中,尿素生成的氨基来源有:( C ) A.鸟氨酸 B.精氨酸 C.天冬氨酸 D.瓜氨酸 6.糖酵解途径中,第二步产能的是: ( B ) A. 1,3-二磷酸甘油酸到 3-磷酸甘油酸 B. 磷酸烯醇式丙酮酸到丙酮酸 C. 3-磷酸甘油醛到 1,3-二磷酸甘油酸 D. F-6-P到 F-1,6-P 7.氨基酸的联合脱氨过程中,并不包括哪类酶的作用: ( D ) A 转氨酶 B L –谷氨酸脱氢酶 C 腺苷酸代琥珀酸合成酶 D 谷氨酸脱羧酶 8.下列哪一种物质不是糖异生的原料: ( C ) A. 乳酸 B. 丙酮酸 C. 乙酰CoA D. 生糖氨基酸 9.目前被认为能解释氧化磷酸化机制的假说是: ( C ) A、化学偶联假说 B、构象变化偶联假说 C、化学渗透假说 D、诱导契合假说 10、1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验证明了下列哪一种机制?(D) A.DNA能被复制 B.DNA基因可转录为mRNA C.DNA基因可表达为蛋白质

生物化学名词解释

1.分子伴侣:是细胞内一类可以识别肽链的非天然构象,促进各功能域和整体蛋白质正确折叠的保守蛋白质。 2.等电点:对某一蛋白质(氨基酸)来说,在某一PH,它所带的正电荷与负电荷恰好相等,即净电荷为零。这一PH称为该蛋白质(氨基酸)的等电点。 3.结构域:大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或数个球状或纤维状的区域,折叠的较为紧密,各行使其功能,称为结构域。 4.核酶:具有催化活性的RNA。 5.增色效应:核酸(DNA和RNA)分子解链变性或断链,其紫外吸收值(一般在260nm处测量)增加的现象。 6.底物水平磷酸化:物质在生物氧化过程中,常生成一些含有高能键的化合物,而这些化合物可直接偶联ATP或GTP的合成,这种产生ATP等高能分子的方式称为底物水平磷酸化。 7.氧化磷酸化:在真核细胞的线粒体或细菌中,物质在体内氧化时释放的能量供给ADP与无机磷合成ATP的偶联反应。 8.脂肪动员:储存在脂肪细胞中的脂肪被脂肪酶逐步水解为游离脂肪酸及甘油,并释放入血以供其它组织氧化利用的过程。 9.一碳单位:一碳单位就是指具有一个碳原子的基团。指某些氨基酸分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基团,包括甲基、亚甲基、甲烯基、甲炔基、甲酰基及亚氨甲基等。 10.ATP合酶:结合于线粒体内膜、叶绿体类囊体膜和细菌质膜上由多亚基组成的复合物。在氧化磷酸化和光合磷酸化过程可催化ATP的合成。 11.端粒酶:是一种含有RNA链的逆转录酶。它以所含RNA为模板来合成DNA端粒结构。 12.Tm值:是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。DNA中G-C含量越高,Tm值越高,成正比关系。 13.Klenow片段:E.coli DNA聚合酶Ⅰ经胰蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性,但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。 14.顺式作用元件:可影响自身基因表达的DNA序列。包括启动子、增强子及沉默子等调节蛋白。在转录起始点上游参与转录调控的DNA序列。 反式作用因子:也称真核转录调节因子。由它的编码基因表达后,通过与特异的顺式作用元件识别、结合,反式激活另一基因的转录大多数反式作用因子是DNA结合蛋白。 15.套索RNA:细胞核中初级转录产物hnRNA在去除内含子时,剪接体使内含子区段弯曲成套索状,称为套索RNA。 16.酮体:脂肪酸在肝脏线粒体内分解时产生的特有的中间产物——乙酰乙酸、β-羟基丁酸及丙酮的总称。 17.第二信使:细胞对细胞外信号,如激素(第一信使)产生应答时合成的能扩散、调节信号转导蛋白活性的小分子或离子。如cAMP、cGMP。 18.操纵子:转录的功能单位。很多功能上相关的基因前后相连成串,由一个共同的控制区进行转录的控制,包括结构基因以及调节基因的整个DNA序列。主要见于原核生物的转录调控,如乳糖操纵子、阿拉伯糖操纵子、组氨酸操纵子、色氨酸操纵子等。 19.同工酶:来源于同一种系、机体或细胞的同一种酶具有不同的形式。催化同一化学反应而化学组成不同的一组酶。 20.引发体:含有解螺旋酶、引物酶和DNA复制起始区域的复合结构。 21.S-D序列:原核生物mRNA起始AUG上游约8~13个核苷酸部分的一段一致性序列,富含嘌呤碱基,是与小亚基结合的位点。 22.信号肽:分泌蛋白新生肽链N端的一段20~30氨基酸残基组成的肽段。

