文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › Thermo Fisher CryoMed程序降温仪操作规程

Thermo Fisher CryoMed程序降温仪操作规程

Thermo Fisher CryoMed程序降温仪操作规程
Thermo Fisher CryoMed程序降温仪操作规程

Thermo Fisher程序降温仪操作规程

一、界面显示

箱体温度(Chamber)、样品温度(Sample)、LCD 显示程序状态、信息、降温程序的编辑与查看

二、控制面板

2.1 左边

Idle 没有程序运行

Run 有一个降温程序正在运行中

Wait 正在运行的降温处于暂停状态,按下“Run”键可继续运行

End 箱体升温到+25℃

2.2 右边

Cool 打开一个氮气电磁阀

Cool+ 打开两个氮气电磁阀

Heat 正在加热

2.3 控制面板上共有7 个控制键

Warm 开始加热。

Run 开始选定降温程序,或者继续暂停的降温程序。

Slience 停止报警音并清除显示的报警信息。

Back 完全停止一个正在运行的降温程序并回到程序主菜单。

Enter 开始新一行,进入子菜单,移动光标到右边。

Up 向上滚动显示条,或改变程序步骤和设置步骤。

Down 向下滚动显示条,或改变程序步骤和设置步骤。

三、液氮供应

液氮要求:干净,压力为0.15±30%Mpa

氮气接头不可上的过紧,否则会损坏接头,接头处不可使用密封胶带。

四、自动编辑程序

6.1 使用上下箭头键选择“Edit”(编辑)模式,按Enter 键;

6.2 使用上下箭头键选择User1 至User10(自定义程序)中的一个,按Enter 键;

6.3 使用上下箭头键选择步骤step;

6.4 使用左右箭头键移动光标,使用上下箭头键可更改字母、数字或符号,使用SILENCE 键可删除字母、数字或符号,使用左右箭头键移动光标;

6.5 步骤0 输入程序名称,完成后,移动光标回到最左边;

6.6 按向下箭头键,选择步骤1,按Enter 键进入编辑;

6.7 可使用上下箭头键选择一下功能

6.7.1 0.0 C/mC to 0.0 C 箱体温度以设定的变化率到达设定温度

6.7.2 0.0 C/mS to 0.0 C 样品温度以设定的变化率到达设定温度

6.7.3 Wait at 0.0 C 达到设定的温度并等待

6.7.4 Hold for 1m at 0.0 C 在设定的箱体温度等待设定的时间然后继续

6.7.5 Precool 冷却样品至+5℃然后继续下一步骤

6.7.6 Jump to 1 跳到设定的步骤

6.7.7 Loop to 1 for 1 从当前步骤回到设定的步骤循环设定的次数

6.7.8 End 完成程序

6.8 选定功能后,使用上下左右键更改参数

6.9 当所有的步骤设置完成后,继续按BACK 键直至回到主菜单。

五、预置的六个降温程序(Pre-set Profile)

此六个降温程序是不可改变参数的,可通过如下办法查看预设程序的参数

1. 用Up 或Down 键选择需要查看的程序

2. 按Enter 键进入“View”模式,用Up 或Down 键来查看步骤Step

3. 按BACK 键返回主菜单

注明:Pre-set Profile #1 通常用于2.0ml 的样品管。

Pre-set Profile #2 通常用于96 孔板。

Pre-set Profile #3 通常用于STRAW SIZE 样品管。

Pre-set Profile #4 通常用于造血干细胞(65-100ml)。

Pre-set Profile #5 通常用于皮肤组织。

Pre-set Profile #6 通常用于造血干细胞(65-100ml),但降温过程与#4 不同。

六、操作步骤

5.1 将样品放进箱体

5.2 选择降温程序,按“Run”键开始程序

5.3 如果程序中含有“Wait(等待)”步骤,在等待温度到达后,再按下“Run”键

继续其他步骤。

5.4 程序完成后,“End”灯亮。

icu进修自我鉴定

icu进修自我鉴定 篇一:icU进修总结 进修总结 短短三个月的进修学习生活很快就结束了,对我来说是一种磨练,更是一种考验。对于我来说刚刚工作三年,技术理论都尚浅,这次能在icU学习,得到全面的锻炼,无疑机会很珍贵,收获也很丰裕的。我感谢院领导和所有关心爱护我的人给我的这次难得机会!正是这次机会,使我的专业技术有了一定的提高,在此将我的学习体会与各位交流。 和平医院icU共设床位10张,其中开放式床位8张,隔离床位2张,医生6名,其中常住医生4名,轮转医生2名。护士30多名,除了在外进修,以及休假人员,每班约有7-8个护士在岗,平时床位利用率可达100﹪,主要收治一些需要呼吸支持的患者,所以工作人员少,每天的工作量都很大。主任张栋是钟南山的学生,博士学位。护士长是个喜欢研究的人,已有两项发明,且每年都有论文发表,所以在他们的的严格要求下,科里学习气氛很浓,工作压力也颇大。我有幸在此科室学习,并学到了不少的知识。 icU是集医疗,教学,科研一体的科室,技术力量比较雄厚,专业诊疗设备先进齐全,比如监护仪,呼吸机(包括有创和无创的),微量泵(输液泵和注射泵),血滤机,营养泵,胸部物理震颤仪,头部物

理降温仪,输液系统,红外线心电图机,除颤仪,血气分析仪,纤支镜等。 有先进的设备,相应必须有技术先进的医务人员,所以科室里每 个医生都会气管插管,以及深静脉穿刺,护士除了做好生活护理,减少病人的感染率以及家人不在身边的孤独感外,还必须是一位全科护士,危重病人的抢救(心肺脑复苏)以及配合技术是最基本的,因为每一个进入icU的患者都是下有病危通知的,另外还有一些先进护理操作技能,比如经鼻插入肠胃管(营养物质直接送达小肠,直接吸收,而且保留时间比胃管要长得多,一旦插入不容易脱出),深静脉导管的护理技术,血气的采集,介入以及体外的胸部物理治疗,人工气道的管理等。目前上述几项技术都未在我院开展,根据我院现有技术水平,胸部物理治疗以及血气采集(这项技术投入小,且减少了标本暴露于空气中的时间,提高了检查结果的正确率),营养泵的利用可用于糖尿病患者中,低血糖昏迷,或肿瘤恶夜质患者。 icU由于病人的特殊性,一些制度也比较先进,比如说病人由患者的主治大夫和icU的医生护士共同管理,所以要求护士对病人的病情“全知道”,所以护士长实行“复述式交班”,督促全体护士对所有病人病情都了解,且在交班中可纠正一些护士对病人病情叙述的不当,减少了和患者及患者家属在沟通中引发误会,利于护患沟通。在科室工作时,能够感觉到他们的自我保护意识非常强烈,对病患提出的各种疑问都能合理的解释并明确告知病情发展及预后。 在icU学习期间,极大的开阔了我的视野,特别是他们浓厚的学习气

