基质金属蛋白酶与脓毒症性急性肺损伤的研究进展
2012年严重脓毒症与脓毒性休克治疗国际指南
拯救脓毒症运动（SSC） 2012年严重脓毒症与脓毒性休克治疗国际指南2004年，全球11个专业组织的专家代表对感染与脓毒症的诊断及治疗发表了第一个被国际广泛接受的指南。这些建议旨在为临床医生提供治疗严重脓毒症或脓毒性休克的指南，但不能取代医生面对患者病情独特变化而做出的临床决定。指南中大部分建议适用于ICU及非ICU中的严重脓毒症。专家们相信，对非ICU科室及紧急情况下医师如何救治严重脓毒症患者的培训有助于改善患者预后。当然，不同国家或救治机构资源的有限性可能会限制内科医生对某些指南建议的实施。 欧洲危重症医学学会(ESICM)，国际脓毒血症基金会（ISF）联合美国重症监护医学学会（SCCM）在休斯敦2012年美国重症监护医学学会上对2004及2008版《重症脓毒血症和脓毒血症休克的治疗指南》进行修订，详细可参详会议内容。 本指南所依据的新GRADE分级系统将推荐等级分为1（强力推荐：做或不做）、2（弱度推荐：可能做或可能不做）两级，将证据分为A[高质量随机对照研究（RCT）或荟萃分析研究]、B（中等质量RCT 或高质量观察性及队列研究）、C（完成良好、设对照的观察性及队列研究）和D（病例总结或专家意见，低质量研究）。 第一部分严重脓毒症的治疗 A 早期复苏 1、脓毒症所致休克的定义为组织低灌注，表现为经过最初的液体复苏后持续低血压或血乳酸浓度≥4mmol/L。此时应按照本指南进行早期复苏，并应在确定存在低灌注第一时间、而不是延迟到患者入住ICU后实施。 在早期复苏最初6小时内的复苏目标包括：①中心静脉压（CVP）8-12mmHg；②平均动脉压（MAP） ≥65mmHg；③尿量≥0.5ml/（kg·h）；④中心静脉（上腔静脉）氧饱和度（S cv O 2 ）≥70%，混合静脉氧 饱和度（S v O 2 ）≥65%（1C）。 2、严重脓毒症或脓毒性休克在最初6小时复苏过程中，尽管CVP已达到目标，但对应的S cv O 2 与 S v O 2 未达到70%或65%时，可输入浓缩红细胞达到红细胞压积≥30%，同时/或者输入多巴酚丁胺[最大剂 量为20μg/（kg·min）]来达到目标（2C）。 3、此外，研究人员指出，在严重脓毒症和脓毒性休克早期复苏阶段的，缺乏监测中央静脉氧饱和度设施下，乳酸(组织灌注不足的一个标记)水平升高的患者，应尽快使乳酸水平降至正常（弱度推荐；2C级） B 诊断 1、如果在得到培养结果之后再使用抗生素不会给患者带来有临床意义的延误，我们推荐在开始使用抗生素治疗之前先获取适宜的培养标本。为更有效地培养得到病原微生物，推荐对患者至少采集两处血液标本，即经皮穿刺及经留置超过48小时的血管内置管处的血液标本。 在未及时应用抗生素不会给患者带来有临床意义的延误的前提下，应尽可能在使用抗生素之前留取其他培养标本，包括尿液、脑脊液、伤口、呼吸道分泌物或可能为感染源的其他体液（1C）。 2、推荐为患者进行快速及时的影像学检查以早期确定潜在的感染病灶。一旦明确了感染病灶的存在，就应立即取得其标本。但有些患者由于病情不稳定而不能接受有创操作或无法被转运至ICU，此时床旁超声是最有效的方法（1C）。 3、对于真菌严重脓毒症高危患者，建议可通过以下试验，如：1,3-β-D-葡聚糖试验（2B级）、甘露聚糖及抗甘露聚糖抗体试验（2C级），对侵入性念珠菌病做出早期诊断（弱度推荐）。 C 抗生素治疗 1、推荐在确认脓毒性休克（1B）或严重脓毒症尚未出现脓毒性休克（1D）时，在1小时内尽早静脉使用抗生素治疗。 在应用抗生素之前留取适合的标本，但不能为留取标本而延误抗生素的使用（1D）。
脓毒症患者的液体复苏策略
脓毒症患者的液体复苏策略 脓毒症（sepsis）是指机体在感染状态下出现的一系列反应，严重脓毒症（severe sepsis）定义为脓毒症合并了脏器功能不全，如果脓毒症伴有休克等表现则称为脓毒症性休克（septic shock）。无论是严重脓毒症还是脓毒症性休克均是当今危重症医学面临的具有挑战性的疾病，其病死率高达15% ~50%。大量的研究证实，发病最初的数小时内及时、恰当的治疗可以明显改善患者的临床表现。2002年的巴塞罗那宣言倡导全球的拯救脓毒症运动（surviving sepsis campaign，SSC）希望通过提高临床医师对严重脓毒症和感染性休克的认识达到降低病死率的目的，2004年公布了第一版SSC的指南，并在2008年基于新的研究证据进一步更新，2012年美国休斯顿危重症年会针对上述指南再次予以更新如液体复苏、血糖控制、ARDS、APC等。但是无论指南如何修订，复苏治疗始终成为永恒的话题，而且新指南强调了早期发现和认识严重脓毒症的同时应该将复苏做得更早。 一、脓毒症及脓毒症性休克相关定义：脓毒症性休克诊断标准：①临床上有明确的感染；②有全身炎症反应综合症的（SIRS）表现；③收缩压（SBP）<90 mm Hg，平均动脉压（MAP）<70 mm Hg或者成人SBP在原有的基础上下降超过40 mm Hg或低于同年龄正常值两个标准差且不存在其他引起血压下降的原因。 与脓毒症性休克相关的概念 定义 全身炎症反应综合症（SIRS）