智慧树知到《分子生物学》章节测试答案

智慧树知到《分子生物学》章节测试答案 第一章 1、目前生物遗传信息传递规律中还没有实验证据的是() . A:A. DNA →RNA B:B. RNA→蛋白质 C:C. RNA→DNA D:D.蛋白质→ DNA 正确答案: D.蛋白质→ DNA 2、从小鼠的一种有夹膜的致病性肺炎球菌中提取出的 DNA,可使另一种无荚膜、不具有致病性的肺炎球菌转变为有夹膜并具有致病性的肺炎球菌,而蛋白质、 RNA 无此作用,由此可以 证明()。 A:DNA是遗传物质,蛋白质是遗传信息的体现者。 B: 蛋白质是遗传物质,DNA是遗传信息的体现者。 C:DNA和蛋白质均是遗传物质。 D:RNA是遗传物质,DNA和蛋白质是遗传信息的体现者。 正确答案: DNA是遗传物质,蛋白质是遗传信息的体现者。 3、自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式为()。 A:环式 B:半保留 C:D- 环式 D:全保留 正确答案:半保留 Stanley B.Prusien,表彰他发现朊4、 1997 年诺贝尔生理医学奖授予美国加州旧金山大学 病毒及其致病机理,请问朊病毒是一种()?

A:DNA B:葡萄糖 C:蛋白质 D:RNA 正确答案:蛋白质 5、证明 DNA复制为半保留复制的科学家为()。 A:Meselson&stahl B:F. Miesher C:o. Avery D:Chargaff 正确答案: Meselson&stahl 第二章 1、证明 DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是()。 A: 从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B:DNA突变导致毒性丧失 C:生物体吸收的外源 DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 D:DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子 正确答案:生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 2、物种的C值与其进化复杂性之间无严格对应关系。 A:对 B:错

生化名词解释

名词解释 1.嘌呤核苷酸的从头合成: 用简单小分子磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及CO2等为原料,经过多步酶促反应,进行嘌呤核苷酸的合成。 2.硫氧化还原蛋白: 作为一种电子载体,在硫氧化还原蛋白还原酶作用下,从NADPH +H+获得电子,并进一步转移至NDP,将其还原成dNDP。 3.核苷酸的补救合成: 分解代谢产生的嘧啶/嘧啶核苷转变为嘧啶核苷酸的过程称为补救合成途径 4.核苷酸抗代谢物: 一些嘌呤或嘧啶、氨基酸或叶酸等的类似物。以竞争性抑制的方式干扰或阻断嘌呤或嘧啶核苷酸的合成,从而阻止了核酸和蛋白质的合成。利用这一原理,这些抗代谢药物通过抑制肿瘤细胞的核酸和蛋白质的旺盛合成而达到治疗作用。 5物质代谢: 生物体与外界环境之间的物质交换称作物质代谢,是生命活动的物质基础。 6.变构调节: 某些小分子化合物能与酶分子上的非催化部位特异地结合,引起酶蛋白的分子构象发生改变,从而改变酶的活性,这种调节称为酶的变构调节或称别位调节。 7.酶的化学修饰: 酶分子肽链上的某些基团可在另一种酶的催化下发生可逆的共价修饰,从而引起酶活性的改变,这个过程称为酶的酶促化学修饰。 8.第二信使: 存在于细胞内,传递调控信息的化学物质称作细胞内信息分子,又称第二信使。 9.受体: 受体是一类能特异性地识别信息分子(又称配体)并与之结合的物质,其化学本质多为糖蛋白或糖脂。 10.信息分子: 存在于细胞内、外,能够调节细胞的物质代谢、能量代谢、生长、繁殖、学习记忆等生命活动的信号传递效应分子称为信息分子。 11.G蛋白: G蛋白称鸟苷酸调节蛋白,又称GTP结合蛋白。通常以αβγ亚基三聚体的形式存在于细胞质膜内侧,与细胞膜受体相偶联传递调节信息的一种转导蛋白质。 12.诱导剂: 促进酶蛋白合成的化合物称为诱导剂。 13.阻遏剂: 使酶蛋白合成减少的化合物称为阻遏剂。 14.整体调节: 由神经系统和各种激素等对靶细胞的代谢及功能进行综合调节,称作整体水平的调节。 15.细胞水平调节: 通过对细胞内代谢物浓度的变化以及酶的含量和活性进行的调节称细胞水平的调节。 16.激素水平调节: 由内分泌细胞分泌的激素对各种细胞的代谢调节称作激素水平的调节。 17.2,3-DPG支路: 红细胞糖酵解的中间产物1,3-二磷酸甘油酸可变为2,3-DPG,后者经3-磷酸甘油酸沿酵解途径生成乳酸。这一经2,3-DPG的侧支途径称2,3-DPG支路 18.生物转化: 非营养物质(药物、毒物、代谢废物)在体内的代谢变化过程称为生物转化。 19加单氧酶: 又称为羟化酶或混合功能氧化酶,此酶存在于肝微粒体,这一酶系反应的基本特点是能直接激活氧分子,使一个氧原子加到作用物分子;另一个氧原子被NADPH 还原成水分子。 20.黄疸: 凡能引起胆红素生成过多,或肝细胞对胆红素摄取、转化和排泄能力下降,均可使血中胆红素浓度增高,称高胆红素血症。当血清胆红素浓度超过34.2μmol/l时,可出现巩膜、粘膜及皮肤等部位的黄染,临床上称之为黄疸。 21胆色素: 胆色素是含铁卟啉化合物在体内分解代谢的产物,包括胆红素、胆绿素、胆素原和胆素等化合物。