ATAGO(爱拓)旋光仪的使用方法旋光现象和旋光度一般光源发出的光

ATAGO(爱拓)旋光仪的使用方法 1.旋光现象和旋光度 一般光源发出的光,其光波在垂直于传播方向的一切方向上振动,这种光称为自然 光,或称非偏振光;而只在一个方向上有振动的光称为平面偏振光。当一束平面偏振光通过某些物质时,其振动方向会发生改变,此时光的振动面旋转一定的角度,这 种现象称为物质的旋光现象,这种物质称为旋光物质。旋光物质使偏振光振动面旋 转的角度称为旋光度。尼柯尔(Nicol)棱镜就是利用旋光物质的旋光性而设计的。 2. 影响旋光度的因素 (1)溶剂的影响 旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液,影响因素还包括物质的浓度,溶剂也有一定的影响。因此旋光物质的旋光度,在不同的条件下,测定结果通常不一样。 因此一般用比旋光度作为量度物质旋光能力的标准,其定义式为: 式中D表示光源,通常为钠光D线,t为实验温度,a为旋光度,L为液层厚度,单位为厘米,C为被测物质的浓度(以每毫升溶液中含有样品的克数表示),在测定比旋光度值时,应说明使用什么溶剂,如不说明一般指水为溶剂。 (2)温度的影响 温度升高会使旋光管膨胀而长度加长,从而导致待测液体的密度降低。另外,温度变化还会使待测物质分子间发生缔合或离解,使旋光度发生改变。通常温度对旋光度的影响,可用下式表示: 式中t为测定时的温度,Z为温度系数。 不同物质的温度系数不同,一般在-(0.01~0.04)℃-1之间。为此在实验测定时必须恒温,旋光管上装有恒温夹套,与超级恒温槽连接。 (3)浓度和旋光管长度对比旋光度的影响 在一定的实验条件下,常将旋光物质的旋光度与浓度视为成正比,因为将比旋光度作为常数。而旋光度和溶液浓度之间并不是严格地呈线性关系,因此严格讲比旋光度并非常数,在精密的测定中比旋光度和浓度间的关系可用下面的三个方程之一表示: 式中q为溶液的百分浓度;A,B,C为常数,可以通过不同浓度的几次测量来确定。 旋光度与旋光管的长度成正比。旋光管通常有10cm、20cm、22cm三种规格。经常使用的有10cm长度的。但对旋光能力较弱或者较稀的溶液,为提高准确度,降低读数的相对误差,需用20cm或22cm长度的旋光管。 3. 使用注意事项 全自动旋光仪在使用时,需通电预热几分钟,但钠光灯使用时间不宜过长。 旋光仪是比较精密的光学仪器,使用时,仪器金属部分切忌沾污酸碱,防止腐蚀。光学镜片部分不能与硬物接触,以免损坏镜片。不能随便拆卸仪器,以免影响精度。 4. 全自动温控旋光仪结构及测试原理

冷库氨系统融霜操作规程Microsoft Office Word 文档 (3)

冷库氨系统融霜操作规程 1.热氨融霜 热氨融霜是将压缩机排出的高温制冷剂气体引入蒸发器内,利用过热蒸汽冷凝所放出热量来融化蒸发器外表面的霜层,同时蒸发器内原有的积油在压差的作用下排走。这种方法融霜时间短,劳动强度低,除霜效果好,但操作比较复杂,能量损失大,对库温有较大影响。 (1)、检查低压桶的液面和压力,必要时进行降压、排液处理,使低压桶处于准备工作状态。提前关闭或关小供液阀门,使其液面不超过40%,以备容纳融霜排液。 (2)、关闭液体调节站上需冲霜库房的供液阀,保持对蒸发器的抽气状态。 (3)、待蒸发器中液氨大部分蒸发后(15~20分钟),关闭其鼓风机,关闭气体调站上需冲霜库房的回气阀。(注意:对于蒸发温度低于-40℃、氨泵供液的制冷系统,融霜前的抽气过程尤为重要,否则,蒸发器集管或回气管道易发生“液爆”现象。) (4)、开启液体调节站需冲霜库房的排液阀、总排液阀和稍微开启低压循环储液桶的冲霜进液阀(节流阀)。 (注意:热氨融霜过程中,低压桶进液阀要间歇开、关,不能常开也不能开启过大,尤其到冲霜排液行将结束时更不能开启过大。) (5)、开启气体调节站的热氨总阀、需冲霜库房的热氨阀,注意冲霜时热氨压力不应超过0.6MPa。 (6)、注意低压桶的液面不得超过80%。 (7)、热氨冲霜完毕,关闭气体调节站的冲霜库房的热氨阀、总热氨阀;关闭液体调节站上冲霜库房的排液阀、总排液阀和低压循环储液桶的冲霜进液阀(节流阀)。 (8)、缓慢开启气体调节站的回气阀,当蒸发器的回气压力降低到系统蒸发压力时,适当开启液体调节站的有关供液阀,恢复蒸发器的工作状态。 2、冷风机水冲霜操作 (1)、关闭液体调节站上需冲霜库房的供液阀,保持对冷风机蒸发器的抽气

冷库空调操作规程

冷库空调操作规程 1目的: 规范空调的使用、保养、维护 2适用范围: 适用于成品库房 3操作要求: 3.1开机之前检查管道、制冷剂和润滑油是否有泄漏;检查机组的制冷剂压力,检查系统中的各处阀门是否处在正常的开启状态。 3.2在初次开机或断电时间超过8小时以上时,必须让油加热器预热8~24小时后(环境温度越低时间越长,冬季需24小时)方能开机运行。 3.3点击触摸屏进入主菜单后,机组开始4分钟启动延时,4分钟后电脑进入上次断电时的状态,此时点击“开/关”,冷水机组开始自动运行。 3.4在主菜单下点击“机组状态”选择“系统状态”和“单元模块状态”,电脑分别显示当前的系统参数和压缩机状态参数。检查相关数据并每小时记录一次。 3.5关机时点击触摸屏进入主菜单,点击“开/关” ,冷水机组自动关闭。 3.6在机组停机期间,机组的控制电源必须始终保持通电状态以使电加热器工作。 4 维护保养: 4.1保持机房清洁及通风良好,每天要对冷凝器和机组的暴露部件进行一次清洗除污工作,并适当紧固各紧固件,消除震动,防止泄漏。 4.2定期检查电器线路连接是否牢固,绝缘保护可靠;压缩机紧固螺栓是否松动;压缩机润滑油油面是否在正常位置。 4.3定期检查冷却水塔的喷嘴、内管过滤器是否堵塞,转动臂、供水管、球阀、皮带是否良好。 4.4每月检查并清洗冷却水、冷冻水进水侧过滤管芯;检查管道中是否有空气。 4.5如在视油镜中看到大量的泡沫则表示有制冷剂在油中稀释,应采取调节水阀或控制阀、检查和调整膨胀阀、检查冷却水温度、机组运行电流、补充制冷剂等措施。 4.6每次停启的间隔为5~15分钟,且每小时的启动次数不得超过4次。