非特异性损伤引起的临床反应，符合下列两种或两种以上的表现：①体温>38.3。C或<36。C；②心率>90次/分；③呼吸频率>20次/分或<12次/分；④白细胞>12000/mm3或<4000mm3，或幼稚细胞>10% 全身性感染或脓毒症（sepsis） 由感染引起的SIRS 严重全身性感染或严重脓毒症（severe sepsis） 全身性感染伴有两个或两个以上器官功能不全或组织灌注不良；循环、肾脏、呼吸、肝脏、血液、中枢性神经等系统出现功能障碍 感染性休克或脓毒症性休克(Septic shock) 全身性感染导致的低血压(充分的容量复苏仍存在组织灌注异常) 二、严重脓毒症合并脏器功能不全的诊断指标合并下列情况之一者即为严重脓毒症：血乳酸高于正常值；充分复苏后至少两个小时仍显示尿量< 0.5 ml/kg/hr；不是肺炎引起的急性肺损伤PaO2/FiO2< 250；血肌酐> 2.0 mg/dl (176.8μmol/l)；总胆红素> 2mg/dl (34.2μmol/l)；血小板计数< 100,000μl；凝血功能紊乱INR> 1.5。 三、脓毒症性休克液体复苏的具体方法 1、早期目标导向治疗早期规范液体复苏治疗即早期目标导向治疗（Earlier Goal Directed Therapy，EGDT）可以显著地降低脓毒症性休克患者的病死率及临床并发症。基于最初6小时的有效地液体复苏与脓毒症性休克患者28天的死亡率明确相关，所以在确定诊断的最初6小时内需要达到有效液体复苏，实现以下指标：①中心静脉压(CVP) 8-12 mm Hg；②平均动脉压(MAP)≥65 mm Hg；
endocan在脓毒血症及其急性肺损伤的研究进展
四综述四 D O I :10.3760/c m a .j .i s s n .1673-436X.2014.06.016作者单位:400010重庆医科大学附属第二医院呼吸与危重症医学科 通信作者:王导新,E m a i l :w a n g d a o x i n 1@163.c o m e n d o c a n 在脓毒血症及其急性肺损伤的研究进展 唐玲 王导新 ?摘要? e n d o c a n 又名内皮细胞特异性分子-1,最早是由法国科学家L a s s a l l e 等从脐静脉内皮细胞c D N A 文库克隆出的一种内皮细胞特异性分子,在正常人体内主要由肺二肾脏血管内皮细胞分泌,其影响白细胞的黏附二迁移,并在炎症性疾病及肿瘤的进展中起关键作用三近年研究发现,e n d o c a n 参与脓毒血症和A L I 的病理生理过程, 在预测疾病的严重性方面具有积极的临床意义三?关键词? e n d o c a n /E S M -1;内皮细胞特异性分子-1; 脓毒血症;急性肺损伤D e v e l o p m e n t o fe n d o c a ni ns e p s i sa n da c u t el u n g i n j u r y T a n g L i n g ,W a n g D a o x i n .D e p a r t m e n to f R e s p i r a t o r y a n d C r i t i c a l C a r e M e d i c i n e ,t h e S e c o n d A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f C h o n g q i n g M e d i c a l U n i v e r s i t y ,C h o n g q i n g 4 00010,C h i n a C o r r e s p o n d i n g a u t h o r :W a n g D a o x i n ,E m a i l :w a n g d a o x i n 1@163.c o m ?A b s t r a c t ? e n d o c a ni s a n o v e l h u m a n e n d o t h e l i a lc e l l -s p e c i f i c m o l e c u l e c l o n e d f r o m h u m a n u m b r i l i c a l v e i ne n d o t h e l i a l c e l l c D N Al i b r a r y ,w h i c h w a s f o u n db y D r .L a s s a l l e f r o m F r a n c e .E n d o c a n i s e x p r e s s e d i ne n d o t h e l i a l c e l l o f l u n g a n dk i d n e y ,w h i c h c a n a f f e c t a d h e s i o n ,m i g r a t i o no fw h i t e b l o o d c e l l s ,a n d p l a y ak e y r o l ei ni n f l a mm a t o r y d i s e a s e sa n dt u m o r .I nr e c e n t y e a r s ,r e s e a r c h e r sh a v ef o u n dt h a t e n d o c a nm a y b e i n v o l v e d i n t h e p a t h o g e n e s i s o f s e p s i s a n da s s o c i a t e dw i t h t h ed e v e l o p m e n t o f a c u t e l u n g i n j u r y ,a n d r e p r e s e n t t h e p o s i t i v e c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e .?K e y w o r d s ? e n d o c a n /E S M -1;E n d o t h