干旱胁迫相关的顺式作用元件及转录因子简介

干旱胁迫相关的顺式作用元件及转录因子简介 就像植物应答干旱胁迫的信号途径可以分为ABA依赖和不依赖两条一样,相关的顺式作用元件和转录因子也可以分为ABA依赖和不依赖两类。通常的分析方法是通过对干旱或ABA诱导表达基因的启动子序列进行比对辅以序列的删除与碱基的替换等手段可以得到保守的顺式序列。然后利用这些序列进行酵母单杂交筛选等得到相应的反式作用元件。当然,还需要通过凝胶阻滞实验、构建顺式元件序列与标记基因融合转化,通过对得到的反式元件基因进行超表达、RNAi 等手段对结果进行验证(Yamaguchi-Shinozaki and Shinozaki, 2005)。 ABREs是主要的ABA依赖的基因表达的顺式调节元件,该元件普遍存在于不同物种中,在植物受ABA诱导的基因的启动子区域通常以较高的丰度存在,并能与相应的DNA绑定蛋白结合(Guiltinan et al., 1990)。研究发现,ABRE是以组合的形式发挥作用的,即ABRC(ABA response complex)。比如一个ABRE 与一个ACGT-box及一个CE3(coupling element 3)(Shen et al., 1996),或者两个ABRE(Uno et al., 2000),甚至一个ABRE与一个DRE组合(Narusaka et al.,2003)。 通过酵母单杂交筛选得到了许多与ABRE结合并调控下游基因表达的反式作用元件,称之为AREB(ABA-responsive element binding protein)或ARF(ABRE binding factor),系亮氨酸拉链转录因子(bZIP),这些基因受ABA及其它非生物逆境的诱导,而且如上文所言,其激活也依赖于ABA-Dependent的磷酸化(Uno et al., 2000;Choi et al.,2000)。 通过对RD29A和RD29B的研究,发现了一个参与干旱、低温及高盐的不依赖于ABA的顺式作用元件,即DRE(Dehydration responsive element),该顺式元件与RD29A在干旱和高盐胁迫下的迅速诱导表达及在低温胁迫下的诱导表达有关(Yamaguchi-Shinozaki and Shinozaki, 1994)。同样,通过酵母单杂交筛选,找到了结合DREB的反式作用元件,DREB1A和DREB2A以及CBF1(DREB1B),其中DEEB1A与其同源基因受低温诱导,而DREB2A及其同源基因受干旱和高