冷库冲霜操作规程

冷库冲霜及冷库库底通风操作规程 1、前提:操作人员必须是经过专业培训并经考核合格的,深刻掌握所有制冷设备的操作流程、使用并熟悉本制冷工艺。 2. 目的:规范制冷操作人员对冷库冲霜的操作,使设备安全运行,延长设备的使用寿命,增加冷库运行的经济性。 3. 适用范围:低温冷库。 4. 冷库冲霜操作程序: . 冲霜前准备工作冷库蒸发器融霜频次应根据当地适时气侯条件以及产品出入量而定,制冷人员应勤查库房温度、勤查蒸发器霜层厚度,在未结成冰之前便对蒸发器及时进行冲霜,保证库房蒸发器发挥最大制冷效率,降低制冷能耗。热氨融霜时,要与冷库管理部门取得联系,最好在库房货物出库或转库后进行,尤其是使用顶排管式蒸发器的库房,如果库内有货物,应在货物上加盖帆布,地面上铺席子等防水材料,以防将货物弄脏及地面结冰。冷风机的热氨冲霜一般都伴有水冲霜过程,冲霜用水温度一般控制在 18-20℃。 冲霜前检查工作: 4.2.1 检查排液桶的液位和压力,必要时,先进行排液和减压,使排液桶处于准备工作状态。如用低压循环桶兼作排液桶,需调节低压循环桶内的液氨量,使其液面不高于 40%,以备容纳融霜回来的液体。 4.2.2 检查冲霜水箱的水量。 冲霜操作: 4.3.1 热氨冲霜时,提前 15 分钟关闭调节站供液阀,然后关闭蒸发器对应的回气阀,断开冷风机电源。 4.3.2 打开排液桶的降压阀和进液阀、分调节站的排液阀,这样蒸发器内的氨液回路已经接通。注意排液桶的降压阀开启度不易太大。 4.3.3 缓慢打开热氨融霜阀,向蒸发器内供热氨,注意调节站排液集管的压力表,其压力不能超过 ,排液桶内贮氨量不得超过 80%。 4.3.4 当蒸发器管壁上霜层开始融化脱落时,打开蒸发器对应的冲霜水路阀门,开启冲霜水泵,调节和检查冲霜水量,避免接水盘内冲霜水外溢。 4.3.5 水冲霜一般不超过 30 分钟。冲霜 30 分钟后,依次关闭冲霜水路阀门,延迟 5 分钟后关闭热氨融霜阀、调节站上的排液阀和排液桶进液阀,则热氨冲霜工作完成。 4.3.6 在恢复冷库工作时,应缓慢开启分调节站的回气阀,使排管、蒸发器内的压力降低,当降至接近系统蒸发压力时,开启分调节站的供液阀,开启冷风机恢复正常制冷状态,并做好冲霜记录。

圆盘旋光仪使用方法

圆盘旋光仪使用方法 Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】

圆盘旋光仪的使用 偏振光通过某种物质后,其振动面将以光的传播方向为轴线转过一定的角度,这种现象叫做旋光现象。旋转的角度称为旋光度。 凡能使线偏振光通过后将其振动面旋转一定角度的物质,称作旋光性物质。旋光性物质不仅限于像石英、朱砂等固体,还包括糖溶液、松节油等具有旋光性质的液体。不同的旋光性物质可使偏振光的振动面向不同方向旋转。若面对光源,使振动面逆时针旋转的物质称为左旋物质;使振动面顺时针旋转的物质称为右旋物质。 旋光度的大小除了取决于被测分子的立体结构外,,还受到待测溶液的浓度、偏振光通过溶液的厚度(即样品管的长度)以及温度、所用光源的波长、所用溶剂等因素的影响,这些因素在测定结果中都要表示出来。常用比旋光度来表示物质的旋光性。比旋光度和旋光度的关系如下: [α]λt = α C×l 式中:C -溶液的浓度(g/ml);l-旋光管的长度(dm ) 若物质是纯液体,则按下式进行计算: [α]λt = α ρ×l 式中:ρ-液体的密

图1 旋光仪构造示意图 1.底座;2.度盘调节手轮;3.刻度盘;4.目镜;5.度盘游标;6.物镜;7.检偏片;8.测试管;9.石英片;10.起偏片;11.会聚透镜;12.钠光灯光源 测量采用半荫法,钠光灯发出的光经起偏片后成为平面偏振光,在半波片(劳伦特石英片)处产生三分视场。检偏片与刻度盘连在一起,转动刻度盘调节手轮即转动检偏片,可以看到三分视场各部分的亮度变化情况,如图2所示。其中(a )、(c )为大于或小于零度视场,(b )为零度视场,(d )为全亮视场。找到零度视场,从度盘游标处装有放大镜的视窗读数。 图2 三分视场示意图 将装有一定浓度的某种溶液的试管放入旋光仪后,由于溶液具有旋光性,使平面偏振光旋转了一个角度,零度视场便发生了变化,转动度盘调节手轮,使再次出现亮度一致的零度视场,这时检偏片转过的角度就是溶液的旋光度,从视窗中的读数可求出其数值。 图3 旋光仪刻度盘和游标盘 a b c d