e l i a l c e l l -s p e c i f i cm o l e c u l e - 1;S e p s i s ;A c u t e l u n g i n j u r y 脓毒血症是感染引起的全身过度炎症反应综合征,其中内皮细胞功能紊乱可能是它的发生发展机制,而它的严重形式重症脓毒血症及脓毒血症休克,是临床危重症患者的严重并发症,也是导致患者死亡的重要因素三脓毒血症患者容易并发A L I ,一旦出现A L I 往往预示患者预后不佳三因此早诊断二早治疗及准确预测患者的预后具有重要的临床意义三 e n d o c a n 又名内皮细胞特异性分子-1(E S M -1),是一种在正常人血浆中稳定表达的糖蛋白,当发生脓毒血症时它的血浆浓度急剧上升,并且与疾病的严重程度呈正相关三另一项研究发现,e n d o c a n 还可用于诊断及判断A L I 的预后,因此,e n d o c a n /E S M -1有望成为新一代的生物学标志物,对此我们将做一简要综述三 1 e n d o c a n /E S M -1的简介1.1 e n d o c a n 的分子结构 e n d o c a n 是由定位于5号染色体短臂1区1带2亚带(5q 11.2)的单基因表达产物[1 ]三它由165个氨基酸组成的核心蛋白和1 条硫酸皮肤素链以共价键方式结合而成,经过翻译二修饰后,形成相对分子质量为50000的成熟蛋白[2] 三 e n d o c a n 的核心蛋白是一种生物活性多肽, 在氨基末端由富含疏水残基的19个氨基酸残基组成三而e n d o c a n 的硫酸皮肤素链则由β1,4N 乙酰半乳糖胺及β1,3葡萄糖醛酸相互交替组合而成,其中部分葡萄糖醛酸残基转变为艾杜糖醛酸,艾杜糖醛酸在调节可溶性蛋白聚糖的生物活性和结合能力方面具有重要作用[ 3 ]三1.2 e n d o c a n 的生物学特性 e n d o c a n 主要表达于肺组织血管内皮细胞及肾脏的肾小管上皮细胞,它的m R N A 表达受细菌脂多糖及多种炎症细胞因子 调控[4-5 ]三体外实验表明脂多糖二肿瘤坏死因子α(T N F -α)及I L -1β对e n d o c a nm R N A 的表达呈正刺激效应,并且具有时间依赖性,在加入T N F -α后第 2小时开始表达增加,到第48小时达高峰,而在加入T N F -α后15m i n 有一个暂时的负调节,持续时间约1.5h ,I L -1β与T N F -α作用相似三在单独加入γ-干扰素或I L -4时,e n d o c a n 的表达不受影响,而当联合加入γ-干扰素及T N F -α时,e n d o c a n 受T N F -α 诱导表达部分被抑制,由此说明e n d o c a n 的表达受 四 564四国际呼吸杂志2014年3月第34卷第6期 I n t JR e s p i r ,M a r c h2014,V o l .34,N o .6
金属基质蛋白酶9与疾病的研究进展
金属基质蛋白酶9与疾病的研究进展 摘要：金属基质蛋白酶（MMPs）是一组可以选择性降解细胞外基质（ECM）的内肽酶，金属基质蛋白酶9（MMP-9）又名明胶酶B，它是MMPs家族中一个重要成员，能水解弹性蛋白、胶原蛋白、明胶、纤维蛋白等多种细胞外基质成分，在生理情况下参与人体的正常发育，是ECM降解的生理性调节因子。所有MMPs都受金属基质蛋白酶抑制剂所抑制，两者的不平衡导致许多疾病的发生。金属基质蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）为MMP-9特异性抑制剂，目前认为MMP-9与TIMP-1是调节ECM降解、合成的主要酶类，MMP-9/TIMP-1比值失衡是多种疾病发生、发展的重要机制之一。近年研究发现MMP-9还与全身多系统疾病的发生、发展有关，现就MMP-9与多种疾病的相关研究进展进行综述。 关键词：金属基质蛋白酶9；疾病；研究进展金属基质蛋白酶（matrix metalloteinases，MMPs）是一组锌离子依赖的肽链内肽酶，因含金属离子（锌、钙）而得名，现至少已发现26种MMPs，称为MMPs家族，是构成细胞外基质降解最重要的蛋白水解系统。其抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs）是调节MMPs的重要因素。MMPs
与TIMPs在维持ECM的动态平衡中起重要作用。细胞外基质（extracellullar matrix，ECM）是一类由胶原、蛋白聚糖及糖蛋白等大分子物质组成的动态网状结构，ECM不仅起细胞与细胞之间机械支持和连接作用，也是细胞与细胞之间信号传递的桥梁，现已识别丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、基质金属蛋白酶均能降解ECM[1]。金属基质蛋白酶9（matrix metalloteinases-9，MMP-9）是MMPs家族分子量最大的明胶酶。TIMP-1是MMP-9的重要的生理性抑制剂，二者在维持ECM的动态平衡中起重要作用。MMP-9/TIMP-1比值失衡是多种疾病发生、发展的重要机制之一。近年许多研究发现MMP-9与多种疾病的发生发展密切相关。 1 MMP-9概述 MMP-9是1974年从人中性粒细胞中首次提纯得到，于1989年的金属蛋白酶学会上被正式命名。MMP-9的分子量为92KD，MMP-9基因长7.7kb，含13个外显子，其长度不一，位于染色体的20q11.2-13.1[2]。MMP-9起源于角质形成细胞、单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和成纤维细胞。在生理PH值时，在金属锌离子的作用下，能够切断任何ECM 成分，调节细胞黏附、作用于细胞外成分或其他蛋白成分而启动潜在生物学功能，直接或间接参与胚胎发育、组织模型重建和场上恢复等正常生理功能。MMP-9其作用底物包括明