生化2013年试题讲解

生化2013年招收攻读硕士学位研究生 入学考试试题 科目代码:832 科目名称:生物化学 招生专业:生命科学学院、化学化工学院、材料学院、地学部、医学院、药学院、能源研究院相关专业 一、填空题(每空1分,共30分) 1.在生物体内的重要单糖,大多以(1)构型存在,以(2)糖苷键连接的多糖,往往作为熊源形式贮存;以(3)型糖苷键连接的多糖,往往以结构成分存在。 2.根据蛋白质的(4),(5),(6)以及吸附性质和对其他分子的生物学亲和力,可将目的蛋白从混合的蛋白质提取液中分离出来。 3.分子病是由于(7)导致一个蛋白质中(8),这是一种遗传病。 4.Km是酶的一个特性常数,他的大小只与(9)有关,而与酶的浓度无关。1/Km可以近似地表示(10)。 5.蛋白质的磷酸化是可逆的。蛋白质磷酸化时需要(11)催化反应,蛋白质去磷酸化时需要(12)催化反应。 6.酵解途径唯一的脱氢反应是(12),脱下的氢由(14)递氢体接受。 7.酮体合成酶系存在于(15),氧化剂用的酶存在于(16)。 8.由尿酸合成过程中产生的2种氨基酸(17)和(18)不参与人体内蛋白质合成。 9.生物体内各类物质有各自的代谢途径,不同的代谢途径可通过交叉点上的关键中间物而星湖转化,使各代谢途径得以沟通形成网络,(19)、(20)、(21)是其中三个最关键的中间代谢物。 10.5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与(22)和(23)等氨基酸代谢有关。 11.一碳单位可以来自多种氨基酸,其载体是(24)。 12.嘌呤合成时环上的N3和N9来自(25)。 13.tRNA的三叶草结构中,氨基酸臂的功能是携带氨基酸,D环的功能是(26),反密码予功熊是(27)。 14.嘧啶合成的起始物氨甲酰磷酸的合成需要(28)作为氨的供体,尿酸循环中的氨甲酰磷酸(29)作为氨的供体。 15.将不同来源的DNA放在试管里,经热变性后,慢慢冷却,让其复性,如果这些异源DNA之间的某些区域有相同的序列,会形成(30)。

分子生物学 第八章课后答案

1,基因家族的分类及其主要表达调控模式。 答:(1),简单多基因家族,真核生物首先是pre rRNA经过特异性甲基化,然后是经RNA 酶的切割便可产生成熟rRNA分子。原核生物则还要经过核酸酶降解才能产生成熟rRNA分子。(2),复杂多基因家族,一般由几个相关基因家族构成,基因家族之间由间隔序列隔开,并作为独立的转录单位,可能存在具有不同专一性的组蛋白亚类和发育调控机制。(3),发育调控的复杂多基因家族,每个基因家族中,基因排列的顺序就是他们在发育阶段的表达顺序。2,何为外显子和内含子及其结构特点和可变调控? 答:大多数真核基因都是由蛋白质编码序列和非蛋白质编码序列组成的,编码序列称为外显子(exon),非编码序列称为内含子(intron)。结构特点:一个结构基因中编码某一蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起,而是常常被长度不等的内含子所隔离,形成镶嵌排列的断裂方式。可变调控:不少真核基因的原始转录产物可通过不同剪接方式,产生不同的mRNA,并翻译成不同的蛋白质。另外,一些核基因由于转录是选择了不同的启动子或者在转录产物上选择了不同的PolyA位点而使转录产物产生不同的二级结构,因而影响剪接过程,最终产生不同的mRNA分子。 3,DNA甲基化对基因表达的调控机制。 答:大量研究表明,DNA甲基化能关闭某些基因达的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。三种调控机制:一是DNA甲基化导致了某些区域DNA构象变化,从而影响了蛋白质和DNA的相互作用,抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。二是促进阻遏蛋白的阻遏作用。三是DNA的甲基化还提高了该位点的突变频率。 4,真核生物转录元件组成及其分类。 答:启动子,转录模版,RAN聚合酶Ⅱ基础转录所需的蛋白质因子(TFⅡ),RNA聚合酶Ⅱ,增强子,反式作用因子 5,增强子的作用机制。 答:增强子是指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。可能有3中作用机制:(1),影响模版附近的DNA双螺旋结构,导致DNA双螺旋弯折或在反式因子的参与下,以蛋白质之间的相互作用为媒介形成增强子鱼启动子之间“成环”连接,活化基因转录。(2),将模版固定在细胞核内特定位置,如连接在核基质上,有利于DNA拓扑异构酶改变DNA双螺旋结构的张力,促进RNA聚合酶Ⅱ在DNA链上的结合和滑动。(3),增强子区可以作为反式作用因子或RNA聚合酶Ⅱ进入染色质结构的“入口”。 6,反式作用因子的结构特点及其对基因表达的调控。

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