库管理与操作规程

冷库管理与操作规程 一、目的 为了规范冷库的管理,保障冷藏品的卫生质量。 二、适用范围 适用于本公司冷藏库、速度库、贮冰库的日常管理。 三、职责 1、仓管部门负责冷库存贮产品的出入库、清洁卫生与账目管理,并监控冷库温度。 2、设备维护人员、氨机房人员负责维护冷库系统正常运转。 3、包装品管员负责冷库温度、存贮卫生等状况的监督检查。 四、工作程序 1、冷库设计要达到工艺要求,并配备自动温度记录仪的温度计。 2、只有经验收合格的原料或成品才能入库存放。 3、物料按先出的原则入库贮存和出货,避免长时间积压,影响品质。 4、原料与成品分库存放,相互串味的产品不能贮存于同一个冷库内。 5、成品库、冷藏库、包装间的温度符合工艺要求,成品冷藏库温度在-18度以下,速度库温度在-30度以下,单冻机温度在-35度以下。冷藏库温由仓库管理员进行监控,每2小时记录一次,记录于《冷藏库温度监控记录》上。 6、库内产品需有完整的包装、禁止裸露堆放;堆放整齐、批次清楚,每批、每垛产品设有标识;相互串味的产品、原料与成品,不得同库存放。 7、库内物品与墙壁之间距离不少于30cm,距地面不少于10cm,与天花板保持一定的距离并分垛存放,库内清洁,无霉、无鼠、无虫害;中间留通风道,风机底下不可堆放货物。 8、不同品种产品分垛存放、批次清楚,每批每垛产品设有标记。 9、冷藏库、成品库定期清理消毒,每七天扫霜一次;每年至少对冷库进行一次清洁消毒。 10、冷库的卫生由冷库的主管人员负责每天检查,并将检查结果记录在《冷库卫生质量检查记录》中,并由包装品管负责督导。 11、当天进出冷库的物品当天入帐,所有进出库产品,帐面要有正确反映。 12、每天进行盘点,确保账目准确,随时能提供准确数据;月底配合财务部盘点核查并提供月报表。 13、禁止一个人进库作业,班后或无进出库作业必须关灯关门,确认冷库内无人才锁门。 福建海魂水产有限公司

冷库操作规程

汝阳县康盛药业有限责任公司操作规程文件 目的:为了规范冷库的管理,保障冷库储存药品的质量。 依据:《药品经营质量管理规范》 适用范围:本公司冷库的日常使用和管理。 内容: 一、冷库工作原理: 1、通过设置控制系统调节制冷机组运转,使冷库内温度保持在 2-8℃,相对湿度35-75%范围内。 2、通过设置温湿度记录和报警系统、定时记录,保存和更新温湿度 数据,有超标时自动报警提示。 二、冷库工作指标: 冷库内温度:2-8℃湿度35-75% 三、操作程序: 1、在温控系统设置冷机组启动温度6℃,停机温度4℃。 2、在温湿度记录仪器中设置报警参数:温度上限8℃,下限2℃; 相对湿度上限75%下限35%。 3、在温湿度记录仪中设置每隔10分钟自动记录一次实时温湿度数

据,系统每隔1分钟更新一次测点温湿度数据,当监测的温湿度超出规定范围时,系统每隔2分钟记录一次实时温湿度数据并发出报警信息。 4、空载冷库的预冷时间为20分钟,冷库开机30分钟后再进行开门作业,满载冷库的预冷时间为15分钟,冷库开机20分钟后再进行开门作业。上次开门作业结束后,原则上要求关闭冷库门60分钟后才能进行再次进行出入库作业,每次开门作业时间不得超过6分钟。 5、冷库内药品的堆垛间距离不小于30cm,药品与地面的间距离不小于10cm,药品与墙壁的距离不小于30cm,药品与库顶部的距离不得高于冷风机出风口的位置,药品与冷库内制冷机距出风口1m范围内不得码放药品。门的中心点为圆心,以50 cm为半径的圆弧内不得放置药品。 6、冷藏药品验收、储存、拆零、包装、发货等作业活动,必须在冷库内完成。 7、设备故障出现时,必须在1 小时内启用备用制冷机组。外部供电中断的状态下,必须在1小时内启用备用发电机(备用发电机按照操作规程执行。发电机必须每月运行1小时,并且有相关记录。工作时间内,备用的柴油发电机在10分钟内启动,下班后或节假日,保证在1小时内完成发电机的启动)。 五、保养及维护 1、定期擦拭风机,用(软毛刷、无尘布)清除制冷机组散热口尘埃,保证散热效果。 2、不定期检查库内机组结霜状况。 3、检查温控系统的准确性。

省、地、县级疾病预防控制中心实验室建设指导意见

附件:省、地、县级疾病预防控制中心实验室建设指导意见 第一章总则 第一条为加强和规范省、地、县级疾病预防控制中心(以下简称“疾病预防控制中心”)实验室的建设,保证有效实施疾病预防与控制、突发公共卫生事件应急处置、疫情及健康相关因素信息管理、健康危害因素监测与控制、实验室检测与评价、健康教育与健康促进和技术指导与应用研究等职能,制定本意见。 第二条疾病预防控制中心实验室建设必须遵守国家有关法律、法规,从本地区疾病预防控制工作实际出发,正确处理好现状与发展、需要与可能的关系。必须坚持科学、合理、实用、节约的原则,根据服务人口数量、服务内容与需求量等因素,结合区域经济发展水平和卫生规划,在满足基本功能的同时,体现标准化、智能化、人性化的特点,适当考虑未来发展的需要,确定实验室建设规模。 第三条本意见是疾病预防控制中心实验室建设的基本指导原则,是编制、评估、审批疾病预防控制中心新建、改建、扩建项目的重要依据,各地应结合本地区疾病预防控制技术水平和工作实际需要参照执行。 第二章功能与建设规模 第四条疾病预防控制中心工作用房包括业务、实验、行政及保障用房,其中实验用房面积占总建筑面积的比例为:省级不少于41%、地级不少于40%、县

级不少于35%。 第五条省、地、县级疾病预防控制中心根据职能分工应建立下列功能实验室 省级:P3实验室,分子生物学实验室,肠道细菌检测实验室,食源性病原菌分离鉴定实验室,呼吸道病毒实验室,肠道病毒实验室(含脊灰实验室),HIV 确认实验室,结核病参比实验室,地方病实验室,寄生虫病实验室,消毒实验室,杀虫实验室,食品、化妆品、水质、涉水产品等健康相关产品微生物实验室,霉菌分离及鉴定实验室,虫媒病毒实验室,毒理室及感染动物房,放射防护检测实验室,职业卫生检测室,化学毒物及毒素检测实验室,普通理化实验室,生化实验室。 地级:分子生物学实验室,血清学实验室,肠道菌实验室,食源性病原菌分离鉴定实验室,HIV初筛实验室,结核病参比实验室,地方病实验室,寄生虫病实验室,消毒实验室,杀虫实验室,食品、化妆品、水质、涉水产品等健康相关产品微生物实验室,霉菌分离及鉴定实验室,放射防护检测实验室,职业卫生检测室,常见化学毒物检测实验室,普通理化实验室。 县级:血清学检测实验室,食源性病原菌及肠道菌分离鉴定实验室,HIV初筛实验室,结核病实验室,地方病实验室,寄生虫病实验室,食品、化妆品、水质、涉水产品等健康相关产品微生物实验室,职业卫生和放射防护检测室,理化实验室,生化实验室。 除有特殊要求的实验室外,各级疾病预防控制中心开展相关病原微生物工作的实验室应达到P2实验室的建设标准。可针对本地区疾病预防控制工作的实际,