血清光抑素C在严重脓毒血症急性肾损伤的临床应用
血清光抑素C在严重脓毒血症急性肾损伤的临床应用 发表时间：2016-06-22T16:26:32.613Z 来源：《航空军医》2016年第8期作者：彭志红 [导读] 探讨血清光抑素C（Cys c）在诊断严重脓毒血症急性肾损伤中的价值。 长沙医学院附属株洲市人民医院 412000 【摘要】目的：探讨血清光抑素C（Cys c）在诊断严重脓毒血症急性肾损伤中的价值。方法：选取我院2015年3月～2016年3月收治的60例严重脓毒血症患者为观察组，挑选同期60例健康体检者为对照组，比较两组患者Cys c、尿素氮等指标的差异。结果：观察组各参数均高于对照组，其中，严重脓毒血症导致肾功能衰竭、肾功能不全、尿毒症患者各参数均比对照组高，且肾功能不全（75%）与衰竭（100%）患者Cys C异常率比尿素氮（33.33%、82.14%）、肌酐（25%、78.57%）的检出率高，组间数据对比差异显著（P<0.05）。结论：Cys c对早期诊断严重脓毒血症急性肾损伤有理想的敏感度和特异性，对临床诊断及治疗产生重要影响。 【关键词】血清光抑素C；严重脓毒血症；急性肾损伤 Abstract：Objective：To investigate the serum levels of light inhibition C（Cys C）in the diagnosis of severe sepsis value in acute kidney injury.Methods：From February 2015 to February 2015 were 60 cases of patients with severe sepsis as the observation group，select 60 cases of healthy check-up for a control during this period，the Cys c compare two groups of patients，the differences between the indexes of urea nitrogen.Results：Observation group were higher than the control group，among them，the severe sepsis lead to renal failure，renal insufficiency and uremia patients with various parameters are higher than the control group，and renal insufficiency （100%）patients（75%）and failure Cys C abnormal rate than urea nitrogen（33.33%，82.14%），creatinine（25%，78.57%），high detection rate，data contrast differences between group significantly（P<0.05）.Conclusion：The Cys c for early diagnosis of severe sepsis sensitivity and specificity of acute kidney injury has ideal，important influence on clinical diagnosis and treatment. Key words：serum light inhibition C；Severe sepsis.Acute kidney injury 脓毒血症（Sepsis）是因感染引发的全身炎症反应综合征，其病理生理机制比较复杂，是临床威胁患者生命健康的疾病[1]。随着人口老龄化进程加快，随之引发的各种疾病和耐药性细菌不断产生，随机感染机会增加，其中肾脏是受累最严重的器官之一。因此临床早期识别和发现脓毒症患者是否发生急性肾损伤（Acute Kidney Injury，AKI）显得尤为重要。本文以60例严重脓毒血症急性肾损伤患者展开研究，探讨血清光抑素C对这种病症的检测价值，现总结报道如下。 1.资料与方法 1.1一般资料 收集2015年3月至2016年3月在我院接受治疗的60例严重脓血症为患者为观察组，男性35例，女性25例，患者年龄（17～65）岁，平均年龄（38.4 13.9）岁。本组60例患者中，因严重脓毒血症导致肾功能不全者13例、肾功能衰竭25例、尿毒症患者22例，上述患者均符合美国病重危医学会、欧洲危重病医学会等机构联合的制定的严重脓毒血症诊断标准；选择同期接受体检的60例健康人为对照组，男性32例，女性28例，患者年龄在（19～62）岁，平均年龄（39.1 15.2）岁。比较可知，观察组与对照组患者的年龄、性别等一般资料并无统计学差异（P>0.05），存在可比性。 1.2方法 入院后动态监测患者Cys C、肌酐、尿素氮及尿量变化情况。在无菌环境下抽取2ml静脉血，Cys C使用乳胶颗粒增强免疫比浊法展开检测，所用试剂、比浊检测仪器均由北京利德曼生化技术有限公司生产，利用罗氏800全自动生化仪器检测患者血清尿素氮、肌酐，详细记录患者的各项检查结果。 1.3统计学处理 本次研究所有数据采用SPSS20.0软件展开统计学处理，采用（）表示计量资料，组间数据用t检验，若P<0.05，则差异具有统计学意义。 2.结果 2.1比较患者Cys C、尿素氮、肌酐检查结果 由表1可知，因脓毒血症引发尿毒症患者Cys C（5.61±0.73）mg/L、尿素氮（24.96±12.08）、肌酐（658.09±77.22）参数均高于对照组，且因脓毒血症引起肾功能不全、肾功能衰竭患者各参数与对照组存在显著性差异，差异具有统计学意义（P<0.0）。 2.2对比观察组与对照组血清Cys C、尿素氮、肌酐异常情况 由表2可知，肾功能不全（75%）、肾功能衰竭（100%）患者Cys C检出率明显高于肌酐（25%、78.57%）和尿素氮（33.33%、82.14%）这两种检测方法，差异具有统计学意义（P<0.05）。