旋光仪的使用及注意事项

旋光仪的使用及注意事项 a.测定前应将仪器及样品置20℃士0.5℃的恒温室中或规定温度的恒温室中,也可用恒温水浴保持样品室或样品测试管恒温lh以上,特别是一些对温度影响大的旋光性物质,尤为重要。 b.未开电源以前,应检查样品室内有无异物,钠光灯源开关是否在规定位置,示数开关是 否在关的位置,仪器放置位置是否合适,钠光灯启辉后,仪器不要再搬动。 c. 开启钠光灯后,正常起辉时间至少20min,发光才能稳定,测定时钠光灯尽量采用直流供 电,使光亮稳定。如有极性开关,应经常于关机后改变极性,以延长钠灯的使用寿命。 d.测定前,仪器调零时,必须重复按动复测开关,使检偏镜分别向左或向右偏离光学零位。 通过观察左右复测的停点,可以检查仪器的重复性和稳定性。如误差超过规定,仪器应维修 后再使用。 e.将装有蒸馏水或空白溶剂的测定管,放入样品室,测定管中若混有气泡,应先使气泡浮 于凸颈处,通光面两端的玻璃,应用软布擦干。测定时应尽量固定测定管放置的位置及方向, 做好标记,以减少测定管及盖玻片应力的误差。 f.同一旋光性物质,用不同溶剂或在不同pH值测定时,由于缔合、溶剂化和解离的情况不 同,而使比旋度产生变化,甚至改变旋光方向,因此必须使用规定的溶剂。 g.浑浊或含有小颗粒的溶液不能测定,必须先将溶液离心或过滤,弃去初滤液测定。有些 见光后旋光度改变很大的物质溶液,必须注意避光操作。有些放置时间对旋光度影响较大的, 也必须在规定时间内测定读数。 h.测定空白零点或测定供试液停点时,均应读取读数三次,取平均值。严格的测定,应在 每次测定前,用空白溶剂校正零点,测定后,再用试剂核对零点有无变化,如发现零点变化 很大,则应重新测定。 i.测定结束时,应将测定管洗净晾干放回原处。仪器应避免灰尘放置于干燥处,样品室内可 放少许干燥剂防潮。 二、技术参数 1. 旋光度测定范围: -180°∽+180° 2. 度盘格值:1° 3. 度盘游标读数值:0.05° 4. 放大镜放大倍数: 4* 5. 单色光源(钠灯)波长: 589.44mm 6. 试管长度: 100mm、200mm各1支 7. 仪器使用电源:

冷库操作规程

1.目的:建立冷库标准操作规程 2.范围:适用于冷库的操作 3.职责:操作人员按本规程使用和卫生清洁。 维修人员按本规程维修和保养。 质检部对本规程负责,QC操作人员监督执行 4.规程: 操作 4.1.1.使用 1 将电控箱内三相空气开关及单相空气开关板至“ON”,由专职调试人员确认部件状态正常。 2.将电控箱面板控制开关板至“开”一端,机组即可启动工作,电脑进入工作状态,压缩机组、蒸发器风扇运行,电脑已按要求设定温度控制,开、停机及自动化霜。 3.注意观察压力、温度变化的情况,确认机组工作压力及降温良好。 4.注意:启动压塑机前,压缩机吸排气阀门必须打开。 4.1.2 设备清洁 1 设备在使用前、后都要用无尘抹布醮饮用水拧干后进行擦拭机身表面及冷库内腔。 2 然后用无尘抹布醮75%乙醇,拧干抹布再擦拭机身表面及冷库内腔进行清洁消毒(注意不要接触电源部位,以防触电)。 3 填写相关记录。 4.1.3 设备维护保养 1 冷库设备长期不用时,应截断冷库总电源,并确保制冷机组不受潮、不被灰尘等其他物质污染。 2 冷库的电器设备应避免受潮,以免漏电造成触电事故。 3.冷库的门的铰链、拉手、门锁和轨道上应根据实际情况定期添加润滑油。 4.定期检查制冷机组各连接管、阀件、冷风机上的连接管是否牢固,是否有冷剂渗漏。 5.定期检查结霜状况。检查室外机组的震动状况。 6. 检查温控器的准确性。 5 注意事项 1.冷库内放置的物品应留有一定的空隙,以利于冷气的流动。 2.冷库的制冷机组周围严禁堆放物体并远离发热源,以利于空气流动而充分散热,并定期用软毛刷清除制冷机组、散热器上的灰尘。 3.冷库的库温设定应在规定的范围内,否则会增加冷库的工作负荷而损坏冷库原件。储藏保鲜库内温度设定在0+5℃,冷冻库库内温度应设定在0-18℃,低温库库内温度设定在-18-23℃。

Thermo Fisher CryoMed程序降温仪操作规程

Thermo Fisher程序降温仪操作规程 一、界面显示 箱体温度(Chamber)、样品温度(Sample)、LCD 显示程序状态、信息、降温程序的编辑与查看 二、控制面板 2.1 左边 Idle 没有程序运行 Run 有一个降温程序正在运行中 Wait 正在运行的降温处于暂停状态,按下“Run”键可继续运行 End 箱体升温到+25℃ 2.2 右边 Cool 打开一个氮气电磁阀 Cool+ 打开两个氮气电磁阀 Heat 正在加热 2.3 控制面板上共有7 个控制键 Warm 开始加热。 Run 开始选定降温程序,或者继续暂停的降温程序。 Slience 停止报警音并清除显示的报警信息。 Back 完全停止一个正在运行的降温程序并回到程序主菜单。 Enter 开始新一行,进入子菜单,移动光标到右边。 Up 向上滚动显示条,或改变程序步骤和设置步骤。 Down 向下滚动显示条,或改变程序步骤和设置步骤。 三、液氮供应 液氮要求:干净,压力为0.15±30%Mpa 氮气接头不可上的过紧,否则会损坏接头,接头处不可使用密封胶带。 四、自动编辑程序 6.1 使用上下箭头键选择“Edit”(编辑)模式,按Enter 键; 6.2 使用上下箭头键选择User1 至User10(自定义程序)中的一个,按Enter 键; 6.3 使用上下箭头键选择步骤step; 6.4 使用左右箭头键移动光标,使用上下箭头键可更改字母、数字或符号,使用SILENCE 键可删除字母、数字或符号,使用左右箭头键移动光标; 6.5 步骤0 输入程序名称,完成后,移动光标回到最左边; 6.6 按向下箭头键,选择步骤1,按Enter 键进入编辑; 6.7 可使用上下箭头键选择一下功能 6.7.1 0.0 C/mC to 0.0 C 箱体温度以设定的变化率到达设定温度 6.7.2 0.0 C/mS to 0.0 C 样品温度以设定的变化率到达设定温度 6.7.3 Wait at 0.0 C 达到设定的温度并等待 6.7.4 Hold for 1m at 0.0 C 在设定的箱体温度等待设定的时间然后继续 6.7.5 Precool 冷却样品至+5℃然后继续下一步骤

程序冷冻仪-Planer

程序冷冻仪-Planer 英国Planer公司是世界上最早的研制及生产程序冷冻仪(Control Rate Freezer)的专业公司。多年来Planer公司一直处于程序冷冻保存领域的领先地位。胚胎,精子,干细胞, 血袋, 骨髓等生物样品的长期保存,冷冻是唯一的保存方法。保存是否成功取决于样品解冻后的成活率。 样品复苏率的关健是科学的降温程序及程序冷冻仪的性能。Planer公司程序冷冻仪设计的内部分流格板,用均匀的层流来保证所有样品温度均衡,是真正能够精确控制降温程序的冷冻仪。 Planer有各种应用范围的程序冷冻降温仪。包括了从1.7升至380升等各种大小内室的程序冷冻仪。内置精密铂电阻温度传感器,连续、准确地监测样品及冷冻室温度。产品按机型有不同开口方向的样品室,配外接MRV控制器,或外接PC连Delta T软件控制操作程序和数据处理。

控制器 MRV ·四行液晶显示,微处理器控制、显示及打印冷冻程序 ·利用精密铂电阻温度传感器,连续、准确地监测样品及冷冻室温度·10个32步程序,可灵活编辑、储存 ·内置热敏打印机,实时记录样品、冷冻室的温度程序变化的过程·精密的降温速度及升温速度, 温控范围+40℃~-180℃ ·可选Delta T PC 软件连接计算机 ·断电保护功能保证复电后继续运行未完成的程序,确保样品安全

Kryo 360,550, 560 系列程序降温仪要另配供液氮泵(pump)和液氮罐(Dewar) 液氮压力:Planer 供液氮的泵(LNP-4-C),允许范围为7-22 PSI。超出此范围有自动调节功能,即自动加热升压或泄气降压至要求范围,并发出报警,保证程序正常运行。 温度传感器:采用四线铂电阻作温度传感器,能准确记录和跟踪样品及冷冻室温度,准确地控制冷冻过程严格按用户设定的程序进行。冷冻速度:直至-180℃均能达到技术指标中及用户设定的冷冻速度。

冷库安全操作规范

冷库控制系统安全操作规程 1.该设备必须专人操作,维修及保养; 2.操作人员需进行安全培训,获得上岗证持证上岗,并学习冷库《使用说明书》,了解该设备的基本结构,熟练掌握操作规程,并严格按照操作规程进行操作。 3.开机前,检查冷库内及库门的关闭情况是否正常; 4.冷库内的照明及苦闷上的风幕机应在关闭状态; 5.必须确定冷库是否按要求正常运行工作; 6.用钥匙打开制冷化霜电气系统控制箱,合上ZK1,ZK2空气开关后,关闭控制箱盖(注意:冷库停用必须断开ZK1,ZK2空气开关; 重新使用须合上ZK1,ZK2空气开关,接通电源4小时后才能启动压 缩机); 7.把微电脑冷冻控制箱面板上的转换开关扳至自动制冷档位,微电脑温度控制器上风机指示灯和机组指示灯同时亮起; 8.观察冷库内冷风机应启动运转,延时3分钟后,微电脑温度控制器上的制冷指示灯亮起,压缩机开始工作。 9.观察微电脑温度控制器上显示的温度在逐渐下降至下限温度时,能否自动停机;显示的温度上升至上限温度时,能否自动开机; 10.当冷库工作到一定的时间,冷库内冷风机会进行自动化霜,这时微电脑温度控制器箱的化霜指示灯会同时亮起;短时间内微电脑温度控制器上显示的温度会逐渐升高,属于正常现象,不须停机。化霜至一定的时间,会自动停止化霜,温度会逐渐下降,恢复正常!

注意事项: 1.冷库安装完毕或长期停用后再次使用, 降温的速度要合理:每 天控制在 8-10℃为宜 , 在 0℃时应保持一段时间; 2.冷库库板保养,注意使用中应注意硬物对库体的碰撞和刮划。因为可以造成库板的凹陷和锈蚀,严重的会使库体局部保温性能降低; 3.冷库密封部位保养,由于装配式冷库是由若干块保温板拼而成,因此板之间存在一定的缝隙,施工中这些缝隙会用密封胶密封,防止空气和水分进入。所以在使用中对一些密封失效的部位及时修补; 4.冷库地面保养,一般小型装配式冷库的地面使用保温板,使用冷库时应防止地面存有大量的冰和水,如果有冰,清理时切不可使用硬物敲打,损坏地面; 5.冷库常因冷却管系统结霜,而阻碍热的传导,影响冷却效应,并且因结霜,致使冷库库内湿度过低,故应定期升温除霜,并及时淋湿或喷雾调节冷库湿度。冷库的通风换气宜在夜间进行,若冷库库内二氧化碳积累过多,可装置空气净化器,也可用7%的烧碱吸收; 6.冷库的湿度以90%为宜; 7.不得私自改装冷库电源,在进出冷库时要关闭冷库门; 8.放冻货时要轻拿轻放,严禁抛扔; 9.每月对冷库保养一次(电路检查、漏油漏气检查、清洗冷凝器、清洗风扇、清除内部杂物);