脓毒症的氧输送和氧耗问题和细胞病性缺氧
脓毒症的氧输送和氧耗 问题和细胞病性缺氧 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT
脓毒症的氧输送和氧耗问题和细胞病性缺氧 时间：2010-08-23 17:15:27 来源：作者：
基质金属蛋白酶
基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs) 基质金属蛋白酶是一个大家族，因其需要Ca++、Zn++等金属离子作为辅助因子而得名，其家族成员具有相似的结构，一般由5个功能不同的结构域组成:（1）疏水信号肽序列;（2）前肽区，主要作用是保持酶原的稳定。当该区域被外源性酶切断后，MMPs酶原被激活;（3）催化活性区，有锌离子结合位点，对酶催化作用的发挥至关重要;（4）富含脯氨酸的铰链区;（5）羧基末端区，与酶的底物特异性有关。其中酶催化活性区和前肽区具有高度保守性。MMPs成员上述结构的基础上各有特点。各种MMP间具有一定的底物特异性，但不是绝对的。同一种MMP可降解多种细胞外基质成份，而某一种细胞外基质成分又可被多种MMP 降解，但不同酶的降解效率可不同。 MMPs几乎能降解ECM中的各种蛋白成分,破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键性作用，从而在肿瘤浸润转移中的作用日益受到重视，被认为是该过程中主要的蛋白水解酶。目前MMPs家族已分离鉴别出26个成员，编号分别为MMP1～26。根据作用底物以及片断同源性，将MMPs分为4类。 Ⅳ型胶原酶为其中重要的一类，它主要有两种形式，一种被糖化，分子量为92kD，命名为MMP-9;另一种非糖化，分子量为72kD，被称为MMP-2。当前对MMP-2，MMP-9的研究较深入。 MMP-2基因位于人类染色体16q21，由13个外显子和12个内含子所组成，结构基因总长度为27kb，与其他金属蛋白酶不同，MMP-2基因5’旁侧序列促进子区域含有2个GC盒而不是TATA盒。活化的MMP-2定位于细胞穿透基质的突出部位，估计其在酶解细胞间基质成分及基底膜的主要成分Ⅳ型胶原中有“钻头”的作用。 此外，已证实MMP-3 和MMP-10能作用于PG、LN、FN、Ⅲ型和Ⅳ型胶原及明胶。MMP-7能作用于明胶和FN。MMP-1的产生范围较广，可由基质纤维母
重度脓毒症导致急性肺损伤患者自发性利尿现象的观察分析
重度脓毒症导致急性肺损伤患者自发性利尿现象的观察分析 目的对重度脓毒症导致急性肺损伤患者自发性利尿现象进行观察分析。方法选取2015年4月～2017年4月我院收治的重度脓毒症导致急性肺损伤患者10例为研究对象，对患者出现自发性利尿现象前后的相关指标的变化情况进行观察和分析。结果自发性利尿后，患者的体温和呼吸频率显著下降，氧合指数明显上升，与自发性利尿前相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；结论重度脓毒症导致急性肺损伤患者出现自发利尿，表示患者的病情有好转迹象，预后效果也较好，可以作为临床病情判断的依据。 标签：重度脓毒症；急性肺损伤；自发利尿；观察；分析 脓毒症是全身炎症反应综合征，是由感染引起的，病情发展到重度，患者器官低灌注会导致器官功能障碍，部分患者会出现急性肺损伤，严重危害患者健康和生命安全。而有临床实例表明，部分重度脓毒症导致急性肺损伤患者会出现自发利尿现象，随后病情明显好转[1]。为研究二者间的相关性，本研究以10例出现自发利尿的重度脓毒症导致急性肺损伤患者为对象进行观察分析。现报道如下： 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2015年4月～2017年4月我院收治的重度脓毒症导致急性肺损伤患者26例，有10例出现自发利尿为研究对象，发生率为38.46%。10例患者中，男6例，女4例，年龄36～72岁，平均（54.2±6.1）岁，均为正接受有创机械通气患者，出现自发利尿时间为上机后3～7 d，平均（4.2±0.7）d，在入住ICU病房4～9d，平均（7.2±1.3）d。 1.2 方法 参照以往临床研究经验，对患者的心率、呼吸、体温以及血压等生命体征进行严密监测，对患者的血肌酐等生化指标进行检测，对患者进行血气分析，监测患者的氧合指数，记录患者每日尿量，记录利尿剂的使用情况。 1.3 评价标准[2] 在患者每日补液输入量不变且没有使用利尿剂，或者利尿剂的使用剂量没有增加的情况下，患者每天的排尿量增加，且与前一日相比，增加量在500 mL以上，持续时间达到3 d及以上。 1.4 观察指标
CRRT在脓毒血症急性肾损伤患者救治中的临床研究