WZZ—2B自动旋光仪操作规程

WZZ—2B自动旋光仪操作规程 一、目的:建立自动旋光仪的标准使用程序,保证标准操作。 二、范围:本标准适用于WZZ—2B自动旋光仪的使用。 三、责任者:QC检验员对本标准的实施负责。 四、程序: 1、依据:WZZ—2B自动旋光仪使用说明书。 2、概述:利用平面偏振光,通过含有某些光学活性化合物的液体化合物的液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转,此种旋转在一定条件下有一定度数,称为旋光度。 3、操作程序 3.1 操作前的准备: 3.1.1 如测定对温度有严格要求的供试品,在测定前应将仪器及供试品置规定温度的恒温室内至少2小时,使温度恒定。 3.1.2 未接通电源前应检查样品室内异物,电源开关和示数开关应放在关的位置,为了便于钠光灯起辉,应将钠光灯置于交流电路处,并检查仪器摆放位置是否合适,钠光灯起辉后,不许再搬动仪器,以免损坏钠光灯。 3.2接通电源: 3.2.1 将仪器电源插头插入220V交流电源插座上,[要求使用交流电子稳压器(1KV)],并将接地脚可靠接地。 3.2.2 向上打开电源开关,这时钠光灯在交流工作状态下起辉,瞬时起辉点燃,但发光不稳,经五分钟钠光灯激活后,钠光灯才发光稳定。 3.2.3 向上打开光源开关,若光源开关扳上后,钠光灯熄灭,则再将光源开关上下重复扳动1-2次,使钠光灯在直流下点亮。 3.3测定操作: 3.3.1 打开测量开关,这时数码管应有数字显示。 3.3.2 将旋光管一端螺帽放上皮垫和盖玻片(盖玻片应紧靠试样管)接紧,从另一端注入蒸馏水或其它空白溶剂,先洗涤旋光管后装满,将另一端玻片盖上,放上皮垫,拧紧螺帽。将两端通光面盖玻片用换镜纸擦干,

旋光度的测定

旋光度的测定方法和注意事项 中国卖仪器网整理:平面偏振光通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转。旋转的度数,称为旋光度。偏振光透过长1dm并1mL中含有旋光性物质1g的溶液,在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。 测定比旋度(或旋光度)可以区别或检查某些药品的纯杂程度,亦可用以测定含量。 除另有规定外,本药典系用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度,测定管长度为1dm(如使用其他管长, 应进行换算),测定温度为20℃。 测定旋光度时,用读数至0.01°并经过检定的旋光度测定计。将测定管用供试液体或溶液(取固体供试品,按各药品项下的方法制成)冲洗数次,缓缓注入供试液体或溶液适量(注意勿使产生气泡),置于旋光计 (旋光测定仪)内检测读数,即得供试液的旋光度。 使偏振光向右旋转者(顺时针方向)为右旋,以“+”符号表示;使偏振光向左旋转者(反时针方向)为左 旋,以“-”符号表示。 用同法读取旋光度3次,取3次的平均数,照下列公式计算,即得供试品的比旋度。 a 对液体供试品[a](t,D)= --- ld 100a 对固体供试品[a](t,D)= ----- Lc 式中[α]为比旋度; D 为钠光谱的D线; t 为测定时的温度; l 为测定管长度,dm; α 为测得的旋光度; d 为液体的相对密度; c 为每100ml溶液中含有被测物质的重量,g(按干燥品或无水物计算)。 旋光计的检定,可用标准石英旋光管进行,读数误差应符合规定。 【注意事项】 (1)每次测定前应以溶剂作空白校正,测定后,再校正1次,以确定在测定时零点有无变动;如第2次 校正时发现零点有变动,则应重新测定旋光度。 (2)配制溶液及测定时,均应调节温度至20℃±0.5℃(或各品种项下规定的温度)。 (3)供试的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒。超净工作台如有上述情形时,应预先滤 过,并弃去初滤液。 (4)物质的比旋度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。因此,表示物质的比旋度时应 注明测定条件。

深圳综合细胞库设计建设SICOLAB

综合细胞库设置和管理规范 SZDB/Z266—2017 深圳综合细胞库设计建设标准引用——喜格SICOLAB GB/T5458-2012液氮生物容器 GB/T18442.3-2011固定式真空绝热深冷压力容器第3部分:设计 GB19489-2008实验室生物安全通用要求 GB/T20269-2006信息安全技术信息系统安全管理要求 GB/T20801.4-2006压力管道规范工业管道第4部分:制作与安装 GB/T20988-2007信息安全技术信息系统灾难恢复规范 GB/T22239-2008信息安全技术信息系统安全等级保护基本要求 GB50034-2013建筑照明设计标准 GB/T50174-2008电子信息系统机房设计规范 GB50243-2002通风与空调工程施工质量验收规范 SN/T2294.5-2011检验检疫实验室管理第5部分:危险化学品安全管理指南 SZDB/Z188-2016细胞制备中心建设与管理规范 深圳综合细胞库设计建设及管理要求——喜格SICOLAB 一、总体原则 1、设计建造应符合GB19489-2008第5章的要求。(地形、地质、水文条件、占地面积、周围环境、交通状况等应满足建筑安全及使用要求) 2、应满足样本储存和样本信息储存等功能的要求。(提供镜像保存服务的应在异地设立镜像储存库) 3、功能分区 ①细胞库总体平面布局应清晰合理,宜设置行政办公区域、样本库区域、档案存放区域、机房区域(电子信息储存),且各区域相互独立,不应交叉混合使用。 ②样本库区域应根据使用需求和样本储存条件进行功能分区,应能够防止混淆、差错和交叉污染。 至少包括: ——样本接收区(包含暂存区); ——样本-80℃储存区; ——样本-150℃深低温储存区; ——气体储存区; ——物料储存区。 二、场地与设施 1、样本库环境要求 ——通风应符合GB50243-2002的要求;

冷库标准操作规程

1 目的 杜绝人为操作事故的发生,确保设备正常运转。 2 适用范围:生产区内所有的冷库。 3 职责 3.1 操作人员按本规程使用和卫生清洁。 3.2 维修人员按本规程维修和保养。 3.3 办公室主任负责监督本规程的执行。 4 内容 4.1 使用 4.1.1 开机 4.1.1.1 合上电源总闸,电源指示灯亮。 4.1.1.2 设定所需要的温度。 4.1.1.3 将所需的物品放入库内,扭动温度调节器,将温度调至所需的规定值。 4.1.1.4 向右扭动主机开关,运行显示灯亮,设备进入自动工作状态。 4.1.2 运行 4.1.2.1 设备进入自动工作状态后,将自动进行化霜(化霜灯亮)、恒温(恒温灯亮)。出现故障时“故障”灯亮。 4.1.2.2 设备运行当中如需开启库门,需将库门上方空气屏障器起动按扭置于“开”位置上,空气屏障器将会自动启动。库门关闭时空气屏障器自动关闭。 4.1.3 关机:将主机开关向左扭动,运行灯灭,设备停止运行。切断电源。 4.2 设备清洁 4.2.3 填写相关记录。

4.4 设备保养 4.4.1 每班 4.4.1.1 检查压缩机高、底压压力。 4.4.1.2 检查室内机组结霜状况。检查室外机组的震动状况。 4.4.1.3 检查温控器的准确性。 4.4.2 每年 4.4.2.1 执行每班的检查工作。 4.4.2.2 温控器效正。 4.4.2.3 更换油过滤器,冷冻机油,补加雪种,清洗室外机组。 4.4.2.4 检查所有电路的接头。 5 相关文件与记录 5.1 设备管理规程 5.2 设备卫生清洁记录表 5.3 冷库运行记录表 [此文档可自行编辑修改,如有侵权请告知删除,感谢您的支持,我们会努力把内容做得更好]

最新冷库使用操作规程讲解学习

******医药有限公司 文件编码 冷库管理操作规程 起草部门储运部起草人审核人批准人 发放范围公司各职能部门执行日期 修改原因变更记录 1、目的 统一、规范使用冷库,保证有储存温湿度要求的冷链药品储存过程中质量稳 定安全。 2、依据 本操作规程依据《药品管理法》、《药品经营质量管理规范》(2012年修订版)、《药品流通管理办法》、GSP附录等相关法律法规及本公司《设施设备验证与校 准管理制度》,《设施设备验证与校准管理操作规程》,《冷库验证报告》,《冷库验证方案》。 3、适用范围 冷库及库内设施设备。 4、职责 养护员、库管员对本操作规程实施负责。 5、使用规程 5.1 冷库应在使用前进行空载和满载验证。保证其保温性,并均匀配备温湿度自动监测系统,全程监测温湿度变化,具体内容见《冷库验证方案》; 5.2 冷库温湿度范围为2℃-8℃,湿度35%-75%; 5.3 冷库内配备制冷机,启停温度设置为2℃-7℃; 5.4 冷库外侧配备自动温度启停调节箱,此调节箱由调节按钮及显示板组 成。显示板在左侧,调节按钮在右侧。养护员根据冷库调节箱的使用操作说明书, 将制冷机的启停温度设置为2℃-7℃。 5.5 储藏温度在2℃-8℃的冷链药品收货、验收、养护、发货等操作环节都 应在冷库内进行。空载时开门时间应控制在7分钟以内,最长时间不应超过10分;满载时,开门时间不应超出5分钟。

5.6 当冷库发生停电、断电故障时,备用柴油发电机自动启动,保证了冷库正常供电; 5.7 当温湿度自动监测系统出现异常情况,库管员应关闭冷库库门,保持库内温度,并立即报告储运部部长,启动《冷藏药品温度控制应急预案》,确保冷 藏药品的质量和安全。 5.8 温湿度超标采取相应措施处理,温度达到7℃规定值自动开启冷风机降温;温度降于正常值3℃则关闭冷风机,湿度由制冷机组自动调控。 5.9 冷库内放置冷链药品及需预冷包装材料,并设立包装材料预冷区、待验区、合格品区、待处理区等须有明显标识。冷链药品的收货验收、储存、拆零、 冷藏包装、发货等作业活动,必须在冷库内完成。 5.10 合理储存。药品摆放应严格按照药品GSP规定进行,同一品种不同批号不得混垛,垛与垛之间间隔5cm,垛与墙、顶间隔30cm,垛与灯间隔30cm,垛与地间隔10cm,药品通道宽度100cm。距冷风机出口100cm范围内不得摆放药品。距离门口60cm范围内不得摆放药品。 5.11 保证冷库卫生条件,不定时清理。 5.12 冷风机定期维修保养。 6、附录 6.1本操作规程由公司储运部负责解释。 6.2本操作规程由公司储运部负责检查。

胚胎培养箱澳大利亚Cryologic胚胎冷冻仪==程序降温仪==程序控温仪

细胞如何保存? 1. 注意事项: 1.1. 欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。 1.2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。 1.3. 注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级,无菌且无色(以 0.22 micron FGLP Telflon 过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml 小体积分装,4 oC 避光保存,勿作多次解冻。Glycerol 亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。 1.4. 冷冻保存之细胞浓度: 1.4.1. normal human fibroblast: 1~3 x 106 cells/ml 1.4. 2. hybridoma: 1~3 x 106 cells/ml,细胞浓度不要太高,某些hybridoma 会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后死去。 1.4.3. adherent tumor lines: 5~7 x 106,依细胞种类而异。Adenocarcinoma 解冻后须较高之浓度,而HeLa 只需1-3 x 106 cells/ml。 1.4.4. other suspensions: 5~10 x 106 cells/ml, human lymphocyte 须至少5 x 106 cells/ml。 1.5. 冷冻保护剂浓度为5 或10 % DMSO,若是不确定细胞之冷冻条件,在做冷冻保存之同时,亦应作一个backup culture,以防止冷冻失败。 1.6. 冷冻方法: 1.6.1. 传统方法: 4 oC 10 分钟---> -20 oC 30 分钟---> -80 oC 16 - 18 小时(或隔夜) ---> 液氮槽vapor phase 长期储存。 1.6. 2. 程序降温:利用等速降温机以–1 ~ -3 oC/分钟之速度由室温降至–120 oC,放在液氮槽vapor phase 长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma 之保存。 2. 材料: 2.1. 生长良好之培养细胞 2.2. 新鲜培养基 2.3. DMSO (Sigma D-2650) 2.4. 无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020) 2.5. 0.4 % w/v trypan blue (GibcoBRL 15250-061) 2.6. 血球计数盘与盖玻片 2.7. 等速降温机(KRYO 10 Series II) 3. 步骤: 3.1. 冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。 3.2. 配制冷冻保存溶液(使用前配制):将DMSO 加入新鲜培养基中,最后浓度为5-10%,混合均匀,置于室温下待用。 3.3. 依细胞继代培养之操作,收集培养之细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。 3.4. 离心,去除上清液,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 106 cells/ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。 3.5. 冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 oC 10 分钟→ -20 oC 30 分钟→ -80 oC 16~18 小时(或隔夜) →液氮槽vapor phase 长期储存。 3.6. 冷冻保存方法2: 冷冻管置于已设定程序之等速降温机中,再放入液氮槽中。程序

相关文档
相关文档 最新文档