CRRT在脓毒血症急性肾损伤患者救治中的临床研究目的：探讨连续肾脏替代疗法（CRRT）在脓毒血症急性肾损伤患者救治中 的临床疗效。方法：选取2014年1月-2016年1月于笔者所在医院就诊的脓毒血症急性肾损伤患者86例，按入院编号随机分为观察组与对照组，各43例，对照组给予常规药物治疗，观察组行CRRT治疗，比对疗效。结果：治疗后两组舒张压（DBP）、收缩压（SBP）及平均动脉压（MAP）均较治疗前好转，治疗后观察组DBP、SBP、MAP及血氧饱和度（SpO2）均优于对照组，但差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后两组患者尿量均明显增多，观察组患者尿量增多程度高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后观察组与对照组相比，除血红蛋白（Hb）差异无统计学意义（P>0.05）外，白细胞计数（WBC）、血小板计数（PLT）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、血清肌酐（Scr）、中性粒细胞（N）、尿素氮（BUN）差异均有统计学意义（P＜0.05）；治疗后观察组肾功能恢复比例及死亡率均明显优于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：脓毒血症急性肾损伤患者救治时采用CRRT可有效改善患者机体内环境，清除体内潴留代谢废物及炎症因子，控制血流动力学指标，提升存活率，疗效确切，值得推广。 标签：CRRT；脓毒血症；急性肾损伤；疗效 脓毒血症是重症监护室（ICU）患者常见死亡因素之一，指因感染灶感染致患者现全身炎症反应综合征，临床多伴急性肾损伤、休克及多器官功能障碍、衰竭等并发症，而急性肾损伤在其众多并发症中死亡率最高，严重威胁患者生命安全，影响生存质量。本文选取2014年1月-2016年1月于笔者所在医院就诊的脓毒血症急性肾损伤患者86例为研究对象，探讨连续肾脏替代疗法（CRRT）在脓毒血症急性肾损伤患者救治中的临床疗效，具体报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取2014年1月-2016年1月于笔者所在医院就诊的脓毒血症急性肾损伤患者86例为研究对象，疾病类型：重症肺炎31例，重症腹膜炎24例，重度手术创口感染30例，重症脑膜炎1例；肾损伤级别：轻度38例，中度32例，重度16例。随机分为观察组与对照组，各43例。观察组：男27例，女 16例，年龄23～78岁，平均（56.1±2.3）岁，病程2.1～32 h，平均（8.2±0.9）h；对照组：男25例，女18例，年龄25～80岁，平均（55.7±2.1）岁，病程2.4～31 h，平均（8.4±0.8）h。两组患者性别、年龄、疾病类型及肾损伤级别等一般资料对比，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。 1.2 入选及排除标准 入选标准：（1）均符合2001年美国危重病医学会（SCCM）制定的脓毒血
基质金属蛋白酶_
基质金属蛋白酶_ 基质金属蛋白酶 细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节，需借助于蛋白降解酶的表达和激活。基质蛋白酶主要有以下数种：丝氨酸蛋白酶类，包括血浆酶原激活剂；半胱氨酸蛋白酶类，包括组织蛋白酶0在内的溶酶体酶；金属蛋白酶类0^1&110^^0^611^565) [1]。金属蛋白酶类在肿瘤侵袭过程中的作用近年来倍受关注，大量证据表明基质金属蛋白酶，特别是基质金属蛋白酶- 2 (matrix metalloproteinase-2, MMP-2)在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用，临床研究表明，順?_2活性和表达的增加与人类多种恶性肿瘤侵袭转移潜能及预后密切相关[2?4]。 一.嫩识-2基因及其表达和激活的调节 MMP-2基因位于人类染色体16q21,由13个外显子和12个内含子所组成，结构基因总长度为27此，与其他金属蛋白酶不同，_-2基因5'旁侧序列促进子区域含有2个60盒而不是1414盒[5]。_-2以前酶原的形式由多种细胞分泌，如成纤维细胞、巨噬细胞、内皮细胞和恶性肿瘤细胞等。与其他金属蛋白酶相似，嫩1?-2分子含有氨基末端片段、金属结合片段及竣基末端片段，其中带有高度保守序列PRCGV/NPD的氨基末端具有一个不配对的半胱氨酸残基，该残基与激活位点的锌原子相互作用介导着—_2的前体状态；金属结合片段是公认的锌结合部位，其含旁侧有2个组氨酸的保守序列册4出羧基末端具有类似凝血酶的片段，该片段的具体功能尚未明确。此外，_-2还具有一个 58个氨基酸残基组成的明胶结合片段，此片段与纤维连接素的明胶结合11型基元相似[6]。目前认为，_-2表达和功能的调节发生于转录、分泌、前酶原 的激活、细胞表面的结合以及与来源于肿瘤或宿主细胞的MMP抑制剂的相互作用等多个不同的水平。 MMP-2的转录调节与其他金属蛋白酶相比具有一定的独特性，如佛波醇酯 (phorbol 6316：^通过仙-1位点的介导增加腿?-9和间质胶原酶的表达，而
基质金属蛋白酶酶谱分析法
基质金属蛋白酶酶谱分析法刘 煜 张嘉宁 朱正美 基质金属蛋白酶(m atrix m etallop ro teinases, MM P s)是一组重要的蛋白水解酶,可以水解细胞外基质中胶原、纤维连接蛋白等多种成分[1],参与了人体内许多生理和病理过程,如骨的重建[2]、肿瘤转移[3]等都与MM P s密切相关。近年来研究发现MM P s与生殖过程关系密切[4,5],如在月经的发生,着床与分娩过程都有一定的MM P s的变化,因而对MM P s的活性及种类的分析有着很重要的意义。目前分析MM P s活性及酶量的方法有多种,其中酶谱法是将非还原性SD S2 PA GE电泳分析酶种类与检测酶活性有效结合的一种酶学方法。尤其是具有在电泳中可将组织内与MM P s 紧密结合的组织抑制剂(T I M P s)分离,进而表现出酶的活性,从而达到在分离不同MM P s的同时又可直接显示其活性条带一举两得的特点。鉴于MM P s酶谱分析法具有方法灵敏,结果直观,能同时观察酶与酶原种类和活性等优点,且其方法较简便,适于在不同实验室应用。本研究用早孕子宫内膜样品经组织培养后,将其所分泌的MM P s运用酶谱分析法进行鉴别种类和活性分析,对方法的实验原理及条件进行了介绍,并就其优缺点进行讨论。 一、材料与方法 11材料:丙烯酰胺(A cry),十二烷基磺酸钠(SD S),T riton2X100,Pep statine A,苯甲基磺酰氟(P M SF),N,N2亚甲基丙烯酰胺(B is),1,10菲洛林(1,10phenan th ro line),ED TA,明胶蛋白,DM E M F12无血清培养基,考马斯亮蓝G250,以上均为Sig2 m a公司产品;冰醋酸,甲醇(国产分析纯);72、92×103明胶酶标准品(美国N I H,D r.Stetler2Steven son W G 惠赠)。 21子宫内膜组织块培养:子宫内膜用灭菌冷生理盐水冲洗血迹后,剪成2mm2大小,在24孔培养板中加重量约50m g 孔组织块及1m l培养基后,于5% CO2、37℃条件下,培养5小时,收集上清,-20℃冰箱冻存用于酶谱分析[6]。 31酶谱法:实验原理:MM P s与SD S结合使MM P s结构发生改变,后经SD S2PA GE电泳,将分子量不同的MM P s以及与MM P s结合的组织抑制剂同时分离,再用T rti on2X100除去SD S,在这一过程中引发了MM P s酶原蛋白体外活化机制,酶原在凝胶内除掉一个约10×103的小肽,转变为有活性的酶。MM P s 在体内常以酶原形式分泌并可被纤溶酶等物质激活[7],活化后的MM P s,在除掉SD S后也可以恢复酶活性,在酶谱上称之为活性型MM P s,从而与酶原相区别,由于它在体内已具有水解胶原等基质的作用,因而在功能上的意义要大于相应的酶原。经过酶的复性及酶原的活化后,凝胶内已经具有活性的MM P s则可在适宜的条件下将其所在位置的底物明胶蛋白或其它底物蛋白(制凝胶时已均匀掺入其中)水解,然后用考马斯亮蓝G250染色,再用脱色液脱色,结果见凝胶普遍蓝染,而底物被水解处即可见到清晰的透明条带,根据其透明的程度及面积的大小判断其酶活性的高底,该方法还可以通过变换底物,从而用来研究不同种类的MM P s。如用酪蛋白做底物研究基质溶解素等。 取上述收集的培养上清50Λl加入10Λl样品缓冲液(含1714%SD S,7%蔗糖)混匀后即可进行上样,然后将含有1m g m l明胶蛋白的10%的丙烯酰胺凝胶加入V216垂直电泳槽中,按照L aem n li[8]方法进行电泳,结束后将凝胶置于培养皿中,加入215%T riton2 X100100m l,振荡,重复洗6次,每次5分钟,再用T ris HC l缓冲液(50mmo l L T ris,pH714)冲洗3次,每次5分钟,之后将凝胶放入反应液中(50mmo l L T ris,pH714,200mmo l L N aC l,10mmo l L CaC l2), 37℃培养18小时(该步骤可根据实验要求分别加入1, 10phenan th ro line1mmo l L,ED TA20mmo l L,Pep2 statine A1mmo l L,P M SF20mmo l L等不同的蛋白酶抑制剂,用以鉴定MM P s存在),然后将凝胶置于011%考马斯亮蓝G2250染色液中染色1小时,最后放入脱色液(5%甲醇,715%冰醋酸)中进行脱色[9]。 二、结果 11早孕子宫内膜的MM P s酶谱:应用酶谱法从早 作者单位:116027 大连医科大学生化教研室
乌司他丁对脓毒症急性肺损伤大鼠热休克蛋白70表达的影响
·论著· 2012年11月第9卷第31期 中国医药导报CHINA MEDICAL HERALD 脓毒症是一种感染引起的全身性炎症反应综合征，肺是常累及的靶器官，常并发急性肺损伤（ALI ）/急性呼吸窘迫综合征（ARDS ）[1]。其中，ALI 的发病急，死亡率高，是危重病治疗的难点之一。乌司他丁（Ulinastatin ，UTI ）是从健康成年男性尿中分离纯化的尿胰蛋白酶抑制剂[2]。研究表明，UTI 除对多种蛋白酶、糖脂水解酶具有抑制作用外，还具有抑制多种炎症介质释放等作用。基础及临床初步研究提示，UTI 具有减轻肺损伤，缓解呼吸衰竭等作用，但是其具体作用机制仍不明确。热休克蛋白（HSP ）是一类细胞在受热、生物应激、理化因素等刺激后产生的在进化上高度保守的伴随细胞蛋白，可以增强细胞的应激能力，保护细胞损伤的发生和发展[3]。本实验旨在观察UTI 对脓毒症ALI 大鼠肺组织HSP70表达的影响，研究UTI 对脓毒症ALI 大鼠的肺保护作用，探讨可能 的作用机制，为临床脓毒症肺损伤的治疗提供新的理论依据。1材料与方法1.1实验动物 清洁级雄性Wistar 大鼠39只，体重200～250g ，购自中国科学院上海实验动物中心。1.2实验药品 乌司他丁（Ulinastatin ，UTI ）50000U/支，广东天普生化医药股份有限公司。1.3方法 1.3.1动物模型的制备与分组39只Wistar 大鼠，分为3组：假手术（sham ）组9只，ALI 组15只，乌司他丁（UTI ）组15只。本实验参照文献[4]的方法，以大鼠盲肠结扎穿孔术（CLP ）复制脓毒症模型。以2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后固定，腹正中切开1.5cm 长的切口，在盲肠根部结扎，用18号针在游离端穿通2次，轻挤出少量肠内容物，留置2cm 皮瓣防止针孔闭合，送回盲肠于腹腔，缝合切口，术毕皮下注射生理盐水30mL/kg 乌司他丁对脓毒症急性肺损伤大鼠 热休克蛋白70表达的影响 王俏1朱虹2沈策1▲ 1.上海交通大学医学院附属第六人民医院呼吸内科，上海200233； 2.上海交通大学医学院附属第九人民医院急诊科，上海200011 [摘要]目的研究热休克蛋白（HSP ）70在脓毒症急性肺损伤（ALI ）大鼠中的表达变化及应用乌司他丁（UTI ）进行干预，并探讨作用机制。方法39只Wistar 大鼠分为假手术（sham ）组（9只）、ALI 组（15只）和UTI 组（15只）。大鼠盲肠结扎穿孔术后6、12、24h 分别处死大鼠。检测血气分析、肺组织湿/干重比（W/D ），光镜下观察肺组织形态学变化，应用实时荧光定量-聚合酶链反应（realtime-PCR ）测定肺组织HSP70mRNA 的表达。结果与ALI 组比较，UTI 组PaO 2显著改善（P <0.05），肺W/D 比值降低（P <0.05），苏木精-伊红染色显示肺组织损伤减轻。各时间点肺组织HSP70mRNA 表达明显上升（P <0.05）。结论HSP70在脓毒症ALI 大鼠中的表达上调，UTI 可能通过上调HSP70 的表达改善脓毒症肺组织的损伤。 [关键词]热休克蛋白70；乌司他丁；脓毒症；急性肺损伤；大鼠[中图分类号]R363[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2012）11（a ）-0018-03 Effect of Ulinastatin on heat shock protein 70expression in rats with septic acute lung injury WANG Qiao 1ZHU Hong 2SHEN Ce 1▲ 1.Department of Respiratory Medicine,Shanghai Sixth People's Hospital Affiliated to School of Medicine of Shanghai Jiao -tong University,Shanghai 200233,China; 2.Department of Emergent Medicine,Shanghai Ninth People's Hospital Affiliat -ed to School of Medicine of Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200011,China [Abstract]Objective To study heat shock protein 70(HSP70)expression and investigate the possible mechanisms of Uli -nastatin therapy in rats with septic acute lung injury (ALI).Methods Thirty-nine Wistar rats were randomly divided into sham group (n =12),ALI group (n =15)and Ulinastatin (UTI)group (n =15).And rats were sacrificed at 6,12and 24hours after cecal ligation and puncture operation.Arterial blood gas analysis,lung tissue wet/dry weight ratio,lung histopathologica1changes and pulmonary expression of HSP70mRNA assessed by realtime-PCR were observed.Results Compared with ALI group,PaO 2in UTI group was significantly increased whereas the ratio of wet/dry weight was decreased (P <0.05).The grading of pathologic damage of lung tissue was attenuated greatly ．Pulmonary expression of HSP70mRNA were increased in UTI group compared to those in ALI group at all time points (P <0.05).Conclusion Effects of Ulinas -tatinon on the improvement of septic acute lung injury may be attributed to the up-regulation of lung HSP70expressions.[Key words]Heat shock protein 70;Ulinastatin;Sepsis;Acute lung injury;Rats [作者简介]王俏（1974-），女，2010级在读呼吸病学专业博士研究生，主治医师；研究方向：脓毒症急性肺损伤的诊断与治疗。 ▲ 通讯作者 18